应用PCR／RFLPs对甲型血友病携带者的诊断

应用ＰＣＲ／ＲＦＬＰｓ对甲型血友病携带者的诊断石奇珍，吕联煌，张学敏甲型血友病是一种最常见的Ｘ连锁隐性遗传性出血性疾病，是由凝血因子Ⅷ基因缺陷所致［１］。发病几乎全为男性，女性为携带者，其诊断可通过测定ＦⅧ组分进行判断，但有一定误诊率［２］。我们应用...     

中国人汉族群体Ⅷ因子基因HindⅢ多态性位点研究

用ＰＣＲ法扩增了２０７个无亲缘关系的Ｘ染色体Ⅷ因子基因１９内含子,用ＨｉｎｄⅢ酶切进行Ａｍｐ－ＲＦＬＰｓ分析,查明中国人ＨｉｎｄⅢ多态性位点频率为０．２９,妇女杂合子频率为０．３６５,表明这个指数对检测甲型血友病携带者和产前基因诊断有足够高级的信息量,可应用于临床。     

F8基因倒位检测及其在甲型血友病基因诊断中的应用

目的建立F8基因第22内含子倒位突变检测新方法,应用于甲型血友病(hemophilia A)基因诊断。方法应用长距离PCR(long distance-polymerase chain reaction,LD-PCR)、倒位PCR(inversion-PCR,IPCR)技术检测31例甲型血友病患者F8基因22内含子倒位;对于倒位突变阳性患者的母亲应用上述两种方法进行携带者诊断;而对倒位携带者孕妇于孕中期抽取羊水,进行产前基因诊断。结果31例甲型血友病患者中查出7例存在倒位突变;4例倒位突变阳性患者的母亲有3例为倒位携带者;对1例倒位携带者孕妇进行了产前诊断,确定其胎儿无倒位突变。结论LD-PCR、I-PCR技术可快速检测F8基因22内含子倒位突变,可应用于患者及携带者基因诊断;I-PCR可用于F8基因22内含子倒位的产前基因诊断。     

人类因子Ⅸ基因缺陷的研究

本实验对同一家系３例血友病乙男患者进行因子Ⅸ基因缺陷的研究，应用多聚酶链反应扩增因子Ⅸ基因外显子２的３３８ｂｐ ＤＮＡ片段，扩增产物行单链构型多态性检查，发现三例均出现多态性变化。纯化该三例ＰＣＲ扩增产物ＤＮＡ，并行双链ＤＮＡ直接荧光自动测序，发现三例都在６３６４位发生碱基替换，Ｃ（ＣＧＧ）→Ｔ（ＴＧＧ），该基因点突变改变了正常ＦＩＸ的结构和凝血功能，因而导致血友病乙。该研究对揭示血友病乙分子缺陷     

人类因子IX基因缺陷的研究

本实验对同一家系3例血友病乙男患者进行因子IXI基因缺陷的研究,应用多聚酶链反应扩增因子IX基因外显子2的338bp DNA片段,扩增产物行单链构型多态性(SSCP)检查,发现三例均出现多态性变化.纯化该三例PCP扩增产物DNA,并行双链DNA直接荧光自动测序,发现三例都在6364位发生碱基替换,C(CGG)→T(TGG),该基因点突变改变了正常FIX的结构和凝血功能,因而导致血友病乙.该研究对揭示血友病乙分子缺陷的发生机制有重要意义,并有助于血友病.乙携带者的检查和产前基因诊断,而且对血友病己患者的基因治疗有直接指导意义.     

凝血因子Ⅷ基因及其基因突变的研究

本拟对甲型血友病ＦⅧ基因及其蛋白质结构和功能，ＦⅧ基因突变类型作一综述。     

PCR法分析甲型血友病Ⅷ因子基因HindⅢ多态性位点检测携带者

目的探讨ＰＣＲ法对甲型血友病Ⅷ因子基因ＨｉｎｄⅢ多态性位点分析检测携带者。方法用ＰＣＲ扩增６个甲型血友病患者家系和２０７条无亲缘关系的Ｘ染色体的Ⅷ因子基因１９内含子，用ＨｉｎｄⅢ酶切进行Ａｍｐ－ＲＦＬＰｓ分析。结果查明ＨｉｎｄⅢ多态性位点频率为０．２９，根据Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｉｎｂｅｒｇ定律计算妇女杂合子频率为０．４１，证明这个指数对检测甲型血友病携带者和进行产前诊断具有足够的信息量。研究的６个家系中有２个有信息（３３％）。结论为临床检测携带者和产前诊断提出有效的检测ＨｉｎｄⅢ多态性新途径     

凝血因子Ⅷ基因及其基因突变的研究

本文拟对甲型血友病FⅧ基因及其蛋白质结构和功能,FⅦ基因突变类型作一综述.     

中国广东人群DX_(13)/BglⅡ RFLP基因频率及其甲型血友病基因连锁分析

本文研究了中国广东人群35个甲型血友病家系的DX13/Bg1ⅡRFLP基因频率。66条无遗传关系的X染色体中,等位基因2.8kb和5.8kb的频率分别为0.879和0.121。在中国人群中,DX_(13)/BglⅡ多态性位点阳性率高于欧美白种人。用DX13/Bg1Ⅱ RFLP进行了一例甲型血友病家系连锁分析。     

中国人冠心病与载脂蛋白B基因XbaI酶切多态性关联的研究

应用多聚酶链反应研究了１００例正常人和１０３例冠状动脉粥样硬化性心脏病患者ａｐｏＢ基因ＸｂａＩ酶切位点的限制性片段长度多态性。结果表明：冠心病患者和正确人均以Ｘ＾－等位基因为主，绝大多数为纯合子Ｘ＾－Ｘ＾－基因型。     

FVⅢ基因的分子遗传学研究

对若干个不相关个体的FⅧ基因进行4个基因内的RFLPs(BclI,HindⅢ,Xbal Ⅰ,Msp,Ⅰ）及几个基因外的RFLPs(TaqⅠ、BstxⅠ,PstⅠ,AccⅠ）的研究,计算了FⅧ基因内多态位点的杂合子频率,在催含子22处,发现了两个额外的XbalⅠ多态位点,在FⅧ基因外的DXS52区域,用探针Stl4-1检测到两个TaqⅠ多态系统,并计算了杂合子频率,同时观察到在BclⅠ、XbalⅠ、MspⅠ间存在不同程度的连锁不平衡。     

一种FⅨ基因多态性在我国人群的检出

利用聚合酶链反应和限制性内切酶Ｂｓｔｕ Ｉ酶解技术，对１０９条Ｘ染色体上因子Ⅸ基因内含子Ｉ第１９２位核苷酸Ａ和Ｇ的基因频率进行了分析，发现中国人因子Ⅸ－１９２Ａ和Ｇ的基因频率分别为０．８１和０．１９，女性杂合子频率为０．３１。该发现有利于我国血友病Ｂ携带者筛查和产前基因诊断。     

甲型血友病的分子遗传学研究

本综述了甲型血友病ＦⅧ基因和蛋白的结构和功能，以及ＦⅧ基因突变类型及主要检测方法。     

中国汉人HLADQAl基因对系统性红斑狼疮的遗传易感性研究

利用ＨＬＡ基因的ＰＣＲ－ＲＦＬＰ核苷酸分型技术，以等位基因特异性的限制性内切酶（ＡｐａｌⅠ、ＢｓａｊⅠ、ＨｐｈⅠ、ＦｏｋⅠ、ＭｂｏⅡ、ＭｎｌⅡ）消化ＤＱＡｌ座位特异的ＰＣＲ扩增产物，研究了上海及其附近地区中国汉人ＨＬＡ－ＤＱＡｌ基因与系统红斑狼疮的遗传关联。发现系统红斑狼疮ＤＱＡｌ＊０１０２（３６．５％，ＲＲ＝２．２５，Ｐ＜０．０５，ＥＦ＝０．２０）及＊０４０１（１５．４％，ＲＲ＝１２．４２，Ｐ＜０．００５，ＥＦ＝０．１４）显著增加，而ＤＱＡｌ＊０５０１（１１．５％，ＲＲ＝０．２１，Ｐ＜０．００５，ＰＦ＝０．３１）和＊０．０６０１（３．９％，ＲＲ＝０．２７，Ｐ＜０．０５，ＰＦ＝０．０９）显著下降。排除ＤＱＡｌ＊０４０１的影响后，＊０１０２频率的升高表现得更加明显（ＲＲ＝２．８４，Ｐ＜０．０１）。上述发现显示：ＤＱＡｌ＊０１０２及＊０４０１对ＳＬＥ有遗传易感作用，而ＤＱＡｌ＊０５０１和＊０６０１有遗传抵抗作用，并提出了有关可能的单体型。     

中国藏族群体TH01和VWA STR基因座的遗传多态性

目的了解中国藏族群体与汉族群体的遗传亲缘关系，获得藏族群体ＴＨ０１和ＶＷＡ基因座的群体遗传数据。方法ＥＤＴＡ抗凝血样采自８９名无血缘关系藏族个体，Ｃｈｅｌｅｘ法提取ＤＮＡ，ＰＣＲ扩增样本ＤＮＡ后，聚丙烯酰胺凝胶水平电泳分型。结果在西藏藏族群体中，ＴＨ０１基因座存在５个等位基因，等位基因频率为ＴＨ０１＊６：０．０９７、ＴＨ０１＊７：０．２２７、ＴＨ０１＊８：０．０９１、ＴＨ０１＊９：０．４８１及ＴＨ０１＊９．３：０．１０４，基因型分布符合Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡（χ２＝７．４２１ｄｆ＝８Ｐ＞０．０５）；ＶＷＡ基因座存在７个等位基因，等位基因频率为ＶＷＡ＊１４：０．１０１、ＶＷＡ＊１５：０．０３４、ＶＷＡ＊１６：０．２０８、ＶＷＡ＊１７：０．３０３、ＶＷＡ＊１８：０．２０８、ＶＷＡ＊１９：０．１２９及ＶＷＡ＊２０：０．０１７，基因型分布符合Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡（χ２＝１９．６１ｄｆ＝１４Ｐ＞０．０５）；藏族和汉族的遗传距离为０．０３４，类似于欧洲群体间的遗传距离。结论西藏藏族两个ＳＴＲ基因座基因频率分布与汉族无显著差异，藏族与汉族在ＴＨ０１和ＶＷＡ基因座具有遗传同一性     

肌肉生长发育相关因子GDF-8

GDF- 8是最近发现的骨骼肌生长发育相关因子 ,属于 TGF- β超家族。本文主要介绍 GDF- 8基因的结构、功能及研究前景。     

10例血友病A患者的FⅧ因子基因内含子22倒位分析

１０例血友病Ａ患者的ＦⅧ因子基因内含子２２倒位分析吴竞生，陈云弟，王寅文，陈美珏，王祖贻，潘理明，汪健，丁浩血友病Ａ（ＨＡ）是凝血因于Ⅷ（ＦⅧ）基因缺陷所致的Ｘ－连锁隐性出血性遗传病。ＦⅧ因子基因突变类型众多，１９９３年发现约一半重型ＨＡ是由ＦⅧ基因...