解脲脲原体套式（Nested）PCR检测研究

本文报告解脲脲原体（ＵＵ）的套式（ＮＥＳＴＥＤ）ＰＣＲ检测方法。经方法学考核表明，本法的特异性、灵敏度以及试剂的稳定性和对临检标本的顺应性均较好。９３份各种生殖道炎症患者之宫颈拭子标本套式ＰＣＲ检出２１份阳性（阳性率２２．６％），而市售ＰＣＲ试剂盒仅检出１份阳性（阳性率１．１％）。前者阳性检出率明显高于后者（Ｐ＜０．０１）。     

IST支原体培养与PCR解脲支原体检测方法的比较

目的：比较分析ＰＣＲ解脲支原体检测法与ＩＳＴ支原体培养法的结果及两种方法的优缺点。方法：同时采集８８例临床上诊断为非淋菌性尿道炎（ＮＧＵ）、阴道炎患者分泌物标本两份,分别用ＩＳＴ支原体培养法和ＰＣＲ解脲支原体（Ｕｕ）检测法进行对照实验和分析。结果：ＩＳＴ支原体培养法Ｕｕ阳性２５例（２８．９４％）,人型支原体（Ｍｈ）１例（１．１４％）,Ｕｕ＋Ｍｈ５例（５．６８％）。ＰＣＲ检测Ｕｕ阳性３０例（３４．０４％）,其中男性５例ＰＣＲ检测Ｕｕ为阳性,而ＩＳＴ支原体培养法为阴性;女性３例ＰＣＲ检测Ｕｕ阴性,培养法为阳性。两种方法的Ｕｕ阳性率经统计学ｘ２检验（Ｐ＞０．０５）无显著性差别。结论：ＩＳＴ支原体培养法与ＰＣＲ检测Ｕｕ法均能适用于临床Ｕｕ的检测。ＩＳＴ支原体培养法操作简便,不需要特殊仪器;能进行支原体的种类鉴别;有参考病理阈值并可同时做药敏实验,特别适合基层医院的支原体检测工作。     

液体培养法与套式PCR法检测解脲脲原体比较研究

目的：评价解脲脲原体（Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ,Ｕｕ）液体培养技术的准确性。方法：应用被认为是目前检测临床标本中支原体最为灵敏、特异的套式ＰＣＲ技术,并辅以ＤＮＡ全自动测序技术,对１５４例男性ＳＴＤ者的尿道拭子和８３例女性ＳＴＤ者的阴道拭子配对进行Ｕｕ液体培养法和套式ＰＣＲ法检测。并以套式ＰＣＲ检测为参照系进行统计分析。结果：一、男性ＳＴＤ者Ｕｕ液体培养准确率为６３．０％,假阴性和假阳性率分别为２８．５７％和８．４４％;二、女性ＳＴＤ者Ｕｕ液体培养准确率仅为３８．５５％,假阴性和假阳性率分别４９．４０％和１２．０５％。三、男、女性ＳＴＤ者合并观察Ｕｕ液体培养准确率为５４．４３％,假阴性和假阳性率分别为３５．８６％和９．７％。四、Ｕｕ套式ＰＣＲ产物经ＤＮＡ全自动测序与Ｕｕ标准株（９６０＾Ｔ）完     

男性生殖系感染者精液解脲支原体感染的检测研究

目的：探讨男性生殖系感染者精液解脲支原体（ＩＵＩ）感染的检测研究。方法：取精液标本检测，以源于解脲支原体尿素酶基因序列为引物，应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对解脲支原体ＤＮＡ进行扩增。结果：所试几种非解脲支原体培养物均阴性。解脲支原体阳性出现１条４１８ｂｐ的ＤＮＡ扩增带。３８２４例男性生殖道感染者，ＵＵ阳性检出率２９．１％。其中急性淋菌性生死道炎感染率为４８．１％，淋菌后生殖道炎感染率为３０．２％     

解脲脲原体感染与早产儿关系研究

本文随机对我院新生儿病房１９９７年６月１９９７年１２月收住的１２３例新生儿患者用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）在入院３天内对其咽拭子标本进行解脲脲原体（ＵＵ）之ＤＮＡ检测。结果：（１）早产儿组ＵＵ阳性率５６５２％显著高于足月儿组ＵＵ阳性率３４００％（ｘ２＝４．０１,Ｐ＜０．０５）。（２）ＵＵ阴性组平均体重３０８２２±３３５１ｇ显著高于ＵＵ阳性组平均体重２７５４３±３１６２ｇ（ｔ＝２．０５１,Ｐ＜０．０５）。结论：宫内感染ＵＵ是引起早产儿、低出生体重儿的重要因素之一。预防关键在对生殖道ＵＵ阳性妇女怀孕前先予治疗,以阻断母婴垂直传播。     

解脲支原体的PCR快速检测技术在临床上的应用

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术扩增解脲支原体４２９ｂｐＤＮＡ片段靶基因，检测２０９６例临床疑为非淋菌感染，阴道炎病人宫颈分泌物，检出阳性７８４例，阳性率为３７．４０％。     

妇科病人沙眼衣原体,解脲脲原体淋球菌感染的流行病学研究

本文磁式ＰＣＲ科病人的沙眼衣原体、解脲脲原体、解脲脲原体、淋球菌感染率。结果阳性率分别为１５％、２０．９％、３．８％。１２０例阳性病例的男性配偶阳性率分别为１５％、３０％、２．５％。     

聚合酶链反应在小儿支原体肺炎诊断中的应用价值

为探讨ＰＣＲ在小儿支原体肺炎诊断中的实际应用价值，对４７例临床疑诊支原体肺炎的病儿做了咽拭子ＰＣＲ－ＭＰ测定，同时做了血冷凝集试验（ＣＡＴ）。结果：ＰＣＲ－ＭＰ阳性２１例，真阳性１５例，假阴性１例，敏感度为９３．８％。假阳性６例，占检测标本的１２．８％，占检测报告阳性总数的２８．６％，ＣＡＴ阳性１２例。确诊支原体肺炎１６例，其中１５例经ＰＣＲ早期确诊。结论：ＰＣＲ－ＭＰ测定有利于支原体肺炎的早期诊     

新生儿疟眼沙眼衣原体和解脲脲原体感染的PCR检测研究

为探讨沙眼衣原体（ＣＴ）和解脲解原体（ＵＵ）与新生儿疾病的关系，我们采用套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，从１００例住院新生儿的结膜拭子中共检出阳性者５８例阳性率５８％其中ＣＴ３６例，ＵＵ２２例）；剖宫产７例（ＣＴ４例，ＵＵ３例）经产道分娩５１例（ＣＴ３２例，ＵＵ１９例）结果表明：新生儿是ＣＴ，ＵＵ易感者，可引起新生儿肺炎，宫内感染，早产，低体重，结膜炎，肠炎，采用先进的套式ＰＣＲ技术检测具有灵敏，     

PCR检测支原体和沙眼衣原体在产科中的应用

采用常规聚合酶链反应（ＰＣＲ） 和套式ＰＣＲ（ＮＰＣＲ） 技术检测妊娠２１ ～３１ 周１９０ 份孕妇子宫颈分泌物中人型支原体（ＭＨ） 、解脲支原体（ＵＵ）和沙眼衣原体（ＣＴ）ＤＮＡ， 结果表明各感染原ＤＮＡ总阳性率为３７－９％ （７２／１９０） ； 其中ＭＨ、ＵＵ与ＣＴ ＤＮＡ检出率各为６－３％ （１２／１９０）， ２５－３ ％ （４８／１９０ ）与６－３％ （１２／１９０） ； 在ＤＮＡ阳性组中， 支原体与衣原体阳性率分别为８３－３％ （６０／７２） 与１６－７％ （１２／７２ ）。结果提示， 对上述感染者给予及时足量与足程的抗支原体与抗衣原体治疗， 将有利于胎儿的健康生长与发育。     

宫颈感染解脲支原体与不良妊娠结局的关系

目的：探讨宫颈解脲支原体（ＵＵ）在不同状态下与不良妊娠结局的关系。方法：通过聚合酶链反应（ＰＣＲ）对２１０例孕发的宫颈分泌物进行ｕｕＤＮＡ检测，用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测孕妇血清抗ｕｕＩｇＭ以两项检测结果同时阳性做为宫颈ｕｕ感染的标准，以ｕｕＤＮＡ阳性而血清抗ｕｕＩｇ阴性作为宫颈ｕｕ的携带状态的标准。结果：２１０例孕妇中宫发泌物ｕｕＤＮＡ阳性１００例，占４７．６％，宫颈分泌物ｕｕＤＮＡ及     

不同引物介导的聚合酶链反应检测人乳头瘤病毒DNA

应用３对人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）引物对１０７例各种宫颈标本进行了聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增。结果显示，共同引物（ＧＰ）扩增，有５８．８％（３０／５１）宫颈鳞癌，１００％（１４／１４）尖锐湿疣、１３．６％（３／２２）宫颈炎和１０％（２／２０）正常宫颈出现ＨＰＶ阳性。型特异性引物ＳＰ１６／ＳＰ１８扩增，有３７．２％（１９／５１）宫颈鳞癌２５．７％（５／１４）尖锐湿疣和５％（１／２０）正常宫颈出现ＨＰＶ１６型阳性，５．８％（３／５１）宫颈鳞癌为ＨＰＶ１８型阳性。进一步用ＳＰ１６ｂ引物扩增，没有１例ＨＰＶ１６ｂ亚型被发现。说明宜颈磷癌和尖锐湿疣与ＨＰＶ感染有关，结合应用共同引物和型特异性引物可作为ＨＰＶ检测与分型方法。     

人乳头状瘤病毒感染与食管癌的关系

人类乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）的感染是上皮性肿瘤发生的一个重要原因。特别是ＨＰＶ１６和ＨＰＶ１８型感染与宫颈癌的发生。但ＨＰＶ的感染与食管癌的关系仍不清楚。我们采用免疫组织化学和敏感的ＨＰＶ共同引物、ＨＰＶ１６和ＨＰＶ１８型特异性引物的ＰＣＲ方法及３２Ｐ标记特异性探针Ｓｏｕｒｈｅｒｎ杂交检测食管癌中的ＨＰＶ及其亚型。结果显示，１２７例食管鳞癌标本免疫组化方法检测，ＢＰＶ阳性者占６０．６（７７／１２７），ＨＰＶＥ６蛋白抗原阳性者占４３％（５４／１２７）。其阳性染色明确定位于鳞癌组织内，并与肿瘤的分化有着密切的关系。经β球蛋白引物扩增证实不含ＰＣＲ抑制标本共１０３例，其中ＨＰＶ共同引物ＰＣＲ扩增阳性者为３７例，占３５．９％，经型特异ＰＣＲ及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证实其中ＨＰＶ１６阳性者２１例，占２０．４％；ＨＰＶ１８阳性者８例，占７．８％。仅一例为ＨＰＶ１６和１８均阳性。以上结果显示ＨＰＶ感染的确存在于食管癌中，并可能在食管癌发生中起一定的作用。     

PCR技术检测非淋菌性尿道炎患者精液中沙眼衣原体及解脲脲原体

沙眼衣原体（ＣＴ）及解脲脲原体（ＵＵ）是非淋菌性尿道炎中的两种主要病原体，其对生殖道的危害及引起的不孕不育已被国内外学者广泛关注。我们对３４例非淋菌性尿道炎患者分别以精液及尿道拭子为标本，以ＰＣＲ技术检测，结果精液标本中ＣＴ及ＵＵ检出的总阳性率为６７．６％（２３／３４），同时检出滴虫５例，霉菌２例。而尿道拭子标本总阳性率为３５．２９％（１２／３４）。未检出滴虫及霉菌，我们认为以精液为标本，取材方便，阳性检出率高。     

应用原位PCR技术检测阴茎癌组织中人乳头瘤病毒DNA

目的：研究人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）与阴茎癌的关系。方法：应用原位ＰＣＲ技术对４６例阴茎癌组织中的ＨＰＶ１６和ＨＰＶ１８ＤＮＡ进行检测。结果：３３例阴茎癌中检测到了ＨＰＶＤＮＡ（７１．７％），其中２９例ＨＰＶ１６ＤＮＡ阳性（６３．０％），６例ＨＰＶ１８ＤＮＡ阳性（１３．０％），２例ＨＰＶ１６和ＨＰＶ１８ＤＮＡ均阳性，４例ＨＰＶ１８ＤＮＡ阳性而ＨＰＶ１６阴性；２例淋巴结转移癌，３例癌旁不典型增生组织和１例癌旁增生组织ＨＰＶ１６ＤＮＡ阳性。结论：阴茎癌与ＨＰＶ１６、ＨＰＶ１８感染有密切关系，原位ＰＣＲ技术是一项敏感性高、特异性强的技术。     

丙型肝炎病毒三种不同分型方法的比较

分别应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）产物酶切分型法（酶切法）、型特异引物分型ＰＣＲ法及血清丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）型特异性抗体酶联免疫测定法（ＥＩＡ），对１２０例抗－ＨＣＶ阳性患者血清进行ＨＣＶ分型检测，比较其分型结果。结果显示酶切法与ＰＣＲ法均成功地对９６例（８０％）进行分型，其中Ⅱ型８６例（８９．６％），Ⅲ型８例（８．３％），Ⅱ／Ⅲ型混合感染２例（２．１％），且两种方法的结果完全一致。ＥＩＡ法检测出型特异性抗体７８例（６５％），其中血清１型（相当于基因Ⅰ、Ⅱ型）６８例（８７．２％），血清２型（相当于基因Ⅲ、Ⅳ）６例（７．７％），血清１、２型双阳性者４例（５．１％）。对三种方法均阳性的６６例的分型结果进行比较，ＥＩＡ法与酶切法和ＰＣＲ法的符合率达９７．０％。表明三种分型方法的结果高度一致。     

间接法原位PCR技术在尖锐湿疣诊断中的应用

本文报道用间接法原位ＰＣＲ技术在尖锐湿疣诊断中的应用。３７例外阴尖锐湿疣组织，以１０％福尔马林固定、常规石蜡切片，间接法原位ＰＣＲ检测ＨＰＶ。结果３２／３７／１１型阳性，阳性率为８６．５％，高于原位杂交法的阳性率（７０．３％）；原位杂交阴性的１１例中有６例原位ＰＣＲ法阳性，表明此法具有很高的敏感性和特异性，对诊断尖锐湿疣有重要的实用价值。     

输卵管妊娠患者宫颈拭子解脲脲原体套式(Nested)PCR检测

近年来，有关解脲脲原体（ＵＵ）感染与盆腔炎症性疾病（ＰＩＤ）的关系报道较多。但生殖道ＵＵ感染与输卵管妊娠的关系研究报道甚少。为此，我们应用更为灵敏、特异的套式（Ｎｅｓｔｅｄ）ＰＣＲ技术检测了１７例输卵管妊娠患者的宫颈拭子ＵＵ－ＤＮＡ，并以同期５３６例非输卵管妊娠妇科住院病人宫颈拭子为对照组。检测结果为，前者阳性率为７６．５％，而后者仅为２１．４％，有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。作者认为ＵＵ感染所致的输卵管急慢性炎症是输卵管妊娠的重要原因。作者建议：婚龄妇女应定期作ＵＵ生殖道感染检查，阳性者及时治疗，以防止ＰＩＤ和输卵管妊娠的发生。     

深圳地区泌尿生殖道解脲支原体和沙眼衣原体感染对妊娠的 …

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，对不孕妇女７９人进行生殖道解脲支原体（ＵＵ）及沙眼衣原体（ＣＴ）检查。结果ＵＵ－ＤＮＡ阳性５６人占（７０．９％），ＣＴ－ＤＮＡ２６人（占３３％），其中１８人ＵＵ－ＤＮＡ和ＣＴ－ＤＮＡ均为阳性。     

乳头瘤病毒16型E6,P53,RB,PCNA在宫颈癌中的表达状态及相关性

应用核酸原位杂交和免疫组织化学技术，检测人子宫颈癌中人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）１６型Ｅ６ＯＲＦ与抑癌基因产物Ｐ５３，ＲＢ和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）。在４４例宫颈癌石蜡切片中，原位杂交检测出ＨＰＶ１６Ｅ６ＯＲＦ阳性２７例（６１．３６％），其中免疫组化检测出Ｐ５３、ＲＢ、ＰＣＮＡ阳性分别为８例（２９．６３％），１４例（５２．８５％）、２０例（７４．０７％），而在１７例ＨＰＶ１６Ｅ６阴性标本中Ｐ５３、ＲＢ、ＰＣＮＡ阳性分别为７例（４１．１７％），９例（５２．９４％）、１２例（７０．５８％）。而在５例正常宫颈组织中未测出ＨＰＶ１６Ｅ６ＯＲＦ，ＰＣＮＡ只在宫颈组织上皮基底层细胞中表达。统计学分析表明，ＨＰＶ１６Ｅ６与宫颈癌密切相关（Ｐ＜０．０５），ＰＣＮＡ在宫颈癌与正常宫颈组织中有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。未能发现宫颈癌组织中ＨＰＶ１６Ｅ６ＯＲＦ与Ｐ５３蛋白相关性（Ｐ＞０．０５）。