结核分枝杆菌复合群检测在AIDS合并结核病诊断中的应用

目的探讨结核分枝杆菌复合群(MTD)检测在获得性免疫缺陷综合征(AIDS)合并结核分枝杆菌感染实验诊断的临床应用。方法采用MTD、结核分枝杆菌培养及抗酸染色3种方法,对127例AIDS合并疑似分枝杆菌感染患者的痰样本进行同步检测,对照组为同期住院非人类免疫缺陷病毒(HIV)感染的普通疑似结核病患者25例。结果 127例AIDS患者痰样本MTD阳性率为29.1%;结核分枝杆菌培养法阳性率为25.2%;抗酸染色阳性率为18.9%;对照组MTD和结核分枝杆菌培养法的阳性率均为44.0%,抗酸染色阳性率为40.0%。结论 MTD对AIDS合并结核病的诊断有较高的应用价值,在提高阳性率的同时可在1个工作日内提供结核分枝杆菌感染的实验诊断信息。     

用Bactec TB460快速培养阳性的菌液直接进行分枝杆菌菌种鉴定

ＢａｃｔｅｃＴＢ460分析仪能快速培养出分枝杆菌 ,并能以较快的速度进行粗筛分型 ,初步定出分枝杆菌的菌种 ,而再进一步的鉴定 ,则需要转种罗氏培养基 ,行传统的方法鉴定。我们采用ＢａｃｔｅｃＴＢ460分析仪快速培养阳性的分枝杆菌菌液直接进行分枝杆菌的菌种鉴定 ,现介绍如下。1　材料与方法1 1　标准菌种　结核分枝杆菌 (Ｈ3 7ＲＶ)、堪萨斯分枝杆菌、戈登分枝杆菌、瘰疬分枝杆菌、蟾蜍分枝杆菌等均购于北京生物制品所。1 2　实验菌株　为本院经ＢａｃｔｅｃＴＢ460培养 ,ｐ 硝基 α 氨基 β 羟基 苯丙酮 (ＮＡＰ)试剂鉴定确认为非结核…     

微生物学实验室在诊断分枝杆菌病中的作用

本文对诊断结核分枝杆菌病的现有方法进行了总结。认为所有实验室在进行结核分枝杆菌培养时应使用固体培养和肉汤培养；在耐药普遍的社区可采用ＢＡＣＴＥＣ系统进行药物敏感试验。采用快速基因扩增法能大大缩短结核病，特别是涂片阴性病例的确诊时间。一些新开展的诊断方法需进行规范化的重新评价。     

PCR-荧光探针法检测分枝杆菌的临床应用价值

目的 比较PCR-荧光探针法和改良罗氏培养法检测结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌的一致性,探讨两种方法在临床上的应用价值.方法 应用PCR-荧光探针法检测69例改良罗氏培养阳性的分枝杆菌核酸,比较两种方法检测结果的一致率;两种方法检测结果不一致样本进行测序验证,以测序结果作为金标准,分析两种方法检测结果的正确率及不一致的可能原因.结果 两种方法检测总一致率为89.9%,结核分枝杆菌检测一致率为87.5%,非结核分枝杆菌检测一致率为90.6%.PCR-荧光探针法和改良罗氏培养法共有7例检测结果不一致,与测序结果比对后,改良罗氏培养法检测的正确率为94.2%,PCR-荧光探针法检测的正确率为92.8%.结论 操作简单、快速,灵敏的PCR-荧光探针法与作为传统金标准的改良罗氏培养法检测结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌的一致性良好、正确率高,可作为临床分枝杆菌感染诊断的重要检测手段.     

7种实验方法诊断结核病的临床应用价值

目的评估直接涂片法、浓集涂片法、结核分枝杆菌罗氏培养法、BACTEC MGIT960系统培养结核分枝杆菌法、实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)、实时荧光核酸恒温扩增检测技术(SAT)扩增法、结核分枝杆菌IgG抗体检测等7种方法对临床结核诊断的应用价值。方法对临床确诊的672例肺结核患者和62例健康体检者的痰标本用7种结核菌检测方法进行检测。结果 672例患者中检测阳性率分别为直接涂片法17.0%(115/676)、浓集涂片法25.6%(173/676)、改良罗氏培养法32.2%(218/676)、BACTEC MGIT960系统培养结核分枝杆菌法45.7%(309/676)、实时荧光定量PCR 90.1%(609/676)、SAT扩增法96.4%(652/676)、结核分枝杆菌IgG抗体检测法65.4%(442/676)。对照组只有荧光PCR法和结核抗体法检出阳性,阳性率分别为8.1%、12.9%。涂阴标本经罗氏培养法+结核抗体法+SAT法联合检出阳性率高于单一检测方法。结论涂片法操作简便、快速和价格便宜,但阳性率低,在长时期内其依然是基层医院诊断结核病的主要检测手段;结核分支杆菌培养能进行菌种鉴定和药物敏感试验仍是不可缺少的方法,但周期长;结核抗体法方便,简单,仍是结核实验室诊断的重要手段,但不能区分感染与发病;荧光PCR扩增法快速,灵敏,有较好诊断价值,但设备昂贵,技术要求高,易污染;SAT法快速,灵敏,要求较荧光PCR扩增法低,可以辅助诊断结核病。同时联合检测提高诊断率,并满足不同临床需要。     

结核病3种实验诊断方法比较与分枝杆菌耐药性分析

目的 比较结核病3种实验诊断方法,分析目前深圳市分枝杆菌耐药情况.方法 统计2009～2010年深圳市第三人民医院临床确诊结核病患者痰标本涂片镜检、培养和PCR检测结果,并对分枝杆菌菌种及对治疗药物耐药情况进行统计分析.结果 共有640例资料齐全的结核病确诊病例入选,其中肺结核537例、结核性胸膜炎82例、结核性脑膜炎21例,分枝杆菌涂片镜检阳性率分别为44.1%、5.3%和13.3%,分枝杆菌培养法阳性率分别为59.9%、12.9%和30.0%,PCR检测阳性率分别为52.2%、16.7%和26.3%.经分枝杆菌菌种鉴定,人型结核分枝杆菌占67.0%、牛型结核分枝杆菌占16.8%、非结核分枝杆菌占16.2%,人型结核分枝杆菌对利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素的耐药率分别为16.4%、14.8%、4.7%和15.6%.结论 目前结核病实验诊断方法主要有涂片镜检、培养和PCR检测,病原菌以人型结核分枝杆菌为主,对3种主要抗结核药物的耐药率较高.另外,菌阴结核约占40%,目前对菌阴结核、活动性结核与陈旧性结核的诊断和鉴别诊断困难,期待新的方法.     

PCR扩增IS6110用于检测痰液中结核分枝杆菌的评价

为评价ＰＣＲ扩增ＩＳ６１１０检测结核分枝杆菌的特异性，用Ｂａｃｔｅｃ培养法对４５例可疑肺结核病人痰样品进行分枝杆菌检测；用４对分别针对ＩＳ６１１０不同区域引物和一对分枝杆菌属特异的１６ＳｒＲＮＡ基因引物对这４５例痰样品及其培养物和２７株已知分枝杆菌属菌株进行ＰＣＲ扩增检测。结果所有分枝杆菌ＤＮＡ均扩增出了１６ＳｒＲＮＡ基因片段，结核分枝杆菌ＤＮＡ均扩增出了ＩＳ６１１０的４个不同区域片段，非典型分枝杆菌ＤＮＡ均未扩增出ＩＳ６１１０片段，但存在假阳性和假阴性     

结核分枝杆菌检测阳性报告时间探讨——罗氏培养、7H9培养及MPB64胶体金法

[目的]通过改良酸性罗氏培养、7H9液体培养及MPB64的免疫胶体金法对分枝杆菌的检测阳性报告时间进行比较,以了解现有结核分泌蛋白抗原MPB64检测试剂在肺结核诊断尤其是早期诊断中的应用价值。[方法]收集90例确诊为结核病患者的临床标本,分别用改良罗氏培养基培养、7H9液体培养及MPB64的免疫胶体金法检测结核分枝杆菌,并对检测阳性报告时问进行比较。[结果]早期MPB64抗原胶体金检测试剂盒的阳性率明显高于7H9液体培养法和改良酸性罗氏培养法。[结论]MPB64抗原可以作为一种较为敏感、快速简便的检测结核分枝杆菌感染的方法,有助于结核病临床的快速诊断。     

结核菌快速培养在大容量肺灌洗中的应用

结核病是由结核分枝杆菌引起的慢性传染性疾病，结核分枝杆菌培养是诊断结核病的金标准。肺结核是大容量肺灌洗术（WLL）的禁忌症，且肺结核为尘肺患者常见的合并症，采用液体培养基快速培养结核分枝杆菌为术前快速诊断和排除肺结核病可赢得宝贵时间。     

微生物学实验室在诊断分枝杆菌病中的作用

本文对诊断结核分枝杆菌病的现有方法进行了总结。认为所有实验室在进行结核分枝杆菌培养时应使用固体培养和肉汤培养;在耐药普遍的社区可采用BACTEC系统进行药物敏感试验。采用快速基因扩增法能大大缩短结核病,特别是涂片阴性病例的确诊时间。一些新开展的诊断方法需进行规范化的重新评价。     

4种检测方法在结核病临床诊断中的应用价值

目的探讨结核分枝杆菌感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)、结核分枝杆菌快速培养试验、结核分枝杆菌抗体免疫球蛋白M(IgM)与免疫球蛋白G(IgG)联合检测,以及痰液或肺泡灌洗液涂片4种肺结核诊断方法的临床诊断价值。方法选取该院2014年10月至2015年5月临床初次诊断为结核病,且尚未用药的住院患者516例,对所有患者行T-SPOT.TB、结核分枝杆菌快速培养试验、结核分枝杆菌抗体IgM与IgG联合检测和痰液或肺泡灌洗液涂片检测,计算并比较各方法的灵敏度。结果 T-SPOT.TB的灵敏度(88.76%)高于结核分枝杆菌快速培养试验(45.74%)、结核分枝杆菌抗体IgM与IgG联合检测(72.87%)、痰液或肺泡灌洗液涂片(17.25%),差异均有统计学意义(P0.01)。结论 T-SPOT.TB在检测结核分枝杆菌感染、辅助结核病诊断方面具有很高的应用价值,同时联合其他检测方法可提高诊断率,满足不同的临床需要。     

3种方法检测痰结核分枝杆菌的比较

目的：探讨建立更快速、准确的痰结核分枝杆菌检测方法。方法：采用涂片抗酸染色法、快速结核菌培养法和荧光定量PCR技术对痰结核分枝杆菌进行检测,并对其检出率进行比较。结果：荧光定量PCR技术的检出率最高,快速培养法次之且检测时间较长,抗酸染色法检出率最低。结论：荧光定量PCR技术能对痰结核分枝杆菌进行简便、快速、敏感、特异的检测,在肺结核的早期诊断和疗效观察中将能发挥重要作用。     

DNA微阵列芯片法在海南地区结核病诊断及耐药性检测中的应用

目的 探讨DNA微阵列芯片法在海南地区结核病诊断及耐药性检测中的应用.方法 采用抗酸杆菌涂片法、罗氏培养法、比例法药敏试验及DNA微阵列芯片法对海南地区的2069例疑似结核病患者痰标本进行检测,并对结核分枝杆菌检出率、耐药性及耐药基因突变特征进行分析.结果 DNA微阵列芯片法检测结核分枝杆菌检出率为明显高于罗氏培养法和...     

寡核苷酸法检测结核病患者血清IgG抗体的临床应用评价

目的评价结核分枝杆菌IgG抗体寡核苷酸酶联免疫法在结核病血清学诊断中的临床应用价值。方法对285例结核病[菌阳肺结核（涂片阳性/培养阳性）124例,菌阴肺结核（涂片、培养均为阴性）161例]、38例非结核病的其他呼吸系统疾病患者及49名健康志愿者同步进行抗酸杆菌涂片、培养及结核分枝杆菌IgG抗体寡核苷酸酶联免疫法检测。结果结核分枝杆菌IgG抗体寡核苷酸酶联免疫法诊断菌阳肺结核的敏感性为67.7%（84/124）,诊断菌阴肺结核的敏感性为33.5%（54/161）,诊断结核病的总体敏感性为48.4%（138/285）,总体特异性为92.0%（80/87）,其中在非结核病的其他呼吸系统疾病患者中的特异性为86.8%（33/38）,在健康志愿者中的特异性为95.9%（47/49）。结论结核分枝杆菌IgG抗体寡核苷酸酶联免疫法有极高的特异性和一定的敏感性,可用于结核分枝杆菌IgG抗体的血清学检测,能为临床诊断提供可靠的参考依据。     

麦科多特快速诊断试剂盒试验在活动期肺结核中的应用

结核分枝杆菌是结核病的病原体．它几乎可引起全身各部位结核性瘸变．结核病的早期和鉴别诊断目前主要依靠涂片镜检和分离培养等方法．但用这些传统的方法检测肺外结核和肺内结核的结核分枝杆菌，检出率低．耗时长缺点，     

快速浓集法与直接涂片法抗酸杆菌检测结果的比较

痰结核分枝杆菌检查不仅是确诊肺结核的重要手段,也是制订治疗方案、考核疗效的主要依据。我们对1014例患者的痰标本分别用直接涂片法和快速浓集法检测痰结核分枝杆菌,用结核病病原学诊断的“金标准”结核分枝杆菌的分离培养作对照,对结果进行了比较分析。     

噬菌体快速培养在肺内、肺外结核分枝杆菌感染诊断中的应用

以噬菌体为基础的结核分枝杆菌裂解试验，可以利用噬菌体生长快、特异性高的特点，快速准确的检测结核分枝杆菌，近年来在结核病研究中倍受关注。本研究采用噬菌体裂解法快速检测患者标本中的结核分枝杆菌，取得了理想结果，具有简便、快速、灵敏、价廉的优点，非常适合结核分枝杆菌这类生长缓慢细菌的快速诊断。     

用抗原诊断结核分枝杆菌感染的免疫学研究进展

结核分枝杆菌感染的免疫学诊断包括酶联免疫吸附试验、皮试、IFN γ释放试验等方法 ,其诊断抗原经历了旧结核菌素、纯蛋白衍生物及纯化膜蛋白等阶段。 2 4kD抗原、6kD早期分泌性抗原靶和培养滤液蛋白 10等分泌性蛋白不但具有良好的抗原性 ,而且是结核分枝杆菌等致病性分枝杆菌所特有的 ,在卡介苗和非致病性分枝杆菌缺乏时 ,是理想的结核分枝杆菌感染的诊断抗原。现对结核分枝杆菌感染的免疫学诊断概况及用抗原诊断的研究进展作一综述。     

噬菌体生物扩增法检测结核性胸膜炎患者胸水临床应用研究

目的 评价噬菌体生物扩增法检测胸水中结核分枝杆菌对诊断结核性胸膜炎的临床应用价值.方法 采用噬菌体生物扩增法技术对73例结核性胸膜炎患者,20例非结核性胸膜炎患者胸水中的结核分枝杆菌进行检测.同份标本同时进行涂片抗酸染色、罗氏培养.结果 73例结核性胸膜炎胸水.噬菌体生物扩增法阳性率为49.3%(36/73)、涂片抗酸染色阳性率为2.7%(2/731、罗氏培养阳性率为4.1%(3/73).20例非结核性胸膜炎,噬菌体生物扩增法、涂片抗酸染色、罗氏培养都未检出阳性.结论 噬菌体生物扩增法检测胸水中结核分枝杆菌只需2天时间,操作简便、灵敏度高、特异性强,不需要特殊仪器设备,可作为诊断结核性胸膜炎的一种好方法 .     

用连接酶链反应快速诊断肺外结核

结核病一直是一个严重威胁人类健康的疾病,实验室的快速诊断始终是一个重要的尚未解决的问题。一般情况下用涂片染色和培养的方法诊断肺外结核,但敏感性低、耗时长。即使Bactec460TB系统也需要13～15天才能报告阳性结果。由艾波特实验室建立的LCX结核分枝杆菌检测试剂盒是用连接酶链反应技术直接检测结核分枝杆菌。本文作者用涂片法、培养法、LCX法同时检测非呼吸标本中的结核分枝杆菌,并将其结果作了比较。结果作者检测了来自492位病人的526份非呼吸标本,130份培养阳性,其中33份问54％）涂片阳性,97份（74．6％）涂片阴性。LCX…