荧光定量PCR法与ELISA法检测乙肝病毒感染相关性的研究

目的　采用荧光定量PCR法与ELISA法检测乙肝病毒标志物 ,探讨两种检测方法的相关性。方法　对 95 2份深圳服务行业从业人员体检乙肝表面抗原阳性的血清 ,应用HBV荧光定量PCR法和ELISA法检测并对结果进行分析。结果　荧光定量PCR检测不同乙肝标志物分组阳性率存在一定的差异 ;E抗原阳性的HBVDNA阳性对数均值为 6 . 4 9± 1 .2 9,表面抗原阳性而E抗原阴性的HBVDNA阳性对数均值为 4. 4 6± 1. 2 9,两者间差异具有显著性 (P <0 . 0 1) ,而不同性别和籍贯间无明显差异。结论　两种方法检测乙肝标志物有密切的相关性 ;对从业人员用ELISA法检测乙肝表面抗原阳性者应进一步进行荧光定量PCR检测。     

定量检测乙肝病毒免疫标志物与HBVDNA之间的关系及临床意义

[目的]探讨定量检测乙型肝炎病毒标志物与定量检测HBVDNA之间的关系及临床意义。[方法]采用ECIQ全自动免疫发光分析仪,定量检测HBVM的S／CO比值。同时采用实时荧光定量PCR检测HBV—DNA的拷贝数。[结果]在264例乙肝病人中,乙肝“HBeAg”阳性142例,乙肝“HBeAg”阴性122例,正常对照47例。HBSAg的含量与乙肝“HBeAg”阳性,乙肝“HBeAg”阴性与慢性轻度肝炎有非常显著差异（P〈0．01）。HBVDNA与HBeAg的含量有一定的关系。[结论]采用ECIQ令自动免疫发光分析仪定量检测乙型肝炎病毒标志物与荧光定量PCR技术检测HBV—DNA的联合应用,可为临床提供更为有效、更有价值的信息。     

HBV—DNA检出情况与乙肝五项结果之间的相关性研究

[目的]探讨HBV—DNA的检测结果与乙肝两对半结果之间的相关性。[方法]运用荧光定量PCR法检测225例疑似乙肝患者血清中的HBV—DNA含量,同时采用ELISA法检测乙肝两对半标志物,并对结果进行相关性分析。[结果]HBsAg（＋）HBeAg（＋）HBcAb（＋）组（大三阳组）患者血清中HBVDNA的阳性率为85％（51／60）,平均拷贝数为2．24×10^7 copies／mt;HBsAg（＋）HBeAb（＋）HBcAb（＋）组（小三阳组）患者血清中HBVDNA的阳性率为31％（31／98）,平均拷贝数为3．86×10^5copies／ml;HBsAg（＋）HBcAb（＋）组患者血清中HBVDNA的阳性率为38％（5／13）,平均拷贝数为6．93×10^5copies／ml。[结论]大三阳组和小三阳组阳性率相比差异有统计学意义（x^2=42．458,P〈0．005）;大三阳组和HBsAg（＋）HBcAb（＋）组阳性率相比差异有统计学意义（x^2=12．954,P〈0．005）;HBVDNA病毒含量检测更能准确反映患者HBV感染情况,因此在检测中应该联合使用两种方法,提高检测的准确性,指导临床对患者的病情进行诊断、指导治疗和观察疗效。     

HBV感染者血清病毒载量与HBV-M的相关性分析

目的：探讨乙肝感染者血清HBVDNA与HBV-M各模式的关系及二者的诊断价值。方法：578份血清采用荧光定量PCR检测HBVDNA,同时用放射免疫法检测HBV-M。结果：HBV-M各模式HBsAg阳性者中HBeAg阳性组HBVDNA阳性率（95.21%）及病毒载量最高,与HBeAg阴性组（阳性率50.87%）比较有统计学差异（P〈0.01）,HBeAg阴性组以低载量者居多,但高复制者仍有19.05%;HBsAg阴性组HBVDNA阳性率仍有3.28%,病毒量都为低载量。结论：HBV-M与HBVDNA相互结合,才能正确判断HBV感染状况。     

乙型肝炎病毒DNA含量与血清标志物的关系

目的 探讨乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒（HBV）DNA定量与乙肝血清标志物关系。方法 采用定量聚合酶链反应（PCR）法检测354例乙型肝炎患者血清中DNA含量,与HBV标志物作对比研究。结果 血清HBeAg阳性组HBVDNA含理明显高于抗-HBe或抗-HBc阳性组,而后两组HBVDNA检出率仍较高,乙型肝炎肝硬化组阳性率明显低于慢性乙型肝炎组,且含量较低。结论 定量PCR法检测HBVDNA检出率仍较高,乙型肝炎肝硬化组阳性率明显低于慢性乙型肝炎组,且含量较低。结论 定量PCR法检测HBV DNA具有较强的特异性和灵敏度,为临床了解病毒复制情况,制定治疗方案及疗效观察提供了确切依据。     

血清中Pre-S1及HBV DNA含量对乙型肝炎病毒复制的临床意义

目的探讨乙型肝炎病毒前S1抗原（Pre—S1）、HBVDNA在乙型肝炎血清标志物模式中的价值及临床意义。方法对3226例乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阳性患者血清标本同时进行乙型肝炎病毒（HBV）标志物、Pre—S1的酶联免疫吸附试验（EusA）检测和HBVDNA的实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测,并分Pre—S1阳性组与阴性组进行统计学分析。结果Pre—S1阳性组检出HBVDNA的平均含量是（7．34&#177;0．88）拷贝／mL,阴性组是（5．41&#177;1．14）拷贝／mL。两组比较：HBVDNA的检出率（P〈0．005）和HBVDNA的含量（P〈0．05）差异都有显著性。Pre-S1阳性的乙型肝炎血清标志物模式组中HBVDNA的检出率为77．11％,Pre-S1阴性的乙型肝炎血清标志物模式组中HBVDNA的检出率是29．30％,阳性组检出率较高的3种血清学模式是HBsAg与乙型肝炎e抗原（HBeAg）双阳（模式⑤,100．00％）,HBsAg、HBeAg、乙型肝炎核心抗体（HBcAb）三阳（模式①,95．98％）,HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb四阳（模式③,95．OO％）;阴性组检出率较高的3种血清学模式是模式⑤（100．00％）、模式③（75．00％）、模式①（63．87％）。结论Pre-S1作为一种新的反映HBV复制状态和传染性的指标,在乙型肝炎血清标志物模式中具有重要意义,其阳性血清标志物模式患者HBV复制活跃,HBV含量高。     

HBV感染者血清DNA含量与免疫学标志及血清ALT的检测分析

[目的] 探讨HBV感染并HBVDNA含量与乙肝免疫学标志物HBVM及血清ALT变化的关系。[方法]HBVM采用ELISA方法；HBVDNA检测采用荧光定量聚合酶链反应；ALT检测采用速率法。[结果] HBeAg（＋）患者HBVDNA阳性率及拷贝数与HBeAg（-）／HBeAb（＋）患者或HBeAg（-）／HBeAb（-）患者比较有观著性差异（P〈0．05），而后二者比较无显著性差异（P〉0．05）；HBVDNA阳性组ALT异常率与HBVDNA阴性组比较有显著性差异（P〈0．05）。[结论] HBeAg是乙肝病毒复制的重要标志；HBeAb并非病毒复制终止的标志；HBV感染者的肝损害与HBVDNA含量有一定关系。     

乙型肝炎病毒父婴垂直传播的临床研究

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)阳性父亲的新生儿宫内感染情况以及HBV定量与婴儿感染率之间的相关性。方法以母亲乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阴性、父亲HBsAg阳性的新生儿62例(A组)为研究对象,同时以母亲HBsAg阳性、父亲HBsAg阴性的新生儿71例(B组)及父母双亲HBsAg均阴性者50例(C组)作对照,采用血清酶联免疫吸附试验(ELISA)及荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测新生儿血清HBsAg及HBVDNA水平以及父/母血清HBVDNA拷贝数,采用χ2检验进行统计学分析。结果应用荧光定量PCR技术检测HBVDNA阳性率较ELISA检测的HBsAg阳性率高,C组无1例感染,而A、B两组总体感染率分别为33.9%及35.2%,两组间无统计学差异。荧光定量PCR分析发现,父代、母代HBVDNA含量越高,其子代感染率越高。结论 HBV可能通过父婴途径垂直传播,其感染率与母婴传播相当,且与父代血清HBVDNA含量的高低密切相关。     

HBeAg阴性乙肝患者LHBs的检测及其意义

目的探讨检测乙型肝炎HBeAg阴性患者病毒表面大蛋白（LHBs）用于反映体内乙型肝炎病毒复制的意义。方法采用酶联免疫吸附实验（ELISA）和荧光定量PCR法对807例HBeAg阴性血清标本进行LHBs及HBVDNA检测。结果①在807例HBeAg阴性慢性乙肝血清中HBVDNA阳性率为54．40％（439／807），LHBs的阳性率为56．75％（458／807），二者比较无显著性差异（Χ^2=0．813，P〉0．05），两者总体符合率为91．70％（740／807）；②HBeAg阴性慢性乙肝不同HBV—M模式的HBV—DNA与LHBs检出结果均无显著性差异（P〉0．05）。⑨LHBs含量与HBVDNA拷贝数呈正相关（r=0．995，P〈0．001）。结论LHBs与HBVDNA具有良好的相关关系，能够反映出HBeAg阴性乙肝患者体内HBV复制的程度，是HBVDNA复制水平判定的有效指标，具有重要的临床意义。     

乙型肝炎定量HBsAg阳性样本HBV-DNA与HBeAg定量值分析

目的：对696例同时检测HBV血清标志物和HBV‐DNA定量检测的结果进行回顾分析。方法HBV血清标志物采用免疫光激化学发光法;HBV‐DNA采用荧光聚合酶链式反应（PCR）技术。结果乙肝e抗原（HBeAg）阴性组中不同HBV‐DNA定量阳性率分别为56％、28％、13％、3％;HBeAg阳性组中不同HBV‐DNA定量阳性率分别为31％、19％、15％、35％;HBeAg定量值分析中当HBeAg≥65PEIU/mL时,随着HBV‐DNA检测拷贝数增大其构成比逐渐增大;当HBeAg＜65PEIU/mL时,随着HBV‐DNA检测拷贝数增大其构成比逐渐减少。结论单纯以HbeAg的转换和HBV‐DNA定量的变化来判断乙肝病毒复制与非复制状态存在一定局限性。     

乙型肝炎病毒血清标志物与HBV—DNA定量联合检测的意义

目的探讨乙型肝炎（下称乙肝）病毒DNA（HBV-DNA）与血清免疫标志物的关系。方法荧光定量聚合酶链反应法（FO-PCR）检测血清样本中HBV—DNA含量;酶联免疫吸附法（ELISA）检测HBV血清标志物。结果A组（大三阳）、B组（小三阳）、C组[乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝e抗原（HBeAg）阳性]、D组（HBsAg、抗-HBc阳性）阳性率分别为97．3％、57．8％、100％、54．3％,HBeAg阳性组和HBeAg阴性组HBV-DNA病毒载量差异有统计学意义（P〈0．05）。结论HBV—DNA与乙肝血清标志物乙肝两对半（HBV-M）联合检测,能更准确地反映HBV复制情况,更有助于临床疾病的诊治。     

应用荧光PCR技术检测6500例患者血清HBV DNA的实验研究

目的　揭示血清乙肝病毒标志物 (HBVM)与血清HBVDNA含量相关性。方法　采用ELISA法对血清、HB VM进行检测 ;对HBVM阳性 6 5 0 0例患者血清采用荧光PCR法定量检测HBVDNA。结果　在HBVM阳性的 6 5 0 0例血清中 ,有 3982例占 6 1 3% ,HBVM标志物阳性者血清均有HBVDNA阳性。血清HBsAg、HBeAg、抗 HBc阳性者HBVDNA阳性率占 96 9% ,大于 10 6copies/ml者占 72 1% ,HBsAg、抗 HBe、抗 HBc阳性者HBVDNA阳性率占 2 1 9% ,HBVDNA定量大于 10 3 copies/ml,且小于等于 10 4copies/ml者占 78 1%。结论　血清HBVM阳性患者中约 6 0 %的血清HBVDNA阳性 ,且HBeAg阳性中HBVDNA阳性率及血清HBVDNA均明显高于抗 HBe阳性者。在抗 HBs、抗 HBc阳性者血清内也有HBVDNA阳性者 ,采用荧光PCR定量检测HBVDNA技术先进结果准确。     

HBcAg在隐匿性乙型肝炎中的临床意义

【目的】探讨HBcAg与HBVDNA水平及乙肝病毒标志物模式之间的关系,为临床提供隐匿性乙型肝炎病毒传染性及诊断的实验室依据。【方法】用放射免疫法检测1053例HBsAg阴性标本的六种血清标志物,同时对其中107例标本用聚合酶链反应（PCR）法检测HBVDNA。【结果】1053例HbsAg阴性中HBcAg阳性率为7．31％。在同时检测HBcAg和HBVDNA的107例各种感染模式中．HBcAg阳性率为10．28％,HBVDNA阳性率为8．65％,且阳性率相似,差异无统计学意义（P〉0．05）。HBVDNA含量均低于10^4Copies／mL。[结论]HBcAg可反映HBV病毒感染与复制,是乙型肝炎早期诊断的可靠指标。HBcAg检测作为HBV血清学方法的补充．对乙型肝炎的临床诊断具有重要意义。     

乙型肝炎病毒前S1抗原检测的临床价值

目的 探讨乙型肝炎病毒前S1抗原与乙型肝炎病毒DNA（HBVDNA）、乙型肝炎e抗原（HBeAg）、抗HBe（Anti—HBe）的相关性。方法 对450例乙肝患者血清进行酶免法（EIA）检测前S1抗原、微粒子酶免分析法（MEIA）检测HBeAg、定量PCR内标法检测HBV—DNA。同时对用MEIA检测乙型肝炎病毒血清标志物均阴性的72例正常健康人血清也进行前S1抗原检测。结果 450例HBV—DNA阳性的乙肝患者中，HBeAg阳性率为76．8％，前S1抗原的阳性率为61．5％，其中：前S1抗原的阳性率在HBeAg阳性患者中为61．6％、在抗-HBe阳性患者中为61．5％。HBV—DNA阳性情况下HBeAg阳性与HBeAg阴性患者的前s1抗原阳性率，两组经解检验，P〉0．05无明显差异。结论 前S1抗原、HBeAg与HBVDNA符合率较高，前S1抗原与HBeAg无明确相关。对无条件检测HBVDNA而HBeAg阴性的血清，检测前S1抗原，可起到提示病毒是否复制的补充作用，如与其他乙型肝炎病毒血清标志物同时检测，对临床会更有意义。     

慢性乙型肝炎患者HBV—DNA定量检测的临床意义

目的分析慢性乙型肝炎患者HBV—DNA定量检测的临床意义。方法采用微粒子酶免法检测113例慢性乙型肝炎患者血清中HBeAg舍量，采用荧光定量PCR法检测患者血中HBv—DNA含量，采用速率法检测患者血清生化ALT，并进行比较分析。结果HBeAg阳性组DNA阳性率100％，平均含量为（7．24±1．45）Ecopies／mL，HBeAg阴性组DNA阳性率82．69％，平均含量为（5．36±1．02）Ecopies／ml，显著低于HBeAg阳性组（P〈001）。患者血清HBeAg和HBV—DNA含量与ALT无相关关系。结论血清中HBeAg阳性和阴性与HBV-DNA含量有一定相关性，与ALT无相关关系，临床中要辩证地看待H13VJb-清标志物及HBV-DNA含量与肝脏炎症程度的关系，应把HBeAg和HBV-DNA、血清生化结合起来进行分析。     

HBsAg阳性患者乙型肝炎病毒表面大蛋白的检测及其意义

目的探讨检测乙型肝炎病毒表面大蛋白（LHBs）用于反映HBsAg阳性患者体内乙型肝炎病毒复制的临床意义。方法采用酶联免疫吸附实验（ELISA）和荧光定量PCR法对1066例HBsAg阳性血清标本进行LHBs及HBV DNA检测。结果①在1066例HBsAg阳性血清中HBV DNA阳性率为63．23％（674／1066），LHBs的阳性率为66．42％（708／1066），二者比较无显著性差异（x^2=2．240，P〉0．05），两者总体符合率为91．93％；②不同HBV—M模式的HBV—DNA与LHBs检出结果均无显著性差异（P〉0．05）。③LHBs含量与HBVDNA拷贝数呈正相关（r=0．927，P〈0．001）。结论血清中LHBs含量与HBV—DNA的拷贝数具有较好的相关性，LHBs能够反映HBV的复制情况。     

荧光定量PCR在乙型肝炎病毒宫内感染监测中的应用

目的 探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)在乙型肝炎病毒(HBV)宫内感染监测中的作用及临床意义.方法 应用FQ-PCR检测102例乙型肝炎(下称乙肝)感染孕妇血清及其新生儿脐带血的HBV DNA,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙肝感染孕妇血清及其新生儿脐带血的乙肝血清学标志物.结果 新生儿脐带血的HBVDNA阳性率为16.7%(17/102),高于脐带血乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的阳性率(10.8%,11/102)P＜0.001;102例乙肝孕妇中有29例血清乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)阳性,其新生儿脐带血HBV DNA阳性率为48.3%(14/29),高于孕妇HBeAg阴性组的阳性率(4.1%,3/73)P＜0.001,新生儿脐带血的HBV DNA阳性率随孕妇HBVDNA含量增加而增加(P＜0.001).结论 FQ-PCR检测新生儿脐带血HBV DNA是诊断乙肝宫内感染的良好而敏感的筛选指标;孕妇血清HBV DNA高含量是乙肝宫内感染的高危因素.     

乙型肝炎病毒前S1抗原与HBVDNA、HBeAg的相关性分析——附178例检测分析

目的：探讨HBV前S1抗原（pre-S1antigen,Pre—S1Ag）与HBVDNA、HBeAg的相关性,并评价Pre—S1鲰的临床应用价值。方法：对178例慢性乙型病毒性肝炎（慢乙肝）患者采用EUSA法检测Pre．S1Ag、HBeAg,采用荧光定量PCR法检测HBVDNA,比较Pre．S1Ag、HBeAg与HBVDNA的诊断符合率,并根据HBVDNA载量分为低复制组、中等复制组及高复制组,分析HBVDNA载量与Pre-S1Ag阳性率的相关性。结果：178例的HBVDNA均为阳性,其中Pre—S1Ag阳性144例（80．9％）,Pre—S1Ag阴性34例（19．1％）;HBeAg阳性112例（62．9％）,HBeAg阴性66例（37．1％）。Pre—S1Ag、HBeAg与HBVDNA的诊断符合率分别为80．9％、62．9％,上述两诊断符合率比较差异有统计学意义（P〈0．05）。112例HBeAg阳性慢乙肝者中,Pre-S1Ag的阳性率80．4％;66例HBeAg阴性慢乙肝者中,Pre—SlAg阳性率82％。HBV高复制组的Pre-S1Ag阳性率（93％）高于中等复制组（80％）和低复制组（64％）,且HBVDNA载量与Pre—S1Ag的阳性率呈正相关（r=0．293,P〈0．01）。结论：Pre．S1Ag与HBVDNA有较好的相关性,在无法开展HBVDNA检测的基层医院,对于HBeAg阴性慢乙肝患者应增加检测Pre-S1Ag,以提高检测的准确度。     

HBV-DNA定量与乙肝病毒感染免疫学检测结果对比分析及意义

本文采用荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)和ELISA两种方法同时检测了 310份血清 ,并对结果进行了对比分析 ,结果显示 :80例HBsAg (+)、HBeAg (+)、HBcAg (+)组的血清HBVDNA检出率为 92 5 % (74例 ) ,平均拷贝数为 4 10× 10 10 /ml,6 8例HBsAg (+)、HBeAb (+)、HBcAb (+)组血清HBVDNA检出率为32 35 % (2 2例 ) ,平均拷贝数为 1 31× 10 9/ml,70例HBsAg (+)、HBeAb (+)组血清HBVDNA检出率为45 71% (32例 ) ,平均拷贝数为 4 0 8× 10 8/ml;32例HBV M全阴性组血清HBVDNA检出率为 6 .6 7% (2例 ) ,平均拷贝数为 1 5 4× 10 8/ml。结果表明 :HBV -M阴性的病人也可能有HBVDNA阳性 ,因此为临床提供HBV感染、复制及传染性的判断以及指导治疗 ,应选择乙肝两对半标志物检测的同时做PCRHBVDNA定量检测     

检测乙肝表面抗原大蛋白的临床意义

[目的]检测乙肝患者血清中乙肝表面抗原大蛋白（ Hepatitis B Virus Large Surface Protein, LHBs） 、乙肝前SI、HBVDNA以及ALT，探讨LHBs用于乙肝患者临床诊断的意义。[方法]采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测LHBs以及乙肝前st，采用化学发光方法检测乙肝两对半，采用荧光定量PCR方法对患者HBVDNA进行检测，采用全自动生化分析仪检测丙氨酸转氨酶（ALT）。[结果]1．相同乙肝模式患者血清LHBs与HBVDNA检出率无显著差异（P〉0．05）；2．HBeAg阳性患者血清中LHBs与HBVDNA阳性率均明显高于HBeAg阴性患者，差异显著（P〈0．05）；3．相同乙肝模式患者血清乙肝前S1的检出低于HBVDNA的检出，两者差异显著（P〈0．05）；4．LHBs阳性患者的ALT明显高于LHBs阴性患者。[结论]乙肝表面抗原大蛋白（LHBs）可以弥补由于乙肝病毒变异引起的HBeAg检测的不足，并在一定程度上反映了乙肝患者肝功能状况。