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1.
目的评价高尔基蛋白(GP73)在原发性肝癌诊断中的价值。方法选择肝癌患者93例,对照人群共71例(包括健康人,肝硬化,及慢性肝炎患者),用电化学发光法检测AFP;采用WesternBlot方法和ELISA方法检测高尔基蛋(q73(GP73)。结果GP73的ROC曲线下面积为0.873,当35.76ng/ml为GP73诊断肝细胞癌的cut.off值时,GP73检测肝细胞癌的敏感性和特异性分别为79.6%和85.9%。AFP阳性的肝癌组23.4%(11/47)GP73阴性,如果单用GP73检测,会漏诊23.4%。AFP阴性同时GP73阴性占(6/93)6.4%,联合检测AFP、GP73,肝癌漏诊率降低至6.4%。肝硬化组GP73浓度均值大于慢性肝炎及正常人群,但差异无统计学意义。丙型肝炎肝癌组GP73浓度均值高于乙型肝炎及非病毒性肝炎肝癌,差异有统计学意义。结论GP73诊断肝细胞癌的敏感性优于AFP。GP73、AFP联合应用有较好的互补性,可以有效避免可能发生的AFP阴性病例的漏检。GP73可成为鉴别肝硬化、肝癌患者的血清标志物,有一定的早期诊断价值。 相似文献
2.
目的评价新的肿瘤标志物高尔基体蛋白73(GP73)对原发性肝癌的临床诊断价值。方法用ELIAS法对40例原发性肝癌患者(肝癌组)、40例慢性肝病患者(肝病组)与40名健康体检者(对照组)血清标本进行GP73测定,然后对结果进行统计学分析,并与病理结果("金标准")比较,分析灵敏度、特异性和符合率。结果①肝癌组血清GP73水平(中位数:299.4)明显高于肝病组(中位数:83.4)和对照组(中位数:53.2),差异具有统计学意义(P均〈0.01);②与"金标准"病理结果比较,敏感度为90.0%、特异性为70.0%和符合率为76.7%。结论 GP73是诊断原发性肝癌较为敏感的肿瘤标志物,其敏感性高于AFP,具有广泛的临床应用价值。 相似文献
3.
高尔基体蛋白73及其基因检测对原发性肝癌诊断的价值 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 评价分析GP73和GP73 mRNA在PHC中的诊断价值,探讨血清中GP73和AFP联合检测对PHC诊断和高危人群普查的意义,为PHC诊断和普查提供一种新方法 .方法 采用ELISA对73例PHC、13例肝硬化、32例肝炎和62名健康人的血清GP73、AFP水平进行检测,采用SYBR Green实时荧光定量PCR法检测各组外周血单个核细胞GP73 mRNA的相对表达量,以Ct值比较法计算GP73 mRNA相对表达水平,同时检测分析8份正常肝组织和8份肝癌组织的GP73 mRNA相对表达水平.结果 ELISA检测4组血清GF73、AFP结果 显示,总体比较经Kruskal-Wallis检验,4组间差异有统计学意义(H值分别为89.6、52.0,P均<0.01),全血GP73 mRNA含量4组间差异无统计学意义(H=4.33,P>0.05).组间多重比较Mann-Whitney检验结果显示,PHC组血清GP73的含量[166.7(162.7-231.8)μL]与肝硬化[57.3(46.6~113.6)μg/L]、肝炎[29.6(26.2~54.5)μg/L]及健康对照组[25.1(20.8~29.4)μg/L]比较,差异有统计学意义(U值分别为246、297、349,P均<0.01),各组血清AFP的含量分别为380.9(258.5~ 503.2)μg/L、3.8(1.3~14.5)μg/L、5.1(2.4~7.8)μg/L、2.8(2.2~5.7)μg/L,差异亦有统计学意义(U值分别为246、419、790,P均<0.01).肝癌组织GP73 mRNA表达量(12.64)显著高于正常肝组织(1.00).以ROC曲线确定诊断PHC的GP73临界值为123.2μg/L和AFP临界值为10.6 μg/L时,PHC组血清GP73、AFP单项检测的敏感度分别为65.8%和53.4%,特异度分别为95.3%和92.5%,两者联合检测的敏感度为79.5%,特异度为90.7%.结论 GP73蛋白对PHC诊断具有较好的敏感度和特异度;全血标本GP73 mRNA检测不能作为诊断PHC的肿瘤标志,肝组织标本GP73 mRNA检测可作为诊断PHC的肿瘤标志,但存在创伤性大、风险大、患者痛苦等缺点.血清GP73联合AFP检测可有效提高PHC诊断,可用于PHC高危人群的普查及筛选. 相似文献
4.
Objective To explore the diagnostic value of GP-/3 protein in gene detection in the patient of primary hepatic carcinoma, to discuss the joint roles of serum GP73 and AFP, and provide a novel method for the diagnosis for PHC and screening for high-risk population. Methods ELISA was used to detect the serum level of GP73 and AFP in 73 cases of PHC, 13 cases of hepatic cirrhosis, 32 cases of hepatitis and 62 cases of health people. SYBR Green real time fluorescence quantitative PCR was used to detect the relative value of GP73 mRNA in the peripheral blood cells of each group. Comparative Ct method was used to evaluate the relative expression levels. Eight cases of normal liver tissues and 8 cases of PHC tissues were detected at the same time to compare the relative expression levels. Results Kruskal-Wallis test showed that the serum levels of GP73 and AFP had significant differences between four groups(H value were 89. 6 and 52.0, P < 0. 01) and the whole blood GP73 mRNA had no significant differences(H =4. 33, P > 0. 05). Mann-Whitney test showed that the serum levels of GP73 had significant differences among PHC groups[166. 7 (162. 7-231.8) μg/L] and liver cirrhosis[57. 3 (46. 6-113. 6) μg/L], hepatitis[29. 6(26. 2-54. 5) μg/L], health group[25.1 (20. 8-29. 4) μg/L] (U value were 246, 297, 349, P < 0. 01).The A FP levels of the four groups were 380. 9 (258.5-503.2) μg/L, 3.8 (1.3-14. 5) μg/L, 5. 1 (2. 4-7. 8)μg/L and 2. 8(2. 2-5.7) μg/L. It also showed significant differences (U value were 246,419 and 790,P <0. 01). The GP73 mRNA expression of PHC liver tissues(12. 64) was significant higher than normal liver tissues (1.00). The critical values for GP73 and AFP was determined to be 123. 2 μg/L and 10. 6 μg/L through the 8OC curves. Under the critical value the sensitivity of GP73 and AFP were 65.8% and 53.4% ,and the specificity of CP73 and AFP were 95.3% and 92. 5% respectively. Joint detection could increase the sensitivity up to 79. 5%, and achieve the high specificity of 90. 7%. Conclusions As a new diagnositic marker of primary hepatic carcinoma, GP73 protein has the very good sensitivity and specificity. The GP73 mRNA in the whole blood sample could not be used for the diagnosis of PHC. But it woule be a good molecular marker for diagnosis of PHC in the liver tissue sample. The joint detection of GP73 and AFP could improve PHC diagnostic performance, and provide an effective approcach to the PHC high-risk screening. 相似文献
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Objective To explore the diagnostic value of GP-/3 protein in gene detection in the patient of primary hepatic carcinoma, to discuss the joint roles of serum GP73 and AFP, and provide a novel method for the diagnosis for PHC and screening for high-risk population. Methods ELISA was used to detect the serum level of GP73 and AFP in 73 cases of PHC, 13 cases of hepatic cirrhosis, 32 cases of hepatitis and 62 cases of health people. SYBR Green real time fluorescence quantitative PCR was used to detect the relative value of GP73 mRNA in the peripheral blood cells of each group. Comparative Ct method was used to evaluate the relative expression levels. Eight cases of normal liver tissues and 8 cases of PHC tissues were detected at the same time to compare the relative expression levels. Results Kruskal-Wallis test showed that the serum levels of GP73 and AFP had significant differences between four groups(H value were 89. 6 and 52.0, P < 0. 01) and the whole blood GP73 mRNA had no significant differences(H =4. 33, P > 0. 05). Mann-Whitney test showed that the serum levels of GP73 had significant differences among PHC groups[166. 7 (162. 7-231.8) μg/L] and liver cirrhosis[57. 3 (46. 6-113. 6) μg/L], hepatitis[29. 6(26. 2-54. 5) μg/L], health group[25.1 (20. 8-29. 4) μg/L] (U value were 246, 297, 349, P < 0. 01).The A FP levels of the four groups were 380. 9 (258.5-503.2) μg/L, 3.8 (1.3-14. 5) μg/L, 5. 1 (2. 4-7. 8)μg/L and 2. 8(2. 2-5.7) μg/L. It also showed significant differences (U value were 246,419 and 790,P <0. 01). The GP73 mRNA expression of PHC liver tissues(12. 64) was significant higher than normal liver tissues (1.00). The critical values for GP73 and AFP was determined to be 123. 2 μg/L and 10. 6 μg/L through the 8OC curves. Under the critical value the sensitivity of GP73 and AFP were 65.8% and 53.4% ,and the specificity of CP73 and AFP were 95.3% and 92. 5% respectively. Joint detection could increase the sensitivity up to 79. 5%, and achieve the high specificity of 90. 7%. Conclusions As a new diagnositic marker of primary hepatic carcinoma, GP73 protein has the very good sensitivity and specificity. The GP73 mRNA in the whole blood sample could not be used for the diagnosis of PHC. But it woule be a good molecular marker for diagnosis of PHC in the liver tissue sample. The joint detection of GP73 and AFP could improve PHC diagnostic performance, and provide an effective approcach to the PHC high-risk screening. 相似文献
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目的:探讨高尔基体蛋白73(G P73)在诊断原发性肝癌中的临床应用价值。方法选取兴化市第三人民医院2007年1月至2012年12月住院的甲胎蛋白(AFP)阳性(>10 ng/mL)患者117例,其中原发性肝癌患者51例为肝癌组,将66例非肝癌患者分为肝硬化组32例,慢性乙型肝炎组24例,选取同一时期排除相关肝病患者10例为对照组。收集所有患者血清样本,采用酶联免疫吸附试验测定G P73含量,并作各组间水平比较。结果肝癌组GP73水平为(117.63±25.78)ng/mL ,明显高于肝硬化组的(81.24±18.49)ng/mL、慢性乙型肝炎组的(78.12±16.01)ng/mL和对照组的(45.49±8.78)ng/mL ,差异有统计学意义(P<0.01);GP73诊断原发性肝癌的ROC曲线下面积为0.881。结论 GP73可以作为原发性肝癌临床诊断的分子标志物,对临床具有辅助诊断和鉴别诊断价值。 相似文献
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目的建立基于抗体-适配子双夹心的高尔基体蛋白73(GP73)ELISA检测方法,并用于血清GP73的检测。方法以抗体-适配子双夹心的模式,通过正交试验和方阵滴定试验确定GP73特异性抗体和适配子最佳工作水平、反应的温度和时间等。以GP73重组蛋白建立标准曲线并评价该方法灵敏度、精确度、线性及准确度等。利用该方法对59例对照组患者及77例肝癌患者血清进行GP73水平检测,并同步进行电化学发光定量测定甲胎蛋白(AFP)水平。结果该方法标准曲线的批内变异系数(CV)为3.87%,批间CV平均为4.44%;平均回收率为95.8%,灵敏度达12.0ng/mL。肝癌患者血清GP73水平均明显高于对照组、肝炎组和肝硬化组(P0.05)。GP73对原发性肝癌诊断灵敏度为85.7%,而AFP为62.3%;而早期肝癌中GP73和AFP灵敏度分别为76.7%、36.7%。结论成功建立基于抗体-适配子夹心的GP73ELISA检测方法,该方法可用于临床检测GP73水平。 相似文献
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目的探讨高尔基体蛋白73及其基因检测对原发性肝癌诊断的价值。方法回顾性分析2017年1月-2019年10月我院收治的338例研究对象,对所有患者检测高尔基体蛋白73及其基因,分析4组的高尔基体蛋白73及其基因水平。结果研究组1高尔基体蛋白73及其基因表达水平均明显高于其他三组(P<0.05)。结论原发性肝癌患者的高尔基体蛋白73及其基因水平均处于高水平,因此可通过检测高尔基体蛋白73及其基因水平对原发性肝癌进行诊断,其具有临床的应用价值。 相似文献
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高尔基蛋白73(Golgi protein 73,GP73)是目前新型肿瘤标志物的研究热点之一并在多种肿瘤疾病中表达。GP73单独或联合现有肿瘤标记物对肿瘤疾病具有重要的诊断价值,在不同肿瘤组织或血清中GP73的表达水平具有差异性,且对不同肿瘤疾病的诊断价值也不尽相同。近年来研究认为GP73在原发性肝癌中的诊断价值高于其他肿瘤,同时其表达调控的研究在肿瘤靶向治疗方面也具有广阔的前景。现就GP73在相关恶性肿瘤表达的临床意义和调控机制的研究进展做一综述。 相似文献
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目的探讨高尔基体蛋白73(GP73)和甲胎蛋白(AFP)联合检测在原发性肝癌(PHC)诊断中的价值。方法 AFP采用微粒子化学发光法,用美国雅培ARCHITECT i2000SR全自动化学发光仪进行定量检测;GP73采用ELISA法作定量检测,分别对PHC组105例,普通肝病组47例,其他肿瘤对照组43例和健康对照组50例进行两项指标的定量检测和分析。结果 PHC组血清GP73水平均明显高于普通肝病组、其他肿瘤组和健康对照组,差异有统计学意义(P0.05);GP73、AFP及二者联合检测对诊断PHC的灵敏度分别为79.05%、62.86%、94.29%,其受试者工作特征曲线(ROC曲线)下面积(AUC)分别为:0.84、0.71、0.95。结论 GP73和AFP联合检测能提高PHC诊断的敏感性和诊断价值。 相似文献
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目的:评估高尔基体蛋白73(GP73)作为血清学标志物在原发性肝癌(PHC)诊断、病情评估及预后判断中的临床应用价值。方法分别采用酶联免疫吸附试验和化学发光法定量检测 PHC组血清GP73及甲胎蛋白(AFP)含量,以肝硬化组及健康体检组作为对照。Spearman等级相关分析GP73与 AFP间的相关性;Kaplan-Meier法绘制生存曲线及Cox比例风险模型分析血清GP73与PHC患者术后生存期的关系。结果 PHC组血清GP73水平显著增加,与肝硬化组及健康对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);PHC患者血清GP73与AFP之间呈正相关( r=0.6567,P<0.01)。病变累及大小大于3 cm的P H C患者血清G P73含量明显高于病变累及小于3 cm的患者,差异有统计学意义( P<0.05);临床分期为Ⅲ~Ⅳ的患者血清G P73含量明显高于临床分期为Ⅰ~Ⅱ的患者,差异有统计学意义(P<0.05);GP73水平与PHC患者年龄、性别及病理分级等因素无关。生存曲线显示,手术后血清GP73≤120μg/L的PHC患者其生存时间明显长于GP73>120μg/L的PHC患者,差异有统计学意义(P<0.01);Cox 比例风险模型分析显示,血清 GP73可用于判断 PHC患者的不良预后,其相对风险度为3.427,95% CI为1.380~8.509。结论 GP73作为PHC新的血清学标志物,不仅对于PHC诊断,而且对PHC病情分析、术后风险评估及预后判断等具有重要临床价值。 相似文献
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目的探讨乙肝患者血清高尔基蛋白(GP)73水平改变及其临床意义。方法连续性纳入2013年1月至2015年6月于镇江市中西医结合医院就诊的300例慢性乙肝病毒感染患者,根据病情分为乙肝病毒携带(HBV-C)组共50例,慢性乙肝(CHB)组共120例,乙肝相关肝硬化(LC)组共60例,乙肝相关肝细胞癌(HCC)组70例。比较各组之间血清GP73水平差异,并通过相关性分析和受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析比较GP73对不同乙肝患者病变程度的诊断学价值。结果 CHB组、HCC组和LC组患者GP73水平分别为(117.3±12.8)、(181.5±21.7)、(263.2±33.4)ng/mL,均明显高于HBV-C组患者的(39.2±3.5)ng/mL,差异均有统计学意义(P0.05)。HCC组和LC组患者GP73水平又明显高于CHB组,差异有统计学意义(P0.05)。代偿LC亚组GP73水平[(245.6±29.3)ng/mL]明显低于失代偿LC亚组[(279.5±39.6)ng/mL],差异有统计学意义(P0.05)。血清GP73水平与天门冬氨酸氨基转移酶(r=0.554,P0.05)、丙氨酸氨基转移酶(r=0.409,P0.05)、清蛋白(r=0.445,P0.05)、Child-pugh分级(r=0.609,P0.05)和失代偿LC(r=0.722,P0.05)呈正相关。GP73对于CHB的ROC曲线下面积(AUC)为0.741,95%CI为0.519~0.813,cut off值为176.3ng/mL,敏感性为77.8%,特异性为77.2%;GP73对于HCC的AUC为0.749,95%CI为0.676~0.834,cut off值为232.0ng/mL,敏感性为78.0%,特异性为82.5%;GP73对于LC的AUC为0.738,95%CI为0.636~0.841,cut off值为292.2ng/mL,敏感性为74.4%,特异性为80.9%;GP73对于失代偿性LC的AUC为0.802,95%CI为0.699~0.932,cut off值为319.3ng/mL,敏感性为84.2%,特异性为90.3%。结论 GP73可以作为一种较为敏感且特异性较高的肝脏标记物,不但有助于早期诊断HCC和LC,还有助于辅助判断LC患者肝功能代偿状态。 相似文献
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目的探讨高尔基体蛋白73(GP73)及甲胎蛋白异质体(AFP-L3)在原发性肝癌(PHC)诊断中的应用价值。方法分别采用酶联免疫吸附试验和亲和吸附法法检测68例PHC患者、42例肝硬化患者以及40例健康体检者血清GP73以及AFP-L3的含量,计算AFP-L3占总AFP的比率。结果检测血清GP73诊断PHC的临界值为123.8μg/L,曲线下面积为0.909,95%可信区间为0.835~0.957,诊断灵敏度为72.1%,特异度为91.4%;血清AFP-L3诊断PHC临界值为10.53%,曲线下面积0.885,95%可信区间为0.826~0.940,诊断灵敏度为70.6%,特异度为93.9%;PHC组血清GP73及AFP-L3含量明显高于肝硬化组及对照组(P<0.05)。与GP73及AFP-L3单项检测比较,二者联合检测可明显提高PHC诊断的灵敏度、阴性预测值以及总有效率(P<0.05),而特异度和阳性预测值无显著性差异(P>0.05)。结论 GP73及AFP-L3含量在PHC患者血清中明显增高,且二者联合检测可提高PHC诊断效率,可作为PHC诊断的血清标志物。 相似文献
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目的探讨甲胎蛋白异质体(AFP-L3)及高尔基体蛋白73(GP73)在原发性肝癌诊断中的价值。方法对40例原发性肝癌患者、32例慢性肝炎患者、33例肝硬化患者及40例健康体检者的血清中AFP-L3及GP73等指标水平进行检测,比较4组AFP-L3、GP73等指标水平及阳性检出率。结果原发性肝癌组AFP-L3、GP73等指标水平及阳性检出率均显著高于慢性肝炎组、肝硬化组、健康体检组(P<0.05)。AFP-L3(%)、GP73含量及AFP-L3与GP73联合诊断原发性肝癌的曲线下面积分别为0.911、0.935、0.974。结论 AFP-L3、GP73可作为原发性肝癌患者的临床诊断标志物,二者联合检测可能提高阳性检出率,增加诊断可靠性。 相似文献
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甲胎蛋白异质体3和高尔基体蛋白73检测在原发性肝癌诊断中的临床意义 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨血清中甲胎蛋白异质体(AFP-L3)和高尔基体蛋白73(GP73)在原发性肝癌诊断中的临床意义。方法收集原发性肝癌(45例)、肝硬化(35例)、慢性肝炎(36例)、健康对照组(40例)共156个血清样本,采用亲和吸附法和酶联免疫吸附法测定AFP-L3与GP73含量,计算AFP-L3占总AFP的比例(%)。结果 AFP-L3比值在肝癌组为15.60±5.28,显著高于肝硬化组(7.86±2.33)、肝炎组(7.27±2.43)和健康组(6.42±1.56);GP73含量变化范围为38.06±7.03(健康组)-129.16±28.68(肝癌组),统计学上差异显著(P〈0.05)。肝癌组中AFP-L3比值阳性率与GP73含量阳性率均显著高于其它各组。AFP-L3比值和GP73含量诊断原发性肝癌的ROC曲线下面积分别为0.933和0.936。结论血清中AFP-L3和GP73浓度可以作为原发性肝癌临床诊断的分子标志物。 相似文献
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ELISA检测脑脊液S100B蛋白及临床意义 总被引:13,自引:3,他引:13
S100蛋白是广泛分布于不同组织的一类分子量较小(9~13 ku)的EF臂型钙结合蛋白,目前已发现该家族至少有19个成员,S100B(旧称S100β)96%存于脑组织中,因而被认为是脑特异性蛋白[1,2]。近年来,动物实验和;临床发现,脑血管疾病和脑损伤后,脑脊液和血清中S100B含量升高,可作为中枢神经系统疾病的标志物。我们建立了抗S100B蛋白单隆抗体为包被抗体,抗S100多克隆抗体为检测抗体的双抗体夹心ELISA,对中枢神经系统损伤患者以及正常对照(无中枢神经系统损伤,无肿瘤)病人脑脊液S… 相似文献
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目的探讨高尔基体蛋白73(Golgi protein 73,GP73)及异常凝血酶原(des-gamm-carboxy-prothrombin,DCP)用于肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)诊断的临床价值。方法采用酶联免疫吸附法分别检测56例HCC患者、34例肝硬化患者以及30例健康体检者血清GP73以及DCP水平。结果 HCC组患者血清GP73含量为(201.9±92.9)μg·L-1,明显高于肝硬化组的(76.4±25.5)μg·L-1以及对照组的(29.9±15.0)μg·L-1(均P<0.01);HCC组患者血清DCP含量为(115.1±36.1)μg·L-1,明显高于肝硬化组的(45.6±16.4)μg·L-1以及对照组的(23.2±11.4)μg·L-1(均P<0.01)。Spearman相关分析发现,HCC患者GP73与DCP含量之间具有一定相关性,r=0.573,P<0.01。血清GP73诊断HCC最佳临界值为128.5μg·L-1,其诊断灵敏度为80.4%,特异性为87.5%,曲线下面积为0.925 8;血清DCP诊断HCC最佳临界值为73.2μg·L-1,其诊断灵敏度为76.8%,特异性为81.3%,曲线下面积为0.885 3。与血清GP73及DCP单项检测相比,二者联合检测能明显提高HCC的诊断灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值以及总有效率均明显高于(P<0.05);而二者单项检测各指标之间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 HCC患者血清GP73及DCP含量显著增加,并且2个指标的联合检测对HCC的临床诊疗具有重要价值。 相似文献
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目的探讨血清a-L-岩藻糖苷酶(AFU)、高尔基体蛋白73(GP73)在原发性肝癌(HCC)早期诊断中的应用价值及其与临床病理特征的关系。方法 2014年6月至2016年6月应用ELISA法测定120例HCC患者,120例肝硬化患者,120例慢性乙型肝炎患者及100例健康对照者血清AFU、GP73水平,比较各组血清AFU、GP73阳性表达情况,分析血清AFU、GP73阳性表达与HCC患者临床特征的关系,应用受试者特异度曲线(ROC)分析血清AFU、GP73在肝癌中的应用价值。结果 HCC组血清AFU、GP73水平及阳性表达率高于肝硬化组、慢性肝炎组及对照组(P0.05),而肝硬化组血清AFU、GP73水平及阳性表达率高于慢性肝炎组及对照组(P0.05),而慢性肝炎组血清AFU、GP73水平及阳性表达率与对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。HCC组中,不同浸润程度、临床分期、淋巴转移、血管侵犯、Child-Pugh分级患者的血清AFU表达水平差异有统计学意义(P0.05),不同肿瘤分期、血管侵犯、淋巴结转移、Child-Pugh分级的患者GP73表达水平差异有统计学意义(P0.05)。血清AFU诊断肝癌灵敏度为93.33%,特异度为96.00%,准确率为94.54%;GP73诊断肝癌的灵敏度为90.00%,特异度为96.00%,准确率为92.73%。结论血清AFU、GP73表达水平升高与HCC发生及病情进展有密切的关系。通过测定血清AFU、GP73水平将有助于评价HCC发生及病情进展情况。 相似文献
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目的建立检测人血清中抗烟曲霉特异性抗体的ELISA法,评估该法在侵袭性烟曲霉病(IA)诊断中的价值。方法用沙氏液体培养基震荡培养烟曲霉,TCA/丙酮沉淀法分离菌体蛋白和培养上清中的分泌蛋白。用烟曲霉播散感染的家兔血清及确诊IA患者血清,分别与菌体蛋白和分泌蛋白进行免疫印迹分析,选择反应强的分泌蛋白作为包被抗原,建立测定抗烟曲霉特异抗体的ELISA,并对方法的精密度和特异性进行考察、确定cut off值。对实验动物模型血清以及5例确诊、24例临床诊断为IA的患者血清样本进行测定,并与血清半乳甘露聚糖(GM)测定结果进行比较。结果免疫印迹结果显示培养获得的烟曲霉分泌蛋白与感染动物和病人血清均呈现强反应,以其作为包被抗原建立的ELISA法精密度良好,批内CV=12.0%,批间CV=8.1%;阻断试验证实此法对烟曲霉抗体具特异性。依据200份健康人血清测定结果,取吸光度(A)值1.03作为cut-off值。健康人抗体阳性率为2.0%(4/200),IA患者阳性率41.4%(12/29),二者差异显著(P<0.01)。2例临床诊断病人血清GM试验阴性,但抗体阳性,占8.3%(2/24)。实验感染的家兔均在感染后1周内测... 相似文献