竹节参总皂苷提取物质量控制方法研究

目的:建立以活性主成分定量的竹节参总皂苷活性相关质量评价方法.方法:通过优化得到的竹节参总皂苷提取工艺制备竹节参总皂苷提取物,高效液相色谱法测定提取物中主成分含量,将这些主成分配制成与药材提取物总皂苷中含量相当浓度的主成分群,以体外抗氧化模型评价主成分群与提取物活性成分差异.结果:总皂苷提取物体外抗氧化活性为71.30 U·g-1,其中竹节参皂苷V含量24.9 mg·g-1、竹节参皂苷Ⅳa含量为90.6 mg·g-1、竹节参皂苷Ⅳ含量为38.7 mg·g-1、Pjs-2含量为41.1 mg·g-1,主成分群体外抗氧化能力为64.79 U·g-1.结论:以竹节参总皂苷主成分竹节参皂苷V、竹节参皂苷Ⅳa、竹节参皂苷Ⅳ、Pjs-2作为药效评价指标的准确性高,具有一定的科学性、合理性,竹节参总皂苷供试品中竹节参皂苷V含量应≥24.9 mg·g-1,竹节参皂苷Ⅳa含量≥90.6 mg·g-1,竹节参皂苷Ⅳ含量≥38.7 mg·g-1,Pjs-2含量≥39.6 mg·g-1.     

竹节参药材不同部位皂苷成分的分析研究

目的建立HPLC法同时测定竹节参药材中皂苷Ⅴ、Ⅰb、Ⅳ和Ⅳa的方法;并对鄂产竹节参植物不同部位中竹节参总皂苷、竹节参皂苷Ⅴ、Ⅰb、Ⅳ和Ⅳa的含量进行检测分析,评价其药用价值。方法采用超声法提取竹节参不同部位中的总皂苷成分;紫外-可见分光光度法测定其的含量;HPLC法同时测定不同部位竹节参中皂苷Ⅴ、Ⅰb、Ⅳ和Ⅳa含量,色谱柱为Apollo C18(4.6 mm×200 mm,5μm),流动相35%乙腈-0.05%磷酸水溶液,流速1.0 ml.min-1,波长203 nm,柱温25℃,进样量20μl。结果竹节参根茎干中总皂苷、皂苷Ⅴ、Ⅰb、Ⅳ和Ⅳa含量分别为14.49%,4.97%,0.47%,4.90%和2.49%;芦头结节部分分别为11.91%,2.57%,1.18%,3.46%和1.62%;地上茎叶部分分别为0.56%,0.05%,0.01%,0.07%和0.03%。结论建立的方法灵敏性高,重复性好,操作简便;鄂产竹节参地下根茎部分中根茎干和芦头结节的有效成分总皂苷含量较高,地上茎叶部分皂苷含量较低,有效成分含量与其传统的药用部位相符;竹节参药用部位中皂苷Ⅴ、Ⅰb、Ⅳ和Ⅳa成分分布均匀,且含量占总皂苷的2/3以上,可以作为竹节参药材质量评价指标。     

不同产地珠子参中竹节参皂苷Ⅳa含量测定

目的:测定不同产地珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量。方法:高效液相色谱法,色谱柱:Inertsil ODS-sp(4.6mm×150 mm,5μm);流动相乙腈-0.2%磷酸(35∶65);柱温30℃;流速1.0 mL.min-1;检测波长203 nm。结果:对陕西等8省区所产珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量进行测定,其中以陕西眉县样品中竹节参皂苷Ⅳa的质量分数最高为7.38%,湖北恩施样品中竹节参皂苷Ⅳa质量分数最低为2.17%。结论:不同产地珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量具有较大差异。     

珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量测定

目的 建立高效液相色谱法测定珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量.方法 供试品用60%乙醇超声提取40min,滤过,取续滤液作为供试品溶液;高效液相色谱仪测定峰面积.色谱柱:Inertsil ODS-sp(5μm,4.6 mm×150 mm);流动相:乙腈-0.2%磷酸溶液(35:65);柱温:30℃;流速:1.0 ml/min;检测波长:203 nm.结果 珠子参中竹节参皂苷Ⅳa与其他组分分离良好,保留时间12.5 min.竹节参皂苷Ⅳa对照品线性范围1.007 6～10.076μg,r = 0.999 9,平均回收率为103.46%,RSD为0.81%.结论 该法操作简便,方法 稳定性,分离度好,灵敏度高,可用于珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量测定.     

HPLC-DAD-ELSD法同时测定牛膝中β-蜕皮甾酮、人参皂苷R0、竹节参皂苷Ⅳa的含量

目的:采用高效液相色谱-二极管阵列检测器-蒸发光散射检测器(HPLC-DAD-ELSD)法同时测定牛膝中3种化合物β-蜕皮甾酮、人参皂苷R_0、竹节参皂苷Ⅳa的含量。方法:采用Agilent 5 TC-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.08%甲酸(A),水-2.5%异丙醇-0.08%甲酸(B)不同比例进行梯度洗脱;流速为0.9 mL/min,运行时间80 min,β-蜕皮甾酮采用DAD进行检测,检测波长为248 nm;人参皂苷R_0和竹节参皂苷Ⅳa采用ELSD进行检测,漂移管温度为110℃,载气流速3.2 L/min。结果:β-蜕皮甾酮在0.001 9～0.096 3 mg/mL浓度范围内浓度与峰面积间呈良好的线性关系(r~2=0.999 9);人参皂苷R_0、竹节参皂苷Ⅳa分别在0.002 2～0.469 5 mg/mL和0.004 7～0.483 0 mg/mL浓度范围内浓度的对数与峰面积的对数间呈良好的线性关系(r~2=0.999 5,r~2=0.999 4)。牛膝中三种化合物(β-蜕皮甾酮、人参皂苷R_0、竹节参皂苷Ⅳa)的平均加样回收率分别为99.29%(RSD为2.14%)、99.13%(RSD为2.04%)和98.30%(RSD为2.11%)。结论:本研究所建立的方法简便,快速,且稳定性、精密度、重复性良好,适用于牛膝中甾酮类和皂苷类成分的同时测定,也可用于牛膝药材的质量控制。     

一测多评法测定竹节参中7种皂苷类成分的含量

目的建立一测多评法同时测定竹节参中7种皂苷类成分的含量,并验证此方法在竹节参中应用的可行性与适用性。方法采用HPLC法,以竹节参皂苷Ⅴ为内参物,建立人参皂苷Rg1、Re、Rb1,假人参皂苷RT1,竹节参皂苷Ⅳ、Ⅳa的相对校正因子(fs/i),并利用fs/i计算竹节参样品中成分的含量,同时用外标法测定各成分的含量,比较2种方法的差异。结果人参皂苷Rg1、Re、Rb1,假人参皂苷RT1,竹节参皂苷Ⅳ和Ⅳa的fs/i分别为1.286 7、1.432 7、0.966 6、0.962 4、1.207 2、0.938 4。采用一测多评法与外标法得到的10批竹节参样品各成分含量无显著性差异。结论建立的一测多评法准确性高,可用于竹节参皂苷类成分的定量分析和质量评价。     

竹节参中皂苷含量测定方法的建立

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定竹节参中人参皂苷Rg 1、人参皂苷Re、人参皂苷Ro、竹节参皂苷Ⅳa含量的方法。方法:色谱柱:Waters Symmetry C18柱(5μm,4.6×250 mm);流动相:乙腈-0.2%磷酸溶液;流速:1.0 mL/min;检测波长:203 nm。结果人参皂苷Rg 1、人参皂苷Re、人参皂苷Ro、竹节参皂苷Ⅳa的线性范围分别为0.01753ug-1.7531ug(r=1)、0.01754ug-1.7541ug(r=1)、0.04917ug-4.917ug(r=1)、0.0248751ug-0.99486ug(r=1),平均回收率分别为94.68%(RSD=2.45%)、94.71%(RSD=2.82%)、97.92%(RSD=2.08%)、94.80%(RSD=2.41%)。结论该方法简便可行,重复性好,可用于测定竹节参中人参皂苷Rg 1、人参皂苷Re、人参皂苷Ro;竹节参皂苷Ⅳa的含量,为进一步提高竹节参的质量控制提供依据。     

糖智宁胶囊定量分析方法研究

目的建立糖智宁胶囊的定量分析方法。方法采用HPLC测定糖智宁胶囊中葛根素、盐酸小檗碱、人参皂苷Ro和竹节参皂苷Ⅳa的含量。Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);柱温30℃;流动相为乙腈-0.2%磷酸溶液(梯度洗脱);流速1 ml·min-1;检测波长203 nm。结果 HPLC中,葛根素、盐酸小檗碱、人参皂苷Ro和竹节参皂苷Ⅳa线性范围分别为0.87~15.66μg(r=0.999 6)、1.84~40.48μg(r=1.000 0)、0.19~4.114μg(r=0.999 9)、3.24~71.28μg(r=0.999 9),平均加样回收率分别为98.14%、98.18%、98.69%、97.02%,RSD分别为0.51%、2.16%、1.39%、1.50%。结论该方法简单、专属性强、重复性好、结果准确可靠,可用于糖智宁胶囊的质量评价。     

开口箭皂苷抗炎活性的研究

目的评价开口箭总皂苷的抗炎活性。方法采用系统溶剂萃取,运用角叉菜胶所致小鼠足肿胀模型和脂多糖刺激小鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮细胞模型对开口箭不同提取部位的抗炎活性进行研究。结果开口箭水溶性浸膏、正丁醇萃取物、石油醚萃取物对角叉菜胶所致小鼠足肿胀及肿胀足中前列腺素E2含量升高均具有显著抑制作用(P<0.01)。其总皂苷经大孔树脂吸附,30%,70%,95%乙醇洗脱,各洗脱部分对脂多糖刺激腹腔巨噬细胞产生NO均有显著抑制作用(P<0.01)。结论开口箭具有良好的抗炎作用,具有良好的开发利用价值。皂苷是其抗炎的重要物质基础之一。抑制炎症介质PGE2,NO的产生是其作用机理之一。     

珠子参饮片质量标准研究

目的:建立珠子参饮片质量标准。方法:采用性状、显微、TLC进行定性鉴别,高效液相色谱法测定人参皂苷Ro、竹节参皂苷Ⅳa的含量。同时测定了水分、灰分和酸不溶性灰分等。结果:对四川、云南、贵州等省区所产珠子参饮片中人参皂苷Ro和竹节参皂苷Ⅳa的含量进行测定,结果显示,各样品中人参皂苷Ro平均含量为7.19%,竹节参皂苷Ⅳa的平均含量为3.16%。结论:本法操作简便、稳定性好,可用于珠子参饮片中人参皂苷Ro和竹节参皂苷Ⅳa的含量测定;制定的质量标准规范,结果准确。     

HPLC法同时测定芩石利咽口服液中8种成分及其镇咳、抗炎活性研究

目的 建立HPLC法同时测定芩石利咽口服液(黄芩、生石膏、水牛角等)中原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸、芍药苷、连翘酯苷A、黄芩苷、木犀草素、汉黄芩素的含量,并研究其镇咳、抗炎活性.方法 该药物的HPLC分析采用phenomenex柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相甲醇-0.1％磷酸,梯度洗脱;体积流量1 mL...     

HPLC法同时测定不同采收期珠子参中5种皂苷类成分含量

目的:建立不同采收期珠子参中人参皂苷Rg1、人参皂苷Ro、竹节参皂苷Ⅳa、姜状三七苷R1以及去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa 5种化学成分的含量测定方法。方法:采用Thermo C18 (5μm,4.6 mm×250 mm)色谱柱;以0.02%的磷酸水溶液和乙腈进行梯度洗脱;柱温30℃;流速1 m L·min~(-1);检测波长203 nm。结果:不同采收期中5种化学成分含量积累在7月份达到最高。结论:7月份可作为珠子参最佳采收期,用于珠子参的质量控制。     

竹节参HPLC-ELSD指纹图谱和化学成分分析

目的:建立竹节参药材HPLC-ELSD液相指纹图谱,分离纯化鉴定其主要特征峰的单体化合物,客观评价竹节参内在质量差异。方法:采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD),梯度洗脱,测定了10批竹节参样品。色谱条件为YMC-pack ODS-AQ色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈(A)-0.5%乙酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~5 min,20%~40%A;5~20 min,40%~40%A),流速为1.0 mL.min-1,柱温30℃。ELSD检测器:漂移管温度为40℃,氮气释放压力为33 Psi。通过采用反复硅胶柱色谱和半制备HPLC的方法分离纯化竹节参的化学成分,并根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果:建立了10批竹节参样品HPLC-ELSD指纹图谱,分离纯化鉴定了5个主要化学成分,分别为人参皂苷Re,竹节参皂苷Ⅳ,Ⅳa,Ⅴ,Pjs-2。结论:综合竹节参指纹图谱和化学成分分析,能较全面的表征不同产地竹节参内在成分的差异,为竹节参内在质量评价提供依据。     

大孔吸附树脂富集纯化竹节参总皂苷工艺条件优选

目的 研究大孔吸附树脂富集纯化竹节参中总皂苷的工艺条件及参数.方法 以竹节参总皂苷的吸附量和洗脱率为指标,筛选大孔吸附树脂,并研究所选树脂富集纯化竹节参总皂苷的吸附和洗脱条件.结果 D101树脂对竹节参总皂苷有较好的吸附分离性能.最佳工艺条件为上样质量浓度为0.2 g生药/mL,以3BV 70％乙醇溶液洗脱,吸附及洗脱体积流量均为1 mL/min,洗脱液蒸干,即得纯化的竹节参总皂苷提取物.纯化后竹节参总皂苷质量分数为82.53％,精制度达338.81％.结论 D101大孔吸附树脂富集纯化竹节参中总皂苷是可行的.     

七丹胶囊中4个成分的HPLC分析

目的:建立七丹胶囊中4个成分的高效液相色谱测定方法。方法:采用汉邦C18柱(150mm×4.6mm,5μm);以乙腈-水为流动相,进行梯度洗脱,流速:1.0mL/min,检测波长为203nm进行三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1皂苷有效成分含量测定。采用汉邦C18柱(150mm×4.6mm,5μm);流动相(甲酸-水)-(甲醇-乙腈)=62∶38,其中甲酸-水(1∶59),甲醇-乙腈(30∶10),流速:1.0mL/min,检测波长:286nm,进行丹酚酸B含量测定。结果:三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、丹酚酸B线性范围分别为0.4721～2.832μg(r=0.9995)、1.734～10.404μg(r=0.9999)、1.732～10.392μg(r=0.9999)、0.4～4.0μg(r=0.9999);平均加样回收率(n=5)分别为100.32%、99.965%、100.285%、101.4%;RSD分别为1.01%、2.53%、2.46%、1.88%。结论:本测定方法简便可行、重复性好,可用于七丹胶囊中4个成分的含量测定。     

土家族药物扣子七中三萜皂苷成分及抗肿瘤活性研究

目的研究土家族药物扣子七Panax japonicus var. major中三萜皂苷类成分,对其抑制肿瘤细胞增殖活性进行筛选,并初步探讨化合物结构与活性的关系。方法应用多种色谱方法对土家族药物扣子七正丁醇部位进行分离,所分离化合物运用核磁共振方法进行结构鉴定,应用MTT法测定分离化合物对体外培养人肿瘤细胞增殖的影响。结果从扣子七根茎正丁醇部位分离得到14个三萜皂苷,分别鉴定为竹节参皂苷IVa甲酯(1)、竹节参皂苷Ⅳa丁酯(2)、竹节参皂苷Ⅳ(3)、竹节参皂苷Ⅳa(4)、28-去糖竹节参皂苷Ⅳa(5)、齐墩果酸-3-O-β-D-(6′-甲酯)-吡喃葡萄糖醛酸苷(6)、(24R)-珠子参苷R_1(7)、(24R)-拟人参皂苷F11(8)、(20S)-三七皂苷R_2(9)、(20S)-人参皂苷Rg_2(10)、人参皂苷Rg_1(11)、人参皂苷Re(12)、人参皂苷Rd(13)、竹节参皂苷V甲酯(14)。活性研究结果显示,化合物5和6对胃癌BGC-823细胞、结肠癌HCT-116细胞、宫颈癌HeLa细胞及肝癌Hep G2细胞均显示了较强的活性,呈良好的剂量依赖关系,其中化合物5对BGC-823、HCT-116细胞的IC_(50)分别为9.94、14.17μmol/L,化合物6对肝癌HepG2细胞的抑制作用最强(IC_(50)=12.70μmol/L)。结论首次从扣子七中分离得到化合物6并报道了其光谱数据;其部分化学成分显示出抗肿瘤活性,其抗肿瘤活性与齐墩果烷型皂苷密切相关,且活性强弱可能与C-28取代基有关联,相关抗肿瘤机制值得进一步研究。     

竹节参抗炎作用的研究进展

竹节参为"七"类中药之一,近年来备受关注,富含皂苷类成分,对人体免疫系统、中枢神经系统、消化系统、心脑血管系统等药理活性显著。炎症是多种疾病发生和发展的重要病理过程,该文对竹节参的抗炎活性及其作用机制作一综述,以期为竹节参对抗炎症方面的应用提供参考。     

白扁豆配方颗粒的质量标准研究

目的 研究白扁豆配方颗粒质量评价方法,并分析其主成分从饮片至标准汤剂及配方颗粒的含量变化。方法 采用UPLC-Q-TOF/MS技术,通过对照品比对、数据库检索鉴别白扁豆配方颗粒成分;采用UPLC-ELSD法测定白扁豆配方颗粒中竹节参皂苷IVa的质量分数,以Waters CORTECS T3柱为色谱柱,柱温为25℃,流动相为0.05%甲酸溶液（A）-乙腈（B）梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,采用ELSD检测器,其蒸发管温度为80℃,雾化温度为50℃,载气流速为1.3 L/min,进样量为7μL。结果白扁豆配方颗粒指纹图谱共标定了13个共有峰,质谱鉴别了11个成分。竹节参皂苷IVa检测质量浓度的线性范围为11.76～117.60μg/mL (r=0.999 8);精密度、稳定性、重复性试验的RSD值均小于3%,竹节参皂苷IVa平均回收率为99.27%,RSD为2.68%。结论 所建立白扁豆配方颗粒质量控制分析方法准确度高、专属性强、重复性好且时间较短,可用于监测白扁豆配方颗粒生产过程各阶段的质量优劣,为白扁豆配方颗粒的质量标准制定提供研究依据。     

白英中甾体皂苷纯化工艺的研究

目的采用大孔树脂对白英中甾体皂苷进行纯化,以提高白英提取液中皂苷的纯度。方法通过静态吸附试验确定大孔树脂的型号;采用单因素考察法确定大孔树脂对皂苷的最佳吸附、洗脱条件。结果采用LSA-10型大孔树脂纯化白英中皂苷。最佳吸附条件为:药液浓缩比为1:0.4,吸附流速为2.0mL/min,洗脱剂为50%的乙醇;最佳洗脱条件为:洗脱流速为3mL/min,洗脱剂的用量为100mL。纯化后,浸膏中皂苷含量由1.29%上升至12.48%。结论采用大孔树脂对白英提取液中皂苷进行纯化可显著提高浸膏中皂苷含量。     

高效液相法测定清喉咽颗粒中黄芩苷的含量

目的为了控制清喉咽颗粒中黄芩苷的含量,建立了用高效液相色谱法来测定。方法高效液相色谱法,色谱柱为Inertsil-ODS-3(5μm 4.6×150 mm),流动相:甲醇-水-冰醋酸(50∶50∶1),流速:1.0 mL/min;检测波长为274 nm[1];结果黄芩苷在0.210~1.05μg范围内呈良好的线性关系,r=0.999 9,回收率为98.68%,RSD=0.52%(n=5)。结论本法简便、准确、重现性好,而且专属性强,可用于清喉咽颗粒的质量控制。