β-细辛醚干预缺氧诱导的内皮细胞黏附分子表达的作用

目的观察石菖蒲的主成分β-细辛醚对缺氧-复氧诱导的内皮细胞黏附分子表达的影响。方法采用流式细胞术和特异性标记单克隆抗体,测定内皮细胞表面黏附分子VCAM-1及CD62E的表达率。结果缺氧模型组VCAM-1、CD62E明显增高,与正常组比较P<0.001;β-细辛醚能降低VCAM-1、CD62E的表达,与模型组比较有统计学意义(P<0.05～0.001),且CD62E表达呈明显的量效关系。结论β-细辛醚能抑制缺氧诱导的内皮细胞表面黏附分子的表达,有保护血管内皮免受缺氧-复氧损害的作用。     

β-细辛醚与冰片对Aβ1-42损伤PC12细胞自噬相关蛋白LC3和线粒体功能的影响

目的 观察β-细辛醚与冰片对β-淀粉样蛋白1-42（Aβ1-42）诱导PC12细胞损伤自噬相关蛋白轻链3（LC3）的作用,以及对细胞内钙离子浓度 和线粒体膜电位（MMP）的影响。方法 体外培养PC12细胞,β-细辛醚与冰片预处理,用终浓度为1.25 μmol·L-1 Aβ1-42诱导细胞产生自噬,光镜观察细胞形态,3-（4, 5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴盐比色法（MTT法）检测细胞活力,流式细胞仪检测LC3蛋白的表达、细胞内钙离子浓度及MMP,电镜观察细胞超微结构。结果 与模 型组比较,β-细辛醚组、冰片组及其β-细辛醚+冰片组能提高细胞活力（P＜ 0.05）,升高LC3蛋白的含量（P＜ 0.05）,降低细胞内钙离子浓度及升高MMP（P＜ 0.05）, 减少自噬体,保护线粒体形态结构。结论 β-细辛醚与冰片及其配伍对Aβ1-42诱导的细胞损伤有保护作用。     

黄癸素对ECV304细胞的增殖、迁移和小管形成的影响

目的:探讨黄癸素(HB)在体外对血管生成的影响。方法:MTT法测定黄癸素对ECV304增殖的影响,划痕法检测黄癸素对ECV304细胞迁移的影响,二维培养观察黄癸素对ECV304细胞小管样结构形成的影响。结果:MTT法测得黄癸素对ECV304细胞24、48、72小时的IC50分别为40.61、7.15和2.40mg/L;划痕法测得黄癸素浓度为1.25、2.5、5mg/L时的迁移抑制率分别为39%、53%和79%;与阴性对照组比较,经黄癸素处理的ECV304细胞小管数目均显著减少,且管腔不完整,浓度为20、30、40mg/L时小管形成抑制率分别为26.99%、39.26%和65.64%。结论:黄癸素可直接抑制ECV304细胞的增殖、迁移和小管样结构的形成,抑制血管新生,从而可能对肿瘤血管的形成起到间接抑制作用。     

β-细辛醚对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤的保护作用研究

目的探讨β-细辛醚对Aβ25-35所致PC12细胞凋亡的抑制作用。方法以Aβ25-35建造体外PC12细胞损伤模型,观察β-细辛醚对其细胞存活率、细胞形态、乳酸脱氢酶(LDH)的含量和Caspase-3、Caspase-6、Caspase-9 mRNA表达的影响。结果 10μmol/L的Aβ25-35与PC12细胞共培养24 h出现明显损伤,细胞活力下降,培养液中LDH含量增多,Caspase-3、Caspase-6、Caspase-9 mRNA表达水平增高。15 mg/L、30 mg/L、60 mg/Lβ-细辛醚可有效改善Aβ25-35引起的PC12细胞形态改变,提高细胞存活力,减少LDH渗漏,明显降低Aβ25-35引起的PC12细胞Caspase-3、Caspase-6、Caspase-9 mRNA表达水平。结论β-细辛醚对Aβ25-35所致PC12细胞损伤有保护作用。     

β-细辛醚对Aβ_(1-42)诱导PC12细胞炎症因子表达的影响

目的:探讨β-细辛醚对Aβ_(1-42)诱导PC12细胞炎症因子表达的影响。方法:(1)将对数生长期PC12细胞随机分为正常对照组、Aβ_(1-42)3.3μM、Aβ_(1-42)10μM、Aβ_(1-42)30μM。采用实时无标记动态细胞分析技术(Real Time Cell Analusis,RTCA)和MTT法检测各组PC12细胞存活率;Western blotting检测PC12细胞的IL-1β和TNF-α蛋白表达的变化。(2)将对数生长期PC12细胞随机分为正常对照组、Aβ_(1-42)模型组、β-细辛醚18.5μg·mL~(-1)、β-细辛醚55.5μg·mL~(-1)、β-细辛醚166.7μg·mL~(-1)。采用Western blotting检测PC12细胞的IL-1β和TNF-α蛋白表达的变化。结果:(1)3.3μM Aβ_(1-42)能显著增加PC12细胞IL-1β和TNF-α的蛋白表达(P<0.05),对PC12细胞的存活率无显著影响(P>0.05)。(2)与正常对照组相比,Aβ_(1-42)模型组细胞的IL-1β和TNF-α的表达明显增加(P<0.01)。与Aβ_(1-42)模型组相比,β-细辛醚(55.5μg·mL~(-1)、166.7μg·m L~-1)能显著降低PC12细胞IL-1β、TNF-α的表达(P<0.01),β-细辛醚(18.5μg·mL~(-1))能降低PC12细胞IL-1β的表达(P<0.05),但对TNF-α的表达无显著影响(P>0.05)。结论:β-细辛醚可以有效地抑制Aβ_(1-42)诱导的PC12细胞分泌IL-1β、TNF-α的蛋白表达。     

脑脊液中Aβ检测对老年期痴呆早期诊断的意义

目的　探讨脑脊液 (CSF)中 β -淀粉样蛋白 (Aβ)对老年性痴呆 (AD)的诊断价值。方法　采用双抗体夹心酶联免疫吸附法 (ELISA)检测 54例AD患者及 30例正常对照者 (NC)脑脊液中Aβ1 - 42 浓度。结果　CSF中Aβ1 - 42 平均浓度AD组为 (336 .0 83± 1 2 0 .1 80 )ng/L ,NC组为 (556 .967± 1 31 .341 )ng/L ;AD组CSF中Aβ1 - 42 浓度均明显低于NC组 (P <0 .0 5) ;检测CSF中Aβ1 - 42 浓度诊断AD的灵敏度为 46 .2 9% ,特异性为 92 .96 %。结论　临床上检测CSF中Aβ1 - 42 浓度可作为早期诊断老年性痴呆的辅助指标     

巴戟天糖链对ECV304细胞增殖中BKCa通道的影响

目的 观察巴戟天糖链(MOO)对ECV304细胞增殖中大电导钙激活钾通道(BKCa)通道的影响.方法 以人脐静脉内皮细胞株(ECV304细胞)为研究对象,制备缺氧/复氧模型,采用流式细胞仪检测MOO对ECV304细胞的增殖效应；在+ 60mV指令电压刺激下,应用全细胞膜片钳技术研究MOO对ECV304细胞增殖中BKCa通道电流密度的影响.结果 与模型组相比,MOO大剂量组(0.45 g·L-1)与麝香保心丸组均促进缺氧/复氧损伤后ECV304细胞增殖,差异有显著性(P＜0.05).全细胞膜片钳实验提示:MOO三个剂量组均能增加BKCa通道的电流密度,差异有显著性(P＜0.05),其中大剂量MOO组最为明显.结论 MOO可通过激活ECV304细胞BKCa通道保护受损细胞并促进其增殖.     

石菖蒲有效成分配伍对Aβ损伤PC12细胞的保护作用

目的观察石菖蒲有效成分β-细辛醚和丁香酚组合对β-淀粉样蛋白毒性损伤PC12细胞的保护作用,探讨中药有效成分配伍的优越性。方法观察给药后PC12细胞形态、细胞存活率、细胞内Ca2 浓度和NO的变化。结果β-细辛醚10μmol/L 丁香酚3μmol/L组合能有效减少细胞内Ca2 浓度,抑制NO的产生,提高细胞存活率。结论石菖蒲有效成分的配伍,能更好地发挥保护PC12细胞免受β淀粉样蛋白毒性损伤的作用。     

β-细辛醚对谷氨酸所致PC12细胞损伤的保护作用

目的研究β-细辛醚对谷氨酸所诱导的PC12细胞损伤的保护作用,并探讨其作用机理。方法用谷氨酸造成PC12细胞损伤模型,观察β-细辛醚对其细胞形态、损伤程度、存活力、钙离子浓度和细胞凋亡的影响。结果10mmol/L谷氨酸作用PC12细胞16h,出现明显损伤,凋亡率和死亡率升高,培养上清液中LDH含量增加;7.5、15、30μg/mLβ-细辛醚可有效改善谷氨酸损伤引起的PC12细胞形态改变,提高细胞存活力,减少乳酸脱氢酶渗漏;15、30μg/mLβ-细辛醚能明显降低谷氨酸引起的PC12细胞内钙离子浓度和细胞凋亡率。结论β-细辛醚对谷氨酸所致PC12细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能与钙拮抗作用有关。     

β-辛醚对ox-LDL损伤ECV304细胞内钙离子浓度影响的实验研究

目的:观察石菖蒲主要有效成分β-细辛醚对氧化低密度脂蛋白诱导损伤的人脐静脉血管内皮细胞内钙离子(Ca2+)的影响。方法:将细胞分为正常组,模型组,β-细辛醚高、中、低剂量组;采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)测定ECV304细胞内Ca2+浓度;酶标仪检测细胞活性。结果:ox-LDL可致ECV304细胞内Ca2+明显增高,细胞活力降低,与正常对照组比较有显著差异(P0.001);β-细辛醚能够不同程度的降低ox-LDL致损伤的ECV304细胞内Ca2+浓度,增强细胞活力,与模型组比较差异有统计学差异(P0.05～0.01)。结论:β-细辛醚能有效减轻ox-LDL对ECV304的损伤。     

锁阳乙酸乙酯提取物对Aβ_(25-35)诱导损伤PC12细胞的影响北大核心CSCD

目的:探讨锁阳乙酸乙酯提取物对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤的影响。方法:将48只大鼠随机分为空白组、锁阳乙酸乙酯提取物83mg/kg、8. 3mg/kg、0. 83mg/kg剂量组,采血制备空白血清和含药血清;以Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤造模,锁阳乙酸乙酯提取物含药血清处理PC12细胞后,通过MTT法检测细胞活力,Hoechst 33342染色、流式细胞术检测PC12细胞凋亡情况,用相应的试剂盒测定细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮合酶(NOS)和一氧化氮(NO)的活性及含量。结果:与空白血清组相比,锁阳乙酸乙酯提取物各组10%血清显著提高细胞存活率,使细胞凋亡率明显下降,显著提高了SOD活性,显著降低了MDA、NOS、NO含量。结论:锁阳乙酸乙酯提取物对Aβ_(25-35)致PC12细胞损伤具有保护作用,其保护机制与其增强SOD活性,降低MDA含量,降低NOS活性,减少NO生成,减轻氧化应激对细胞的损伤有关。     

基于蛋白质组学研究葛根素逆转Aβ1-42损伤SH-SY5Y细胞的机制

葛根素具有逆转β-淀粉样蛋白(amyloidβ peptide,Aβ)诱导的神经损伤、抑制神经元凋亡的抗阿尔茨海默病(Alzhei-mer's disease,AD)活性,然而,其潜在药效机制依然有待进一步的研究.AD的发生发展是由于体内多个代谢环节发生变化而导致平衡的破坏,而葛根素可能作用于多靶点、多代谢过程来达到治...     

大豆异黄酮对Aβ1-42诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的:探讨大豆异黄酮提取物对β淀粉样蛋白片段(Aβ1-42)诱导的PC12细胞损伤的保护作用。方法:从大豆中提取并纯化出总异黄酮,通过PC12细胞株体外培养的方法,给予不同剂量的大豆异黄酮预处理,并用10μmol/L Aβ1-42诱导的细胞损伤,检测经处理后细胞MTT及PC12细胞形态的变化。结果:大豆异黄酮可显著降低Aβ1-42诱导的PC12细胞损伤,显著提高细胞的MTT值(P<0.05),并改善细胞的形态,与雌二醇组比较没有显著差异(P>0.05)。结论:大豆异黄酮对Aβ1-42诱导的PC12细胞具有保护作用。     

阿魏酸对Aβ25-35诱导PC12细胞的保护机制研究

目的:观察阿魏酸对β-淀粉样蛋白25-35(βamyloid peptide25-35,Aβ25-35)诱导的阿尔兹海默病(Alzheimer disease,AD)模型细胞的抗氧化能力的影响,探讨当归防治AD的作用及机制。方法:用Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡,以不同浓度阿魏酸对抗干预,以MTT比色法观测阿魏酸对AD模型细胞增殖的保护作用,以比色法检测阿魏酸对AD模型细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)的影响。用RT-PCR法检测Apbb1,乙酰胆碱酯酶(Ache)基因的表达。结果:阿魏酸对损伤的PC12细胞的存活率有提高作用,阿魏酸在2 mmol/L时可明显降低模型细胞培养液中MDA、LDH含量,提高SOD活力,差异有统计学意义(P<0.01)。阿魏酸可下调Apbb1和Ache的mRNA表达,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:阿魏酸对Aβ25-35损伤的PC12细胞有保护作用,机制可能与提高细胞抗氧化能力相关,与下调Apbb1、Ache的mRNA表达量相关。     

复方丹参片对阿尔茨海默病转基因细胞模型Aβ表达的影响

目的研究复方丹参片对阿尔茨海默病（AD）转基因细胞模型β-淀粉样肽（Aβ）表达的影响。方法用前期试验已构建成功的转基因细胞模型做为AD转基因细胞模型,0．5、1、2,4倍复方丹参片饲养大鼠,取0．5、1、2,4倍浓度大鼠血清培养AD转基因细胞,并在24、48、72h用Westernblot方法检测转基因细胞Aβ的表达情况。结果24h,1倍剂量组量效关系最佳。结论复方丹参片能减少AD转基因细胞模型Aβ的表达。     

二陈汤对肺癌A549细胞中黏附分子-1和p38表达的影响

目的研究二陈汤对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导的肺癌A549细胞中细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和p38表达的影响。方法实验分为空白对照组、二陈汤对照组、TNF-α诱导组、二陈汤干预组、p38阻滞组,并给予相应干预。采用TNF-α诱导肺癌A549细胞产生ICAM-1高表达,以二陈汤含药血清处理ICAM-1高表达的肺癌A549细胞,采用Western blot免疫印迹法测定p38蛋白表达,以PCR法测定ICAM-1 mRNA水平,对二陈汤处理前后的ICAM-1表达水平及p38蛋白表达进行分析。结果二陈汤干预组肺癌A549细胞中血清ICAM-1表达及p38活性与TNF-α诱导组比较显著降低（P〈0.01）。结论在体外实验中,二陈汤有可能通过抑制p38的活性而实现对ICAM-1表达的调控,这可能为二陈汤控制肺癌转移的机制之一。     

清心开窍方对Aβ25-35所致大鼠原代神经元细胞损伤的保护作用

目的：了解清心开窍方对Aβ25-35所致大鼠原代神经细胞损伤的保护作用及其机制。方法：制备17d胎龄大鼠胚胎皮层神经细胞,分为正常对照组、模型组、清心开窍方低、中、高剂量组（6.25、12.5、25 mg·mL-1）。支持培养7 d,除正常组、模型组外,用不同剂量清心开窍方预处理24 h后,连同模型组和终浓度10 umol·L-1的Aβ25-35共同培养,造成神经细胞损伤模型。作用24 h后,以MTT值、培养液乳酸脱氢酶（LDH）水平作为细胞的损伤指标,以线粒体膜电位改变作为凋亡早期指标。结果：清心开窍方可以明显减少LDH漏出,增加MTT值,使低线粒体膜电位细胞的比例减少,抑制细胞凋亡,与模型组比较差异显著（P〈0.05）。结论：清心开窍方对Aβ25-35损伤的大鼠原代神经细胞具有保护作用,其机制可能与清心开窍方干预Aβ25-35诱导的细胞线粒体膜电位下降有关。     

黄芩素对Aβ诱导PC12细胞损伤的保护作用及机制研究

目的:研究黄芩素对β-淀粉样蛋白(amyloid β-protein, Aβ)诱导PC12细胞损伤的保护作用,探讨其作用机制。方法:采用MTT法检测各组细胞活性,筛选黄芩素安全有效浓度;将PC12细胞按随机数字表法分为空白组、Aβ组、黄芩素组、雌二醇组。接种24 h后,黄芩素组给予1×10 -6 mol/L...     

地黄饮子对Aβ诱导的PC12细胞SODmRNA表达影响的研究

目的 研究地黄饮子对β淀粉样蛋白（Aβ）诱导的PC12细胞SODmRNA表达的影响.方法 通过实时荧光定量PCR法检测各组PC12细胞SODmRNA的表达.结果 与空白组比较,模型组相对定量基因表达升高（P〈0.01）,地黄饮子含药脑脊液可升高AD模型细胞SODmRNA的表达（P〈0.05或P〈0.01）,中药低、中剂量组与安理申组比较差异无统计学意义,中药高剂量组与安理申组比较有统计学意义（P〈0.05）.结论 地黄饮子能提高Aβ诱导的PC12细胞SODmRNA的表达,提高对自由基的清除能力.     

加减清营汤对H2O2损伤的人脐静脉内皮细胞ECV304 VEGF表达的影响

目的:观察加减清营汤对H2O2损伤的人脐静脉内皮细胞(ECV304)VEGF表达的影响。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(ECV304),随机分成正常组、模型组、血清对照组、阳性药物对照组、加减清营汤含药血清组。加减清营汤含药血清组用加减清营汤含药血清进行干预。用380μmol/L H2O2损伤细胞,培养24h后收集细胞总蛋白,用Western-blotting法检测VEGF表达水平。结果:氧化应激状态下ECV304 VEGF的表达有所增加,加减清营汤含药血清则能显著提高VEGF的表达以有效应对氧化损伤。结论:加减清营汤能促进H2O2氧化损伤的血管内皮细胞的代偿性修复。