合肥地区输血后慢性肝炎HCV基因分型研究

目的：探讨合肥地区输血后慢性肝炎ＨＣＶ感染的基因型。方法：用逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）检测ＨＣＶＲＮＡ,对ＨＣＶＲＮＡ阳性标本用型特异引物ＰＣＲ进行ＨＣＶ分型。结果：６３ 例患者中检出ＨＣＶ　ＲＮＡ５４ 例,阳性率为８５．７％ ;其中Ⅱ型４６ 例（８５．２％）,Ⅲ型６ 例（１１．１％）,Ⅱ／Ⅲ型２ 例（３．７％）。结论：提示合肥地区ＨＣＶ感染大多数属Ⅱ型。     

石家庄地区新生儿尿巨细胞病毒感染的临床分析

采用聚合的酶链反应（ＰＣＲ）检测１０５例出生后３日内新生儿尿中巨细胞病毒,同时应用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测脐血特异性ＩｇＧ和ＩｇＭ抗体。结果,新生儿尿液ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性者３３例,阳性率３１．４％,脐血ＩｇＧ抗体阳性率１００％,ＩｇＭ挤体阳性率１．９％。结果表明ＰＣＲ技术检测新生儿尿液ＨＣＭＶ－ＤＮＡ有利于ＨＣＭＶ先天性感染的早期诊断,早预防、早阻断。有利于更好地实行计划生育,有利于优生     

套式PCR和原位杂交技术检测肝病患者单个核细胞？…

目的 了解慢性乙型肝炎（中度）和原发性肝癌（ＨＢｓＡｇ阳性）患者ＰＢＭＣ内ＴＴＶ ＤＮＡ存在情况。方法 采用套式ＰＣＲ以及原位杂交技术检测外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）内ＴＴＶ ＤＮＡ。结果 套式ＰＣＲＳＷＩＭ２６例慢性乙型肝炎（中度）患者ＰＢＭＣ内ＴＴＶ ＤＮＡ阳性７例。阳性率２６．９％,非常显著高于健康对照（Ｘ＾１２＝１４．３,Ｐ〈０．００１）;２１例原发性肝癌（ＨＢｓＡｇ阳性）虱ＰＢＭＣ内ＴＴ     

用聚合酶链反应行巨细胞病毒感染产前诊断的研究

对５０例正常育龄妇女、６３例正常孕妇及２０例有异常孕产史的孕妇进行了血清巨细胞病毒抗体ＣＭＶ－ＩｇＧ、ＣＭＶ－ＩｇＭ的检测及聚合酶链反应（ＰＣＲ）的检测，并对正常孕妇及异常孕产史孕妇进行绒毛ＣＭＶＰＣＲ检测。结果正常孕妇血清ＣＭＶＰＣＲ阳性率为３１．７５％，远远高于正常非孕妇的血清ＣＭＶＰＣＲ的阳性率１６％。正常孕妇人流的绒毛ＣＭＶＰＣＲ阳性率为２０．６３％，明显低于有异常孕产史孕妇绒毛ＰＣＲ的阳性率４５％，且异常孕产史孕妇血清ＣＭＶＰＣＲ阳性率明显高于正常孕妇。另对血清ＰＣＲ阳性的１２例早孕时抽取绒毛测ＰＣＲ，阳性率为７５％（９／１２），提示宫内感染率相当高。对正常和异常孕产史孕妇血清ＩｇＭ与ＰＣＲ比较，后者敏感性远超过前者，用ＰＣＲ方法对早孕期ＣＭＶ感染能比较正确地早期作出宫内感染的诊断。     

丙型肝炎病毒基因型与血清HCV RNA含量关系及与干扰素应答的研究

目的探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因型与血清ＨＣＶＲＮＡ含量的关系及其对干扰素应答的影响。方法应用定量荧光ＰＣＲ（Ａｍｐｌｉｓｅｎｓｏｒ－ＰＣＲ）技术检测了１３５例不同基因型ＨＣＶ感染的慢性丙型肝炎患者血清ＨＣＶＲＮＡ含量，另对其中７７例进行干扰素治疗并随访１２个月以上。结果ＨＣＶ－Ⅱ型感染血清ＨＣＶＲＮＡ水平（１０７．８±３．４拷贝／ｍｌ）显著高于ＨＣＶ－Ⅲ型感染（１０６．３±２．５拷贝／ｍｌ）（Ｐ＜０．０１），Ⅲ型感染的应答率（７／１３，５３．８％）显著高于Ⅱ型感染（２０／６４，３１．３％）（Ｐ＜０．０５）。应答组治疗前血清ＨＣＶＲＮＡ含量（１０６．８±２．７拷贝／ｍｌ）显著低于无应答组（１０８．３±３．２拷贝／ｍｌ）（Ｐ＜０．０１）。ＨＣＶＲＮＡ含量低于１０６．５拷贝／ｍｌ者，无论何种型别ＨＣＶ感染均应答较好，而ＨＣＶＲＮＡ高于１０８．０拷贝／ｍｌ者则应答极差。结论ＨＣＶ基因型及病毒血症水平是预测干扰素疗效的重要因素，且后者比前者意义更大。Ⅱ型感染病毒血症水平较高可能是影响其疗效的原因之一。     

应用PCR法检测新生儿肝炎综合征患者HCMV－DNA

应用ＰＣＲ法检测新生儿肝炎综合征患者ＨＣＭＶ－ＤＮＡ长春市儿童医院应用ＰＣＲ检测３０例临床诊断为新生儿肝炎综合征（ＮＨＳ）患者和１４例正常新生儿尿中人巨细胞病毒ＤＮＡ（ＨＣＭＶ－ＤＮＡ）。结果阳性率分别为６６．７％和１４．２９％，两者差异显著。ＨＣＭ...     

石家庄地区异常孕产史育龄妇女巨细胞病毒与弓虫感染研究报告

为了解有异常孕产史妇女（异常组），宫内人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）和弓形虫（ＴＯＸ）的感染，本文采用ＰＣＲ分别对１４５例异常组妇女的宫颈分泌物进行了ＨＣＭＶ１０８例和ＴＯＸ３７例的检测，同时对２７例无异常孕产史妇女（对照组）检测了ＨＣＭＶ和ＴＯＸ结果为异常组ＨＣＭＶ和ＴＯＸ的阳性率分别为４４．４４％和３２．４％，对照组为３．７％和０％，经统计学分析两组间有显著性差异（Ｐ〈０．０１），结果表明有异常孕产     

原位PCR技术检测石蜡包埋脑组织中人巨细胞病毒DNA

应用原位聚合酶链反应（ＩＳＰＣＲ）技术检测了２５例尸检畸形胎儿石蜡包埋脑组织中人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＤＮＡ，并与普通ＰＣＲ及原位杂交（ＩＳＨ）进行了比较。ＩＳＰＣＲ、ＰＣＲ及ＩＳＨ检测阳性率分别为４４％，３６％及２０％。与ＩＳＨ相比较，ＩＳＰＣＲ不仅检出阳性率高，而且信号强度增强。研究结果提示，ＩＳ－ＰＣＲ是诊断ＨＣＭＶ感染的快速、敏感、特异的实用方法。     

巨细胞病毒宫内感染的诊断及对胎儿的影响

采用地高辛探针斑点杂交技术和聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，对５１例人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）血清学抗体ＩｇＭ阳性孕妇的羊水、脐血和产后两周内的新生儿尿液，进行ＨＣＭＶＤＮＡ检测。同时与酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测脐血、羊水中ＨＣＭＶ－ＩｇＭ的结果相比较。结果，地高辛探针斑点杂交检测ＨＣＭＶ－ＤＮＡ的阳性率分别为：羊水２１．５７％，脐血３３．３３％，新生儿尿液２７．４５％。ＰＣＲ检测ＨＣＭＶ－ＤＮＡ的阳性率分别为：羊水２９．４１％，脐血４３．１４％，新生儿尿液３Ｓ，２９％。羊水ＨＣＭＶ－ＩｇＭ阳性率为１１．７６％，脐血ＨＣＭＶ－ＩｇＭ阳性率为２３．５３％。脐血ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性的新生儿平均出生体重明显低于脐血ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阴性的新生儿，而脐血ＨＤＷ－ＤＮＡ阳性的新生儿肝功能异常、血小板减少以及低Ａｐｇａｒ评分的发生率明显高于脐血ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阴性的新生儿。结果表明：采用ＥＲ技术检测羊水、脐血或产后两周内新生儿尿液ＨＣＭＶＤＮＡ有助于ＨＣＭＶ官内感染的早期诊断，便于临床早期干预，ＨＣＭＶ官内感染严重影响胎儿的生长发育，可造成胎儿肝功能异常、血小板减少和新生儿窒息的发生。     

用聚合酶链反应和放射免疫法检测肾移植术后人巨细胞病毒感染

将５０例肾移植术后发热病人的尿标本接种细胞，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测第１代细胞培养上清中的人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＤＮＡ。结果１９例为ＨＣＭＶＤＮＡ阳性，阳性率为３８．００％，用固相放射免疫法（ＲＩＡ）检测ＨＣＭＶ抗原，阳性的有１５例，阳性率为２７．７７％。将５４倒尿标本接种人胎肺二倍体单层细胞，分离到６株ＨＣＭＶ。用ＥＬＩＳＡ检测６５例病人单份血清的ＨＣＭＶ－ＩｇＭ抗体，阳性的有１７例，检测４５例病人双份血清ＩｇＧ抗体，１１例的第２份血清的ＨＣＭＶ－ＩｇＧ抗体滴度比第１份有４倍以上升高。上述结果表明，ＰＣＲ检测结果与ＲＩＡ的检测结果基本符合；病人血清抗体的阳性率与ＰＣＲ检测的阳性率基本符合。     

应用聚合酶链反应对有异常妊娠史妇女人巨细胞病毒感染的探讨

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对于有异常妊娠史妇女６０例，检测了血液、尿液和宫颈分泌物中的人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＤＮＡ；用ＥＬＩＳＡ检测血清中的ＨＣＭＶ－ＩｇＭ抗体。结果表明：有死胎、畸胎妊娠史的妇女，血、尿和宫颈分泌物中的ＨＣＭＶ－ＤＮＡ以及ＨＣＭＶ－ＩｇＭ阳性率分别为４２．８５％（１２／２８）、２８．５７％（８／２８）、５３．５７％（１５／２８）和２５．００％（７／２８）；习惯性流产史的妇女分别为２１．８７％（７／３２）、１２．５％（４／３２）、３１．２５％（１０／３２）和１５．６２（５／３２）；正常对照为１４．２８％（５／３５）、１１．４２％（４／３５）、１７．１４％（６／３５）和６．７１％（２／３５）。统计表明：畸胎、死胎组的血、尿和宫颈分泌物中的ＨＣＭＶ－ＤＮＡ明显高于对照Ｐ＜０．０５，有显著差异。习惯性流产组的四项指标与对照比较均无差异Ｐ＞０．０５。结果提示，血清中的ＨＣＭＶ－ＩｇＭ的阳性率低于血液和宫颈分泌物中的阳性率，而接近于尿中的结果。不同部位的标本，以宫颈分泌物的阳性率最高，其次是血液，再其次是尿液。     

丙型肝炎病毒三种不同分型方法的比较

分别应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）产物酶切分型法（酶切法）、型特异引物分型ＰＣＲ法及血清丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）型特异性抗体酶联免疫测定法（ＥＩＡ），对１２０例抗－ＨＣＶ阳性患者血清进行ＨＣＶ分型检测，比较其分型结果。结果显示酶切法与ＰＣＲ法均成功地对９６例（８０％）进行分型，其中Ⅱ型８６例（８９．６％），Ⅲ型８例（８．３％），Ⅱ／Ⅲ型混合感染２例（２．１％），且两种方法的结果完全一致。ＥＩＡ法检测出型特异性抗体７８例（６５％），其中血清１型（相当于基因Ⅰ、Ⅱ型）６８例（８７．２％），血清２型（相当于基因Ⅲ、Ⅳ）６例（７．７％），血清１、２型双阳性者４例（５．１％）。对三种方法均阳性的６６例的分型结果进行比较，ＥＩＡ法与酶切法和ＰＣＲ法的符合率达９７．０％。表明三种分型方法的结果高度一致。     

TORCH感染与自然流产相关性研究

应用ＥＬＩＳＡ法,对３１２名正常育龄妇女和１９７名有自然流产史妇女,和应用ＰＣＲ技术,对１４例流产组织同时进行ＴＯＲＣＨ感染检测。有自然流产史妇女活动性感染率分别为ＣＭＶ２３．９６％、ＲＶ１６．４３％、Ｔｏｘ１１．５４％、ＨＳＶⅡ５．３６％。明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）。１４例流产组织中ＴＯＲＣＨ－ＤＮＡ阳性１１例,感染率７８．５７％（１１／１４）,其中两种以上病原体感染７例,占感染总数的６３．６４％（７／１１）。表明：妇女ＴＯＲＣＨ感染与自然流产有相关性。孕早期活动性感染和两种以上病原体的混合感染对胎儿影响非常显著,造成现症流产。     

PCR技术和血清抗体检测妊娠期巨细胞病毒感染价值的比较

将ＰＣＲ技术检测孕妇血白细胞中ＨＣＭＶ－ＤＮＡ和ＥＬＩＳＡ检测孕妇血清中ＨＣＭＶ特生ＩｇＭ和ＩｇＧ进行对比研究。结果：ＤＮＡＰＣＲ阳性率为４２．００％，与ＩｇＭ阳性率２５．５８％比较，Ｐ〈０．０５，与ＩｇＧ阳性率６２．７９％比较，Ｐ〈０．０１，说明ＤＮＡＰＣＲ较ＩｇＭ检测敏感，但不如ＩｇＧ。结论：ＤＮＡＰＣＲ更适用于论断先天性ＨＣＭＶ感染和一部分检测不出ＩｇＭ的ＣＭＶ复发感染者，对妊娠期ＣＭＶ感染     

巨细胞病毒感染与可溶性白细胞介素2受体的关系

应用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）对１０４例育龄妇女的血清进行了巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＩｇＧ、ＩｇＭ抗体的检测，同时用ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法测定了不同感染状态下血清中可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）的水平，并将ｓＩＬ－２Ｒ水平与未感染ＨＣＭＶ的正常育龄妇女进行了比较。结果，育龄妇女中抗－ＨＣＭＶＩｇＧ的阳性率为８９．４％，ＩｇＭ的阳性率为９．６％，感染ＨＣＭＶ的妇女血清中ｓＩＬ－２Ｒ水平均大于未感染的对照组（１７８．１±５７．３Ｕ／ｍｌ），Ｐ＜０．０５，其中ＩｇＭ阳性者和ＩｇＭ、ＩｇＧ同时阳性者血清中ｓＩＬ－２Ｒ水平最高，分别为９１０±４６５．６Ｕ／ｍｌ和９０５±３４７．８Ｕ／ｍｌ，两者间的差异无显著性意义（Ｐ＞０．０５），但均大于仅抗－ＨＣＭＶＩｇＧ阳性者（４４６．８±１５８．９Ｕ／ｍｌ），Ｐ均＜０．０５。表明，ＨＣＭＶ感染可致ｓＩＬ－２Ｒ水平升高，并且活动性感染者上升明显。提示：ｓＩＬ－２Ｒ可能参与了ＨＣＭＶ的免疫致病机制。     

HCV RNA的PCR检测研究与分析

应用ＰＣＲ技术检测ＨＣＶ ＲＮＡ，输血后肝炎且抗－Ｃ１００－３阳性者阳性率为９５％（１９／２０）；输血后肝炎而抗－Ｃ１００－３阴性者阳性率为８６．７％（１３／１５）；非输血后肝炎而抗－Ｃ１００－３阳性者阳性率仅２０％（１／５）；非输血后肝炎而抗－Ｃ１００－３阴性者阳性率仅１８．２％（２／１１）。对克隆的５＇－ＮＣ端片段的核苷酸序列分析显示，中国株与已公布的美、日、台湾等序列的同源性都很高，可达９８     

婴儿持续性黄疸与巨细胞病毒PCR检测研究

本文应用ＰＣＲ技术对持续性黄疸婴儿进行巨细胞病毒检测，结果６８例患儿血清中巨细胞病毒（ＣＭＶ）３８例阳性，阳性率为５５．９％；尿中ＣＭＶ４５例阳性，阳性率为６６．２％。ＰＣＲ与病毒分离及其它血清学方法相比，既快速又敏感，尿标本用于ＰＣＲ检测ＣＭＶ－ＤＮＡ取材及处理简便，且较血标本检出率为高［１］。     

乙型肝炎病毒C基因启动子及前C变异的动态研究

目的明确乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）Ｃ基因启动子（ＢＣＰ）与前Ｃ变异株在慢性乙型肝炎患者中的动态消长,及与ＨＢｅＡｇ血清学状态的关系。方法对３２例慢性乙型肝炎患者的１０５份系列血清进行错配聚合酶链反应（ＰＣＲ）－限制性片段长度多态性分析,并对其中１５例患者系列血清标本的ＰＣＲ产物进行直接测序。结果ＢＣＰ和Ａ８３变异株感染率均明显增高（６２．５％＞４６．９％;３１．３％＞１２．５％）;ＢＰＣ变异株更多地（１４／１６）表现为优势积累,且先于ＨＢｅＡｇ血清阴转;ＢＣＰ野株／变异株比例变化影响ＨＢｅＡｇ血清学的稳定性。结论两种类型的变异株在炎症活动中均具有选择优势,最终造成ＨＢｅＡｇ（－）的ＨＢＶ感染;可能与ＨＢＶ感染之持续有关。     

用聚合酶链反应检测人肝细胞癌乙型肝炎病毒DNA和丙型肝炎病毒RNA

为研究乙型肝炎病毒ＤＮＡ（ＨＢＶＤＮＡ）和丙型肝炎病毒ＲＮＡ（ＨＣＶＤＮＡ）与肝细胞癌的关系，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和巢式ＰＣＲ（ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ）分别检测４２例肝肿瘤组织中ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ。结果：１例胆管细胞癌组织ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ均阳性，１例胆管囊腺瘤ＨＢＶＤＮＡ阳性。４０例肝细胞癌组织中，单纯ＨＢＶＤＮＡ阳性１９例，单纯ＨＣＶＲＮＡ阳性３例，二者均阳性１０例。ＨＢＶＤＮＡ阳性率７２．５％，ＨＣＶＲＮＡ阳性率３２．５％。ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ感染与肝癌组织学分型无关；且肝细胞癌中ＨＣＶ感染与ＨＢＶ未见相关。结果提示，我国ＨＢＶ感染仍是引起肝细胞癌的主要原因。但由于肝细胞癌患者中ＨＣＶ的感染率也较高，且有上升趋势，因此ＨＣＶ可能也是肝细胞癌发生的重要原因之一。     

成都地区孕妇和新生儿TORCH感染的检测与分析

采用ＥＬＩＳＡ检测孕妇血清及新生儿脐血ＴＯＲＣＨ特异性ＩｇＧ、ＩｇＭ抗体，同时采用ＰＣＲ检测ＣＭＶ－ＩｇＭ阳性孕妇的羊水及产后乳汁ＣＭＶ－ＤＮＡ，以了解孕妇及新生儿ＴＯＲＣＨ感染情况。结果显示ＴＯ、ＲＶ、ＣＭＶ、ＨＳＶ－１和ＨＳＶ－２检出率分别为４１．４８％、８９．３６％、９５．７４％、３９．３６％和２２．３４％，其活动性感染分别为４．２５％、３．１９％、２４．４６％、１１．７０％和５．３１％。新生儿脐血检出率为３８．２０％、８３．１４％、９３．２５％、３３．７０％和２１．３４％，宫内感染率分别为１．１２％、１．１２％、６．７４％、２．２４％和０。ＣＭＶ感染较为普遍，血清ＣＭＶ－ＩｇＭ阳性孕妇羊水ＣＭＶ－ＤＮＡ检出率为４５．４６％，远高于脐血ＩｇＭ，ＣＭＶ－ＤＮＡ阳性者胎儿、新生儿异常率较高。两种或两种以上因素感染胎儿更易受损