基于TXNIP信号通路调控的艳山姜挥发油对高糖诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

目的 研究艳山姜挥发油（EOAZF）对高浓度葡萄糖（HG）诱导人脐静脉内皮细胞（HUVECs）损伤的保护作用,为研究EOAZF改善糖尿病诱导的心血管疾病提供实验依据。方法 该项目研究分为正常组,模型组（25 mmol·L^-1葡萄糖组）,阳性药组（100 mg·L^-1维生素C）,EOAZF低、中、高浓度组（0.25,1,4 μg·L^-1）。通过建立HG诱导HUVECs损伤模型,检测不同给药组内皮细胞中的丙二醛（MDA）,一氧化氮（NO）和内皮素1（ET-1）的分泌量,评价EOAZF对高糖诱导HUVECs损伤的保护作用;采用AnnexinV-FITC/PI双染实验以及DCFH-DA荧光探针标记,考察EOAZF对HG诱导HUVECs的凋亡水平和活性氧（ROS）产生的影响;采用蛋白免疫印迹法（Western blot）,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）,检测硫氧还原蛋白相互结合蛋白（TXNIP）与硫氧还原蛋白（Trx-1）蛋白表达和转录水平,采用胰岛素二硫键还原法测定细胞内总Trx-1的酶活性。结果 细胞形态学结果显示,与正常组比较,模型组HUVECs增殖速度明显降低,细胞形态受损;与模型组比较,0.25,1,4 μg·L^-1EOAZF对HG诱导损伤的HUVECs具有保护作用,且呈浓度依赖性;与正常组比较,模型组显著上调HUVECs内MDA和ET-1分泌量（P<0.05）,下调NO的分泌（P<0.01）;与模型组比较,不同浓度EOAZF均能改善HG诱导的MDA,ET-1和NO的分泌,其中4 μg·L^-1EOAZF能明显降低HG诱导的HUVECs细胞MDA和ET-1的分泌量（P<0.05）,明显上调HUVECs细胞NO的分泌量（P<0.05）;细胞凋亡和ROS检测结果显示,与正常组比较,模型组细胞凋亡和ROS水平均显著上调（P<0.01）;与模型组比较,4 μg·L^-1EOAZF明显降低HG诱导的HUVECs中ROS水平和细胞凋亡率（P<0.05）;免疫印迹实验结果和Trx-1活性检测结果显示,与正常组比较,造模组细胞中TXNIP的mRNA和蛋白水平显著上调（P<0.01）,Trx-1的活性显著降低（P<0.01）;与模型组比较,4 μg·L^-1EOAZF明显下调HG诱导的TXNIP的mRNA与蛋白的表达上调（P<0.05）,同时增强细胞内总Trx-1的酶活活性（P<0.05）,发挥抗氧化应激的作用。结论 EOAZF能改善HG诱导损伤的HUVECs的内皮功能,降低细胞内ROS水平和凋亡水平,发挥显著的内皮细胞保护作用,其机制可能是通过降低TXNIP的mRNA和蛋白水平以及增强Trx-1的活性而发挥的抗氧化应激作用。     

抵当陷胸汤对高糖诱导心肌微血管内皮细胞损伤的影响

目的 基于高糖诱导的心肌微血管内皮细胞（CMECs）模型,观察抵当陷胸汤对其损伤的影响,并探讨其相关作用机制。方法 采用体外培养大鼠原代心肌细胞,给予33 mmol·L^-1葡萄糖造模,造模成功后随机分为模型组（葡萄糖终浓度为33 mmol·L^-1）、正常组、抵当陷胸汤低剂量组（葡萄糖+5%抵当陷胸汤含药血清）、抵当陷胸汤中剂量组（葡萄糖+10%抵当陷胸汤含药血清）、抵当陷胸汤高剂量组（葡萄糖+20%抵当陷胸汤含药血清）和阿拉氯胺（ALT-711）组（葡萄糖+10%ALT-711含药血清）。采用噻唑蓝（MTT）比色法检测含药血清对CMECs增殖的影响;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测各组c-Jun mRNA相对表达水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测磷酸化蛋白质酪氨酸激酶1（p-JAK1）、磷酸化信号转导和转录激活因子1（p-STAT1）、转化生长因子-β₁（TGF-β₁）蛋白的表达水平。结果 与正常组比较,模型组细胞中c-Jun mRNA、p-JAK1、p-STAT1及TGF-β₁蛋白的表达均显著升高（P<0.01）;与模型组比较,各治疗组细胞中c-Jun mRNA表达水平显著降低（P<0.01）,抵当陷胸汤中、高剂量组及ALT-711组中p-JAK1、p-STAT1蛋白表达水平均明显降低（P<0.05,P<0.01）,抵当陷胸汤低剂量组变化差异无统计学意义,各用药组TGF-β₁蛋白均明显降低（P<0.05,P<0.01）,且抵当陷胸汤中、高剂量组较低剂量组下降明显。结论 抵当陷胸汤对高糖损伤的CMECs起到保护作用,其机制可能与降低细胞内JAK/STAT信号转导通路活性有关。     

槲皮素通过激活自噬对LPS诱导的软骨细胞基质代谢及炎症的影响

目的 从细胞自噬角度探讨槲皮素调控膝骨关节炎（KOA）软骨细胞外基质代谢及炎症反应的作用机制。方法 提取软骨细胞、传代培养，及用Ⅱ型胶原蛋白（Collagen Ⅱ）免疫荧光染色鉴定原代细胞；将脂多糖（LPS）诱导的软骨细胞分为空白组（不做任何处理）、模型组（10 mg·L^-1 LPS处理48 h）、槲皮素低、中、高剂量组（10 mg·L^-1 LPS处理48 h+50、100、150 mmol·L^-1槲皮素处理24 h）。细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测LPS（2.5、5、7.5、10、12.5 mg·L^-1）对软骨细胞不同时间（24、48、72 h）增殖的抑制作用；槲皮素（50、100、150、200 mmol·L^-1）对LPS诱导的软骨细胞不同时间（12、24、48 h）增殖的影响；蛋白免疫印迹法（Western blot，WB）检测微管相关蛋白1轻链3Ⅱ（LC3Ⅱ）和泛素结合蛋白p62（p62）蛋白表达。用3-甲基腺嘌呤（3-MA）干预LPS诱导的软骨细胞，分为空白组（不做任何处理）、模型组（10 mg·L^-1 LPS）、槲皮素组（模型组+100 mmol·L^-1槲皮素）、3-MA组（模型组+100 μmol·L^-1 3-MA）、3-MA+槲皮素组（模型组+100 μmol·L^-1 3-MA+100 mmol·L^-1槲皮素），先用LPS处理48 h后，3-MA处理2 h，再用槲皮素干预24 h。酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量；WB检测基质金属蛋白酶-13（MMP-13）、金属蛋白酶组织抑制因子1（TIMP1）蛋白表达。结果 Collagen Ⅱ免疫荧光鉴定结果示，所提取的细胞符合软骨细胞特征；CCK-8法筛选LPS最佳造模质量浓度为10 mg·L^-1、48 h，槲皮素最佳浓度为100 mmol·L^-1、24 h；WB结果示，与空白组比较，模型组LC3Ⅱ表达显著降低（P<0.01），p62表达显著升高（P<0.01），与模型组比较，槲皮素低、中、高剂量组LC3Ⅱ表达显著升高（P<0.01），其槲皮素中剂量组最显著，p62表达显著降低（P<0.01），其槲皮素中剂量组最显著；与空白组比较，模型组MMP-13表达明显升高（P<0.05），TIMP1表达显著降低（P<0.01）；与模型组比较，槲皮素组、3-MA+槲皮素组MMP-13表达明显降低（P<0.05，P<0.01），其中槲皮素组最显著，TIMP1表达显著升高（P<0.01），其中槲皮素组最显著。倒置显微镜下观察软骨细胞形态学改变结果示，槲皮素可恢复受损的软骨细胞形态；CCK-8检测各组细胞增殖结果示，与空白组比较，模型组软骨细胞增殖明显被抑制（P<0.01）；与模型组比较，槲皮素组、3-MA+槲皮素组软骨细胞增殖显著升高（P<0.01），其中槲皮素组最显著；ELISA检测结果示，与空白组比较，模型组IL-1β、TNF-α含量显著升高（P<0.01）；与模型组比较，槲皮素组、3-MA+槲皮素组IL-1β、TNF-α含量明显降低（P<0.05，P<0.01），其中槲皮素组降低最显著。结论 槲皮素可促进LPS诱导的软骨细胞增殖，调控软骨细胞外基质合成与代谢平衡，抑制炎症反应，恢复软骨细胞功能，其机制可能与槲皮素激活细胞自噬有关。     

基于Akt/JNK/p38 MAPK信号通路探讨健脾活骨方对酒精致血管内皮细胞功能损伤的保护作用

目的 观察健脾活骨方（JPHGP）对酒精致血管内皮细胞功能损伤的保护作用,并基于蛋白激酶B/c-Jun氨基末端激酶/p38 MAPK（Akt/JNK/p38 MAPK）信号通路探索相关作用机制。方法 通过鸡胚尿囊膜实验、胸主动脉环实验和人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的迁移、侵袭、黏附和管腔形成实验,在有或无酒精诱导条件下,观察JPHGP不同质量浓度8、16、32 μg·L^-1对血管新生的影响;采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测HUVEC中Akt、JNK、p38 MAPK等磷酸化表达水平。结果 与正常组比较,模型组动脉环周围微血管数目及长度均减少,HUVEC的迁移、侵袭、和管腔形成能力降低（P<0.05,P<0.01）;JPHGP 16、32 μg·L^-1组作用后能明显升高鸡胚尿囊膜新生血管长度（P<0.05,P<0.01）,与模型组比较,JPHGP 8、16、32 μg·L^-1组能浓度依赖地增加胸主动脉环周围微血管数量（P<0.05,P<0.01）,JPHGP 32 μg·L^-1组能升高胸主动脉环周围微血管长度（P<0.05）;JPHGP 16、32 μg·L^-1组均能增强HUVEC的迁移、侵袭、和管腔形成能力。Western blot检测结果表明,与正常组比较,模型组中的p-JNK/JNK、p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-Akt/Akt蛋白表达水平均显著降低（P<0.01）;与模型组比较,JPHGP 8、16、32 μg·L^-1组的p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-Akt/Akt蛋白表达水平均显著升高（P<0.01）,JPHGP 16、32 μg·L^-1组的p-JNK/JNK的蛋白表达水平显著升高（P<0.01）。结论 JPHGP对酒精致血管内皮细胞功能损伤具有保护作用,其机制可能与激活Akt/JNK/p38 MAPK信号通路有关,相关研究结果将为JPHGP“健脾活血”功效阐明提供一定的科学依据。     

不同浓度的柴胡人参药对血清对非酒精性脂肪性肝细胞模型的毒性评估和脂肪变的影响＊

目的 通过观察不同浓度的柴胡人参药对血清对混合脂肪酸诱导的HepG2细胞模型脂肪变的影响，探讨NAFLD细胞模型的建立，筛选出药物血清最佳的效应浓度。方法 HepG2常规培养后，分为正常组（C）组，模型组1（M1×）、模型组2（M2×），将C组加入含10%的小牛血清DMEM培养基继续培养，模型组分别加入两种不同体积配置混合脂肪酸0.5 mmol·L^-1（13.5 μL油酸+6.5 μL棕榈酸）和1 mmol·L^-1（27 μL油酸+13 μL棕榈酸）造模，选出最佳的模型后，将正常组大鼠血清（Zq组）、吡格列酮组大鼠血清（P组）和药对组大鼠血清（Y组）按不同浓度干预细胞24 h，用CCK-8试剂盒检测各组血清毒性，对造模组细胞进行油红O染色和TG含量检测，筛选出含药血清最佳的效应浓度。结果 ①1 mmol·L^-1混合脂肪酸可使脂肪变细胞着色明显，其平均光密度值和TG含量显著高于0.5 mmol·L^-1浓度组（P < 0.01）；②每组含药血清IC₅₀浓度分别为：Zq组：44.27%，是Y组：32.34%，P组：36.00%；IC₁₀浓度分别为：Zq组：10.26%，Y组：10.84%，P组：11.49%，各组含药血清浓度 ≤ 10%时，对于HepG2细胞来说较为安全；③与M组相比，10%浓度的含药血清均能够较显著的减少HepG2细胞内脂滴蓄积，显著降低细胞内甘油三脂（TG）含量（P < 0.01）。结论 1 mmol·L^-1油酸：棕榈酸（2：1）可成功诱导HepG2细胞脂肪变模型，并且10%浓度的柴胡人参药对血清的作用最强，能有效改善HepG2细胞的脂肪变。     

防己黄芪汤对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎及血管新生的影响

目的 观察防己黄芪汤对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎（CIA）及血管新生的影响。方法 将DBA/1小鼠按体质量随机分为正常组,CIA组及防己黄芪汤组（5.4 g·kg^-1）。CIA组及防己黄芪汤组第1天以牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂免疫DBA/1小鼠,于第21天以牛Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂免疫DBA/1小鼠建立CIA模型,并于二次免疫当天开始灌胃给药,每天1次,共给药28 d。第22天开始观察CIA小鼠的关节红肿等症状并进行关节炎评分,第49天取材后,进行组织苏木素-伊红（HE）染色观察CIA小鼠关节滑膜中血管新生情况;免疫组化检测CIA小鼠关节滑膜中血管内皮细胞标志物血小板内皮细胞黏附分子-1（CD31）及血管内皮生长因子（VEGF）的表达情况;免疫荧光双染检测CIA小鼠关节滑膜中成熟血管和不成熟血管的情况。同时,提取大鼠胸主动脉环,采用VEGF（20 μg·L^-1）诱导大鼠胸主动脉环微血管的生长,加入不同浓度防己黄芪汤（0.25,0.5,1 g·L^-1）作用后,显微镜下观察防己黄芪汤对VEGF诱导的大鼠胸主动脉环微血管生长情况并进行拍照统计。结果 与正常组比较,CIA组小鼠炎症关节红、肿及畸形明显,临床关节炎评分、发病率、关节滑膜炎症、血管新生情况显著升高,关节滑膜中的血管密度,CD31和VEGF的阳性表达量、不成熟血管的数量均显著升高（P<0.01）;与CIA组比较,防己黄芪汤组小鼠炎症关节的红、肿及畸形明显改善,临床关节炎评分、发病率、关节滑膜炎症、血管新生情况显著降低,关节滑膜中的血管密度,CD31和VEGF的阳性表达量、不成熟血管的数量均显著下降（P<0.01）。与正常组比较,VEGF能显著诱导大鼠胸主动脉环微血管的生长（P<0.01）;与VEGF组比较,防己黄芪汤（0.25,0.5,1 g·L^-1）可显著抑制大鼠胸主动脉环微血管的生成（P<0.01）。结论 防己黄芪汤可有效缓解CIA小鼠的临床症状,降低临床关节炎评分及发病率,同时具有抑制CIA小鼠关节滑膜中及大鼠胸主动脉环中血管新生的作用。     

通络生骨胶囊对糖皮质激素致血管内皮细胞功能损伤的保护作用

目的 观察通络生骨胶囊（TLSGC）对糖皮质激素致血管内皮细胞功能损伤的影响,并从丝裂原活化蛋白激酶激酶（MEK）/细胞外调节蛋白激酶（ERK）信号通路初步探索其作用机制。方法 取正常SD大鼠胸主动脉环,用甲泼尼龙琥珀酸钠（MPS,0.04 g·L^-1）和（或）血管内皮细胞生长因子（VEGF,20 μg·L^-1）体外干预,加入TLSGC（12.5,25,50 μg·L^-1）连续作用5 d,观察血管环芽出的微生血管数目、长度和面积;此外,以甲泼尼龙琥珀酸钠（MPS,0.04 μg·L^-1）加入由VEGF（20 μg·L^-1）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）,再加入TLSGC（12.5,25,50 μg·L^-1）,然后分别采用transwell迁移,transwell侵袭及管腔形成实验检测HUVEC的迁移、侵袭及管腔形成能力,并以硝酸还原酶法检测细胞上清中一氧化氮（NO）含量,干粉法检测细胞上清中内皮素-1（ET-1）含量,蛋白免疫印迹法检测细胞中血管内皮细胞生长因子受体2（VEGFR2）,ERK,磷酸化（p）-ERK,MEK和p-MEK蛋白表达量。结果 与正常组比较,MPS能明显抑制由VEGF诱导的大鼠胸主动脉环微血管数目、长度和面积以及HUVEC细胞迁移、侵袭和管腔形成能力,降低NO并升高ET-1含量,MPS还能明显减少由VEGF诱导的VEGFR2,p-MEK和p-ERK在HUVEC中的蛋白含量（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,TLSGC能剂量依赖地改善由MPS降低的大鼠胸主动脉环微血管数目、长度和面积以及HUVEC细胞迁移、侵袭和管腔形成能力,提高HUVEC中的NO,VEGFR2,p-MEK和p-ERK蛋白含量并降低ET-1含量（P<0.05,P<0.01）。结论 TLSGC对糖皮质激素所致血管内皮细胞血管生成和分泌功能的损伤具有保护作用,其机制可能与活化MEK/ERK信号通路有关。     

基于MGC-803细胞微环境探讨加味小陷胸汤抑制侵袭迁移作用机制

目的 观察加味小陷胸汤水提取物对MGC-803细胞微环境的影响，探究该方通过调控MGC-803细胞微环境抑制侵袭迁移作用与其调控Wnt5a/Ca²⁺/活化T细胞核因子（NFAT）信号通路的可能机制。方法 转化生长因子-β₁（TGF-β₁）造模后，将MGC-803细胞分为空白组、模型组、加味小陷胸汤组（10、20、40 mg·L^-1）；Wnt5a过表达质粒转染后，分为过表达载体（pEX）-空白（NC）组、pEX-Wnt5a组、pEX-NC+加味小陷胸汤组（40 mg·L^-1）和pEX-Wnt5a+加味小陷胸汤组（40 mg·L^-1）。观察MGC-803细胞侵袭能力、迁移能力、微环境关键因子、上皮间质转化（EMT）基因、Wnt5a、钙调神经磷酸酶（CaN）、NFAT1、磷酸化（p）-NFAT1和NFAT1核蛋白表达及细胞Ca²⁺浓度变化。结果 与空白组比较，模型组微环境显著上调（P<0.01）；与模型组比较，加味小陷胸汤（10、20、40 mg·L^-1）可明显抑制微环境（P<0.05，P<0.01）。进一步实验表明，与空白组比较，模型组过表达Wnt5a后侵袭细胞增多，划痕率升高，微环境因子和EMT基因呈活化态势，Wnt5a/Ca²⁺/NFAT通路激活（P<0.01）；与模型组比较，加味小陷胸汤可抑制细胞远处侵袭和减少愈合，抑制微环境、EMT发展，和Wnt5a/Ca²⁺/NFAT信号转导，降低NFAT1核表达和NFAT1介导的转录活性，从而降低细胞Ca²⁺浓度，且可逆转Wnt5a的作用（P<0.05，P<0.01）。结论 加味小陷胸汤可通过改善MGC-803细胞微环境调控Wnt5a/Ca²⁺/NFAT通路，抑制胃癌侵袭转移和EMT进程。     

葛根抑制高糖诱导巨噬细胞损伤与调控内质网应激信号通路的关系探讨

目的 观察葛根含药血清对高糖诱导的重度内质网应激（ERS）模型中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、内质网应激信号通路蛋白葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、活化转录因子4（ATF4）、蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）、真核翻译起始因子2α（eIF2α）的作用,观察葛根对高糖诱导巨噬细胞炎症损伤的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 采用血清药理学方法,制备空白血清和葛根含药血清,体外培养RAW264.7巨噬细胞,采过62.5 mmol·L^-1葡萄糖诱导巨噬细胞建立体外重度ERS模型,使用不同体积分数的葛根含药血清及内质网应激抑制剂（4-PBA）干预细胞。通过细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测不同葡萄糖浓度（22.5、23.5、25.0、27.5、32.5、47.5、72.5、122.5 mmol·L^-1）及不同体积分数葛根含药血清（0%、2.5%、5%、7.5%、10%、15%、20%）对RAW264.7巨噬细胞存活率的影响;在CCK-8法检测葡萄糖浓度对巨噬细胞存活率影响结果基础上采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测不同葡萄糖浓度浓度（22.5、32.5、42.5、52.5、62.5、72.5 mmol·L^-1）及不同时间段下（6、12、24、36、48 h） ERS的标志性蛋白GRP78的表达量,筛选出建立重度ERS模型最适造模浓度和时间,基于上述实验结果将细胞分为分别将细胞分为空白组、62.5 mmol·L^-1葡萄糖模型组、2 mmol·L^-1 4-PBA组、高、中、低（15%、10%、5%）葛根含药血清组开展后续实验,通过酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测重度ERS模型中RAW264.7巨噬细胞上清液中TNF-α的表达,Western blot检测重度ERS模型中相关通路蛋白表达情况。结果 CCK-8法检测发现,在葡萄糖浓度为27.5 mmol·L^-1刺激下巨噬细胞存活率达到最高（P<0.01）、而在葡萄糖浓度22.5~27.5 mmol·L^-1刺激下,巨噬细胞存活率随浓度增加而呈上升趋势,葡萄糖浓度在25.0 mmol·L^-1时差异有统计学意义（P<0.01）,在葡萄糖浓度37.5~122.5 mmol·L^-1刺激下,则出现了下降趋势,葛根含药血清在1%~15%皆差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）,Western blot法检测不同葡萄糖浓度和不同时间段下的GRP78蛋白表达量发现,在24 h时,GRP78蛋白表达显著性最强（P<0.01）,葡萄糖浓度为62.5 mmol·L^-1时,GRP78蛋白表达量最强（P<0.01）;由此可知葡萄糖浓度为62.5 mmol·L^-1可作为诱导重度ERS模型的最适浓度。与空白组相比较,模型组中TNF-α、GRP78、ATF4蛋白表达水平,磷酸化（p）-PERK/PERK、p-eIF2α/eIF2α明显升高（P<0.05,P<0.01）,而与模型组比较,各给药组的TNF-α、GRP78、ATF4蛋白表达水平,p-PERK/PERK、p-eIF2α/eIF2α明显降低（P<0.05,P<0.01）。结论 在体外实验结果表明,葛根在一定程度上可缓解高糖诱导巨噬细胞所出现的炎症损伤及通过抑制ERS信号通路中GRP78、ATF4、PERK、eIF2α的表达,以此来恢复细胞稳态。     

木兰脂素对离体大鼠胸主动脉环血管舒张机制和大鼠肾细胞毒性作用

目的: 研究木兰脂素（magnolin,Mag）的舒张血管作用、作用机制和细胞毒性。 方法: 应用离体血管环技术观察Mag对大鼠胸主动脉环张力的作用,记录去氧肾上腺素 （phenylephrine,PE,1 μmol·L^-1）预收缩的离体大鼠胸主动脉环张力变化。采用一氧化氮合酶（eNOS） 抑制剂L-硝基精氨酸甲酯（L-NAME,100 μmol·L^-1）预处理后观察Mag对血管环张力改变的 影响,并用MTT方法观察对大鼠肾细胞（NRK）增殖的影响。 结果: 木兰脂素（0.1~1 000 μmol·L^-1）对PE预收缩的血管环具有浓度依赖的舒张作用,该舒张作用为内皮依赖性。50%最大效应浓度（Half maximal effective concentration,EC₅₀）为24.43 μmol·L^-1。 内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthesis,eNOS）抑制剂-NG-硝基-L-精氨酸甲酯（NG-Nitro-L-arginine methyl ester hydrochloride,L-NAME,100 μmol·L^-1）预处理可以抑制Mag对具内皮血管的舒张效应。木兰脂素（0.1~1 000 μmol·L^-1）处理NRK的相对增殖率在84.17%和134.60%。 结论: 木兰脂素具有内皮依赖性舒张血管作用,其机制可能与内皮型一氧化氮合成酶激活有关,且没有肾细胞毒性。     

基于ICP-MS法的麝香保心丸中26种无机元素分析

目的采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法建立麝香保心丸中26种无机元素(Li、Na、Mg、Al、Ca、Ti、V、Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、Ga、As、Se、Sr、Mo、Cd、Sb、Ba、Hg、Tl、Pb、Bi)的测定方法。方法麝香保心丸样品以浓硝酸为消解试剂经微波消解后,以Ge、In元素为内标,以灌木枝叶标准物质作为质控标准物质,采用ICP-MS法测定其中26种无机元素的量。结果待检测的26种元素线性关系良好,相关系数r≥0.999 4,各元素的检出限在0.010~2.987μg/L,定量限在0.035~10.000μg/L,回收率在79.88%~105.76%,RSD≤4.55%。测定的12批样品中Ca、Mg、Na、Fe量较高,均超过1.000 mg/g;Mn、Cu、Zn、Al、Ga量也相对较高,而Sb、Hg、Tl、Bi量相对较低,均在0.050μg/g以下。结论该方法操作简便,分析速度快,灵敏度高,适用于麝香保心丸中无机元素的测定。     

基于ICP-MS法分析九味熄风颗粒中25种重金属及微量元素

目的采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法建立九味熄风颗粒中25种重金属及微量元素(Li、Mg、Cd、Sn、Al、Mn、Fe、Ti、V、Co、Zn、Ga、Cr、Ni、Tl、Pb、Cu、As、Be、B、Sb、Ba、Sr、Hg、Bi)的测定方法。方法九味熄风颗粒样品经微波消解后,以Ge、In元素为内标,以灌木枝叶标准物质作为质控标准物质,采用ICP-MS法进行测定。结果检测的25种元素线性关系良好,相关系数R2≥0.999 2,各元素的检出限在0.009~16.051μg/L,回收率在70.75%~107.66%,RSD≤6.44%。测定的6批样品中Cr、Sn、Hg、Pb均未检出,Tl、Cd、As、Cu的量均较低或未检出,Cd≤0.011μg/g,Cu≤0.373μg/g,Tl≤0.021μg/g,As≤0.571μg/g。结论该方法操作简便,分析速度快,灵敏度高,适用于九味熄风颗粒中重金属及微量元素的测定。     

微波消解-电感耦合等离子体质谱法测定脉络宁注射液中25种矿物质元素

目的建立微波消解-电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)直接稀释测定脉络宁注射液中25种矿物质元素(Mg、Ca、Fe、Cu、Zn、Mn、Al、B、Ba、Co、Cr、K、Li、Mo、Na、Ni、P、Pb、Sr、Th、Ti、V、As、Cd和Hg)的方法。方法分别对微波消解条件和测试条件进行考察;样品经微波消解后,采用电感耦合质谱仪测定25种矿物质元素,并对测定方法学进行考察。结果确定最佳消解条件为3步缓慢升温:400 W 80℃升温10 min,保留5 min;600 W 120℃升温10 min,保留5 min;900 W 200℃升温20 min,保留20 min;25种矿物质元素在各自的线性范围内线性关系良好,r≥0.999 6,精密度、稳定性和重复性试验的RSD均符合定量分析要求;加标回收率为94.7%~106.1%,RSD在0.34%~2.79%。脉络宁注射液中检测出Mg、Ca、Fe、Cu、Zn、Mn、Al、B、Ba、Co、Cr、K、Li、Mo、Na、Ni、P、Pb、Sr、Th、Ti、V,未检出As、Cd和Hg。结论该方法简便、迅速、准确,适用于脉络宁注射液中25种矿物质元素的同时测定。     

蜂蜜炼制前后黄酮类成分种类和含量变化分析

目的研究中药辅料蜂蜜炼制前后黄酮类成分变化。方法参考《中药药剂学》,对不同来源的6种蜂蜜进行炼制。供试品经固相萃取法富集黄酮类成分。采用高效液相色谱-三重四级杆串联质谱(HPLC-TQ-MS)法测定,Thermo Accucore RP-MS色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.6μm),以0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱,体积流量0.3 m L/min,柱温30℃。质谱条件:采用电喷雾离子源(ESI),正离子检测模式,多反应监测模式(MRM)扫描分析。结果蜂蜜中共检测到12种黄酮类成分,包括黄酮苷元、二氢黄酮苷元和异黄酮苷元。黄酮苷元有8种:槲皮素、桑黄素、木犀草素、山柰酚、芹菜素、汉黄芩素、高良姜素和白杨素;二氢黄酮苷元有3种:短叶松素、柚皮素和乔松素;异黄酮苷元染料木素。不同蜜源蜂蜜所含黄酮类成分种类和含量存在明显差异。6个蜂蜜样品炼制后,都发现了蜂蜜中没有报道过的芦丁和芸香柚皮苷,12种检测到的蜂蜜黄酮类成分在炼制后其量都有不同程度的变化,椴树蜜的槲皮素、桑黄素、木犀草素、山柰酚、芹菜素、汉黄芩素、乔松素和白杨素量均有增加,短叶松素、柚皮素和高良姜素量没增加反而还有下降的;洋槐蜜中除芹菜素量增加不明显外,其余均有所增加,尤其是槲皮素和桑黄素增加的较为明显;百花蜜和枣花蜜12种黄酮类成分量均显著增加。结论炼制可造成蜂蜜中黄酮类成分的种类和含量发生改变。     

基于ICP-MS法分析银杏叶系列品种中25种无机元素

目的建立银杏叶制剂中25种无机元素的电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分析方法,并对不同剂型银杏叶制剂中无机元素量进行比较分析。方法样品经微波消解后,采用ICP-MS法测定25种无机元素量,绘制无机元素指纹谱图,并进行方法学考察。结果 25种无机元素在各自的线性范围内线性关系良好,r≥0.950 0,精密度、稳定性和重复性试验的RSD值均符合定量分析要求;加样回收率为91.35%～108.86%,RSD在0.05%～4.45%。银杏叶制剂中检测了25种无机元素量,并绘制无机元素指纹图谱,发现其谱图具有一定的特征性;银杏叶片中元素Hg、Al、Cr的量较高,有害无机元素的量超标应引起关注。结论通过无机元素在银杏叶制剂中的组成分布及其量的变化规律研究,为银杏叶制剂的质量控制及安全性评价提供依据,同时为临床使用提供一定参考。     

Die Lateralität und Lateralitätsinstabilität in der Diagnostik und Therapie

The disturbance and instability of laterality are obstacles to diagnostics and therapy. Correction prior to starting therapy is required. They also predispose toward defined health problems and unspecific diseases. Numerous research activities provide evidence of the relevance of undisturbed laterality in diagnostics and therapy. Techniques of testing and therapeutic corrections will allow for optimized therapy success.     

Gibt es eine Beziehung zwischen Qigong und Moderner Physik?

Based on the principle of completeness, Qigong is described as a method uniting external and internal paths to insight, and this can be perceived while practicing it. The common principle which we approach in every Qigong exercise is named the Dao. In quantum physics, there are also phenomena showing an underlying unity: entanglement of atomic systems.     

Biopotency Assays, a Model with Integration Feature for Quality Control Research of CMM

正As known,the development of quality control(QC)and quality assessment(QA)in the products of Chinese materia medica(CMM)is difficult and challenging.Some of the well-known analysis methods,such as IR,UV,HPLC,NMR GC-MS,and LC-MS have been applied in chemical components of the QC of CMMs and have gained significantimpact and advancement in modern analytical fields.In fact,the variables of CMM quality are caused by intrinsic and     

基于ICP-MS法的加味左金丸中无机元素分析

目的 通过电感耦合等离子体质谱（inductively coupled plasma mass spectrometry,ICP-MS）法建立加味左金丸中Cd、Pb、As、Hg、Co、V、Ni、Cu、Li、Sb、Ba、Mo、Sn、Cr、Na、Mg、Al、Ca、Ti、Mn、Fe、Zn、Ga、Se、Sr、Tl共计26种无机元素的测定方法。方法 加味左金丸通过微波消解法处理后,根据相对分子质量的大小选择内标物,其中⁷Li、²³Na、²⁴Mg、²⁷Al、⁴⁰Ca、⁴⁸Ti、⁵¹V、⁵²Cr、⁵⁵Mn、⁵⁶Fe、⁵⁸Ni、⁵⁹Co、⁶³Cu、⁶⁶Zn、⁷⁰Ga、⁷⁵As、⁷⁷Se、⁸⁶Sr以⁷²Ge作为内标;⁹⁵Mo、¹¹⁴Cd、¹¹⁸Sn、¹²¹Sb、¹³⁷Ba以¹¹⁵In作为内标;²⁰²Hg、²⁰⁵Tl、²⁰⁸Pb以²⁰⁹Bi作为内标。对标准品溶液、空白溶液与供试品溶液进行分析,采用标准曲线法进行定量分析。通过ICP-MS法进行测定。结果 26种无机元素线性的相关系数r ≥ 0.999 6,检出限为0.001~1.500μg/L,定量限为0.01~5.00 μg/L,精密度与重复性试验的RSD均小于5%,平均回收率在82.64%~106.44%,RSD均小于5%。对3个厂家的12批样品进行了测定,26种元素的含量差异较大,其中Na、Mg、Ca、Fe 4种元素的含量比较高,均大于500 μg/g,Cd、Pb、As、Hg、Co、Li、Sb、Mo、Sn、Cr、Se、Tl的含量比较低,均小于1 μg/g。由结果可知,人体的常量元素,如Na、Mg、Ca的含量比较高,Cd、Pb、As、Hg等有害元素含量比较低。根据《中国药典》2020年版一部的要求,本品中Cd、Pb、As、Hg与Cu均符合规定。结论 该方法快速、准确,可以用于加味左金丸中无机元素的测定。     

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正The Journal of Acupuncture and Tuina Science,a journal with an international scope(ISSN 1672-3597,CN 31-1908/R,Bimonthly),is embodied by‘Springer Verlag'Database,Index Copernicus(IC)and Chinese Scientific and Technical Paper and Citations Data(CSTPCD).You can search full text on http://www.springerlink.com/content/1672-3597.