锌对原代培养海马神经元锌转运体1和金属硫蛋白mRNA表达的影响

目的:观察不同浓度锌对锌转运体1(zinc transporter 1, ZnT-1)mRNA和金属硫蛋白(metallothionein, MT)1、2 mRNA表达的影响,旨在探讨神经元锌内稳态的可能机制.方法:采用锥虫蓝染色法检测不同浓度锌(0、50、100、125、150、175、200 μmol/L)对原代培养海马神经元存活率的影响;用实时荧光定量RT-PCR法分别检测不同浓度锌(0、50、75、100、125、150 μmol/L)对ZnT-1、MT1、MT2的mRNA表达的影响,检测100 μmol/L锌暴露不同时间点(0、2、4、6、8 h)对ZnT-1、MT1、MT2 的mRNA表达的影响.结果:培养基锌浓度大于125 μmol/L时,海马神经元存活率明显下降;锌浓度大于75 μmol/L时,ZnT-1 mRNA 表达成线性上升(P<0.05),MT mRNA表达同样明显上升(P<0.05),但在100 μmol/L后进入平台期;在100 μmol/L锌浓度条件下,ZnT-1 mRNA表达在2 h内达到峰值,MT mRNA在6 h达到其峰值.结论:虽然神经元可通过增加ZnT-1和MT的表达来应对高锌冲击,但两者的保护作用不同,ZnT-1外排作用发生在前且具有持续性,MT的络合作用发生在后且会饱和.     

低锌饮食对大鼠二次打击惊厥模型远期惊厥阈和锌转运体3的影响

目的: 探讨低锌饮食对大鼠二次打击惊厥模型远期惊厥阈、死亡率和锌转运体3（ZnT3）的影响。方法: 60只27日龄（P27）健康雄性SD大鼠随机分为4组,惊厥组和惊厥低锌饮食组在P27腹腔注射氯化锂、在P28腹腔注射匹罗卡品致惊厥持续状态模型,观察大鼠惊厥发作情况,将达到Ⅳ级及以上痫性发作的视为造模成功。对照组和低锌饮食组在相同时间腹腔注射生理盐水。致惊厥前2天（即P27、P28）4组均予常锌饮食（锌 44 mg/kg）喂养,致惊厥后（即P28后）对照组和惊厥组继续予常锌饮食喂养,而低锌饮食组和惊厥低锌饮食组予低锌饮食（锌 2.7 mg/kg）喂养。2周后予青霉素二次打击,记录大鼠首次出现惊厥发作的时间（惊厥阈）、死亡时间及死亡率,观察时间为1 h。观察结束后取各组大鼠皮层组织,蛋白质印迹法检测ZnT3的表达。结果： 大鼠的持续惊厥模型诱导成功率为72.5%（29/40）,死亡率为24.1%（7/29）。惊厥第3天、5天、7天惊厥组、惊厥低锌饮食组体重明显低于对照组（P＜0.05）;惊厥第9天惊厥低锌饮食组体重明显低于对照组（P＜0.05）。惊厥组和惊厥低锌饮食组血清锌浓度均明显低于对照组（P＜0.05）。低锌饮食组、惊厥组、惊厥低锌饮食组惊厥阈明显低于对照组（P＜0.05）,惊厥低锌饮食组明显低于低锌饮食组和惊厥组（P＜0.05）。惊厥低锌饮食组生存时间明显低于对照组和低锌饮食组（χ²分别为9.994、6.707,均P＜0.05）。对照组、低锌饮食组、惊厥组和惊厥低锌饮食组存活率分别为80%、60%、50%、20%,无统计学差异（P=0.073）。低锌饮食组、惊厥组及惊厥低锌饮食组ZnT3蛋白表达明显低于对照组（P＜0.05）,惊厥低锌饮食组明显低于惊厥组和低锌饮食组（P＜0.05）。 结论： 惊厥可致大鼠血清锌浓度降低,缺锌膳食能增加惊厥后再次打击时惊厥发作的易感性,二者互为增强效应,这种现象可能是通过下调ZnT3的表达,破坏大脑锌稳态而导致。     

牛磺酸营养干预下缺氧大鼠视网膜中葡萄糖转运蛋白1的表达

目的 观察高原缺氧条件下大鼠视网膜中葡萄糖转运蛋白1(GLUT-1)的变化,探讨牛磺酸对视网膜缺氧适应的影响.方法 96只SD大鼠随机分为6组,对照组(C)、牛磺酸组(T)、4 500 m缺氧组(45H)、4 500 m缺氧 牛磺酸组(45HT)、5 500 m缺氧组(55H)和5 500 m缺氧 牛磺酸组(55HT),分别以基础饲料和添加了2.4%牛磺酸的饲料喂养1周,营养干预后C组、T组继续在平原饲养,45H组、45HT组和55H组、55HT组放入低压氧舱分别模拟4 500 m和5 500 m高度的高原缺氧条件.在处理0、1、2、3 d后取视网膜,提取总RNA和总蛋白,应用RT-PCR和Western blot方法检测视网膜GLUT-1 mRNA和蛋白表达.结果 缺氧第1天视网膜中GLUT-1 mRNA与蛋白的表达显著降低(P＜0.05).缺氧第2天 mRNA与蛋白的表达开始回升,第3天 mRNA的表达恢复正常水平,蛋白的表达高于对照,牛磺酸处理后表达量均比对应的缺氧组高.结论 高原缺氧条件下,牛磺酸能通过上调GLUT-1的表达促进视网膜缺氧适应性调节机制的建立.     

高磷饮食对慢性肾衰竭大鼠肾脏Ⅱa型Na-Pi转运体的影响

目的:研究高磷饮食对慢性肾衰竭(CRF)大鼠肾脏Ⅱa型钠-磷协同转运体(NaPi鄄2)mRNA表达的影响。方法:24只SD大鼠,随机分为CRF高磷饮食组、CRF低磷饮食组、假手术高磷饮食组与假手术低磷饮食组,用5/6肾大部切除术构建CRF大鼠模型,分别予高磷(含磷1.2%)或低磷(含磷0.2%)饮食,测定2、7、14天血离子钙(iCa)、磷(P)、全段甲状旁腺激素(iPTH);第14天测血1,25鄄(OH)2D3,RT鄄PCR法检测NaPi鄄2mRNA表达。结果:2周后CRF模型中高磷饮食组较低磷组肾脏NaPi鄄2mRNA表达明显减低(P<0.01),血P明显增高(P<0.05),iPTH明显增高(P<0.01),血iCa及1,25鄄(OH)2D3两组无明显差异(P>0.05)。假手术组中高磷饮食组较低磷组NaPi鄄2mRNA表达减低(P<0.05),血iCa、P、iPTH及1,25鄄(OH)2D3均无变化(P>0.05)。CRF组较假手术组NaPi鄄2mRNA表达明显减少(P<0.05)。结论:高磷饮食引起CRF大鼠NaPi鄄2mRNA表达减少,高磷血症可能是iPTH增高、不受钙和1,25鄄(OH)2D3影响的独立因素。     

膳食锌缺乏对阿尔茨海默病模型鼠大脑内锌转运体mRNA表达的影响

目的研究不同膳食锌含量对成年APPswe/PsEN1dE9双转基因阿尔茨海默病模型小鼠大脑内锌相关转运体mRNA表达的影响。方法成年APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠[J004462 B6C3-T9(APPswe,PSEN1dE9)85D60/J]33只,随机分为膳食锌缺乏组1(ZD1)、膳食锌缺乏组2(ZD2)、膳食补锌组(ZS)和阳性对照组(PC),及10只正常对照组(NC),应用RT-PCR方法检测小鼠大脑中ZnT-1、MT1和ZIP1 mRNA的表达;原子吸收分光光度法测定血清锌浓度。结果 PC中ZnT-1表达较NC有显著性升高(P<0.01),MT1和ZIP1在PC和NC中表达无显著差异。缺锌喂养后,ZnT-1的表达与PC组比有显著下降(P<0.01),下降随缺锌时间的延长而加剧,补锌后ZnT-1表达有所上升,存在着时间-反应关系和剂量-反应关系。缺锌喂养50d后,大脑中MT1与ZIP1 mRNA表达并无明显改变,但持续缺锌喂养至80d后,mRNA表达均明显下降(P<0.01),补锌喂养可恢复至缺锌前水平。结论成年APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠大脑内存在着ZnT-1的异常高表达,膳食锌缺乏可下调大脑内ZnT-1、MT1、ZIP1的mRNA表达。     

青光安Ⅱ号对慢性高眼压模型大鼠视网膜GSK-3β及β-catenin mRNA表达影响

目的观察青光安Ⅱ号方对慢性高眼压模型大鼠视网膜GSK-3β及β-catenin mRNA表达影响。方法将40只(80眼)雄性SD大鼠随机分成6组,分别为:空白组(A),模型组(B)、青光安Ⅱ号方低剂量组(C)、青光安Ⅱ号方中剂量组(D)、青光安Ⅱ号方高剂量组(E)、益脉康分散片组(F)。将B、C、D、E、F组大鼠采用烧灼巩膜表浅静脉法建立大鼠慢性高眼压模型。模型大鼠维持高眼压状态2月后开始干预,干预后2周、4周分别用q PCR检测大鼠视网膜GSK-3β及β-catenin mRNA的相对表达量。结果 2周后,与B组比较,各组GSK-3βmRNA表达降低而β-catenin mRNA表达升高,差异有统计学意义(P0.05)。4周后,与F组比较,C、D、E组GSK-3βmRNA降低,β-catenin mRNA表达升高,差异有统计学意义(P0.05)。与E组比较,C、D组GSK-3βmRNA降低而β-catenin mRNA表达升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论青光安Ⅱ号方及益脉康分散片均能抑制GSK-3βmRNA的表达,并增加β-catenin mRNA的相对表达量,对慢性高眼压大鼠视网膜神经节细胞有一定的保护作用;初步观察表明复方中药青光安Ⅱ号方在对慢性高眼压大鼠视神经的保护中,效果优于益脉康分散片,且以青光安Ⅱ号方高剂量最优。     

1,25二羟基维生素D_3对大鼠脾CD4~+CD25~+调节性T细胞及Foxp3基因表达的影响

目的:探究1,25二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]对大鼠脾CD4 CD25 调节性T细胞(Treg)及其特异性转录因子Foxp3基因表达的影响.方法:近交系雄性Lewis大鼠,随机分成对照组和3个剂量的VitD3组: 0.125 μg组,0.25 μg组和1 μg组,每组30只;灌胃给药,3次/周,共2周后对照组给予赋形剂;各组随机抽取20只大鼠,于第15 d腹腔注射脂多糖(LPS)(10 mg/kg),随机选择其中10只于6 h后切取脾,其余10只观察注射LPS后96 h大鼠的病死率,同时留取未注射LPS大鼠的脾;流式细胞仪检测脾CD4 CD25 Treg数量变化,RT-PCR检测脾Foxp3 mRNA表达.结果:1,25(OH)2D3明显上调大鼠脾CD4 CD25 Treg的数量及特异性转录因子Foxp3 mRNA的表达;1,25(OH)2D3能保护大鼠抵抗LPS的攻击.结论:1,25(OH)2D3对大鼠脾CD4 CD25 调节性T细胞及特异性转录因子Foxp3 mRNA的表达有显著影响.1,25(OH)2D3保护大鼠抵抗LPS攻击可能与其促进CD4 CD25 Treg的发育和功能有关.     

锌对大鼠生长板软骨细胞ZnT-7表达的影响

目的 研究锌对大鼠生长板软骨细胞锌转移体-7(ZnT-7)表达的影响及其规律.方法 原代培养Wistar大鼠肋生长板软骨细胞,不同浓度的锌螯合剂TPEN分别处理培养生长板软骨细胞12 h.免疫组化检测生长板软骨细胞特异性Ⅱ型胶原表达.免疫荧光技术对ZnT-7进行定位研究,实时RT-PCR和Western blot检测znT-7表达.结果 Ⅱ型胶原免疫组化检测阳性.ZnT-7在生长板软骨细胞中定位于高尔基体上;Western blot和RT-PCR结果显示;5 μmol/L(TPEN)组与对照组相比略有增高,而10 μmol/L、20 μmol/L组与对照组相比逐渐降低.结论 ZnT-7定位于高尔基体上,同时在缺锌的条件下其对锌离子稳定有一定的代偿作用.     

托吡酯对戊四氮点燃大鼠海马生长相关蛋白-43 mRNA表达的影响

目的:观察托吡酯对戊四氮点燃大鼠海马结构内生长相关蛋白(GAP)-43mRNA表达的影响.方法:健康成年雄性SD大鼠40只,随机分为4组,每组10只.I组大鼠胃内注入生理盐水(10 mL/kg)后1 h腹腔注射10 g/L 戊四氮(35 mg/kg);Ⅱ组和Ⅲ组大鼠腹腔注射戊四氮(剂量同I组)前1 h分别按100 mg/kg和40 mg/kg胃内注入10 g/L 托吡酯生理盐水溶液;Ⅳ组大鼠按10 mL/kg和3.5 mL/kg分别胃内注入和腹腔注射生理盐水,间隔1 h.各组选取2个研究时间点,第1个时间点为I组大鼠疒间性发作达到Ⅲ级,第2个时间点为Ⅰ组大鼠疒间性发作达到Ⅴ级,每个时间点各组大鼠为5只.应用RT-PCR半定量检测不同时间点各组大鼠齿状回、海马CA3区及CA1区GAP-43 mRNA的表达.结果:2周和4周时I 组大鼠疒间性发作分别达到Ⅲ级和V级.GAP-43 mRNA RT-PCR 产物经溴乙啶显色后显示出256 bp和385 bp 2个预期的条带.在同一时间点,Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组大鼠齿状回及CA3区的GAP-43 mRNA表达强于Ⅳ组,差异有统计学意义(P＜0.05);各组在CA1区GAP-43 mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05);Ⅱ组和Ⅲ组大鼠齿状回和CA3区的GAP-43 mRNA表达水平较Ⅰ组降低,差异有统计学意义(P＜0.05),而Ⅱ组和Ⅲ组大鼠之间GAP-43 mRNA表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).与2周时相比,4周时Ⅰ组大鼠GAP-43 mRNA表达水平进一步增强,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:戊四氮点燃大鼠海马GAP-43 mRNA表达增强,表明突触重建参与了癫(癎)发生的病理过程;托吡酯可抑制GAP-43的表达,可能是托吡酯抗癫(癎)作用的机制之一.     

N-硝基-L-精氨酸甲酯诱导的高血压大鼠胸主动脉血管紧张素转换酶2和血管紧张素转换酶的表达

目的 通过观察高血压大鼠胸主动脉组织中血管紧张素转换酶(ACE)、ACE2活性及mRNA表达的改变,探讨ACE2及其与ACE相互平衡对高血压的调节作用.方法 40只血压正常且年龄匹配的SD大鼠分为模型组和对照组,每组20只.模型组大鼠每100 mL饮水中加入Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)50 mg,每日摄入L-NAME 50 mg/kg,制作高血压模型;按照L-NAME的摄入时间分为第2、4、8、12周4个亚组(n=5);对照组设立相同的亚组,于相应时间分别摄入相同体积的清水.采用总活性比色法检测胸主动脉ACE和ACE2活性;RT-PCR技术检测胸主动脉ACE和ACE2 mRNA的表达.结果 模型组大鼠在服用L-NAME后第4、8、12周,血压均较相应对照组显著升高(P＜0.05);而对照组各亚组入组前后血压差异无统计学意义(P＞0.05).服用L-NAME后第4、8、12周,模型组大鼠的胸主动脉组织ACE活性和mRNA相对表达量均较相应对照组显著升高(P＜0.05),ACE2活性及其mRNA相对表达量均较对照组显著降低(P＜0.05);对照组各亚组间ACE、ACE2活性和mRNA相对表达量比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 通过抑制NO合成所导致的高血压的发病过程中,胸主动脉组织ACE2、ACE的mRNA表达及活性与血压升高有关.     

孕期至幼年期低水平铅暴露仔鼠海马锌离子平衡的变化及其发育期海马神经元的损伤

目的:探讨孕期至幼年期铅暴露对仔鼠发育期海马神经元的损伤及其与Zn2+平衡的相关机制。方法：25只母鼠随机分为对照组母鼠（n=10）和铅暴露组母鼠（n=15）。从受孕当天开始至仔鼠生后7、14和21　d时间点分别将对照组和铅暴露组仔鼠随机各分为3组(P7、P14和P21组),每小组仔鼠8只,铅暴露组母鼠按上述时间段给予0.2%醋酸铅饮水,对照组母鼠正常饮水。在仔鼠生后上述时间点分别测定仔鼠血铅和脑铅含量,Timm’s染色观察海马苔藓纤维(MF),并采用免疫组织化学法检测锌离子转运体-1（ZnT-1）的表达水平。结果：铅暴露组仔鼠血铅和脑铅含量显著高于对照组（P<0.01）。铅暴露组仔鼠海马CA2区、CA3区出现大量变性细胞,且细胞排列松散,细胞层数减少。Timm’s染色,正常组仔鼠生后21　d开始出现MF发芽,其吸光度(A)值为0.135　0±0.024　3;铅暴露组仔鼠生后21　d MF发芽的A值为0.096 7±0.024 2,较正常组显著降低(P<0.01)。铅暴露组生后7 d仔鼠海马ZnT-1表达水平显著低于对照组（P<0.01）,生后14和21 d与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论：孕期至幼年期低水平铅暴露可能导致仔鼠海马神经元Zn2+失衡和海马神经元胞内Zn2+水平降低,后者可能参与铅暴露导致发育期神经损伤。     

APP/PS1转基因小鼠大脑内锌转运蛋白3的表达

目的研究锌转运蛋白3(ZnT-3)在APP/PS1转基因小鼠大脑皮质及海马内的分布和表达变化。方法应用免疫组织化学技术检测ZnT-3在APP/PS1转基因小鼠脑内的分布,并应用Western blot方法分析ZnT-3在大脑皮质及海马的表达水平。结果ZnT-3主要分布于APP/PS1转基因小鼠脑内的老年斑中,且主要定位于老年斑周围变性的神经元及其突起内;ZnT-3在APP/PS1转基因小鼠大脑皮质和海马的表达均明显高于野生型小鼠。结论ZnT-3在APP/PS1转基因小鼠大脑内的高表达以及在老年斑内的定位,提示ZnT-3可能在老年斑内锌离子的聚集过程中起着重要的调节作用,进而参与了APP/PS1转基因小鼠大脑内Aβ老年斑的形成。     

锰锌联合作用下大鼠生精细胞caspase-3和cyto-c的表达变化

目的研究锰和锌对生精细胞caspase-3、cyto-c表达的影响。方法健康雄性SD大鼠80只随机分为10组,空白对照组,ZnCl2对照组,15 mg.kg-1和30 mg.kg-1MnCl2组;15 mg.kg-1MnCl2＋ZnCl2组和30 mg.kg-1MnCl2＋ZnCl2组。锰组分别给予MnCl2.4H2O腹腔注射4周和6周;ZnCl2对照组给予100 mg Zn2＋.kg-1饲料口服;锰加锌组分别染锰4周后再给予含锌饲料口服。各组大鼠分别于第4周末和第6周末处死,免疫组化法检测睾丸caspase-3、cyto-c表达。结果与空白组比较,各锰组和锰加锌组caspase-3阳性细胞率均升高,cyto-c阳性细胞率均降低（P〈0.01）。与同剂量组比较,染锰6周caspase-3和cyto-c阳性细胞率分别较4周升高和降低（P〈0.01）。与同时间组比较,30 mg.kg-1组caspase-3和cyto-c阳性细胞率分别较15 mg.kg-1组升高和降低（P〈0.01）。与同剂量锰组比较,锰加锌组caspase-3和cyto-c阳性细胞率分别降低和升高。各组caspase-3和cyto-c阳性细胞率呈负相关（r=-0.817,P〈0.01）。结论 15 mg.kg-1和30 mg.kg-1氯化锰均可诱发大鼠生精细胞caspase-3和cyto-c表达,并随染锰时间和剂量的增加而分别增加和降低,存在一定的时间-效应和剂量-效应关系,摄入含锌100 mg.kg-1的食物可抑制锰所诱发的caspase-3表达。     

不同饲料锌水平对哺乳期后幼鼠大脑及睾丸组织ZnT3mRNA表达的影响

目的:观察哺乳期后幼鼠在不同饲料锌水平条件下的生长情况,探讨饲料中锌水平对幼鼠大脑皮质、海马及睾丸组织锌转运体3(ZnT3)mRNA表达的影响.方法:20只雄性3周龄ICR幼鼠(P21)随机分为饲料缺锌(ZD,Zn 1 mg/kg)、适锌(ZA,Zn 30 mg/kg)、高锌(ZS,Zn 180 mg/kg)、高锌对喂(PF,Zn 180 mg/kg,每日饲料投放量依据缺锌组每日摄食量确定)4组,以相应饲料饲喂3周(P21～P42),观察小鼠P21～P42期间的摄食量及体质量变化.饲喂3周后,处死小鼠取血清及大脑皮质、海马、睾丸组织,以原子吸收分光光度法测定小鼠血清锌含量,半定量RT-PCR法检测分析不同饲料锌水平幼鼠P42时相应组织中ZnT3 mRNA的表达.结果:断乳幼鼠饲喂不同水平锌饲料3周后,ZD组幼鼠摄食量及体质量显著低于其余各组(P＜0.05,P＜0.01),血清锌也显著低于其余各组(P＜0.05,P＜0.01).P42时ZD小鼠睾丸及皮质中ZnT3 mRNA表达显著降低(P＜0.05),PF小鼠海马中ZnT3 mRNA表达高于其他各组(P＜0.05).结论:哺乳期后保证饲料中足量锌对幼鼠的生长发育十分重要;饲料缺锌显著降低哺乳期后小鼠睾丸及皮质ZnT3 mRNA表达,这种基因表达变化可能是哺乳期后幼鼠维持锌内稳态的一种反馈保护机制.     

高盐对SD大鼠肾脏骨调素mRNA表达的影响

OBJECTIVE: To investigate the effect of high-salt diet on the expression of osteopontin (OPN) mRNA and its protein in Sprague-Dawley rat kidney. METHODS: Forty-eight male SD rats aged 10 weeks receiving normal salt diet were enrolled in study, and were divided into two groups and fed with high salt diet (4%NaCl) or normal salt diet (0.6%NaCl) for 12 weeks respectively, with 24 rats in each group. Tail systolic blood pressure and bodyweight were measured in all rats every week. At the end of 4th, 8th and 12th week, 6 rats in each group were sacrificed for detection of the expression of OPN mRNA and its protein in the kidney with quantitatine real-time (QRT)-PCR and immunohistochemistry, respectively. RESULTS: No significant difference was found in blood pressure, bodyweight and kidney weight/bodyweight between high-salt diet group and normal salt diet group (P>0.05). The expression of OPN mRNA (0.27+/-0.16 vs 0.15+/-0.13, P<0.05) and its protein (0.78+/-0.15 vs 0.61+/-0.11, P<0.01) in SD rat kidney with high-salt diet were up-regulated at the end of 12th week compared with the rats with normal salt diet. CONCLUSIONS: High-salt diet increase the expression of OPN mRNA and its protein in SD rat kidney. Renal injury induced by high salt intake might be independent of blood pressure change.     

孕期膳食补锌上向调控胎盘及母鼠小肠IGF-Ⅱ mRNA的表达

目的探讨孕期膳食补锌对胎盘及母鼠小肠中IGF—Ⅱ mRNA表达的影响。方法18只SD孕鼠随机分为正常对照组（ZC）和补锌组（ZS）。两组进食常规饲料，ZC组（n=9）饮用去离子水，ZS组（n=9）饮用补锌水（含锌1．26mmol／L）。分别于孕9．5d和孕17．5d时取胎盘和小肠。以半定量聚合酶链反应（RT-PCR）测定胎盘和母鼠小肠中IGF-Ⅱ mRNA的相对表达量。结果ZC组孕17．5d时，胎盘IGF-Ⅱ mRNA的相对表达量明显高于孕9．5d（P〈0．05），呈现出发育性增高。孕9．5d和孕17．5d时，ZS组胎盘及小肠IGF-Ⅱ mRNA相对表达量均显著高于ZC组（P〈0．05）。结论妊娠不同时期膳食锌摄入水平增高显著上向调控胎盘和母体小肠中IGF-Ⅱ mRNA的表达。     

Overexpression of parathyroid pituitary-specific transcription factor (Pit)-1 in hyperphosphatemia-induced hyperparathyroidism of chronic renal failure rats

Background  Hyperphosphatemia in renal failure has been identified as a major role in the pathogenesis of hyperparathyroidism that is independent of changes in serum calcium and 1,25(OH)₂D₃. The aim of this study was to evaluate the expression of parathyroid Pit-1 in hyperphosphatemia-induced secondary hyperparathyroidism (SHPT) of chronic renal failure (CRF) rats.
Methods  Wistar rats with CRF induced by 5/6 nephrectomy were ramdomly fed with diet containing 1.2% inorganic phosphate (Pi, high phosphate (HP) group, n=9) or 0.2% Pi (low phosphate (LP) group, n=9) for 10 weeks starting from the fourth week after the surgery. Another 7 nephrectomy rats with HP diet were intraperitoneally injected with phosphonoformic acid (PFA, the specific inhibitor of Pit-1, HP+PFA group) 0.15 g/kg every other day for 10 weeks starting from HP diet. Another 6 HP rats injected with the same amount of normal saline as the control of the HP+PFA group (HP+saline group). At the same time, 9 rats with sham surgery received HP diet as the controls. At the 4th week and 14th week, blood was taken for measurement of serum creatinine (SCr), serum calcium (SCa), serum phosphorus (SPi), 1,25(OH)₂D₃ and intact parathyroid hormone (iPTH). At the 14th week, two parathroid glands (PTGs) of each rat were removed by microsurgery, one gland for immunohistochemistry analysis of proliferating cell nuclear antigen (PCNA), the other one for detection of Pit-1 by Western blotting, and for the measurement of Pit-1 mRNA and PTH mRNA by real-time quantitative polymerase chain reaction.
Results  In nephrectomy rats, high dierary phosphate induced a marked increase in serum phosphate, iPTH, PTH mRNA and PCNA parathyroid cells, accompanying Pit-1 and its mRNA in parathyroid gland increased significantly. However, serum Ca and 1,25(OH)₂D₃ remained unchanged. PFA decreased Pit-1 and its mRNA levels to reduce intact PTH, PTH mRNA and PCNA-positive parathyroid cells.
Conclusions  Expression of parathyroid Pit-1 in hyperphosphatemia-induced SHPT of CRF rats was upregulated. Pit-1 may mediate the stimulation to parathyroid gland by hyperphosphatemia.

     

诱导型热休克蛋白70在大鼠视网膜的表达及其对视网膜缺血再灌注损伤的保护作用

目的　检测锌离子诱导的HSP70 在大鼠视网膜的表达及HSP70 对视网膜缺血再灌注损伤的保护作用。方法　生理盐水前房加压灌注制作视网膜缺血再灌注 (RIR)损伤模型 ,腹腔注射硫酸锌诱导HSP70 表达 ,作为实验组 ;腹腔注射HSP表达抑制剂 -Quercetin(槲皮素 ) ,为实验对照组 ;另取大鼠不行任何处理作正常对照组。不同时间段作视网膜HSP70 免疫组化染色 ,视网膜病理 (HE)染色、神经节细胞 (RGCs)计数 ,视网膜透射电镜观察 ,比较各组差异。结果　实验组在注射硫酸锌后 10h即见视网膜节细胞层有HSP70 阳性表达 ,16h达高峰 ,7d后仍呈弱阳性表达 ,HSP70 主要在RGCs胞浆表达 ;正常对照组及实验对照组均呈阴性表达。RIR后实验组和实验对照组均有RGCs损失 ,其中RIR后 2 4h ,实验组RGCs计数多于实验对照组且有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ,RIR后 3d、7d差异有显著性 (P <0 .0 1) ;透射电镜观察显示实验组损伤轻于实验对照组。结论　腹腔注射锌离子可诱导大鼠视网膜的HSP70 表达 ,腹腔注射槲皮素可抑制此作用 ,HSP70 主要在RGCs胞浆表达 ;HSP70 能提高RGCs对RIR损伤的耐受性