电针对SAMP8小鼠海马神经元线粒体超微结构及相关凋亡蛋白的影响

目的:观察电针对SAMP8小鼠海马神经元线粒体超微结构及相关凋亡蛋白的影响,从保护线粒体、抑制细胞凋亡的角度探讨电针治疗老年性痴呆(AD)的部分作用机制。方法:以SAMP8小鼠为研究对象,依据"补肾通督,醒神益智"的治疗原则,电针"百会"、"涌泉",每日1次,共治疗21天。用Morris水迷宫测试小鼠学习记忆能力的变化,评价电针对AD的治疗效应。用透射电镜观察海马神经元线粒体的超微结构,用免疫组化法检测海马神经元中凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-9的表达。结果:与空白组小鼠相比较,模型组小鼠平均逃避潜伏期明显延长、原平台象限停留时间明显缩短,海马神经元线粒体超微结构不完整,海马神经元中Caspase-3、Caspase-9表达增高;与模型组小鼠相比较,模针组小鼠治疗后平均逃避潜伏期缩短、原平台象限停留时间延长,学习记忆能力有所提高,海马神经元线粒体超微结构基本正常,海马神经元中Caspase-3、Caspase-9表达减少。结论:电针对AD治疗效应的发挥可能与减轻线粒体超微结构损伤、降低Caspase-3、Caspase-9表达,抑制细胞凋亡线粒体途径的级联反应,减少细胞凋亡有关。     

电针对SAMP8小鼠海马线粒体作用的研究

目的:观察电针对8月龄快速老化小鼠亚系(SAMP8)海马神经元线粒体超微结构及线粒体酶活性的影响,探讨电针治疗阿尔茨海默病(AD)的部分作用机制。方法:采用计算机随机的方法,将SAMP8小鼠24只分为模型组、电针组,每组各12只;8月龄抗快速老化小鼠亚系(SAMR1)12只作为空白组。电针"百会"涌泉"对电针组小鼠进行治疗,施以疏密波,频率2～100Hz,电压2～4V,强度以小鼠下肢轻微抖动为度,留针20min。每日1次,7d为1个疗程,共治疗3个疗程。治疗结束后,用Morris水迷宫测试各组小鼠空间学习记忆能力的变化,评价电针的治疗效应;用透射电镜观察海马神经元线粒体的超微结构;用分光光度法检测海马线粒体细胞色素C氧化酶(COX)的活性。结果:与模型组相比,电针组小鼠治疗后平均逃避潜伏期缩短,线粒体结构大致正常,嵴排列整齐,仅见部分轻度肿胀,线粒体体密度、面密度大于模型组,COX活性明显高于模型组(P<0.05,0.01)。结论:电针对AD学习记忆能力的改善可能与其减轻海马神经元线粒体超微结构损伤、提高线粒体COX活性、保护线粒体结构和功能、改善能量代谢有关。     

电针对SAMP8小鼠海马线粒体呼吸链功能的影响

目的:从线粒体角度探讨电针治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制.方法:选取8月龄SAMP8小鼠12只,随机分为模型组6只,电针组6只,另选取6只8月龄的SAMR1小鼠为对照组.电针组电针“百会”“大椎”“肾俞”“太溪”穴,每日1次,每次20 min,10次为一疗程,共治疗3个疗程;其他两组不做治疗干预,只进行相同方式、相同时间和相同程度的抓取和小鼠固定器固定.疗程结束后,采用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,分光光度法检测海马线粒体呼吸链酶复合物的活性,反相高效液相色谱法检测细胞三磷酸腺苷(ATP)水平.结果:与对照组相比,模型组小鼠平均逃避潜伏期明显延长,原平台象限停留时间缩短,海马线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ活性降低,细胞ATP含量减少;与模型组比较,电针组平均逃避潜伏期缩短,原平台象限停留时间延长,海马线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ活性升高,细胞ATP含量增加.结论:电针能够提高小鼠海马线粒体呼吸链酶复合物活性及细胞ATP含量,改善线粒体功能,可能是治疗AD的机制之一.     

电针对SAMP8小鼠海马线粒体呼吸链功能的影响

目的:从线粒体角度探讨电针治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法:选取8月龄SAMP8小鼠12只,随机分为模型组6只,电针组6只,另选取6只8月龄的SAMR1小鼠为对照组。电针组电针"百会""大椎""肾俞""太溪"穴,每日1次,每次20min,10次为一疗程,共治疗3个疗程;其他两组不做治疗干预,只进行相同方式、相同时间和相同程度的抓取和小鼠固定器固定。疗程结束后,采用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,分光光度法检测海马线粒体呼吸链酶复合物的活性,反相高效液相色谱法检测细胞三磷酸腺苷(ATP)水平。结果:与对照组相比,模型组小鼠平均逃避潜伏期明显延长,原平台象限停留时间缩短,海马线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ活性降低,细胞ATP含量减少;模型组比较,电针组平均逃避潜伏期缩短,原平台象限停留时间延长,海马线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ活性升高,细胞ATP含量增加。结论:电针能够提高小鼠海马线粒体呼吸链酶复合物活性及细胞ATP含量,改善线粒体功能,可能是治疗AD的机制之一。     

电针对SAMP8小鼠海马线粒体呼吸链酶复合体活性的影响

目的观察电针对SAMP8小鼠海马线粒体呼吸链酶复合体活性的影响,从线粒体角度探讨电针治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法选取8月龄SAMP8小鼠16只,随机分为模型组8只,电针组8只,另选取8只8月龄的SAMR1小鼠为对照组,疗程结束后,采用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,分光光度法检测海马线粒体呼吸链酶复合体的活性。结果模型组与对照组相比,模型组鼠平均逃避潜伏期明显延长,原平台象限停留时间缩短,海马线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ活性降低(P<0.01,P<0.05);电针组与模型组比较,电针组平均逃避潜伏期缩短,原平台象限停留时间延长,海马线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ活性明显升高(P<0.01,P<0.05)。结论电针治疗AD的可能机制是提高海马线粒体呼吸链酶复合体活性,改善线粒体功能。     

电针对SAMP8小鼠海马神经元葡萄糖调节蛋白75的影响研究

目的:观察电针对SAMP8小鼠海马神经元grp75的影响,从改善能量代谢障碍的角度探讨电针治疗阿尔茨海默病(AD)的部分作用机制。方法:采用计算机随机的方法,将SAMP8小鼠分为模型组、模针组;SAMR1小鼠作为空白组。电针"百会"、"涌泉"对模针组进行治疗,施以疏密波,频率2~100Hz,电压2~4 V。治疗结束后,用Morris水迷宫测试空间学习记忆能力的变化,评价电针对AD的治疗效应;用免疫组化方法检测grp75表达。结果:与模型组相比,模针组小鼠治疗后平均逃避潜伏期缩短,在原平台所在象限停留的时间延长(P0.05);模针组小鼠海马神经元grp75较模型组表达增高(P0.01)。结论:电针对SAMP8小鼠学习记忆能力的改善,可能与提高海马神经元grp75的表达、调节线粒体功能、改善能量代谢障碍有关。     

电针抗炎效应在SAMP8小鼠神经元损伤中的促保护作用

目的:观察电针“百会”“肾俞”对SAMP8小鼠神经元病理损伤的影响及其抗炎效应对神经元修复的促进作用，为研究电针防治阿尔茨海默病提供新的实验依据。方法:将12只7月龄的SAMP8小鼠随机分为模型组和电针组，6只同龄且遗传背景相同的SAMR1小鼠作为正常组。电针组针刺“百会”和双侧“肾俞”,双侧“肾俞”连接韩氏电针仪，采用连续波，频率2 Hz,电流强度1 mA,15 min/d, 10 d为1个疗程，共进行4个疗程，疗程间间隔1 d。疗程结束后，采用Morris水迷宫实验检测各组小鼠空间学习记忆能力；采用免疫荧光染色检测各组小鼠海马齿状回(DG)抗神经元特异性核蛋白(NeuN)阳性表达水平及阳性细胞数；Western blot检测各组小鼠海马区小胶质细胞特异性蛋白离子钙结合衔接分子-1(Iba-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β蛋白表达水平；透射电镜观察海马DG区神经细胞超微结构。结果:与正常组相比，模型组平均逃避潜伏期明显延长、跨越原平台次数明显减少(P<0.01);海马DG区NeuN平均荧光强度和标记密度降低(P<0.05);海马Ib...     

电针对SAMP8小鼠海马区补体及小胶质细胞吞噬能力的作用机制

目的:观察电针对SAMP8小鼠海马区离子钙结合衔接分子1(Iba-1)、补体C1q、分化簇68(CD68)表达水平的影响,探讨电针治疗阿尔茨海默病的作用机制。方法:SAMP8小鼠随机分为模型组与电针组,每组12只,并以12只同月龄SAMR1小鼠作为对照组。电针组予“百会”“大椎”“肾俞”电针治疗,20 min/次,1次/d, 8 d为1个疗程,共干预3个疗程,疗程之间间隔2 d。采用Morris水迷宫实验观察小鼠学习记忆能力,免疫组织化学法检测海马CA1区Iba-1、CD68蛋白阳性表达水平,Western blot法和实时荧光定量PCR法检测海马组织Iba-1、C1q、CD68蛋白和mRNA的表达水平。结果:与对照组比较,模型组平均逃避潜伏期延长(P<0.01),原平台象限停留时间缩短、跨越原平台的次数减少(P<0.01);与模型组比较,电针组平均逃避潜伏期缩短(P<0.05,P<0.01),原平台象限停留时间延长、跨越原平台次数增加(P<0.01)。与对照组比较,模型组海马CA1区Iba-1、CD68蛋白阳性表达及海马组织Iba-1、C1q、CD68蛋...     

音乐电针对SAMP8小鼠行为学及大脑皮层NEP、IDE表达的影响

目的：探讨音乐电针治疗阿尔茨海默病（AD）的可能作用机制。方法：将SAMP8小鼠随机分为模型组、药物组和音乐电针组,SAMR1小鼠作为正常组。药物组给予盐酸多奈哌齐0.92mg/kg灌胃给药;音乐电针组电针＂百会＂、＂印堂＂穴20min后,点刺＂水沟＂穴。采用Morris水迷宫测定小鼠学习记忆能力,免疫组化法检测小鼠大脑皮层NEP及IDE的表达。结果：音乐电针改善模型小鼠学习记忆能力与药物比较,无显著性差异（P〉0.05）,并能显著提高大脑皮层NEP及IDE表达（P〈0.05）。结论：音乐电针具有改善AD学习记忆障碍的作用,其机制可能与促进Aβ降解酶表达有关。     

电针对SAMP8小鼠海马区细胞周期蛋白依赖性激酶5及Tau蛋白的影响

目的:观察电针"肾俞"对SAMP8小鼠海马区神经元超微结构及细胞周期蛋白依赖性激酶5(CDK5)、Tau蛋白的影响,探讨电针防治阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法:将5月龄雄性SAMP8小鼠随机分为模型组、电针组和针刺组,以同品系SAMR1小鼠为正常组,每组15只。针刺组针刺小鼠"百会"及双侧"肾俞";电针组针刺"百会"并电针双侧"肾俞"。两组均20 min/次,每日1次,7 d为1个疗程,共治疗4个疗程。治疗后行Morris水迷宫检测小鼠的学习记忆能力,透射电镜观察海马区超微结构,免疫组织化学法检测海马CDK5的阳性表达,Western blot法检测海马区Tau-5和p25、CDK5蛋白的表达水平。结果:①水迷宫测试结果显示:与正常组比较,模型组小鼠平均逃避潜伏期延长(P<0.05,P<0.01),原平台象限停留时间缩短、跨越原平台次数减少(P<0.01);与模型组比较,电针组和针刺组平均逃避潜伏期缩短(P<0.05,P<0.01),电针组原平台象限停留时间延长、跨越原平台次数增多(P<0.01),针刺组原平台象限停留时间延长(P<0.0...     

电针对转基因阿尔茨海默病小鼠海马CA1区超微结构的影响

目的:研究针刺治疗阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)的超微结构基础。方法:将3月龄的淀粉样前体蛋白(APP)转基因小鼠随机分为模型组和电针组,以相同年龄和背景的C 57 BL/6 J小鼠做正常对照组。电针组取"百会"涌泉"穴,隔日治疗1次,针刺3个月。以LashleyⅢ水迷宫测定小鼠学习记忆能力,以透射电镜观察海马CA 1区的超微结构。结果:电针组小鼠水迷宫游出时间及进入盲端次数明显少于模型组(P<0.05),接近于正常对照组;与正常对照组比较,模型组海马CA 1区超微结构出现线粒体肿胀、嵴断裂或消失,突触变性,毛细血管基膜增厚、轮廓不清;而电针组海马CA 1区超微结构可见突触前终末的突触囊泡明显增多,线粒体嵴形态与微血管结构层次清楚,其特征与正常对照组相近。结论:APP转基因阳性小鼠海马CA 1区超微结构发生类AD变化,学习、记忆行为学能力下降,是AD较理想的动物模型。电针能改善APP转基因小鼠海马CA 1区超微结构,可能是改善AD小鼠学习、记忆能力的形态学基础。     

运用微型正电子发射扫描技术观察电针对SAMP8老年痴呆小鼠大脑海马区葡萄糖代谢的影响

目的利用18氟-脱氧葡萄糖micro-PET(18F-FDG micro-PET)影像学技术观察正常组小鼠,模型组和电针组老年痴呆模型SAMP8小鼠(快速老化小鼠)大脑海马区的葡萄糖代谢情况。方法随机挑选6月龄正常组SAMR1小鼠4只,痴呆模型组和电针组SAMP8小鼠各4只,通过2%异氟烷吸入麻醉后,从尾静脉弹丸式注射放射性示踪剂18F-FDG,每例约14.8~16.5MBq,摄取1 h后进行10 min micro-PET图像采集。计算并比较各组小鼠每克脑的海马组织18F-FDG的摄取率。结果电针组小鼠每克脑组织18F-FDG的摄取率高于正常组和模型组。结论电针能明显提高SAMP8小鼠脑18F-FDG的摄取及每克脑组织的摄取率,并可能通过影响脑葡萄糖代谢而发挥神经保护作用。     

补肾活血方对SAMP8小鼠学习记忆及海马神经干细胞影响实验研究

目的观察补肾活血方对快速老化SAMP8小鼠行为学及海马内神经干细胞的影响,以期为补肾活血方治疗阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的临床应用提供实验依据。方法7月龄的SAMP8雄性小鼠随机分为3组,分别为模型组、中药组和西药对照组,同月龄的SAMR1小鼠作为正常对照组。中药组按照6 g/kg补肾活血方灌胃给药,西药组给予3 mg/kg的盐酸多奈哌齐灌胃,正常组和模型组小鼠给予同体积的生理盐水灌胃。连续灌胃4周后采用水迷宫、免疫组织化学法和Western Blot法观察小鼠行为学、海马区NeuN和Nestin的表达。结果与正常老化SAMR1小鼠相比,模型组SAMP8小鼠学习记忆能力明显下降,海马组织Nestin和NeuN的表达减少(P<0.05);与模型组相比,给予补肾活血方和盐酸多奈哌齐西药干预后,SAMP8小鼠学习记忆能力有所改善,海马组织内Nestin和NeuN的表达增多(P<0.05);中药组和西药对照组SAMP8小鼠相比,学习记忆、海马组织Nestin和NeuN的表达无显著性差异(P>0.05)。结论补肾活血方通过上调SAMP8快速老化小鼠海马组织Nestin和NeuN的表达,促进神经干细胞的增殖和向神经元分化,从而改善SAMP8小鼠的学习认知记忆能力,对AD起治疗作用。     

四君子丸对SAMP8小鼠海马CA3区神经元Lon蛋白表达的影响

目的：研究SAMP8小鼠海马Lon蛋白及线粒体动力学相关蛋白表达变化,为健脾益气法治疗阿尔茨海默病提供理论依据。方法：3月龄SAMR1小鼠8只作为正常组,3月龄SAPM8小鼠32只分为模型组、多奈哌齐组(0.013 g·kg^-1)、四君子丸低、高剂量组(3.24、12.56 g·kg^-1),每组8只,多奈哌齐组灌胃多奈哌齐,四君子丸低、高剂量组灌胃四君子丸溶液,灌胃30 d;第25天开始水迷宫定位航行实验,第30天开始水迷宫空间探索实验;第30天取材后,免疫组化检测线粒体融合蛋白2(MFN2)蛋白表达变化,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)表达,比色法检测三磷酸腺苷(ATP)含量,电镜检测神经元线粒体微观结构变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测β淀粉样蛋白(Aβ)、Lon蛋白、线粒体动力相关蛋白1(DRP1)蛋白、MFN1蛋白表达变化。结果：与正常组比较,模型组小鼠逃避潜伏期时间增加、穿越次数减少、AMPK表达上调,ATP含量降低,Aβ蛋白表达升高(P<0.01),DRP1蛋白表达显著升高...     

电针对SAMP8小鼠皮质及海马突触素和突触后致密物-95表达的影响

目的 观察电针对SAMP8小鼠皮质及海马突触素(SYN)和突触后致密物-95(PSD-95)表达的影响,探讨电针治疗阿尔茨海默病的介入时机.方法 SAMP8小鼠48只随机分为模型组、3月龄电针组、6月龄电针组和9月龄电针组,每组12只,选取同龄正常老化SAMR1小鼠12只为对照组.电针组电针"百会""大椎""肾俞",频...     

针刺对戊四唑致痫大鼠海马神经元超微结构的影响

目的观察针刺对戊四唑诱发癫痫大鼠海马神经元损伤的保护作用。方法将SD大鼠72只随机分为模型组、针刺组、正常组。正常组腹腔注射0.9%氯化钠注射液(2 mL)、其余各组腹腔注射戊四唑(50 mg/kg),于注射后4 h与24 h两个时间段取脑组织。分别于光镜下和电镜下观察海马结构改变。结果癫痫发作后4 h光镜、电镜均可见大鼠海马神经元损伤,24 h后损伤进一步加重;针刺组大鼠海马神经元损伤明显减轻。结论针刺具有明显保护癫痫继发脑神经元损伤作用。     

电针对慢性应激抑郁大鼠学习记忆与海马神经元损伤的影响

目的:观察电针对慢性应激抑郁大鼠海马神经元的保护作用。方法:将SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针组和氟西汀组,每组12只。采用慢性不可预知的温和应激方法建立抑郁症大鼠模型。电针组给予电针"百会""印堂"穴,每次20min,每日1次,共治疗21d;氟西汀组给予氟西汀3.3mg/kg灌胃治疗,每日1次,共21d。实验第1、7、14、21天检测大鼠体质量,Morris水迷宫实验观察动物行为学,HE染色检测海马的组织结构,透射电镜观察海马超微结构。结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量显著下降(P0.01),水迷宫实验的潜伏期和游泳总路程显著延长(P0.01),海马神经元严重损伤,结构发生明显改变。电针治疗可以显著增加大鼠体质量(P0.05),缩短潜伏期和游泳总路程(P0.01),减轻海马神经元损伤。结论:电针可以改善慢性应激引起的大鼠海马神经元损伤,这可能是针刺缓解学习记忆能力的下降,治疗抑郁症的作用机制之一。