胆管癌相关基因甲基化研究进展

目的总结胆管癌相关基因甲基化谱的研究进展,阐述DNA甲基化研究对胆管癌的临床诊断价值和治疗意义。方法分析近年来有关胆管癌相关基因异常甲基化与胆管癌关系的文献报道。结果胆管癌的发病是多基因异常表达的结果,目前已发现许多肿瘤相关基因甲基化异常与胆管癌的发生密切相关。表基因的改变可能是胆管癌发生过程中非常重要的机理。结论胆管癌相关基因甲基化异常与胆管癌的发生关系密切,胆管癌相关基因异常甲基化检测有望为胆管癌的早期无创诊断提供新的途径。改变DNA甲基转移酶活性和胆管癌相关基因甲基化状况可作为胆管癌辅助治疗的一种新思路。     

肝细胞癌GSTP1基因启动子区甲基化的研究

基因启动子区异常甲基化抑制转录是基因失活的又一机制，也是人类肿瘤发生的重要机制之一。肝细胞癌（HCC）发生的分子机制仍不十分清楚。我们采用甲基化特异性PCR（MSP法）检测了HCC中GSTP1基因启动子甲基化，探讨其在HCC发生中作用。     

普鲁卡因酰胺诱导肝癌细胞启动子区甲基化的GSTP1基因重新表达

目的研究HepG2肝癌细胞GSTP1基因启动子区甲基化与GSTP1基因表达的关系，并探讨普鲁卡因酰胺用于诱导因甲基化失活的GSTPI基因重新表达的可能性。方法分别用5-杂氮-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)和普鲁卡因酰胺处理HepG2细胞后培养，甲基化特异性PCR(MSP)检测细胞中GSTP1基因的甲基化状况，RT-PCR和Western blot分别检测细胞中GSIP1 mRNA和GST-π的表达。结果HepG2细胞在去甲基化药物处理前，GSIP1基因完全甲基化，GSTP1基因不表达；药物处理后，普鲁卡因酰胺组和5-Aza-CdR组GSTP1基因有表达。结论肝癌细胞GSTP1基因启动子区甲基化可抑制GSTP1基因表达，普鲁卡因酰胺与5-Aza-CAR一样能使启动子区甲基化的GbTP1基因重新表达。     

死亡相关蛋白激酶与肿瘤

死亡相关蛋白激酶（DAPK）是钙离子／钙调素调节的丝氨酸／苏氨酸激酶。DAPK有一个多区结构，具有潜在的转录活性，色氨酸000自身磷酸化被认为是其基本状态的一个自控装置。DAPK参与干扰素-γ、TNF-α、p53和TGF-β等介导的细胞凋亡，在整个凋亡系统中发挥着重要作用。DAPK被认为是抑癌基因，与肿瘤的发生、发展、转移密切联系，其启动子CpG岛甲基化是其在表观遗传学上调节的重要方式。DAPK在肿瘤早期诊断、评价预后及基因靶向治疗等方面有重要意义。     

散发性肝外胆管癌中RASSF1A基因启动子甲基化状态的研究

目的　检测肝外胆管癌组织中RASSF1A基因启动子甲基化及各CpG位点甲基化发生率。方法　采用甲基化特异性聚合酶链反应 (MS PCR)和半巢式PCR对RASSF1A基因启动子区域进行扩增 ,并对扩增产物克隆测序。结果　在全部 48例肝外胆管癌组织中 ,RASSF1A基因启动子区域存在CpG位点甲基化现象的共 2 8例 ,16个CpG位点甲基化平均发生率为 42 .45 % ,明显高于对照组 (χ2 =11.77,P <0 .0 1)。结论　RASSF1A基因启动子区域CpG岛甲基化是RASSF1A失活的主要机制 ,在肝外胆管癌的发生过程中发挥重要作用。     

胆道肿瘤相关基因甲基化的研究新进展

胆道肿瘤是一种恶性程度较高的肿瘤,早期诊断困难,预后较差.近年来,细胞基因组的表观遗传学改变在胆道肿瘤发生发展中的作用日益受到国内外学者的关注.DNA启动子高甲基化与抑癌基因转录失活有一定的关系,而DNA低甲基化与癌基因的过度表达有关,这些与肿瘤的形成显著相关.DNA甲基化为肿瘤诊断的标记物、治疗检测手段提供了新的探索方向.现对与胆道肿瘤发生相关基因甲基化的研究现状作一综述.     

死亡相关蛋白激酶与肿瘤

死亡相关蛋白激酶(DAPK)是钙离子/钙调素调节的丝氨酸/苏氨酸激酶。DAPK有一个多区结构,具有潜在的转录活性,色氨酸308自身磷酸化被认为是其基本状态的一个自控装置。DAPK参与干扰素-γ、TNF-α、p53和TGF-β等介导的细胞凋亡,在整个凋亡系统中发挥着重要作用。DAPK被认为是抑癌基因,与肿瘤的发生、发展、转移密切联系,其启动子CpG岛甲基化是其在表观遗传学上调节的重要方式。DAPK在肿瘤早期诊断、评价预后及基因靶向治疗等方面有重要意义。     

乳腺癌组织Ras相关区域家族1A基因启动子甲基化状态及临床意义

目的 探讨Ras相关区域家族1A基因(RASSF1 A)启动子甲基化在乳腺癌发生发展中的作用.方法 甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)法分析44例乳腺癌石蜡包埋切片组织中RASSF 1A基因启动子甲基化状况,分析甲基化与临床病理特征之间的关系.结果 44例乳腺癌组织切片中有25例RASSF1A基因启动子发生了超甲基化,甲基化率为56.8％,启动子甲基化与患者年龄明显相关(P＜0.05),与患者月经初潮年龄和生育次数无相关,与肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期及雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)之间无相关.结论 RASSF1A启动子甲基化为乳腺癌中的频发事件,其发生率随着年龄增长而升高,在乳腺癌发生中起重要作用.     

前列腺癌与雌激素受体基因启动子甲基化关系的实验研究

目的 探讨前列腺癌雌激素受体（ＥＲ）的失活与其基因启动子甲基化的关系。方法 采用亚硫酸氢盐基因组测序法研究前列腺癌细胞系和显微解剖的前列腺癌标本的ＥＲ基因的甲基化状态。结果 前列腺癌细胞系ＥＲ基因启动子的甲基化率为６／６,且ＥＲ ｍＲＮＡ均不表达。将这些细胞用去甲基剂５－氮－２－脱氧胞苷处理可以恢复所有ＥＲ阴性细胞系的ＥＲ ｍＲＮＡ的表达。８０％（８／１０）的低分级前列腺癌和９５％（２０／２１）的     

DNA修复基因MGMT启动子区过甲基化在胆管癌中的作用

目的探讨胆管癌组织中6-氧-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因的甲基化状态及其在胆管癌中的临床意义。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)和免疫组织化学法分析胆管癌组织中MGMT基因启动子甲基化状态及MGMT蛋白表达情况,并分析MGMT基因甲基化状态与临床病理特征的关系。结果 36例胆管癌组织中MGMT基因17例(47.2%)为甲基化阳性;MGMT蛋白阳性表达15例,阴性表达21例,21例MGMT蛋白阴性表达的胆管癌中MGMT甲基化阳性14例;15例MGMT蛋白阳性表达中MGMT甲基化阳性仅3例。MGMT蛋白表达与MGMT甲基化状态呈负相关(rs=-0.816,P<0.05)。MGMT基因的甲基化状态与胆管癌患者的肿瘤浸润深度、分化程度及TNM分期有关(P<0.05),但与患者的年龄、性别、病理学类型、淋巴结转移均无关(P>0.05)。结论 MGMT基因启动子过甲基化是胆管癌组织中常见的分子事件,并可能与胆管癌发生有关,MGMT甲基化状态可以作为评价胆管癌恶性程度的一项指标。     

重症急性胰腺炎死亡相关因素分析

目的探索与重症急性胰腺炎死亡相关的危险因素。方法回顾性分析自1997年8月至2004年2月入院的全部重症急性胰腺炎(SAP)57例,其中男性32例,女性25例,中位年龄51岁。根据结局的不同将SAP患者分为生存组和死亡组,分别对两组资料的一般特征、严重程度和手术相关因素进行对比分析。结果SAP共57例,死亡11例,病死率为19.3%,手术治疗30例,死亡8例,病死率为26.7%。两组在年龄、Ranson评分、APACHEⅡ评分、腹水、多器官功能不全、ARDS、心功能衰竭、肾衰竭等发生率差异有统计学意义。多因素回归分析显示,年龄、腹水、多器官功能不全是和死亡相关的独立危险因素。结论年龄、腹水、多器官功能不全是和死亡相关的独立危险因素。     

胆管癌组织螺杆菌16S-rRNA基因的检测及意义

目的探讨人胆管癌中是否存在螺杆菌的感染。方法取 11份手术切除的胆管癌标本 ,分别用两对螺杆菌属特异的 16S RNA引物进行PCR检测。对照组取自 4个肝囊肿和 2个血管瘤旁的正常肝胆管组织标本。结果 11份胆管癌标本用两对引物分别行二次PCR后 ,结果均为阳性的 6份 ,阳性率为 5 6 %。 4个肝囊肿和 2个肝血管瘤旁的正常肝胆管组织的PCR结果阴性 ,胆管癌组与对照组的阳性率有显著性差异 (P <0 0 5 )。对用C97和C98行PCR扩增的 2份产物测序 ,结果与幽门螺杆菌有 99%以上的同源性。结论胆管癌组织内存在螺杆菌的核酸物质 ,胆管癌患者肝脏中可能存在螺杆菌的感染。螺杆菌在胆管癌发生中的作用有待进一步研究。     

胆管癌TMS1/ASC基因甲基化及其临床意义

肿瘤发生是多基因协同作用、多因素共同参与、综合发展的结果。研究发现肿瘤抑制基因失活与其启动子区域表遗传性改变即CpG岛甲基化状态直接关联;因此CpG岛甲基化在肿瘤发生、发展过程中发挥着关键作用。TMS1/ASC基因是近年发现     

胆管结石患者胆汁对人胆管癌细胞增殖的影响

目的观察胆管结石患者胆汁对人胆管癌细胞QBC939生长的影响 ,探讨胆管结石与胆管癌发生、发展的关系。方法应用噻唑蓝比色法检测 2 0份胆管结石患者胆汁和 10份正常胆汁对QBC939增殖的影响 ,应用流式细胞仪测定细胞周期和凋亡。结果胆管结石患者胆汁与正常胆汁比较 ,明显促进QBC939细胞增殖 ,用胆管结石患者胆汁处理 4 8h的QBC939细胞增殖指数显著上升 (P <0 0 1) ,胆管结石胆汁组 (47%± 10 % )S期细胞比例比正常胆汁组 (2 3%± 3% )明显增高 (P <0 0 1) ,G0 /G1期细胞比例 (42 %± 8% )比正常胆汁组 (6 3%± 10 % )明显降低 (P <0 0 5 )。结论胆管结石患者胆汁具有潜在的促增殖活性 ,胆管结石与胆管癌的发生、发展关系密切     

肝门胆管癌患者外周染色体不稳定性的观察及意义

目的　观察肝门胆管癌患者外周血淋巴细胞染色体的不稳定性 ,探讨肝门胆管癌的遗传易感性 ;找寻外周血标记物 ,为肝门胆管癌临床的早期诊断提供依据。方法　用染色体显带分析技术和荧光原位杂交 (FISH)分析技术对 2 6例肝门胆管癌患者、2 6例正常人外周血淋巴细胞染色体不稳定性进行了观察。结果　肝门胆管癌患者外周血淋巴细胞染色体裂隙、断裂和异常细胞为 ( 8.75± 3 .3 0 )、( 7.3 6± 2 .76)、( 13 .3 5± 4.73 ) ,而正常对照组为 ( 3 .17± 1.82 )、( 2 .0 4± 1.76)、( 3 .65± 1.97) ,经t检验 ,患者组与对照组各检测指标差异均有显著性 (P <0 .0 1) ;频率较高的位点是 8p2 2、9p2 1、11q13、17p12。 结论　肝门胆管癌患者外周血淋巴细胞染色体裂隙、断裂和异常细胞比率明显增高 ,提示肝门胆管癌患者可能存在较高的肿瘤遗传易感性 ;位点 8p2 2、9p2 1、11q13、17p12可能是寻找肝门胆管癌外周血标记物的候选部位。     

Methylation patterns of methylenetetrahydrofolate reductase gene promoter in infertile males

Errors of folate/homocysteine pathways which are critical for transferring methyl groups have been suggested to affect male fertility. We aimed to evaluate the methylation patterns of the promoter of methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) gene in infertile males and to investigate the association between MTHFR promoter methylation and success of sperm retrieval. Thirty-five nonobstructive azoospermic and 46 severe oligozoospermic patients constituted the study group and were compared with 49 fertile and/or normozoospermic men. The methylation status was analysed by methylation-specific polymerase chain reaction. MTHFR promoter methylation was detected in infertile men with NOA and SO in the ratio of 48.6% and 58.7%, respectively. Methylation was also observed in 51% of controls. MTHFR promoter was methylated in 65% of men with viable spermatozoon during TESE. No association was found regarding to the profile of MTHFR promoter methylation between both NOA and SO patients and controls (p = .621). There was no relation between the methylation status of MTHFR promoter and low motility and poor morphology (p = .682 and p = .413, respectively). No association was found between MTHFR promoter methylation and presence of viable spermatozoa (p = .382). Our data indicate that the promoter methylation of MTHFR gene may not be associated with male infertility.