补肾生髓方对D-半乳糖衰老模型大鼠学习记忆能力及衰老相关蛋白P16、P21的影响

目的:探讨补肾生髓方对衰老大鼠学习记忆能力及衰老相关蛋白P16、P21的影响。方法:将50只实验大鼠随机分成D-半乳糖衰老模型组、正常组、补肾生髓方组、六味地黄丸组、维生素E组共5个组。采用颈背部皮下注射D-半乳糖400mg/kg,连续4个月,制备衰老模型,同时给予相应药物灌胃,正常组给予等剂量0.9%氯化钠注射液。采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,Western blot检测大鼠海马中P16、P21蛋白的表达。结果:补肾生髓方能够缩短D-半乳糖衰老大鼠到达平台的时间,降低衰老模型大鼠海马中P16、P21的含量。结论:补肾生髓方能够提高衰老大鼠的学习记忆能力,通过降低大鼠体内P16、P21的含量从而达到延缓衰老的目的。     

哈蟆油对D-半乳糖致衰老模型雌性大鼠的实验研究

目的 观察哈蟆油(OR)对D-半乳糖所致雌性衰老模型大鼠血清和肝组织超氧化物歧化酶(SOD)及其分型铜锌-SOD(CuZn-SOD)、过氧化物酶(POD)、总抗氧化能力(T-AOC)等活性的影响.方法 采用SPF级雌性SD大鼠40只,随机分为OR高、中、低剂量组和模型组,每组8只,D-半乳糖颈背部皮下注射6周.另设一组8只,同样部位每日注射生理盐水,作为正常对照组.第3周开始灌胃给药,模型对照组和正常对照组灌胃植物油.给药结束后收集标本,采用紫外分光光度法测定血清和肝组织总SOD,CuZn-SOD,POD,T-AOC的水平.结果 模型组大鼠血清和肝组织总SOD、CuZn-SOD、POD和T-AOC活性明显降低,与其他各组比较有显著性差异(P＜0.01).OR高剂量组比中、低剂量组能显著提高血清中上述指标数值(P＜0.05,P＜0.01);OR中剂量比低剂量组能显著提高血清SOD,CuZn-SOD活性(P＜0.05).OR高剂量组比低剂量组能显著提高肝组织中上述指标(P＜0.01).结论 OR明显提高老年雌性大鼠血清和肝组织SOD、CuZn-SOD,POD和T-AOC活性.OR能够增强衰老雌性大鼠抗氧化应激水平,从而改善其衰老程度.     

补肾化瘀生新法协同静脉注射骨髓间充质干细胞对延缓大鼠衰老作用

目的:观察补肾化瘀生新法协同静脉注射骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)延缓大鼠衰老的有效性,明确中医药协同静脉注射BMSCs治疗延缓机体衰老的可行性。方法:75只SD大鼠随机分为补肾化瘀生新方高、中、低剂量组、模型组和正常组。每组12只,按照125 mg·kg~(-1)·d~(-1)的剂量颈背部皮下每日1次注射D-半乳糖溶液,连续45 d,建立大鼠衰老模型。补肾化瘀生新方高、中、低剂量组(27.28,13.64,6.82 g·kg~(-1))灌胃给药,模型组生理盐水灌胃,正常组不给药,早晚各1次,连续45 d。同时尾静脉注射BMSCs注射3.0×10~6个/m L的BMSCs,每周1次,连续4次。免疫荧光法测定脑、肝、肺、心中CD105,p53,p21,p16~(INK4a)阳性细胞数,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠的脑、肝、肺、心中p16~(INK4a),p53,p21 mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠脑、心脏、肺脏、肝脏中CD105阳性细胞数明显降低,p16~(INK4a),p21,p53阳性细胞数明显升高(P0.05),大鼠的脑、心脏、肺脏、肝脏中p16~(INK4a),p53,p21 mRNA表达明显上调(P0.05);与模型组比较,补肾化瘀生新各剂量组大鼠脑、心脏、肺脏、肝脏中CD105阳性细胞数明显升高,p16~(INK4a),p53,p21阳性细胞数明显降低(P0.05),补肾化瘀生新各剂量组均能明显降低脑、肝、肺、心组织中p16~(INK4a),p53,p21阳性细胞数mRNA表达明显下降(P0.05)。结论:补肾化瘀生新法协同静脉注射BMSCs可能影响p16~(INK4a)/Rb和p53/p21途径上的关键基因p16~(INK4a),p53,p21的表达而延缓BMSCs衰老,显示了中医药协同静脉注射BMSCs抗衰防衰的可行性。     

归芪多糖对衰老细胞周期及p53、p16蛋白的影响

目的:研究归芪多糖对衰老的WI-38细胞的细胞周期及p53、p16蛋白表达的影响。方法:采用MTT法,研究不同浓度归芪多糖对WI-38细胞活力的影响,筛选出归芪多糖最佳作用浓度;采用流式细胞术分析细胞周期;Western blot法分析归芪多糖对p53、p16蛋白表达的影响。结果:0.016/mg·m L归芪多糖可明显促进细胞增殖;与衰老组细胞相比,归芪多糖可明显促进衰老细胞进入分裂期(P0.01),并可显著降低衰老模型组细胞p53和p16蛋白的表达。结论:归芪多糖可延缓WI-38细胞的衰老,其作用机制与调控细胞周期,抑制p53-p21和p16-pRb信号通路有关。     

当归多糖对衰老模型小鼠抗氧化作用及p16蛋白表达水平的影响

目的:观察当归多糖对衰老模型小鼠脑组织p16蛋白表达及不同组织中单胺氧化酶(MAO)、过氧化氢酶(CAT)活性的影响,探讨当归多糖治疗衰老的作用机制.方法:将昆明种小鼠60只随机分为空白对照组、模型对照组、脑复康组和当归多糖高、中、低剂量组,每组10只;腹腔联合注射D-半乳糖和亚硝酸钠(NaNO2)建立衰老小鼠模型;脑复康组灌胃脑复康(200 μg/g),当归多耱低、中、高剂量组灌胃当归多糖(依次为100,200,400 μg/g),空白对照组和模型对照组灌胃等体积的生理盐水,连续8周;眼球采血处死小鼠,采用ELISA法检测脑组织p16蛋白的含量,比色分析法测定脑、肝、肾组织MAO活性及肝、肾组织CAT活性.结果:与空白对照组对比,模型对照组小鼠p16蛋白的表达升高,MAO活性升高,CAT活性降低,差别有统计学意义(P＜0.01);当归多糖各剂量组小鼠脑组织p16蛋白表达减少、MAO活性降低,肝组织CAT活性升高,肾组织MAO活性降低、CAT活性升高,与模型对照组对比,差别有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05);而与脑复康组对比,当归多糖各剂量组的上述指标均无统计学意义(P＞0.05).结论:当归多糖可以降低衰老小鼠脑组织p16蛋白的表达,降低脑及肾组织MAO的活性,增强肝组织和肾组织CAT的活性,其机制可能是通过抑制衰老细胞的增殖而起到延缓衰老的作用.     

楮实子油对亚急性衰老模型小鼠脑组织抗氧化作用的实验研究

目的:观察楮实子油对D-半乳糖衰老模型小鼠脑组织的影响.方法:采用D-半乳糖颈背部皮下注射复制小鼠亚急性衰老模型,给药组给予不同的剂量,实验结束检测相关指标.结果:楮实子油能明显提高衰老模型小鼠的SOD、GSH-Px活性(P＜0.01);降低衰老模型小鼠NO、MDA值(P＜0.01).结论:楮实子油有抗氧化、延缓衰老的作用.     

黄芩素延缓大鼠心肌衰老的作用及机制

目的:研究黄芩素是否具有延缓大鼠心肌衰老的作用及机制。方法:将75只成年SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和黄芩素高中低剂量组(200、100、50 mg/kg),正常对照组每日皮下注射生理盐水(10 mL/kg),其余4组均每日皮下注射D-半乳糖生理盐水溶液(150 mg/kg)连续30天,建立衰老模型,同时黄芩素各剂量组大鼠灌胃相应药物,正常对照组与模型组灌胃等体积生理盐水。给药30天后,采用超声心动仪对动物心脏功能进行评价,检测各组大鼠心肌组织中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)含量。SA-β-gal活性检测试剂盒检测心肌组织β-半乳糖苷酶活性。Western blot衰老相关蛋白p21~(Cip1/Waf1)及p53表达。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠心脏功能下降,左室射血分数、短轴缩短率降低(P0.01);心肌组织β-半乳糖苷酶活性明显增加(P0.01);血清与心肌中的SOD和GSH-Px下降,MDA含量增加(P0.01),衰老相关蛋白p21~(Cip1/Waf1)及p53表达增加。与模型组比较,黄芩素组大鼠心脏功能增加,MDA含量下降,SOD和GSHPx水平升高,衰老相关蛋白p21~(Cip1/Waf1)及p53表达降低,且呈剂量相关性,高剂量组改善更明显。结论:黄芩素对大鼠心肌衰老有一定的延缓作用,其机制可能与提高衰老心肌抗氧化能力,抑制其下游p53/p21~(Cip1/Waf1)信号通路有关。     

补肾活血方对老年大鼠心脏自由基代谢及p16蛋白表达的影响

目的观察补肾活血方对老年大鼠心脏自由基代谢和p16蛋白表达的影响,探讨其对衰老大鼠心脏的保护作用机制。方法 100只大鼠随机分为青年对照组、老年对照组和补肾活血方高、中、低剂量组,每组20只。各给药组给予相应药物灌胃,每日1次,连续16周。末次给药后1 h,将大鼠麻醉后取血清和心脏。测定血清和心肌组织一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量和过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性;免疫组化检测心肌组织β-半乳糖苷酶和p16蛋白表达。结果与老年对照组比较,补肾活血方高剂量组大鼠血清NO含量和CAT、SOD活性显著升高(P0.05),补肾活血方各剂量组MDA含量显著降低(P0.01);补肾活血方高剂量组大鼠心肌组织NO含量和SOD活性显著升高,MDA含量显著降低(P0.05),补肾活血方各剂量组CAT活性显著升高(P0.05,P0.01);补肾活血方各剂量组心肌组织β-半乳糖苷酶和p16蛋白表达降低。结论补肾活血方通过抗氧化损伤和抑制抑癌基因p16表达,发挥抑制老年大鼠心肌老化的作用。     

哈蟆油对小鼠体内雌二醇含量及血常规影响的研究

目的:研究哈蟆油对正常小鼠和模型小鼠体内雌二醇(E2)含量及血常规各项指标的影响。方法:环磷酰胺致免疫力低下模型小鼠、皮下注射D-半乳糖致衰老模型小鼠,以及正常小鼠,均给予哈蟆油混悬液,以小鼠血液中E2含量以及血常规各项目指标为考察指标,考察哈蟆油对小鼠E2含量及血常规中各检查项目的影响作用。结果:哈蟆油对正常小鼠和D-半乳糖致衰老模型小鼠体内E2含量无显著影响。哈蟆油可显著增加环磷酰胺致免疫力低下模型小鼠体内白细胞、红细胞计数(P0.05),可显著提高血红蛋白含量和血细胞比容(P0.05);可显著增加D-半乳糖致衰老模型小鼠体内红细胞计数(P0.05),显著提高血红蛋白含量(P0.05);对正常小鼠血常规各项指标无显著影响。结论:服用哈蟆油的同时,并不会引起机体的E2含量变化,从而不会引起相应的疾病;可显著增加免疫低下、衰老机体内白细胞和红细胞计数,表明哈蟆油对机体免疫低下和衰老有一定作用。     

哈蟆油蛋白对去势大鼠骨组织形态保护的实验研究

目的观察大鼠骨密度(BMD)、生物载荷量及股骨组织切片形态学变化,评价哈蟆油蛋白对去势大鼠骨形态的保护作用。方法利用动物骨密度仪和小动物骨骼强度测定仪测量大鼠BMD和生物载荷量;采用HE染色法观察大鼠股骨骨小梁数量变化,应用免疫组化技术观察哈蟆油蛋白对ALP和BMP2表达的调节作用。结果与模型组比较,哈蟆油蛋白明显提高了大鼠的BMD(P0.05),显著改善了股骨的最大载荷量(P0.01);150mg·kg~(-1)哈蟆油给药组的骨小梁的排列更加有序,结构更加完整;同时低剂量和高剂量组的ALP和BMP2呈现阳性表达。结论哈蟆油蛋白能增强骨强度、降低骨脆性骨折风险,同时能保护骨小梁结构,促进ALP和BMP2的阳性表达,故哈蟆油蛋白对骨组织形态发挥一定的保护作用,可能参与骨代谢平衡,发挥防治绝经后骨质疏松的作用。     

癌痛消胶囊调节小鼠荷H22移植性肝癌细胞VEGF,p53和p21ras表达的实验研究

目的:通过观察癌痛消胶囊调节小鼠荷H22 移植性肝癌细胞中血管内皮生长因子(Vascularen dothelialgrowthfactor,VEGF)、p53和p21ras的表达作用,以探讨该药抑制肿瘤的作用机理。方法:昆明种雄性小白鼠60只,按随机区组分为6组(A -F组) ;A -E组每鼠均于前肢右腋皮下接种0 2mlH22 肿瘤细胞悬液(浓度为1×107/ml) ,接种24h后按体重给药。A组、B组、C组分别给予大、中、小剂量的癌痛消胶囊,D组予康赛迪胶囊,E组予生理盐水,均灌胃给药,每日1次。连续用药10天,停药24h ,称重并处死动物,剥取瘤块称重,计算出肿瘤生长抑制率,用免疫组化法检测癌细胞中VEGF ,p53 ,p21ras ,VHL的表达程度。F组予饲料及水分正常饲养。结果:A ,B ,C ,D组均有明显的抑瘤作用,其中以A组的抑瘤作用最明显(P<0 05或P<0 01)。造模各组动物的肝癌细胞中均见VEGF ,p53和p21ras的阳性染色,但阳性表达程度不同,与B ,C ,E组比较,癌痛消胶囊大剂量组和康赛迪胶囊组均可明显降低肝癌细胞中VEGF ,p53和p21ras的阳性表达(P<0 05或P<0 01)。结论:癌痛消胶囊对小鼠H22 移植性肝癌有抑瘤作用,抑制肿瘤生长的机理可能与下调VEGF ,p53和p21ras的水平有关。     

淫羊藿苷对D-半乳糖诱导的脑衰老模型小鼠p53/p21信号通路的影响

目的:观察淫羊藿苷对脑衰老模型小鼠p53/p21信号通路的影响,并探讨淫羊藿苷抗衰老的可能机制。方法:将实验小鼠随机分为空白组、模型组、淫羊藿苷低剂量组和淫羊藿苷高剂量组,除空白组外,其他各组通过D-半乳糖诱导建立脑衰老模型。淫羊藿苷低剂量组和淫羊藿苷高剂量组灌胃淫羊藿苷药液,空白组和模型组灌胃等体积生理盐水。用Morris水迷宫评价各组小鼠的学习记忆能力;用ELISA检测各组小鼠血清中T-AOC、GSH-PX、GSH-ST、MDA的表达。用Real time-PCR和免疫组化检测各组小鼠海马中p53和p21的表达。结果:与空白组比较,模型组小鼠上平台潜伏期、游泳总路程和第1次抵原平台时间都明显增加(P0.01),而小鼠穿越平台次数和目标象限时间则明显较少(P0.01)。与模型组相比,淫羊藿苷低剂量组和淫羊藿苷高剂量组小鼠上平台潜伏期、游泳总路程和第1次抵原平台时间均有所较少(P0.01,P0.05),而小鼠越平台次数和目标象限时间有所增加(P0.01,P0.05)。与空白组比较,模型组小鼠血清中T-AOC、GSH-PX、GSH-ST明显降低(P0.01),而MDA明显升高(P0.01);与模型组比较,淫羊藿苷低剂量组和淫羊藿苷高剂量组小鼠血清中T-AOC、GSH-PX、GSH-ST均有不同程度升高(P0.01,P0.05),而MDA则有所降低(P0.01)。与空白组比较,模型组小鼠海马中p53、p21 mRNA和蛋白表达水平升高(P0.01)。与模型组比较,淫羊藿苷低剂量组和淫羊藿苷高剂量组小鼠海马中p53、p21 mRNA和蛋白表达水平降低(P0.01,P0.05)。结论:淫羊藿苷具有延缓衰老作用,其机制可能与其抑制衰老信号通路p53/p21有关。     

连黛胶囊对胃肠肿瘤p21ras和突变型p53蛋白表达调节作用的临床研究

目的研究连黛胶囊对胃肠肿瘤p21ras和突变型p53蛋白表达的调节作用.方法选择临床中晚期胃肠肿瘤患者45例,随机分为治疗组和对照组,治疗组30例,在对症支持疗法的基础上口服连黛胶囊,对照组15例仅用对症支持疗法,观察治疗前后血清p21ras和突变型p53蛋白含量变化,同时观察生存质量的变化.结果治疗组治疗后血清p21ras和突变型p53蛋白含量显著降低(P＜0.01,P＜0.05),生存质量评分明显提高(P＜0.05).对照组各指标治疗前后差异无显著性意义.结论连黛胶囊具有调节胃肠肿瘤p21ras和突变型p53蛋白表达的作用.     

自拟善胃方对萎缩性胃炎癌前病变患者p16、p21的影响

目的　观察自拟善胃方对慢性萎缩性胃炎 (CAG)伴有胃粘膜异型增生 (Dys)和 (或 )肠上皮化生 (IM)的治疗效果 ,并观察抑癌基因蛋白p16 (p16 )以及癌基因蛋白 p2 1(p2 1)在治疗前后的表达情况。 方法　将内镜和病理确诊为CAG且伴有Dys和 (或 )IM的患者 6 0例 ,随机分为治疗组和对照组。治疗组 30例 ,给予善胃方 ;对照组 30例 ,给予猴头菌片 ,两组均用药 12周。结果　 1)善胃方在总体疗效方面(90 .0 0 % )优于猴头菌片对照组 (5 6 .6 7% ) ,P <0 .0 5 ;2 )中药治疗组患者治疗前后腺体萎缩程度缓解明显优于对照组 ,P <0 .0 5 ;3)中药治疗组患者治疗前后粘膜Dys、IM改善显著优于对照组 ,P <0 .0 5 ;4 )中药治疗组中 ,粘膜p16表达经治疗显著提高 ,P <0 .0 5 ,而对照组治疗前后 p16表达水平无显著变化 ;5 )中药治疗组中 ,粘膜 p2 1表达经治疗显著降低P <0 .0 1,而对照组治疗前后p2 1表达水平无显著变化。 结论　中药善胃方对萎缩性胃炎有良好的治疗作用 ,并在一定程度上可使粘膜Dys、IM改善 ,提高 p16的表达 ,降低 p2 1的表达。     

自拟善胃方对萎缩性胃炎癌前病变患者p16、 p21的影响

目的观察自拟善胃方对慢性萎缩性胃炎(CAG)伴有胃粘膜异型增生(Dys)和(或)肠上皮化生(IM)的治疗效果,并观察抑癌基因蛋白p16(p16)以及癌基因蛋白p21(p21)在治疗前后的表达情况.方法将内镜和病理确诊为CAG且伴有Dys和(或)IM的患者60例,随机分为治疗组和对照组.治疗组30例,给予善胃方;对照组30例,给予猴头菌片,两组均用药12周.结果 1)善胃方在总体疗效方面(90.00%)优于猴头菌片对照组(56.67%),P<0.05;2)中药治疗组患者治疗前后腺体萎缩程度缓解明显优于对照组,P<0.05;3)中药治疗组患者治疗前后粘膜Dys、IM改善显著优于对照组,P<0.05;4)中药治疗组中,粘膜p16表达经治疗显著提高,P<0.05,而对照组治疗前后p16表达水平无显著变化;5)中药治疗组中,粘膜p21表达经治疗显著降低P<0.01,而对照组治疗前后p21表达水平无显著变化.结论中药善胃方对萎缩性胃炎有良好的治疗作用,并在一定程度上可使粘膜Dys、IM改善,提高p16的表达,降低p21的表达.     

连黛胶囊对胃肠肿瘤p21~(ras)和突变型p53蛋白表达调节作用的临床研究

目的 :研究连黛胶囊对胃肠肿瘤 p2 1ras和突变型 p5 3蛋白表达的调节作用。 方法 :选择临床中晚期胃肠肿瘤患者 4 5例 ,随机分为治疗组和对照组 ,治疗组 30例 ,在对症支持疗法的基础上口服连黛胶囊 ,对照组 15例仅用对症支持疗法 ,观察治疗前后血清 p2 1ras和突变型 p5 3蛋白含量变化 ,同时观察生存质量的变化。结果 :治疗组治疗后血清p2 1ras和突变型 p5 3蛋白含量显著降低 (P <0 0 1,P <0 0 5 ) ,生存质量评分明显提高 (P <0 0 5 )。对照组各指标治疗前后差异无显著性意义。结论 :连黛胶囊具有调节胃肠肿瘤p2 1ras和突变型p5 3蛋白表达的作用。     

艾灸对亚急性衰老大鼠肝组织羰基毒化及p19ARF、p53 mRNA表达的影响

目的：研究温和灸对亚急性衰老大鼠肝组织羰基毒化及p19ARF、p53 mRNA表达的影响。方法：SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸治疗组和维生素E治疗组。连续大剂量腹腔注射D-半乳糖制备亚急性衰老大鼠模型,艾灸治疗组采用温和灸“肾俞”穴进行治疗。采用生物化学比色法检测各组大鼠肝组织蛋白质羰基含量,应用荧光定量PCR技术检测大鼠肝组织p19ARF、p53 mRNA的表达。结果：与正常组比较,模型组大鼠肝组织蛋白质羰基含量显著升高（P<0.01）,p19ARF、p53 mRNA表达均显著升高（P<0.01）;与模型组比较,艾灸治疗组、维生素E治疗组肝组织蛋白质羰基含量显著下降(P<0.01,P<0.05),p19ARF、p53 mRNA表达均显著降低（P<0.01,P<0.05）。结论：温和灸“肾俞”穴能降低亚急性衰老大鼠肝组织蛋白质羰基含量,下调肝组织p19ARF、p53 mRNA的表达。     

萎胃康颗粒逆转慢性萎缩性胃炎的p53机制研究

目的:探讨萎胃康颗粒逆转慢性萎缩性胃炎(CAG)的机制。方法:将90只SD大鼠随机抽取18只为正常对照组(正常组),其余72只采用多重刺激6周复制大鼠CAG模型。确定造模成功的64只随机分为4组,即模型对照组、萎胃康大剂量组、萎胃康小剂量组、三九胃泰组,分别ig生理盐水、萎胃康高浓度水煎液、萎胃康低浓度水煎液和三九胃泰混悬液,1次/d。给药30d后,观察对大鼠胃黏膜组织形态及突变型p53表达的影响。结果:模型组大鼠胃黏膜病理无明显改善,突变型p53表达较正常组显著升高(P<0.01);各治疗药物均可显著改善胃黏膜萎缩,降低胃黏膜突变型p53表达,较模型组具有显著性差异(P<0.01)。其中以萎胃康大剂量组大鼠胃黏膜p53的平均光密度最低,较其他治疗组有显著性差异(P<0.01)。结论:萎胃康能改善和逆转实验性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜萎缩,其疗效与剂量有关,其机制可能与抑制细胞的异常增殖有关。     

中草药对细胞色素P450酶系影响的研究进展

目的：介绍中草药对细胞色素P450酶（cytochrome p450，CYP）的影响。方法：查阅国内外近几年来关于中草药对细胞色素P450酶系影响的有关文献并进行综述。结果：多种中草药能够抑制或诱导某个/某些细胞色素P450酶，从而影响合用药物的代谢，导致药物相互作用的发生。结论：应重视一些中草药对细胞色素P450酶系的影响及所引起的药物相互作用和形成机制的研究，促进临床合理用药，提高中草药的有效性和安全性.