五味子冻干粉改善睡眠剥夺果蝇睡眠作用的实验研究

目的：探讨五味子冻干粉改善睡眠剥夺果蝇睡眠的作用。方法：在恒温、恒湿、自动光控条件下,以7日龄果蝇作为观察对象,分别采用光照和机械刺激两种不同的方法,复制果蝇的睡眠剥夺模型。利用果蝇活动监测仪（DAMS）,以静止时间持续5min以上作为睡眠标准,观察以8%五味子冻干粉连续给药6天（雌果蝇）或给药4天（雄果蝇）后,果蝇睡眠时间的变化。结果：两种方法均可剥夺果蝇的睡眠,与正常果蝇相比,睡眠剥夺果蝇的睡眠时间明显缩短（P<0.01）。给予五味子冻干粉后,无论光照刺激还是机械刺激所致睡眠剥夺果蝇的睡眠时间均明显增加,与睡眠剥夺模型对照组比较,具有显著性差异（P<0.01）。结论：8%五味子冻干粉对睡眠剥夺果蝇的睡眠有一定改善作用。     

五味子冻干粉改善睡眠剥夺果蝇睡眠作用的实验研究

目的:探讨五味子冻干粉改善睡眠剥夺果蝇睡眠的作用.方法:在恒温、恒湿、自动光控条件下,以7日龄果蝇作为观察对象,分别采用光照和机械刺激两种不同的方法,复制果蝇的睡眠剥夺模型.利用果蝇活动监测仪(DAMS),以静止时间持续5min以上作为睡眠标准,观察以8%五味子冻干粉连续给药6天(雌果蝇)或给药4天(雄果蝇)后,果蝇睡眠时间的变化.结果:两种方法均可剥夺果蝇的睡眠,与正常果蝇相比,睡眠剥夺果蝇的睡眠时间明显缩短(P<0.01).给予五味子冻干粉后,无论光照刺激还是机械刺激所致睡眠剥夺果蝇的睡眠时间均明显增加,与睡眠剥夺模型对照组比较,具有显著性差异(P<0.01).结论:8%五味子冻干粉对睡眠剥夺果蝇的睡眠有一定改善作用.     

刺五加对果蝇睡眠剥夺模型睡眠及全基因表达谱的影响

目的:探讨刺五加对睡眠剥夺果蝇睡眠的改善作用,并进行差异基因表达谱初步分析。方法:在恒温、恒湿、自动光控条件下,选取7日龄野生型Canton S品系黑腹果蝇为试验对象,采用光照刺激的方法复制果蝇睡眠剥夺模型,利用自动红外果蝇活动监测系统,以果蝇24h总睡眠时间和睡眠指数为观察指标,进行刺五加改善睡眠剥夺果蝇睡眠作用的量-效与时-效关系研究;在此基础上,采用果蝇表达谱芯片技术进行刺五加改善果蝇睡眠的差异基因表达谱初步分析。结果:刺五加浓度1%、给药3天以上,对果蝇睡眠的改善作用最明显;与模型组相比,刺五加组共有差异表达基因685个,上调基因188个,下调基因497个。结论:刺五加对果蝇睡眠剥夺模型的睡眠具有明显的改善作用,其作用机制涉及免疫反应和多细胞生物过程等相关基因表达的变化。     

睡眠剥夺诱导小鼠气虚证模型的方法研究

目的：通过比较睡眠剥夺、力竭游泳、睡眠剥夺结合力竭游泳3种造模方法,研究小鼠气虚模型的建立与评价方法。方法：将小鼠分为正常对照组、睡眠剥夺组、力竭游泳组、睡眠剥夺+力竭游泳（简称“复合组”）,每组12只,睡眠剥夺组采用多平台水环境法进行睡眠剥夺,每天10h;力竭游泳组采用负重10%进行力竭游泳,每天一次;复合组两种方法联合使用,连续28天。试验结束后,观察小鼠行为与体重,抓力仪测量小鼠抓力,利用小动物无创监护仪检测脉搏信号（心率、呼吸频率、呼吸幅度、脉搏幅度）,采用数码照相机采集舌面图像,利用细胞流式仪检测脾脏T细胞亚群（CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺）与B细胞（CD19⁺）。结果：与正常对照组比较,3组模型小鼠活动能力均降低,呈现疲劳特性,体重、抓力显著降低（P<0.05-0.01）;小鼠舌面均见不同程度的变白,仅复合组具有显著性差异（P<0.05）;睡眠剥夺组与复合组小鼠心率、呼吸频率、脉搏幅度与呼吸幅度均显著降低（P<0.05-0.01）;3组的CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺T细胞亚群显著增加（P<0.01）,睡眠剥夺组的CD19⁺B细胞显著减少（P<0.01）。结论：三种方法均可以成功制备气虚小鼠模型,以睡眠剥夺造模最优。     

睡眠剥夺动物模型及其在中医药改善睡眠研究中的应用

整理国内外常用的睡眠剥夺模型建立方法,并探讨其在中医药改善睡眠研究中的应用,为从中医药角度建立新型且更可靠的睡眠剥夺模型做好理论基础。查阅近15年内睡眠剥夺模型建立及应用的相关文献,归纳总结国内外主要的睡眠剥夺模型及其原理和优缺点并给出模型的改进方法,并结合其在中医药改善睡眠相关研究中的应用,比较模型在中医证型方面中各自的不同之处。结果表明啮齿类动物睡眠剥夺模型主要有水平台剥夺模型、应激剥夺模型、强迫运动剥夺模型、化学刺激剥夺模型、轻柔刺激剥夺模型等;果蝇睡眠剥夺模型主要有机械剥夺模型、夜间重复光照剥夺模型、基因修饰法等;中医药改善睡眠研究中的睡眠剥夺动物模型主要包括阴虚失眠模型、肝郁失眠模型、心肾不交失眠模型等。不同动物睡眠剥夺模型有各自优缺点,在进行中医药改善睡眠研究时需根据具体情况灵活选择,其与中医证型结合方面有待完善;现有的睡眠剥夺模型大多在准确性和稳定性方面均有欠缺,影响实验结果的可靠性;睡眠剥夺模型致力于结合基本模型与中医失眠证型表现,而睡眠剥夺模型在中医药方面的应用尚不十分广泛,建立符合中医药研究思路的睡眠剥夺模型应是中医药改善睡眠研究中的重点。     

睡眠剥夺的机制及中药对抗的研究述略

睡眠剥夺(sleep deprivation，SD)是指人因环境需要丧失正常所需睡眠量的状态。短时间SD一般不会产生明显的不良影响，而长时间睡眠剥夺(prolonged sleep deprivation，PSD，一般指机体在24h或更长的时间内维持清醒的一种状态)则会产生较大的不良影响。本文将对相关文献作如下综述。     

芳香开窍滴鼻剂抗睡眠剥夺作用研究

目的:观察芳香开窍滴鼻剂的抗睡眠剥夺作用.方法:用小平台水环境法(flower pot technique)对大鼠进行连续72h快速动眼相睡眠剥夺,建立睡眠剥夺(sleep deprivation,SD)病理模型.芳香开窍滴鼻剂鼻粘膜给药,观察其对大鼠疲倦程度、学习能力、运动功能的影响.结果:高、中、低剂量组大鼠每日落水次数与模型组比较有显著性差异.高、中剂量组大鼠学习记忆测试及运动功能与模型组比较有显著性差异.结论:芳香开窍滴鼻剂可改善大鼠疲倦程度,提高学习能力,改善运动协调性,具有抗睡眠剥夺的作用.     

水环境站台睡眠剥夺心虚证大鼠模型的再研究

目的:为研究非疾病状态的中医证候模型的特点,对水环境站台睡眠剥夺大鼠模型进行再研究。方法:SD大鼠持续水环境站台剥夺睡眠192 h,参照中国中西医结合学会虚证辨证标准,从心率、呼吸频率、收缩期血压、力竭性游泳时间、心功能、体重和耳温7个方面进行量化观察,并从一般情况进行非量化观察。结果: 模型组心率增加,呼吸频率增加,力竭性游泳时间缩短,心功能增强,体重下降(P<0 .05,P<0. 01);精神萎靡,但抓取反抗凶。结论:水环境站台睡眠剥夺大鼠模型存在心气虚证等多种证的表现,并突出地表现了心主神明功能的紊乱;该模型是对受试动物施加生理性造模因素所致,具有证候表现多样复杂、变化不稳定的特点,不同于心衰心气虚病证结合模型。病与非病模型的本质和证候表现各有特点,用时应各得其所。亟待适合新病、急病、非疾病状态的虚证辨证标准。     

睡眠剥夺的机制及中药对抗的研究述略

睡眠剥夺(sleep deprivation,SD)是指人因环境需要丧失正常所需睡眠量的状态.短时间SD一般不会产生明显的不良影响,而长时间睡眠剥夺(prolonged sleep deprivation,PSD.一般指机体在24h或更长的时间内维持清醒的一种状态)则会产生较大的不良影响.本文将对相关文献作如下综述.     

试用睡眠剥夺方法建立心虚证的动物模型

本文报道了用睡眠剥夺的小站台法,模拟中医理论的"惊"和"劳"等病因,在20只大鼠身上建立心虚证模型的实验。结果表明,它能够使实验动物产生某些心虚证的体征。并可通过控制睡眠剥夺的时间,选择性的造成类似心阴虚、心气虚或气阴两虚偏气虚证的动物模型。     

尿酸盐致大鼠痛风模型的制备

目的 建立用尿酸盐制备痛风模型的方法.方法 用尿酸盐溶液制备急性痛风动物模型,24 h后检测动物一般体征、踝关节及其周围组织的病理学改变及K+浓度,进行模型评价.结果 模型动物出现明显的痛风症状,如踝关节肿胀、行走迟缓、足爪卷曲等;局部解割发现有尿酸盐结晶沉着于踝关节腔内,光镜下可见明显的关节炎病理改变;右踝关节及其周...     

电针百会、三阴交对大鼠睡眠剥夺细胞因子的影响

目的探讨电针对该模型大鼠的细胞因子的影响,并采用酶联免疫吸附检测方法,观察针灸的抗睡眠剥夺作用。方法将30只健康SD大鼠随机分为对照组10只,模型组10只,电针组10只,对照组采用大平台法造模;模型组采用小平台法造模,电针组造模同模型组,给予每日1次的电针治疗。采用酶联免疫吸附法测定大鼠海马白细胞介素-1β（IL-1β）,白细胞介素-2（IL-2）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量改变。结果电针能明显降低睡眠剥夺大鼠海马IL-1β、IL-2及TNF-α含量（P〈0.01）。结论电针能明显改善睡眠剥夺大鼠的细胞免疫功能,细胞因子可能参与了大鼠的睡眠调节。     

胰岛素诱导HepG2细胞胰岛素抵抗模型的建立

目的体外建立胰岛素抵抗Hep G2细胞模型,可用于中药有效成分的胰岛素抵抗活性筛选研究。方法用不同浓度的胰岛素对Hep G2细胞进行诱导后进行不同作用时间的筛选,通过葡萄糖氧化酶法对Hep G2细胞的葡萄糖消耗量及CCK-8法对细胞活性评价,明确最优的Hep G2细胞胰岛素抵抗模型建立的浓度和作用时间。结果用10~(-6) mol/L的胰岛素诱导处理36 h是Hep G2细胞产生胰岛素抵抗的最适条件。结论高胰岛素培养法可以建立Hep G2细胞胰岛素抵抗模型,具有建模周期短、价格低、易于重复、可控性强的优点,可用于抗胰岛素抵抗中药成分的筛选研究。     

抑郁症睡眠障碍模型大鼠甲状腺激素变化及逍遥散干预的研究

目的:观察抑郁症睡眠障碍(SDD)大鼠自主行为及血清TT3(三碘甲状腺原氨酸),TT4(甲状腺素),FT3(游离三碘甲状腺原氨酸),FT4(游离甲状腺素),TSH(促甲状腺素)表达变化,探讨甲状腺激素水平与抑郁症睡眠障碍的关联及逍遥散的干预作用。方法:48只Wistar大鼠进行敞箱行为(OFT)试验,根据得分将大鼠随机分为4组,正常组、模型组、米氮平组、逍遥散组。除正常组外,其余各组共接受21 d不同的应激。造模开始当天应激前1 h模型组、米氮平组、逍遥散组分别给予等容量生理盐水、米氮平、逍遥散水提液。21 d计算行为得分后处死大鼠,取大鼠血清置-20℃冰箱中备测TT3,TT4,FT3,FT4,TSH水平。结果:21 d后模型组自主活动较应激前显著减少(P0.01),与模型组比较,逍遥散组及米氮平组大鼠的自主活动明显增加(P0.01),2组与正常组无差异;各组血清TT3,TT4水平变化无差异;模型组FT3水平下降,FT4水平上升,TSH水平无变化,米氮平组、逍遥散组与模型组比较,无统计学意义。结论:逍遥散具有缓解抑郁症睡眠障碍的效应,但对甲状腺激素水平变化无影响。     

多巴胺、硝酸甘油诱导血管舒缩异常SD大鼠模型的建立

目的:筛选合适的多巴胺(DA)提前给药时间,建立先后应用DA和硝酸甘油(GTN)诱导的血管舒缩异常大鼠模型。方法:大鼠分为5组:正常组、DA组、根据DA不同时间点(10,30,45min)加GTN等3组,通过脉冲多普勒血流计对大鼠颈总动脉血流速度动态检测,评价DA、GTN对血流速度变化率的影响。结果:给药组的DA在注射后的10min内血流速度变化率与正常组同时间点组间比较有差异(P<0.05),但是从11min起与正常组组间比较差异不显著(P>0.05)。10min间隔组血流速度变化率与DA组在45,50,55,60,65,70min等6个时间点比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。45min间隔组颈总动脉血流速度变化率与DA组在80,85,90,95,100min等5个时间点比较差异有统计学意义(P<0.05)。30min间隔组颈总动脉血流速度变化率在各个时间点与DA组比较差异没有统计学意义(P>0.05)。结论:皮下注射DA、间隔45min再注射GTN可建立具有时相性特点的血管舒缩异常大鼠模型。该模型有可能用于防治偏头痛药物的血管活性筛选。     

乙醇诱导人胃上皮细胞株凋亡的研究

目的 探讨建立乙醇诱导人胃上皮细胞株(GES-1)凋亡模型的方法和可行性。方法 采用罗氏细胞实时动态分析仪、MTT比色法、Hoechst染色法、Annexin V-FITC/PI凋亡流式检测研究不同浓度的乙醇对人胃上皮细胞株(GES-1)凋亡作用。结果 (1)当乙醇浓度大于0.5 mol·L-1时,对GES-1细胞株有明显的诱导凋亡作用,而考察的TNF-α(100,50 ng·mL-1)则没有明显的细胞凋亡诱导作用;(2)通过形态学观察,发现乙醇模型组GES-1细胞株出现明显的凋亡细胞形态学改变;(3)Annexin V-FITC/PI凋亡流式分析结果发现乙醇浓度大于0.2 mol·L-1对细胞具有明显的诱导凋亡作用,乙醇主要诱导GES-1细胞株进入早期凋亡,且具有浓度依赖性,但该诱导作用具有时效性,在作用持续60 min后,其诱导作用会逐渐减弱。结论 乙醇对GES-1细胞株具有明显的诱导细胞凋亡作用,且具有浓度依赖性及时效性;本凋亡模型具有较好的重现性。     

电针百会、足三里穴对睡眠剥夺大鼠学习记忆的影响

目的观察电针百会、足三里穴对睡眠剥夺(SD)后大鼠学习记忆能力的影响以及脑干中多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)含量的变化。方法将32只雄性SD大鼠随机分为正常组、睡眠剥夺组、假针组和电针组。采用Morris水迷宫实验和避暗实验分别在连续5 d的睡眠剥夺前后测试大鼠的学习记忆能力,并应用高效液相色谱(HPLC)和电化学检测器检测大鼠脑干中DA和5-HT含量。结果在Morris水迷宫实验中,睡眠剥夺组和假针组的潜伏期均高于正常组和电针组(P0.05);睡眠剥夺组和假针组的平台象限滞留时间均低于正常组和电针组(P0.05),电针组低于正常组(P0.05)。在避暗实验中,连续5 d的睡眠剥夺后睡眠剥夺组、假针组和电针组的步入潜伏期均低于正常组(P0.05),而电针组高于睡眠剥夺组和假针组(P0.05)。连续5 d的睡眠剥夺后,睡眠剥夺组和假针组大鼠脑干DA含量均低于正常组和电针组(P0.05),电针组低于正常组(P0.05);睡眠剥夺组和假针组大鼠脑干5-HT含量均高于正常组和电针组(P0.05),电针组高于正常组(P0.05)。结论电针可明显改善睡眠剥夺后大鼠的学习记忆能力,其机制可能与脑干中DA和5-HT含量的变化有关。     

刀豆蛋白A诱导小鼠实验性肝肾共损伤模型的建立

目的:筛选并初步建立能够诱导小鼠肝肾同时损伤的实验动物模型,为评价肝肾损伤治疗药物提供实验动物模型。方法:考察尾静脉注射刀豆蛋白A(Con A)10,15,20,40 mg·kg-1,造模时间12 h;ig给药D-半乳糖胺(D-Gal)1 g·kg-1及腹腔注射0.3%四氯化碳(CCl4,20 mL·kg-1)60 mg·kg-1,造模时间24 h;药物对模型小鼠肝脏、肾脏的损伤作用,通过检测肝肾功能相关的生化指标,肝脏及肾脏病理组织学改变,确定有效的造模方案。为进一步确定该模型是否能有效评价治疗肝肾损伤药物的药效,考察了大黄甘草汤对小鼠肝肾损伤模型的保护作用。结果:给予小鼠1 g·kg-1D-Gal,CCl460 mL·kg-1造模后,其血清直接胆红素(DBIL)、总胆红素(TBIL)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)活性与对照组比较均显著升高(P<0.05或P<0.01),而尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)、总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG),血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)含量无明显变化,组织病理变化与血清生化指标结果相同,说明上述两种药物可诱发小鼠肝损伤模型,但未检测到肾损伤相关生化指标及病理变化;给予小鼠Con A 20 mg·kg-1造模后,小鼠血清DBIL,TBIL,ALT,AST,BUN,TC,TG,CRE,TP,ALB值与对照组相比较差异显著(P<0.01,P<0.05),说明Con A 20 mg·kg-1可诱发小鼠肝肾同时损伤,进一步优化模型,确定15 mg·kg-1Con A为诱发小鼠肝肾损伤的最佳剂量;给予模型验证方药大黄甘草汤干预后,肝肾损伤小鼠的生化和组织学检查均有显著改善。结论:初步建立尾静脉注射Con A 15 mg·kg-1诱导小鼠实验性肝肾同时损伤模型,用大黄甘草汤验证说明模型建立成功。