血浆microRNA联合超声心动图与急性心肌梗死诊断的相关性研究

目的 通过检测急性心肌梗死(AMI)患者血浆中microRNA-98-5p(miR-98-5p)、microRNA-499a-5p(miR-499a-5p)的表达情况,并分析二者联合超声心动图所测左室射血分数(LVEF)作为AMI早期诊断指标的可行性。方法 选择2018年11月—2022年1月在包头市中心医院住院的45例AMI且发病到入院时间在12小时内的患者为AMI组,另取同期住院的31例非心梗患者作为对照组。两组患者均通过高通测序法检测血浆miR-98-5p、miR-499a-5p表达情况,并用超声心动图检测LVEF值。比较两组患者血浆miR-98-5p、miR-499a-5p及LVEF的组间差异,并通过绘制受试者工作特征曲线,分析血浆miR-98-5p、miR-499a-5p、LVEF、肌钙蛋白(cTnI)对AMI的诊断价值。结果 LVEF及miR-98-5p的表达量在AMI组低于对照组(P<0.05);miR-499a-5p、cTnI在AMI组的表达量显著高于对照组(P<0.001)。miR-98-5p、miR-499a-5p、LVEF单独及联合诊断AMI的AUC分...     

miR-499a-5p靶向MMP-16通过Nrf2信号通路减轻急性呼吸窘迫综合征大鼠的肺损伤

目的 探讨miR-499a-5p高表达靶向基质金属蛋白酶-16(MMP-16)对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠肺损伤的影响.方法 实验设置假手术组、模型组、miR-499a-5p模拟物组、MMP-16组、miR-499a-5p模拟物+MMP-16组、Nrf2信号通路抑制剂D-呋喃核糖基苯并咪唑(DRB)组、miR-...     

MicroRNA-199a-3p对人骨肉瘤细胞凋亡的影响

目的:探讨microRNA-199a-3p (miR-199a-3p)对人骨肉瘤细胞凋亡的影响?方法:用合成的成熟miR-199a-3p序列模拟物(miR-199a-3p mimics)转染人骨肉瘤细胞(U2-OS),以阴性对照物序列(NC mimics)转染细胞作为阴性对照?转染后应用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组细胞miR-199a-3p的表达量,Western blot法检测各组细胞中髓样细胞白血病-1(MCL-1)蛋白的表达水平及多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)的剪切情况,利用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,并对实验结果进行统计学分析?结果:与对照组相比,转染miR-199a-3p mimics的实验组细胞中,miR-199a-3p的表达量明显升高,MCL-1蛋白的表达降低,PARP蛋白的剪切水平增加,细胞的凋亡率增高,差异均有统计学意义(P < 0.05)?结论:miR-199a-3p可以有效促进骨肉瘤细胞的凋亡?     

急性呼吸窘迫综合征患儿血清miR-499a-5p、MMP-16 mRNA水平变化及临床意义

目的 探讨急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患儿血清微小RNA-499a-5p(miR-499a-5p)、基质金属蛋白酶16(MMP-16)mRNA水平与病情严重程度和预后的关系。方法 选取2019年1月—2022年1月湖南省儿童医院重症医学科收治的ARDS患儿105例作为ARDS组,根据氧指数(OI)分为轻度亚组39例、中度亚组42例、重度亚组24例,根据住院28 d临床结局分为存活亚组88例和死亡亚组17例,选取同期医院体检健康儿童47例作为健康对照组。采用qPCR法检测血清miR-499a-5p、MMP-16 mRNA水平,Pearson/Spearman相关性分析ARDS患儿血清miR-499a-5p、MMP-16 mRNA水平与血气分析指标的相关性,受试者工作特征曲线(ROC)分析血清miR-499a-5p、MMP-16 mRNA水平对ARDS患儿死亡的预测价值。结果 ARDS组血清miR-499a-5p水平低于健康对照组,MMP-16 mRNA水平高于健康对照组(t=21.349、24.932,P均<0.001)。轻度亚组、中度亚组、重度亚组血清miR-499a-5p水平...     

miR-199a在宫颈癌及宫颈上皮内瘤样病变中的表达及意义

目的探讨miR-199a在宫颈癌及宫颈上皮内瘤样病变(CIN)中的表达情况及与宫颈癌各种临床病理特征的关系。方法采用茎环Realtime RT-PCR方法检测48例宫颈癌、12例CIN及正常宫颈组织中miR-199a-3p和miR-199a-5p的表达,分析miR-199a-3p和miR-199a-5p表达与宫颈癌常见的临床病理特征的关系。结果用茎环Realtime RT-PCR方法检测miR-199a-3p和miR-199a-5p表达的敏感性和特异性良好;miR-199a-3p和miR-199a-5p在宫颈癌及CIN组织中的表达低于非肿瘤组织,差异性显著(P<0.05),miR-199a-5p/miR-199a-3p表达比值未见明显差异(P=0.219)。其中miR-199a-5p的表达与宫颈癌的组织分化程度存在一定相关性。小细胞型(Ⅲ级)宫颈癌的miR-199a-5p表达低于其他组织分化类型的标本(P=0.054))。miR-199a-3p和miR-199a-5p的表达与年龄、肿块大小、大体类型、病理类型及FIGO分期未见显著相关性(P>0.05)。结论 miR-199a-3p和miR-199a-5p在宫颈癌及CIN组织中的表达显著低于正常宫颈组织。miR-199a-5p的表达与肿瘤的分化程度存在一定相关性。miR-199a在宫颈癌组织中的异常表达,可能在宫颈癌的发生和发展过程中发挥重要作用,有望成为宫颈癌新的治疗靶点。     

槲皮素通过生长抑制特异性基因5调节微小RNA-23a-3p 和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路抑制垂体神经内分泌肿瘤的增殖机制

目的:探讨槲皮素对垂体神经内分泌肿瘤(PitNETs)生长的抑制作用及其可能机制。方法:通过Starbase工具预测生长抑制特异性基因5(GAS5)与微小RNA-23a-3p (miR-23a-3p)结合情况，双荧光素酶报告实验和RNA免疫沉淀测定GAS5和miR-23a-3p之间的结合关系。体外培养人垂体瘤细胞系RC-4B/C,分为对照组(Control)、槲皮素组(Quercetin)、GAS5抑制组(Si-GAS5)和槲皮素+si-GAS5组(Quercetin+si-GAS5),对比分析槲皮素对GAS5、miR-23a-3p及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路的影响，以及人垂体瘤复苏细胞(RC-4B/C)生长和侵袭能力的影响。结果:Starbase工具预测GAS5与miR-23a-3p结合，双荧光素酶报告实验和RNA免疫沉淀测定揭示了GAS5和miR-23a-3p之间的直接结合。槲皮素促进GAS5的表达，抑制miR-23a-3p和PI3K/AKT的表达，抑制RC-4B/C细胞的增殖和侵袭(均P<0.05);下调GAS5、miR-23a-3p表达增多...     

miR-33a-3p通过调控EphA2影响结直肠癌化疗耐药

摘要:目的 探讨微小 RNA-33a-3p(miR-33a-3p)对结直肠癌化疗耐药的影响及其调控机制。方法 实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)法检测结直肠癌亲本株(HCT8)及耐药细胞株(HCT8/5-Fu及 HCT8/DDP)中 miR-33a-3p的表达。构 建 miR-33a-3p模拟物和阴性对照转染至结直肠癌耐药细胞后检测细胞增殖、凋亡、周期分布及化疗敏感性变化,运用生 物信息学方法预测 miR-33a-3p的靶基因,运用qRT-PCR和 Westernblot检测过表达 miR-33a-3p对下游靶基因 EphA2 的影响。结果 结直肠癌耐药细胞系中 miR-33a-3p的表达显著低于亲本株(均 P<0.01)。与阴性对照组相比,过表达 miR-33a-3p的耐药细胞增殖能力降低,细胞凋亡增加,细胞于 G2/M 周期阻滞,化疗敏感性增强(均 P<0.05)。生物信 息学预测结果显示 EphA2可能为 miR-33a-3p的下游靶基因。当过表达 miR-33a-3p时,耐药细胞 EphA2表达明显降 低。结论 miR-33a-3p可能通过调控下游靶基因 EphA2的水平逆转结直肠癌化疗耐药。     

基于miR-15a-5p/P53信号通路探讨EMT与肺癌细胞阿霉素耐药的关系

目的 探讨miR-15a-5p在肺癌细胞对阿霉素(DOX)耐药中的作用,并阐明其与DOX耐药之间的功能和机制联系。方法 分别采用si-miR-15a-5p、miR-15a-5p模拟物转染A549、A549/DOX抗性细胞(A549/D)。采用MTT法测定细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blots检测上皮间充质转化(EMT)相关蛋白及P53蛋白表达,qRT-PCR检测miR-15a-5p表达。通过生物信息学预测与双荧光素酶报告子分析miR-15a-5p潜在靶基因。采用A549/D细胞构建裸鼠移植瘤模型,分析miR-15a-5p过表达促进DOX的体内抗肿瘤作用。结果 MTT分析结果显示,miR-15a-5p的敲低提高了A549细胞的细胞活力(IC50值:8.86±0.32μmol/L),miR-15a-5p的过表达降低了A549/D细胞的细胞活力(IC50值:1.92±0.11μmol/L)。并且在A549细胞中阻断miR-15a-5p减少凋亡(P <0.001),在A549/D细胞中增加miR-15a-5p表达促进凋亡(P <0.001)。Western b...     

miR-15a-5p在乳腺癌耐药与敏感患者中的差异分析及耐药价值预测

目的 探讨miR-15a-5p在多西他赛治疗敏感组和耐药组中的表达差异及对临床预后的意义。方法 运用TCGA数据库分析miR-15a-5p在恶性肿瘤中的表达情况。收集2019年1月至2020年1月在本院治疗的30例对多西他赛耐药的乳腺癌患者为耐药组,收集同期治疗的30例对药物敏感的乳腺癌患者为敏感组,通过q-PCR荧光定量法检测患者癌组织中miR-15a-5p的表达水平,探讨miR-15a-5p与乳腺癌耐药、分型的关联情况。绘制ROC曲线分析miR-15a-5p对患者预后的预测价值以及miR-15a-5p对乳腺癌患者耐药诊断价值。结果 通过泛癌分析发现,miR-15a-5p在乳腺癌等多种癌症中显著高表达。q-PCR结果显示,多西他赛化疗敏感组的miR-15a-5p的表达水平高于耐药组的表达水平(P<0.05)。临床统计分析发现miR-15a-5p与ER(雌激素受体)、PR(孕激素受体)的表达呈负相关,而与人表皮生长因子受体-2的表达无明显关联性。结论 miR-15a-5p在多西他赛耐药患者的肿瘤组织中的表达水平明显低于敏感组,且miR-15a-5p在乳腺癌的高表达与乳腺癌的分子分...     

miR-499-5p调控AKT2基因对骨肉瘤MG63细胞凋亡和迁移的影响

目的 探讨miR-499-5p在骨肉瘤MG63细胞中的表达及其对MG63细胞凋亡和迁移的影响.方法 运用生物信息学软件TargetScan和miRanda对miR-499-5p和AKT2基因的靶向配对关系进行预测.未转染细胞设为空白对照组(control组),脂质体2000转染miR-499-5p模拟物为mimics组,转染干扰AKT2基因的siRNA为siRNA组.Real-time PCR检测3组细胞中miR-499-5p和AKT2 mRNA的表达情况,westernblot检测AKT2蛋白的表达情况,流式细胞术检测3组细胞凋亡情况,细胞划痕实验检测体外的迁移情况.结果 TargetScan和miRanda显示miR-499-5p和AKT2基因二者靶向配对良好.Real-time PCR检测结果表明转染mimics后,AKT2 mRNA的表达量降至(45.06±8.12)％,与control组(100％)比较,差异有显著性意义(P＜0.05).Western blot检测结果表明mimics组AKT2蛋白相对表达量为(0.32±0.05),与comtrol组(0.69±0.11)比较,明显降低,P＜0.05.流式细胞术和细胞划痕实验结果显示mimics组MG63细胞凋亡率(18.97±2.41)％及细胞划痕愈合率(63.54±5.43)％,与control组(10.35±2.56)％和(90.35±6.81)％相比差异均有显著性意义(P＜0.05).结论 miR-499-5p能够下调骨肉瘤MG63细胞中AKT2基因的表达,促进癌细胞的凋亡以及抑制细胞的迁移.     

原发性与复发性骨肉瘤差异蛋白质组学研究

目的 比较原发性与复发性骨肉瘤差异蛋白质,为寻找骨肉瘤复发的特异标记物提供依据.方法 分别对5例骨肉瘤标本和4例复发性骨肉瘤提取总蛋白,然后双向凝胶电泳,重复3次,银染后扫描用Image2 Master 2DE软件分析寻找差异蛋白,切除差异蛋白质点进行MS+MS/MS质谱鉴定,获取肽质指纹图谱并查询NCBI数据库寻找匹配蛋白质.结果 获得重复性较好的双向电泳银染图谱,原发性与复发性骨肉瘤组织蛋白质点数分别为(1 206±161)和(1 387±185),找到明显差异的蛋白质点42个,并成功鉴定出13个.与原发性骨肉瘤相比,5个蛋白质在复发性骨肉瘤中表达下降;8个蛋白质在复发性骨肉瘤表达水平升高,其中β2微球蛋白在原发性骨肉瘤中表达缺失.结论 原发性骨肉瘤与复发性骨肉瘤存在明显差异蛋白质,β2微球蛋白有可能成为诊断复发性骨肉瘤的分子标记物及检测指标.     

FASTKD4在骨肉瘤组织中表达及对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨FASTKD4在骨肉瘤组织中表达及其对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响.方法 通过免疫组化和qPCR的方法检测FASTKD4在骨肉瘤及癌旁组织中的表达情况,同时还通过qPCR检测FASTKD4在不同骨肉瘤细胞中的表达情况,根据结果选择Saos-2细胞作为研究对象,细胞转染FASTKD4小干扰RNA(shFASTKD...     

骨肉瘤50例病理基础与MRI表现

目的 比较骨肉瘤MRI表现与病理的关系。方法 50（男38，女12）例患，均行平片及MRI检查，7例行CT扫描，分析其MRI侵袭特点、信号及其与成骨性之间的关系。结果 MRI显示病变边界清晰，骨质受累长度6－31cm，14例越过骺线侵犯骨骺；20例侵及骨性关节面，其中4例伴关节腔积液，1例侵犯邻骨。MRI发现跳跃性病灶2例，患骨T2WI的信号高低与是否成骨性肿瘤有关（P＜0.05）。49例伴软组织肿块；2例转移。结论 MRI可很好地显示骨肉瘤的部位和骨内外侵犯范围；患骨T2WI信号高低与瘤骨所占比例有关。     

高危骨肉瘤的临床特点及治疗对策

目的 通过分析61例骨肉瘤后因素及生存率，探讨高危骨肉瘤临床特点及治疗对策，报告16例高危骨肉瘤治疗经验。方法 以经肢体挽救手术治疗有完整随访资料的61例骨肉瘤为基础，寿命表法计算生存率，采用图像分析技术对肿瘤预后相关因素包括肿瘤的绝对长度、绝对宽度、绝对深度、绝对面积、软组织肿块最大横径进行分析。结果 61例骨肉瘤随访1～10a,5a生存率57.5%，外科分期Ⅲ期；骨肉瘤与宿生主骨面积比≥2/3；软组织肿块最大横径≥6cm；病理骨折；活检标本PCNA阳性细胞检出占平均视野2/3以上均属高危骨肉瘤。采用术前多次化疗，深静脉持续给药；高选择骨肉瘤原发灶和转移灶滋养动脉化疗并栓塞；术前放疗和肢体挽救术处理高危骨肉瘤16例，随访1.5a，死亡2例，带病存活5例，无病存活9例，保肢率68.7%。结论 本研究使一些高危骨肉瘤得到了积极救治，更具备综合性和肿瘤针对性。     

PTEN在骨肉瘤组织中的表达及意义

目的:研究骨肉瘤组织中抑癌基因PTEN的表达情况,探讨其在骨肉瘤发生、发展中的可能作用.方法:用免疫组化S-P法检测PTEN蛋白在38例骨肉瘤及20例骨软骨瘤石蜡标本中的表达情况.结果:PTEN蛋白在骨肉瘤中表达阳性率为55.3%,在骨软骨瘤中为90.0%,骨肉瘤与骨软骨瘤相比有显著差异(P＜0.01).结论:抑癌基因PTEN蛋白在骨肉瘤组织中表达下调,可能与骨肉瘤的恶性进展有关.     

Fas在骨肉瘤中的表达及其意义

免疫组化S-P方法检测Fas在骨肉瘤及骨软骨瘤中的表达。Fas在38例骨肉瘤中表达阳性率为73．7％，加例骨软骨瘤中为95．0％，差异显著（P〈0．05）。Fas在骨肉瘤组织中表达下调，可能与骨肉瘤的恶性进展有关。     

Establishing an osteosarcoma associated protein-protein interaction network to explore the pathogenesis of osteosarcoma

Background

The aim of this study was to establish an osteosarcoma (OS) associated protein-protein interaction network and explore the pathogenesis of osteosarcoma.

Methods

The gene expression profile {"type":"entrez-geo","attrs":{"text":"GSE9508","term_id":"9508"}}GSE9508 was downloaded from the Gene Expression Omnibus database, including five samples of non-malignant bone (the control), seven samples for non-metastatic patients (six of which were analyzed in duplicate), and 11 samples for metastatic patients (10 of which were analyzed in duplicate). Differentially expressed genes (DEGs) between osteosarcoma and control samples were identified by packages in R with the threshold of |logFC (fold change)| > 1 and false discovery rate < 0.05. Osprey software was used to construct the interaction network of DEGs, and genes at protein-protein interaction (PPI) nodes with high degrees were identified. The Database for Annotation, Visualization and Integrated Discovery and WebGestalt software were then used to perform functional annotation and pathway enrichment analyses for PPI networks, in which P < 0.05 was considered statistically significant.

Results

Compared to the control samples, the expressions of 42 and 341 genes were altered in non-metastatic OS and metastatic OS samples, respectively. A total of 15 significantly enriched functions were obtained with Gene Ontology analysis (P < 0.05). The DEGs were classified and significantly enriched in three pathways, including the tricarboxylic acid cycle, lysosome and axon guidance. Genes such as HRAS, IDH3A, ATP6ap1, ATP6V0D2, SEMA3F and SEMA3A were involved in the enriched pathways.

Conclusions

The hub genes from metastatic OS samples are not only bio-markers of OS, but also help to improve therapies for OS.     

巨噬细胞融合瘤苗对大鼠骨肉瘤的主动性免疫治疗

目的：探讨融合瘤苗在骨肉瘤免疫治疗中的应用潜力。方法：用ＵＭＲ１０６细胞系建立大鼠骨肉瘤动物模型,然后将该细胞系与大鼠巨噬细胞融合作为瘤苗应用于荷瘤大鼠,观察其抑制肿瘤生长和肺转移的效果。结果：在治疗６ＯＫ时治疗组和对照组相比,瘤重明显减小（Ｐ〈０．０１）;肺转移发生率降低（Ｐ〈０．０１）。结论：骨肉瘤细胞与巨噬细胞的两便瘤苗可望的骨肉瘤的治疗中发挥作用。     

7例骨膜骨肉瘤临床预后分析

目的 探讨骨膜骨肉瘤的临床病理特征及预后.方法 对7例骨膜骨肉瘤患者进行临床表现、病理特征及预后分析.男4例,女3例;年龄14～29岁,中位年龄21岁.4例高级别的骨膜骨肉瘤患者手术后接受化疗.结果7例患者随访48～128个月,平均84个月,无1例出现局部肿瘤复发和远处转移,均无瘤生存.结论 骨膜骨肉瘤是一种罕见的表面骨肉瘤,早期诊断和及时治疗可以改善患者的预后.     

干扰素在骨肉瘤治疗中的作用

干扰素(interferon,IFN)是一组具有抗血管生成、抗肿瘤和免疫调节作用的细胞因子,在体外和异体移植模型中都显示出有效的抗骨肉瘤活性。临床试验表明,IFN可作为骨肉瘤手术治疗单一辅助药物,并能明显提高患者无瘤生存率。文中就IFN在骨肉瘤中的作用展开综述,以期为骨肉瘤的治疗提供新思路。