异型缝隙连接通道对心脏电生理功能的调控作用

由多种不同的缝隙连接蛋白(Cx)组成的异型缝隙连接(GJ)通道的电生理``特性不同于由单一种Cx组成的同型GJ通道,前者对心脏细胞间通信的调节作用也有别于后者。在病理情况下,由于心脏内Cx的再分布所致的异型GJ通道的电生理特性改变可诱发心律失常的发生。     

异型缝隙连接通道和磷酸化对心脏缝隙连接的调变

目的 检测由缝隙连接蛋白(connexin，Cx)43和Cx45组成的多种异型缝隙连接通道(her—eromultimeric gap junction channels，HGJC)和磷酸化对缝隙连接(gap junction，GJ)的调变作用。方法 将转染了编码为Cx43或Cx45的DNA后的Hela细胞放置在一起共同培养组成双侧和单侧异型GJ通道。显微注射若丹明123(rhodamine123，Rh)检测经200nmol／L十四(烷)酰佛波醇乙酸酯(12-0-tetrade—canoylphorbol-13-acetae，TPA)处理前后，在紫外光显示下由Cx43和Cx45所组成的不同GJ通道对荧光染料的偶联率(coupling ratio)。结果 在不同的GJ中，同型GJ通道Cx43(homotypie Cx43，HoCx43)偶联率最高。从Cx45侧注入荧光染料的单侧异型GJ通道45(mono-heteromeric Cx45-Cx43／45，MH45)偶联率较之从Cx43／45侧注入荧光染料的MH45、双侧异型GJ通道Cx43／45(bi-heteromeric Cx43／45，BH43／45)及同型GJ通道Cx45(homotypic Cx45，HoCx45)等的偶联率是最低的。根据HoCx43或HoCx45通道的偶联率对各型通道偶联率进行标准化处理。BH43／45和MH43通道的偶联率均较HoCx43降低。对MH45通道来说，从Cx43／45侧注射的通道偶联率大于从Cx45侧注射的偶联率。TPA处理后HoCx43的偶联率降低，而当Cx43和Cx45组合成BH43／45和MH43通道后其偶联率下降更显著。结论 Cx43和Cx45共同表达可构成BH43／45、MH43和MH45等异型通道，而这些通道可降低细胞间的通讯并对磷酸化的作用不敏感。单侧异型GJ通道的偶联率取决于染料注射的方向。     

异型缝隙连接通道和磷酸化对心脏细胞通讯的调节作用

为了检测缝隙连接蛋白 (Cx) 4 3和Cx4 5组成的多种异型缝隙连接通道和磷酸化对缝隙连接 (GJ)里细胞通讯的调节作用 ,将转染了编码为Cx4 3或Cx4 5的DNA后的Hela细胞放置在一起共同培养组成双侧和单侧异型GJ通道。显微注射荧光素黄 (LY)后 ,利用紫外光检测经 2 0 0nmol/L十四 (烷 )酰佛波醇乙酸酯 (TPA)处理前后由Cx4 3和Cx4 5所组成的多种异型GJ通道对荧光染料的偶联率。结果 :在不同的GJ中 ,同型GJ通道Cx4 3(HoCx4 3)偶联率最高。单侧异型GJ通道Cx4 3(MH4 3)和单侧异型GJ通道Cx4 5 (MH4 5 )的偶联率较之相关的HoCx4 3和同型GJ通道Cx4 5 (HoCx4 5 )低。从Cx4 5侧注入荧光染料的MH4 5偶联率较之从Cx4 3/ 4 5侧注射的MH4 5、双侧异型GJ通道Cx4 3/4 5 (BH4 3/ 4 5 )和HoCx4 5等的偶联率都低。TPA处理后HOCx4 3的偶联率降低 ,而当Cx4 3和Cx4 5组合成异型BH4 3/4 5和MH4 3通道其偶联率下降更显著。结论 :Cx4 3和Cx4 5共同表达可构成BH4 3/ 4 5、MH4 3和MH4 5等通道 ,而这些异型GJ通道可降低细胞间通信和对磷酸化的敏感性。有关MH4 5通道 ,其偶联率大小决定于荧光染料的注射方向 ,此可能与心律失常再折返的解剖学的机制有关。     

缝隙连接蛋白与心律失常的相关性研究进展

以往认为心律失常的发生主要与心肌细胞兴奋性异常有关但近年来的研究表明细胞间电耦联障碍是心律失常的另一个重要原因之一,其所起的致心律失常作用甚至大于兴奋性异常。由心肌缝隙连接蛋白(connexin,Cx)构成的缝隙连接(gapjunction,GJ)通道是心肌细胞之间的一种特殊连接通道,     

心肌细胞缝隙连接及其与心血管疾病和心律失常的关系

心肌细胞缝隙连接 (GJ)提供细胞间的电流通路 ,使动作单位协同扩布。心肌细胞的缝隙连接蛋白 (Cx)主要有Cx4 0、Cx4 3和Cx4 5 ,其在心脏中的分布和功能不同。在有疾病的心肌中 ,Cx含量和GJ分布发生改变 ,主要受酶、机械力等因素的调控 ,最终导致功能上的改变。Cx含量的减少、GJ密度减低及GJ的侧边化导致区域内各向异传导性变化 ,与心律失常的产生有关     

缝隙连接、连接蛋白43及其与心律失常的关系

缝隙连接(GJ)通道是介导心肌细胞间电化学信息交流,保证心脏整体活动的协调性和同步性的特殊通道。在致心律失常发生上,GJ通道介导的细胞间电耦联障碍甚至比膜离子通道功能紊乱起了更重要的作用。连接蛋白43(Cx43)是心室GJ通道的主要构成成份,其表达和分布的异常将导致心室肌细胞的整体性异常,从而传导速度和传导各向异性发生改变,产生折返和传导阻滞。以GJ通道为作用靶点的新一代抗心律失常药的出现将为心律失常的治疗带来新的希望。     

心脏缝隙连接蛋白重构与心律失常

缝隙连接（GJ）是存在于两个相邻心肌细胞间的一个低阻抗通道，胞质中的离子和小分子物质可经过这一通道相互沟通，传导着多种电和化学信号。因此，GJ通道调控着心肌细胞间的通讯，控制并保证健康心脏的协调性收缩。缝隙连接蛋白重构是指GJ及组成GJ的缝隙连接蛋白（Cx）的变化，如数量缺失或重新分布及Cx的异常组合等，可见于各种病理性改变的心脏，可致非协调性收缩和心律失常。     

连接蛋白43磷酸化状态与心脏缝隙连接通道功能的关系

缝隙连接是介导相邻细胞间直接通讯的特殊膜结构。心室肌细胞间的缝隙连接通道主要由连接蛋白43(Cx43)构成。Cx43的磷酸化状态除了快速调节通道的开放/闭合状态(单通道传导性和通道开放概率),还可通过影响Cx43的合成、转运、聚集/解聚和降解等不同环节,改变活化通道数量,最终实现对缝隙连接功能的调控。迄今,已发现多种激酶和蛋白磷酸酶可直接和(或)间接调控Cx43羧基末端的丝氨酸残基和酪氨酸残基的磷酸化状态,从而影响缝隙连接通道的功能。磷酸化/去磷酸化影响Cx43和缝隙连接通道功能的确切作用和具体机制未明。本文就Cx43磷酸化状态与心脏缝隙连接通道功能的关系作一综述。     

连接蛋白43磷酸化状态与心脏缝隙连接通道功能的关系

缝隙连接是介导相邻细胞间直接通讯的特殊膜结构.心室肌细胞间的缝隙连接通道主要由连接蛋白43(Cx43)构成.Cx43的磷酸化状态除了快速调节通道的开放/闭合状态(单通道传导性和通道开放概率),还可通过影响Cx43的合成、转运、聚集/解聚和降解等不同环节,改变活化通道数量,最终实现对缝隙连接功能的调控.迄今,已发现多种激酶和蛋白磷酸酶可直接和(或)间接调控Cx43羧基末端的丝氨酸残基和酪氨酸残基的磷酸化状态,从而影响缝隙连接通道的功能.磷酸化/去磷酸化影响Cx43和缝隙连接通道功能的确切作用和具体机制未明.本文就Cx43磷酸化状态与心脏缝隙连接通道功能的关系作一综述.     

缝隙连接蛋白Cx43的磷酸化对缝隙连接通讯的调控

缝隙连接介导细胞间通讯。磷酸化通过影响缝隙连接蛋白生命周期中的各个过程而调节细胞间通讯,这些过程涉及到缝隙连接蛋白的转运、组装/解离、降解以及通道的门控等。本文将探讨缝隙连接蛋白Cx43的磷酸化对缝隙连接通讯的调控,继而讨论Cx43蛋白的磷酸化特异性抗体,有助于我们深入研究特定位点的磷酸化事件对缝隙连接通道功能的影响。     

连接蛋白、缝隙连接的结构功能及其与心血管疾病

1　引言细胞间的通讯方式可分为间接与直接方式。以体循环远程分泌、旁分泌或自分泌方式经第二信使途径完成一系列生理、生化功能的调节方式称为间接通讯 ;而以细胞间的缝隙连接 (gap junction)为途径进行的细胞间直接的信息交流 ,称为直接通讯 ,又称缝隙连接细胞间通讯 (gap junction inter- cellularcommunication/GJIC)。2　缝隙连接的组成、分布与结构[1]缝隙连接由相邻细胞膜上的两个连接子 (con-nexon)相互锚定组成 ,而连接子是一个六聚体 ,由六个亚单位 -连接蛋白 (connexin/Cx)组成。连接蛋白是由十余个成员组成的一个保守大家族 …     

缝隙连接蛋白43与心肌缺血再灌注心律失常的研究进展

近年来,心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemic-reperfusion injury,MIRI)的治疗和预防是心血管领域新兴的研究课题之一。缝隙连接(gap junction,GJ)是心脏电生理的基本结构。缝隙连接蛋白(connexin,Cx)是缝隙连接的基本单位。缝隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)是心脏Cx家族中最丰富的成员,Cx43的正常表达对于心脏发育、电耦联的心肌细胞活性和心肌功能的协调至关重要。Cx43与MIRI之间的关系已成为当前研究的重点。该文就Cx43与心肌缺血再灌注心律失常的关系作一综述。     

缝隙连接与心脏的传导

细胞之间动作电位或兴奋的传导称为胞间传导 ,可兴奋细胞间的电耦联是通过一种特殊的胞间结构而实现 ,这种结构即是缝隙连接 (gapjunction ,GJ)。现已证实 ,心脏的正常传导和引起心律失常的异常传导都与缝隙连接直接相关。目前 ,缝隙连接是心电学基础与临床研究的共同热点。一、缝隙连接的基本概念心肌细胞间的连接主要由闰盘 (intercalateddisk)构成。闰盘由桥粒 (desmosome)、粘附膜 (fasciaadherents)和缝隙连接三部分组成。桥粒是紧密贴附在一起的细胞膜 ,能将各个心肌细胞紧密连接在一起 ,其功能目前尚不明了 ,但其电阻很高 ,离子很难…     

犬冠状静脉窦肌袖细胞及其缝隙连接蛋白43和缝隙连接蛋白45的分布研究

目的研究冠状静脉窦肌袖细胞形态走行、分布及其缝隙连接蛋白(Cx)的分布特点,进一步探讨冠状静脉窦肌袖在心律失常中的作用。方法选用新疆成年杂种犬9条,以其冠状静脉窦(CS)为研究标本,分别做Cx43、Cx45免疫组化及HE染色。结果CS的长度为(5．20±0．68)cm,在CS 2．5～3 cm内普遍存在肌袖细胞,CS肌袖纤维以内环外纵的基本模式分布,随着CS窦口向远处延伸,肌袖层分布逐渐减少。在同一横断层或不同层面,肌袖细胞的分布存在呈不均一性。免疫组化证实Cx43在CS表达稀少,Cx45在CS肌袖细胞细胞膜表达丰富,而且随着CS的延伸Cx45表达减少。结论犬CS的肌袖细胞分布存在不均一性,Cx45为其主要缝隙连接蛋白,这似乎可以证明CS具备心脏传导系统缝隙连接蛋白的特点,揭示了CS在更大程度上是一条电传导通道。     

风湿性心脏病心房颤动患者心房肌缝隙连接重构分布的研究

探讨心房颤动 (AF)患者心房肌细胞间缝隙连接 (GJ)中通道蛋白 (Cx)含量和分布变化与AF发生并维持的意义和机理。收集风湿性瓣膜病 2 2例 ,在建立体外循环心脏停跳前取少量心房组织。将心房组织制成组织切片进行免疫荧光标记 ,在激光共聚焦扫描显微镜下获取荧光图像 ,通过分析软件对获取的信号进行分析。显示单位面积GJ斑数 (Cells) ,面积 (Area) ,GJ斑荧光强度及GJ分布 ,在无AF(NAF)和持续性AF(AF)组间进行比较。结果 :①GJ中Cx4 0斑较细小且荧光较Cx4 3淡 ,荧光强度有明显差异 (P =0 .0 13)。②Cx4 3斑数目、面积及荧光强度在NAF和AF组间无差异 (P =NS)。③Cx4 0斑面积在NAF和AF组间无差异 (P =0 .5 96 ) ,但Cx4 0斑荧光强度在NAF和AF组间有显著差别 (P =0 .0 5 )。④纵切面与横切面GJ斑数之比、纵切面与横切面GJ斑面积之比 ,Cx4 0在NAF和AF组间有明显差异 (分别为P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。结论 :Cx4 3在慢性AF患者中变化不明显 ,可能不参与AF的重构。Cx4 0密度减低 ,并向侧边分布 ,增加各向异比率 ,可能有利于AF的产生和维持。     

缝隙连接蛋白40与心房颤动的关系

缝隙连接通道大量分布于心脏组织,介导心肌细胞之间直接通讯,在维持心肌电活动的同步性及冲动在心肌快速传导方面发挥着重要的生理功能.缝隙连接蛋白(connexin,Cx) 40的表达量、分布及分子结构变化均与心房颤动有关.该文介绍Cx40的表达、分子变异与心房颤动的关系以及基于Cx40靶标的抗心律失常治疗进展.     

脑利钠肽对新生大鼠心室肌细胞缝隙连接蛋白Cx43含量的影响

观察脑利钠肽(BNP)对缝隙连接蛋白Cx43含量的影响,探讨BNP对心室肌细胞电生理特性的直接效应。以培养新生大鼠心室肌细胞为实验模型,分为实验组和对照组,实验组以不同浓度(1×10-8,1×10-7,1×10-6mol/L)的BNP处理心肌细胞24h后,通过免疫印迹法(Westernblot)反映心肌细胞Cx43总蛋白含量变化;通过免疫组化法在激光共聚焦显微镜下观察GJ通道的密度变化。结果:Westernblot显示BNP处理组和对照组比较Cx43条带显色密度减弱并有统计学意义(P<0.01),且随着BNP的剂量越大,Cx43条带密度减弱越明显。在共聚焦显微镜下观察到的Cx43的特异性荧光经过强度定量分析后得出实验组GJ通道Cx43密度比对照组减弱(P<0.01)。结论:一定浓度的BNP可使GJ蛋白Cx43的含量下调。BNP有可能参予心室肌细胞GJ的重构,从而在“致心律失常基质”的形成中起作用。     

连接蛋白43与胃肠运动

连接蛋白（Cx）43是构成缝隙连接（GJ）最重要的Cx,GJ是介导胃肠平滑肌细胞（SMC）和Caja1间质细胞（ICC）间电化学信息交流,保证肌肉活动的协调性和同步性的特殊通道。Cx43广泛存在于胃肠Caja1间质细胞与平滑肌细胞之间,在胃肠运动中发挥重要作用。Cx43的异常表达与分布可导致胃肠运动障碍。     

连接蛋白43与胃肠运动

连接蛋白（Cx）43是构成缝隙连接（GJ）最重要的Cx,GJ是介导胃肠平滑肌细胞（SMC）和Caja1间质细胞（ICC）间电化学信息交流,保证肌肉活动的协调性和同步性的特殊通道。Cx43广泛存在于胃肠Caja1间质细胞与平滑肌细胞之间,在胃肠运动中发挥重要作用。Cx43的异常表达与分布可导致胃肠运动障碍。     

心肌缝隙连接蛋白43与心血管疾病的关系

心脏缝隙连接（gap junction,GJ）是细胞间进行电化学偶联及信息交换的重要途径,是介导心脏维持正常的协调性和同步性功能的重要桥梁及特殊通道。GJ主要由连接蛋白组成,而在心肌细胞水平上主要包括连接蛋白（connexin,Cx）43、Cx40和Cx45,但各自在心脏部位的表达分布和功能上却有所不同。现已有研究报道分析在许多心血管疾病中,GJ在结构和功能上的改变或异常与主要心血管事件的发生有直接关联。Cx含量及分布的减少、GJ调控因素的影响及GJ的侧一侧连接导致传导异向性变化等,均可能使心脏整体功能活动不同程度地下降或受到抑制,从而引起心脏疾病的发生和发展。