HPLC法同时测定17种石杉亚科植物石杉碱甲、乙

目的建立HPLC法同时测定17种(含2待发表新种)石杉亚科植物中石杉碱甲(huperzine A)和石杉碱乙(huperzine B)的含有量。方法石杉碱甲、乙酒石酸提取液的分析采用Wondasil C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以甲醇-醋酸铵溶液为流动相,等度洗脱;体积流量1.0 mL/min;检测波长310 nm;柱温室温。外标法定量。结果石杉碱甲、乙分别在0.002 0~0.30μg、0.001 8~0.27μg范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均加样回收率、RSD分别为103.86%(1.85%)、101.3%(1.30%)。17种石杉亚科植物中都含有石杉碱甲、乙,各物种之间含有量有显著性差异;喜马拉雅马尾杉中石杉碱甲含有量最高,达0.22%,柳杉叶马尾杉、有柄马尾杉和马尾杉含量也较高;马尾杉中石杉碱乙含有量最高。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于石杉亚科植物中石杉碱甲和石杉碱乙的质量控制。     

湖南省石杉属植物中石杉碱甲含量的研究

 目的测定湖南产6种(含一新种)石杉属植物中石杉碱甲含量,为科学利用该植物提供可靠依据。方法于该省野外实地采集石杉属植物,以2%酒石酸溶液提取总碱,用改进的高效液相色谱法测定石杉碱甲的含量(外标法)。结果所采集6种石杉属植物中,石杉碱甲在蛇足石杉、狭叶石杉、长柄石杉、四川石杉、湖南石杉(拟新种)中均有分布,长柄石杉中含量最高,达0.0789%;本实验证明皱边石杉中不含石杉碱甲,先前两篇高含量报道应为鉴定之误。结论本测定方法简便、准确;在该属中4种形态极难区分的种之间,石杉碱甲含量具有分类学意义。     

石杉碱甲对脑卒中后认知功能障碍疗效的观察

目的：研究石杉碱甲治疗血管性痴呆的临床疗效和安全性。方法：80例血管性痴呆患者随机分为治疗组40例,石杉碱甲0．1mg,2次／d;对照组40例,尼莫地平片30rag,3／d。两组均连续治疗12周,并同时给予相同的基础药物治疗。治疗前后由专人进行简易精神状态量表（MMsE）及日常生活活动能力量表（ADL）的评定。结果：12周后两组患者MMSE、ADL评分与治疗前比较差异均有统计学意义,组间比较,治疗组疗效明显优于对照组,无明显不良反应。结论：石杉碱甲治疗血管性痴呆安全有效,疗效显著。     

石杉碱甲改善老年痴呆症的药效学研究

老年期痴呆的药物治疗亦日益受到国内外医学界的重视,目前治疗的药物甚多,然而疗效欠佳,石杉碱甲为胆碱酯酶抑制剂,对真性胆碱酯酶具有选择性抑制作用,易通过血脑屏障,能显著地改善患者的认知功能、行为和日常生活能力,本文评价石杉碱甲治疗老年血管性痴呆的疗效.认知石杉碱甲是一种安全有效的治疗药物.     

石杉碱甲的研究进展

石杉碱甲(huperzine A,HupA)是来源于蕨类植物蛇足石杉的一种倍半萜生物碱,为高效、高选择性、可逆性的乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制剂。HupA在治疗阿尔茨海默病(Alzheimersdisease,AD)方面的显著疗效,近年研究还证明HupA有神经保护和预防化学武器的潜力,引起世界各国药学工作者广泛关注和研究。现系统的综述石杉碱甲在药学研究各领域中的研究进展。     

石杉碱甲-亚油酸酯的合成及其性质的初步研究

目的 合成石杉碱甲(huperzine A，HUP)-亚油酸(1inoleic acid，LA)酯(HUP—LA)，并对其性质进行初步探讨。方法 利用二环己基碳酰二亚胺(DCC)法制备HUP—LA；考察了其在不同pH值、不同温度的缓冲液及小鼠血浆和不同脏器组织匀浆中的降解情况。结果 HUP—LA经^1H—NMR，^13C—NMR，IR，MS，UV证实为目标化合物。目标化合物在不同的体外环境中稳定性差异大。结论 该研究对于石杉碱甲的结构改造有参考意义。     

加兰他敏和石杉碱甲生物合成的研究进展

植物来源的加兰他敏、石杉碱甲等乙酰胆碱酯酶抑制剂(AChEIs)以其高效低毒的优势成为当前临床治疗阿尔茨海默病的主流药物。由于目前加兰他敏、石杉碱甲等AChEIs尚未实现工业规模化合成,故仍主要依赖植物提取。然而,药源植物培育周期长、难度大,药效物质含量低,随着社会需求的急剧攀升,供求矛盾日益突出。开发新替代资源以及利用现代基因工程技术合成加兰他敏、石杉碱甲等AChEIs是缓解当前矛盾的有效途径。对近年来加兰他敏和石杉碱甲生物合成的相关研究进展进行综述,总结了替代资源的开发研究现状,以期为挖掘加兰他敏、石杉碱甲等AChEIs优势新资源及利用代谢工程合成药效物质研究提供参考。     

HPLC法测定不同季节千层塔中石杉碱甲和石杉碱乙含量

目的:考察不同季节千层塔药材中石杉碱甲、乙的含量,为确定千层塔的最佳采收期提供依据。方法:采用超声提取方法进行样品的制备;用HPLC方法测定千层塔中石衫碱甲、石衫碱乙的含量。结果:石杉碱甲、乙线性范围分别为0.050μg-1.000μg、0.031μg-0.620μg,回收率分别为100.1%(RSD:0.72%,n=6)、99.5%(RSD:1.1%,n=6)。不同采收期千层塔中的石衫碱甲、石衫碱乙的含量差异较大,其中8月份的含量最高,为0.0236%、0.0124%。结论:该研究可为千层塔最佳采收期的确定提供参考,以8月份为千层塔药材的最佳采收时期。     

石杉碱甲胃膨胀片体外释放机制的初步研究

目的:探讨石杉碱甲胃膨胀片的释药机制及影响因素.方法:以PEO为骨架材料,PVA为助膨剂,MCC为填充剂,运用Ritger-Peppas方程释放指数n值,评价PEO,PVA,MCC等对释药速率的影响.结果:胃膨胀片的释药速率随PEO,PVA含量增高而变快,而MCC对释药速率没有明显影响.经处方筛选优化后制备的膨胀片,药物释放曲线符合Higuechi方程,释药机制是扩散和凝胶骨架溶蚀2种机制的协同作用结果的非Fick扩散.结论:PEO,PVA均可影响法石杉碱甲胃膨胀片中主药的释放,而MCC影响不明显.药物释药机制用Ritger-Peppas方程进行描述后,结论是释药机制符合非Fick扩散.     

尼莫同联合石杉碱甲治疗血管性痴呆的疗效观察

目的研究尼莫同联合石杉碱甲治疗血管性痴呆的临床疗效和安全性。方法76例血管性痴呆患者随机分为治疗组40例:尼莫同30 mg 3次/d,石杉碱甲0.1 mg 2次/d;对照组36例:脑复康0.8 g 3次/d。2组均连续治疗12周,并同时给予相同的基础药物治疗。治疗前后由专人进行简易精神状态量表(MMSE)及日常生活活动能力量表(ADL)的评定。结果12周后2组患者MMSE、ADL评分与治疗前比较均有显著性差异(P均<0.01);2组间比较,治疗组疗效明显优于对照组,无明显不良反应(P<0.05或0.01)。结论尼莫同联合石杉碱甲治疗血管性痴呆安全有效,疗效显著。     

葛根素抗糖尿病大鼠心肌线粒体氧化应激损伤作用研究

目的：研究葛根素对链脲佐菌素诱导的I型糖尿病大鼠心功能及心肌线粒体氧化应激的影响。方法：雄性Sprague-Daw ley大鼠,随机分成正常对照组,葛根素对照组,糖尿病模型组,低剂量葛根素治疗组,高剂量葛根素治疗组。各组大鼠饲养8周后,测体重、血糖、心功能、左心室重量、心肌胶原含量,分离心肌线粒体检测活性氧自由基（ROS）水平、丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果：葛根素治疗组抑制糖尿病大鼠血糖的进一步升高,减少糖尿病引起的体重下降,并且显著减少糖尿病大鼠心室与体重比值,提高左室发展压左心室内压最大上升和下降速率,降低左室舒张末压。葛根素明显减少糖尿病大鼠心肌胶原含量及心肌线粒体ROS水平;高剂量葛根素明显抑制心肌线粒体MDA含量,增加心肌线粒体SOD活性。结论：葛根素治疗糖尿病大鼠8周后,能显著改善糖尿病大鼠心功能,其机制可能与抑制血糖升高,减轻心肌线粒体氧化应激损伤有关。     

N-乙酰半胱氨酸对顺铂诱导急性肾损伤后肾脏组织氧化应激水平的影响

目的:研究顺铂(cisplatin,CDDP)诱导大鼠急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)后肾脏组织氧化应激水平及N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)的干预作用.方法:静脉注射CDDP制备大鼠AKI模型.大鼠随机分为空白对照组、AKI模型对照组、NAC低、中、高剂量组(50,100,200 mg· kg-1)、维生素C(Vit C)对照组(100 mg· kg-1).大鼠预先连续给药3d后,给予CDDP,再继续给药5d.测定大鼠体质量、肾质量、肾脏指数、尿蛋白排泄率.试剂盒测定肾脏组织乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、15-F2t-异前列烷(15-F2t-Isop)水平.免疫组化法观察8-OHdG阳性细胞.Western blot测定Cu-Zn-SOD蛋白表达.结果:与空白对照组相比,CDDP诱导AKI模型组体质量、肾质量、肾脏指数下降,尿蛋白排泄率由(0.43±0.09)g显著增加为(2.24±0.41)g,LDH,MDA,15-F2t-Isop,8-OHdG阳性细胞显著增加,CAT,SOD,GSH,GSH-Px和Cu-Zn-SOD表达显著下降(P＜0.01).与AKI模型组相比,NAC组尿蛋白排泄率降低为(0.56±0.19)g,具有显著差异.同时,AKI模型组肾脏指数,LDH,MDA,SOD,CAT,15-F2t-Isop,GSH,GSH-Px水平和8-OHdG阳性细胞数分别为(2.71±0.55) ×10-2,(6.92±0.51)KU·mg-1,(68.6±9.2) nmol·mg-1,(61±15) U·mg-1,(5.12±1.04) U·mg-1,(63.2±9.62) ng·mg-1,(159±18) nmol·mg-1,(72±15) U·mg-1,(12.25±2.23)个,NAC组200 mg·kg-1组分别为(2.96±0.32) ×10-2,(4.62±0.26) KU·mg-1,(39.5±7.9) nmol·mg-1,(109±20) U·mg-1,(9.85±1.21) U·mg-1,(41.8±4.65)ng· mg-1,(225±16) nmol· mg-1,(128±22) U·mg-1,(3.26±0.96)个,两组相比较,具有非常显著差异(P＜0.01),Cu-Zn-SOD表达显著增加(P＜0.01).结论:NAC有效拮抗CDDP的肾损伤作用,可能与其增强肾脏组织抗氧化活性、降低CDDP诱导AKI时肾脏组织氧化应激水平有关.     

脑缺血氧化应激损伤及中药拮抗作用研究进展

氧化应激(oxidative stress,OS)是缺血性脑血管疾病重要病理反应过程。缺血性脑损伤后,活性氧自由基(oxygen free radical,OFR)增加,通过坏死或凋亡的方式引起细胞死亡,还介导线粒体途径、核转录因子信号转导间接导致细胞凋亡。近年来中药抗氧化应激的作用日益受到重视,有关这方面的研究也日益深入。     

脑缺血氧化应激损伤及中药拮抗作用研究进展

氧化应激（oxidative stress，OS）是缺血性脑血管疾病重要病理反应过程。缺血性脑损伤后，活性氧自由基（oxygen free radical，OFR）增加，通过坏死或凋亡的方式引起细胞死亡，还介导线粒体途径、核转录因子信号转导间接导致细胞凋亡。近年来中药抗氧化应激的作用日益受到重视，有关这方面的研究也日益深入。     

葛根素对大鼠体外循环后心肌缺血再灌注损伤的保护作用及抗氧化应激机制的探讨

目的:探讨葛根素对大鼠体外循环后心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MIRI)的保护作用及抗氧化应激机制.方法:取健康雄性SD大鼠75只,随机分为5组:即假手术组(给予等体积的生理盐水)、MIRI模型组(给予等体积的生理盐水)、葛根素低、中、高剂量组(2,5,10 mg·kg-13个剂量).于再灌注开始时在储血槽内加入稀释葛根素10mL.在全麻手术下制造大鼠体外循环模型后,随即阻断大鼠升主动脉造成心肌缺血30 min然后开放升主动脉后再灌注180 min造成大鼠心肌缺血再灌注损伤模型(灌注24 h,用于测定心肌梗死面积).实验组和对照组分别给予葛根素和生理盐水.实验完成后留取大鼠心脏标本,观察大鼠心肌缺血区的心肌细胞凋亡情况;收集血清测定其抗氧化应激的指标:超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),谷胱甘肽(GSH),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px).结果:与模型组相比,葛根素的应用减少了MIRI大鼠的心肌细胞凋亡、心梗面积和血清中丙二醛的含量,增加了血清中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活性和谷胱甘肽的含量,并且随着剂量的增加保护效果尤为明显.结论:葛根素对MIRI大鼠具有抗氧化应激的作用,它能够剂量依赖性的减少心肌细胞凋亡,最终减少心肌梗死面积.     

PERK Signaling of Unfolded Protein Response Activated in Acute Hypobaric Hypoxia and Effect of Ginsenoside Rb1

Objective To observe pancreatic ER kinase (PERK) signaling of unfolded protein response (UPR). Methods The rats were divided into control, model, and ginsenoside Rb1 (Rb1) groups, and put into hypoxia chamber to establish the acute plateau stress model. The water solutions of Rb1 were given to rats in Rb1 group for 7 d. After that, The behavior of rats was observed by Y-maze and passive avoidance test and the rats were sacrificed in a batch for detection by Western blotting. Results Hypobaric hypoxia mediated UPR pathway accompanied the activation of protective pathways such as PERK-eIF2a-ATF4 and Grp78/Bip pathways. On the other hand, Rb1, the extract from herbal medicine ginseng, increased on the expression of PERK, eIF2a, ATF4, and Grp78/Bip in rats. Conclusion The results indicate that PERK-eIF2a-ATF4-GRP78 pathway is a potential target for therapeutic applications in high altitude diseases and Rb1 can attenuate the injury to memory function caused by hypobaric hypoxia neurotoxicity.     

番茄叶水提物对急性炎症氧化应激的拮抗作用

目的:探讨番茄叶水提物对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性炎症所致氧化应激的拮抗作用。方法:50只SD大鼠随机分为正常组、模型组与番茄叶水提物3.19,1.59,0.80g·kg-1·d-1组,连续灌胃给药10d,每天1次。末次给药后以腹腔注射LPS(4mg·kg-1)建立急性炎症模型。酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD),谷胱甘肽过氧化物酶1(GSH-Px-1)和肿瘤坏死因子α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),以逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测外周血白细胞CuZn-SOD,GSH-Px-1基因表达水平。结果:3.19,1.59g·kg-1·d-1番茄叶水提物可明显提高急性炎症大鼠外周血白细胞CuZn-SOD,GSH-Px-1基因表达以及血清CuZn-SOD,GSH-Px-1水平,显著降低血清TNF-α,IL-6水平。结论:番茄叶水提物可显著抑制LPS诱导的大鼠急性炎症及其所致氧化应激。     

天荔汤对糖尿病大鼠肾脏氧化应激的影响

目的研究糖尿病大鼠肾脏氧化应激反应,观察天荔汤对氧化应激的影响。方法将大鼠随机分为5组,即天荔汤高、低剂量组,西药对照组(Capotril HB419),病理组和正常对照组。用四氧嘧啶(Alloxan)诱导糖尿病大鼠模型,8周后检测大鼠血糖、肾脏肥大、肾组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)的活性。结果与正常组相比,病理组血糖、血脂、尿蛋白、肾重、体重等指标明显增高,肾匀浆MDA含量亦增加,而肾脏抗氧化酶的活性则降低,天荔汤显著降低肾组织匀浆SOD、MDA含量。结论糖尿病大鼠肾脏存在氧化应激反应,肾组织抗氧化酶缺乏。经天荔汤治疗后上述变化明显被逆转。     

中枢氧化应激对心绞痛模型大鼠心功能的影响

目的观察心绞痛大鼠中枢氧化应激水平的变化,并运用NADPH氧化酶抑制剂APO减少超氧化物的生成进而降低中枢氧化应激水平以改善心绞痛时心功能。方法采用冠脉结扎术制作心绞痛动物模型,假手术组仅进行手术而不造成缺血状态,干预组通过侧脑室插管给予APO（60pg／3min）,对照组给予人工脑脊液。雄性Sprage—Dawley大鼠随机分为心绞痛干预组（Angina＋APO）、心绞痛对照组（Angina＋VEH）、假手术干预组（SHAM＋APO）和假手术对照组（SHAM＋VEH）。2h后各组大鼠分别进行血流动力学、右心室／体重比值、肺／体重比值的测量。免疫组化方法检测下丘脑室旁核NADPH亚基gp91phox的表达。结果心绞痛对照组与假手术对照组相比,下丘脑室旁核NADPH亚基gp91phox表达增加,左心室舒张末压明显升高,左心室内压最大上升速率和最大下降速率明显降低（P〈0．05）,右心室／体重比值、肺／体重比值均增加（P〈0．05）。心绞痛干预组与心绞痛对照组相比,中枢NADPH亚基gp91phox表达减少,右心室／体重比值、肺／体重比值均减小。结论心绞痛大鼠中枢氧化应激水平升高,降低中枢氧化应激可在一定程度上改善心绞痛大鼠心功能。     

LC-MS/MS测定人血浆中石杉碱甲的浓度及相对生物利用度

 目的建立人血浆中石杉碱甲浓度的LC-MS/MS测定方法,研究石杉碱甲在健康人体内的药动学行为,评价两种制剂的生物等效性。方法血浆样品经碱化后,乙酸乙酯提取,LC-MS/MS内标法分析。检测对象为石杉碱甲,m/z243/210,内标(磷酸可待因),m/z300/199。24名健康受试者交叉口服供试片和参比片,剂量均为0.4mg。结果石杉碱甲测定的线性范围为0.252～25.2μg·L^-1;口服供试制剂和参比制剂后石杉碱甲的AUC_0→t分别为:(1384.079±325.094),(1479.165±288.738)μg·h·L^-1;ρ_max分别为:(3.062±0.821),(3.558±0.973)μg·L^-1;t_max分别为:(47.92±12.85),(44.17±20.62)min。结论本法灵敏、准确、简便。供试品的相对生物利用度为:以AUC_0→t计算为(94.4±18.7)%;以ρ_max计算为(86.3±15.4)%。统计学结果表明,两种制剂生物等效。