1-磷酸鞘氨醇对人视网膜色素上皮细胞增殖的影响

目的研究1-磷酸鞘氨醇对人视网膜色素上皮细胞增殖的影响。方法采用MTT法研究不同浓度、不同作用时间1-磷酸鞘氨醇对hRPE细胞增殖的影响。结果加入不同浓度S1P24 h后,仅浓度为1 ug/ml组的RPE细胞与对照组相比有统计学意义,加入不同浓度1-磷酸鞘氨醇48 h后,1×10~(-2)、1×10~(-1)、1μg/ml组与对照组相比有统计学意义,加入不同浓度1-磷酸鞘氨醇72 h后,1×10~(-3)、1×10~(-2)、1×10~(-1)、1μg/ml组与对照组相比有统计学意义。各实验组,培养24、48或72 h后,相同浓度各时间点OD之间比较差异有统计学意义。各浓度组培养24及48 h后,相同浓度两时间点OD值比较差异均有统计学意义;0、1×10~(-4)、1×10~(-3)、1×10~(-2)、1×10~(-1)μg/ml组培养48及72 h后,相同浓度两时间点OD值比较差异均有统计学意义。结论 1-磷酸鞘氨醇可促进体外培养的hRPE细胞的增殖,并具有明显的浓度及时间依赖性。     

子宫内膜癌鞘氨醇激酶-1与1-磷酸鞘氨醇的表达和意义

目的 探讨鞘氨醇激酶-1（sphingosine kinase 1,SphK1）与1-磷酸鞘氨醇（sphingosine-1-phosphate,S1P）在子宫内膜癌的表达和意义.方法 收集正常子宫内膜和子宫内膜癌患者血浆,行子宫全切手术的子宫内膜癌和子宫肌瘤旁组织,ELISA法检测血浆或组织匀浆液S1P的表达,Western blot法检测组织SphK1的表达,组织SphK1激酶活性定量检测试剂盒测定SphK1酶活性.结果 和正常对照组相比,子宫内膜癌患者血浆S1P的水平和组织S1P的表达明显增加（P＜0.01）,子宫内膜癌SphK1酶活性约是正常子宫组织的2.6倍.结论 被激活的SphKl/S1P信号通路可能参与子宫内膜癌的发生发展.     

1-磷酸鞘氨醇受体2抑制小鼠血管通透性研究

目的 研究1-磷酸鞘氨醇受体2（S1PR2）对小鼠血管通透性的作用。方法 将野生鼠和S1pr2-/-鼠(S1pr2基因缺乏)气管内滴注脂多糖（LPS）制备急性肺损伤模型（LPS组）,以气管内滴注生理盐水为对照。通过检测肺伊文思蓝色素漏出,异硫氰酸荧光素（FITC）标记的葡聚糖肺血管渗漏,以及肺组织湿质量/干质量比值,观察S1PR2对血管通透性的影响,并通过Miles分析,观察血管内皮细胞生长因子（VEGF）对皮肤血管内皮通透性亢进反应。结果 与生理盐水组比较, LPS注射增加野生鼠和S1pr2-/-鼠伊文思蓝漏出（P 均<0.01）、FITC标记葡聚糖肺血管外漏出（P 均<0.01）和引起肺水肿。LPS组中S1pr2-/-鼠与野生鼠比较,伊文思蓝漏出量、FITC标记葡聚糖肺血管外漏出更多（P 均<0.01）,肺水肿更重（P <0.001）;LPS组野生型和S1pr2-/-鼠均增加VEGF剂量依赖性的伊文思蓝漏出,在50、100 ng的VEGF诱导下,与野生鼠比较,S1pr2-/-鼠伊文思蓝漏出量均较高（P 均<0.01）。结论 S1PR2参与内皮细胞屏障保护,抑制血管通透性。     

鞘氨醇-1-磷酸受体1在肾脏中的表达及临床病理意义

目的 探讨鞘氨醇-1-磷酸受体1（sphingosine-1-phosphate receptor 1,S1P₁）在肾脏疾病时肾脏中的表达及相关性。方法 采用免疫组化染色法测定肾脏切片中S1P₁表达并半定量分析。结果 正常组、肾脏疾病组中肾脏均存在S1P₁的表达分布,但各肾脏疾病组的表达强度均低于正常组（Normal组0.309±0.023,IgAN组0.061±0.029,HTN组0.053±0.012,MPGN组0.134±0.060,LN组0.109±0.021,MCD组0.085±0.026）,各组与对照组比较差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论 S1P₁在正常肾脏组织中表达,多种肾脏疾病时S1P₁表达下调,提示S1P₁可能参与肾脏疾病的发生。     

1-磷酸鞘氨醇及受体1在小鼠肺缺血再灌注损伤中的表达变化和意义

目的 探讨1-磷酸鞘氨醇（sphingosine-1-phosphate,S1P）及其受体1（S1PR1）在肺缺血再灌注损伤（PIRI）肺组织中的表达变化及意义。方法 采用无损伤血管夹阻断小鼠左主支气管、左肺静脉和左肺动脉缺血30 min,松开血管夹,接受再灌注2 h,制作小鼠PIRI模型（n=8）,同时设正常对照组（n=8）和假手术组（n=8）,3组小鼠均处死后取肺组织。根据肺组织HE染色、湿/干质量比结果论证模型制作情况。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测肺组织中生成S1P的关键限速酶鞘氨醇激酶-1（SphK1）及S1PR1 mRNA表达变化;酶联免疫吸附法（ELISA） 检测肺组织中S1P及S1PR1蛋白含量的变化。结果 与正常对照组和假手术组比较,缺血再灌注可导致肺组织病理评分升高,肺干/湿质量比增高,肺组织SphK1和S1PR1 mRNA表达升高（P<0.05）,肺组织中S1P、S1PR1蛋白含量均明显增加（P<0.05）。结论 PIRI后,肺组织中S1P及S1PR1的表达升高,提示S1P/S1PR1信号通路参与了PIRI的病理生理改变过程,可能是PIRI潜在的治疗靶点。     

1-磷酸鞘氨醇在心血管系统中的研究进展

<正>1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,S1P)是近年来在心血管研究中发现具有重要生理功能的一种膜磷脂类代谢产物。T.K.Ghosh等[1]1990年发现,S1P在培养的肌细胞中通过非IP3依赖性的途径动员细胞内Ca2+释放,随后开始了对S1P研究更多还原     

1-磷酸神经鞘氨醇对大鼠骨骼肌成肌细胞分化的影响

【目的】观察1-磷酸神经鞘氨醇(S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞向成熟肌细胞分化?形成肌管的作用,探索定向诱导肌分化的途径及其分子机制?【方法】 分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,含不同浓度S1P的高糖DMEM培养基培养,收集细胞,在相差显微镜和共焦显微镜下观察形态变化,并通过免疫细胞化学方法分别检测成肌细胞分化的早期特异性标志-肌球蛋白和生肌素表达的改变?使用磷酸神经鞘氨醇激酶(SphK)活性抑制剂DMS和HACPT后观察S1P对骨骼肌成肌细胞的生肌素表达的作用?【结果】 S1P能明显促进骨骼肌成肌细胞细胞形成肌小管,诱导2 ~ 3 d开始有肌管形成,之后肌管越来越多,到6 ~ 7 d达高峰;同对照组相比随S1P浓度增高,细胞核生肌素阳性率逐渐增高(P <0.01);SphK活性抑制剂抑制S1P促进骨骼肌成肌细胞生肌素阳性率的增高(P < 0.01)?【结论】体外S1P可能通过提高SphK活性调节成肌细胞向成熟肌细胞分化?     

鞘氨醇激酶1/1磷酸鞘氨醇信号通路在糖尿病肾脏病中的研究进展

糖尿病肾脏病(DKD)为糖尿病最常见且危害严重的微血管并发症之一,其发病率随着糖尿病患者的增加而逐年升高,为全世界社会经济和医疗卫生事业的发展带来了严峻的挑战。DKD发病机制复杂,至今缺乏有效的干预措施。鞘氨醇激酶1/1磷酸鞘氨醇(Sphk/S1P)信号通路通过参与糖尿病条件下肾小球系膜细胞的增殖、细胞外基质的合成以及肾小球局部炎症反应等机制促进肾纤维化,该通路可能成为DKD等肾小球疾病新的干预靶点。     

1-磷酸鞘氨醇对角膜血管新生的影响

目的评价1-磷酸鞘氨醇(S1P)对大鼠角膜新生血管(CNV)的影响。方法 20只SD大鼠随机分成对照组和实验组,制做角膜微囊袋并分别植入空白缓释微粒体和含S1P的微粒体,术后1d,7d,14d观察各组大鼠角膜新生血管的生长情况。结果对照组未见明显新生血管生长而实验组新生血管生长明显,差异有统计学意义(P<0.05),实验组CNV的面积、累积钟点数和血管长度随观察时间推移而增多(P<0.05)。结论 1-磷酸鞘氨醇可促进角膜的血管增生,作用机理可能与激活角膜缘附近血管内皮细胞S1PR通路有关。     

新型免疫抑制剂鞘氨醇-1-磷酸受体激动剂研究进展

免疫抑制剂在器官移植和自身免疫系统疾病的治疗方面疗效显著,但多种不良反应限制了其广泛应用。在寻找高活性、低不良反应的新型免疫抑制剂的过程中发现,鞘氨醇-1-磷酸(S1P)受体激动剂通过使淋巴细胞聚集在淋巴结、脾等次级淋巴器官中,导致血液和胸腺的淋巴细胞减少,同时抑制淋巴细胞进入移植器官中,减少移植排斥反应。因此,通过激动S1P受体阻断淋巴细胞循环可以用于治疗免疫系统疾病。本文主要综述新型免疫抑制剂S1P受体全激动剂和选择性激动剂的特点、作用机制及研究进展。     

新型鞘氨醇-1-磷酸受体选择性激动剂的研究进展

自芬戈莫德(fingolimod,FTY720)发现以来,鞘氨醇-1-磷酸(S1P)受体受到研究者的广泛关注,但是在S1P受体的5种亚型(S1P1～S1P5)中,只有S1P1受体的激动剂可通过控制淋巴细胞的迁移而产生较强的免疫抑制效应.因此,寻找S1P1受体选择性激动剂,并研究其构效关系,具有非常重要的意义.本文主要对4类新型的S1P1受体激动剂的研究现状及构效关系进行综述.     

1-磷酸-神经鞘氨醇预防化疗大鼠卵巢功能损害的实验研究

【目的】探讨1-磷酸-神经鞘氨醇（S1P）对环磷酰胺（CTX）导致的大鼠卵巢功能损害的保护作用及可能机制。[方法]40只雌性SD大鼠随机分为4组，即实验对照组（生理盐水组）、CTX组、S1P＋NS组及S1P＋CTX组，每组10只，于结束用药的第1～2周内的动情间期处死，观察卵泡数量的变化，并采用半定量RT-PCR检测卵巢组织Bcl-2及Bax的mRNA变化。【结果】S1P＋CTX组的原始卵泡、初级卵泡和生长卵泡数与S1P＋NS组、对照组的差别不显著（P〉O．05），而CTX组的所有卵泡数均少于其余3组，其差异均有显著性意义（P〈0．01）。卵巢组织中，S1P两组Bcl-2 mRNA的表达明显高于对照组及CTX组（P〈0．01），BaxmRNA表达明显低于对照组及CTX组（P〈0．01）；而CTX组的Bcl-2 mRNA表达明显低于对照组及S1P两组（P〈O．01），BaxmRNA表达明显高于对照组及及S1P两组（P〈0．01）。【结论】S1P能预防CTX导致的大鼠卵巢功能损害，其抗凋亡作用可能是通过调节Bcl-2家族成员表达而实现。     

1-磷酸鞘氨醇2受体缺失对全身过敏反应小鼠血管通透性的影响

[目的]探讨1-磷酸鞘氨醇(S1P)2受体对全身过敏反应小鼠血管通透性的调节作用及其机制.[方法]选取S1P2-/-鼠、eNOS-/-鼠及S1P2-/-/eNOS-/-鼠,建立血小板活化因子(PAF)诱导的全身过敏反应小鼠模型.利用伊文思蓝色素漏出法测定血管通透性,采用温氏法测定红细胞压积,并观察肺组织病理学改变及小鼠死亡率.[结果]与野生鼠比较,S1P2-/-鼠肺血管通透性、红细胞压积及死亡率均显著增高(P<0.01),eNOS基因敲除的S1P2-/-鼠的红细胞压积及死亡率均明显降低(P<0.01).[结论]S1P2受体缺失可增加全身过敏反应小鼠的血管通透性,此效应通过eNOS途径实现.     

1-磷酸鞘氨醇对长春瑞滨化疗血管的防护作用

目的探讨1-磷酸鞘氨醇（sphingosine1-phosphate,S1P）预防化疗性静脉炎的效果。方法将30只新西兰兔随机分为空白对照组、地塞米松处理组和S1P处理组,每组兔耳20只。空白对照组直接注射长春瑞滨,剂量为2mg/kg;地塞米松组先注射地塞米松,剂量为0.25mg/kg,再注射长春瑞滨;S1P处理组先注射S1P,剂量为90μg/kg,再注射长春瑞滨。比较三组的疗效。结果在输注长春瑞滨72h后静脉炎发生最严重,其中S1P组相对其他组静脉炎较轻微;地塞米松组和S1P组的微血管通透性改变较对照组轻微。结论 1-磷酸鞘氨醇可以预防长春瑞滨所致化疗性静脉炎。     

1-磷酸鞘氨醇受体信号在造血干/祖细胞迁移中的作用

目的 探讨1-磷酸鞘氨醇受体(S1PRs)在CD34+造血干/祖细胞迁移中的作用.方法 用密度梯度离心法分离脐血 CD34+细胞,悬浮于transwell培养板的上层,在不同组细胞中分别给予FTY720预处理、含或不含百日咳毒素(PTX)或CXCR4单抗,下层添加SDF-1,流式细胞仪检测迁移细胞数,计算迁移率.同时用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测迁移前后CD34+细胞的SlPRs的表达情况.另用兀Y720处理脐血CD34+细胞,在不同时间点(1、8、16h)用流式细胞仪检测CD49d(VLA-4)、CD11a(LFA-1)、CD62L(L-selectin)的表达.结果 FTY720不影响CD34+细胞的自发迁移,但明显促进SDF-1诱导的CD34+细胞迁移(15.262.14 vs 28.64 2.37),这种作用可以被PTX和CXCR4单抗完全阻断.新鲜分离的脐血CD34+细胞表达S1P1-5,但在FTY720和SDF-1作用下发生迁移的CD34+细胞只表达S1P1、S1P3,S1P4.CD34+细胞在FTY720作用下各个时间点测得的黏附分子表达水平无差别.结论 S1PRs可能与CD34+细胞快速迁移有关,激活S1PRs能够增加SDF-1对CD34+细胞的趋化作用,这种作用是通过CXCR4介导的,信号传递偶联PTX敏感的Gi蛋白受体家族.表达特定S1PRs的CD34+细胞才容易发生快速迁移.FTY720不改变CD34+细胞黏附分子的表达.     

1-磷酸-神经鞘氨醇预防化疗大鼠卵巢功能损害的实验研究

 【目的】探讨1-磷酸-神经鞘氨醇(S1P)对环磷酰胺(CTX)导致的大鼠卵巢功能损害的保护作用及可能机制。【方法】40只雌性SD大鼠随机分为4组,即实验对照组(生理盐水组)、CTX组、S1P+NS组及S1P+CTX组,每组10只,于结束用药的第1～2周内的动情间期处死,观察卵泡数量的变化,并采用半定量RT-PCR检测卵巢组织Bcl-2及Bax的mRNA变化。【结果】S1P+CTX组的原始卵泡、初级卵泡和生长卵泡数与S1P+NS组、对照组的差别不显著(P>0.05),而CTX组的所有卵泡数均少于其余3组,其差异均有显著性意义(P<0.01)。卵巢组织中,S1P两组Bcl-2 mRNA的表达明显高于对照组及CTX组(P<0.01),Bax mRNA表达明显低于对照组及CTX组(P<0.01);而CTX组的Bcl-2 mRNA表达明显低于对照组及S1P两组(P<0.01),BaxmRNA表达明显高于对照组及及S1P两组(P<0.01)。【结论】S1P能预防CTX导致的大鼠卵巢功能损害,其抗凋亡作用可能是通过调节Bcl-2家族成员表达而实现。     

鞘氨醇-1-磷酸转运体Spns2的研究进展

鞘氨醇-1-磷酸（S1P）是一种鞘脂类信号分子,在细胞增殖、分化和迁移等诸多方面发挥重要的调节作用。S1P在细胞内生成,随后释放到细胞外与靶细胞膜上的S1PR受体结合。S1P的体内来源主要是造血细胞和血管内皮细胞。造血细胞中S1P的释放主要通过ABC转运蛋白家族,而血管内皮细胞中S1P的释放则是通过Spns2。Spns2是首个被发现并确认具有重要生理功能的S1P转运蛋白,属于主要协助转运蛋白超家族。应用Spns2基因敲除小鼠模型研究发现Spns2缺陷小鼠的血浆S1P水平较野生小鼠明显下降,淋巴细胞外迁受到抑制。本文将对Spns2的研究历史、结构特性、作用底物、生理功能,以及Spns2与免疫性疾病和癌症的相关性进行简要介绍,为进一步研究Spns2提供重要参考。     

1—磷酸鞘氨醇在人胃癌细胞与血管内皮细胞增殖中的作用

目的：1－磷酸鞘氨醇是新发现的细胞外递质和细胞内第二信使，研究它在人胃癌细胞与血管内皮细胞的增殖及凋亡调控中的作用。方法：光镜观察二甲基鞘氨醇作用前后的细胞形态；MTTI地检测细胞的增殖能力，电镜观察细胞的超微结构及有无凋亡发生。结果：（1）抑制1磷酸鞘氨醇生存后，胃癌细胞与血管内皮细胞形态发生明显变化；（2）二甲基鞘氨醇几乎可以完全抑制两种细胞的增殖；（3）一定剂量时可诱导两细胞凋亡。结论：1－磷酸鞘氨醇在人胃癌细胞与血管内皮细胞的形态，增殖和凋亡的调控中起重要作用。     

外源性1-磷酸神经鞘氨醇(S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞DNA合成的影响

 目的  观察外源性1-磷酸神经鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞增殖的影响。方法  分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,通过制备S1P脂质体使S1P转运到骨骼肌成肌细胞内或直接加入外源性S1P,采用3H-TdR渗入法检测S1P进入细胞内和在细胞外对骨骼肌成肌细胞DNA的合成;进一步使用磷酸神经鞘氨醇激酶(sphingosine kinase,SphK)活性抑制剂N,N 二甲基鞘氨醇(N,N dimethyl sphingosine,DMS)和HACPT ［2-(p-hydroxyanilino)-4-(p-chlorophenyl) thiazole］,观察其对S1P促进DNA合成作用的影响。结果  S1P脂质体转入可明显促进骨骼肌成肌细胞DNA合成。100~1 000 nmol/L剂量范围内S1P脂质体使细胞胸腺嘧啶核苷(3H TdR)的摄入量较对照组增加 12.3%~50.7% (P<0.01),并与剂量呈正相关。该促进作用不会被SphK活性抑制剂DMS和HACPT所阻断。S1P直接加入培养液同样能促进细胞DNA合成(P<0.01),500和 1 000 nmol/L剂量组3H-TdR的摄入量较对照组分别增加18.8% (P<0.05)和26.5% (P<0.05),增幅低于同剂量的S1P脂质体。该促进作用可被DMS和HACPT所阻断。结论  外源性S1P可促进体外培养的大鼠骨骼肌成肌细胞增殖,其作用可能与细胞内SphK活性增加引起细胞内S1P生成增多。