土槿皮乙酸通过调控PAX2对宫颈癌细胞的影响

目的探讨土槿皮乙酸通过调控PAX2对宫颈癌细胞的影响及其分子机制。方法 MTT法检测细胞增殖情况;shRNA干扰技术构建PAX2低表达Hela细胞株,分为空白组、阴性对照组、sh-PAX2组、土槿皮乙酸组、土槿皮乙酸+sh-PAX2组;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;Transwell小室迁移实验检测各组细胞迁移能力;String预测PAX2潜在作用蛋白;Western blot检测蛋白表达;免疫荧光实验观察各组细胞中β-catenin的定位。结果土槿皮乙酸可时间-浓度依赖地抑制宫颈癌细胞增殖。各宫颈癌细胞中PAX2蛋白表达与土槿皮乙酸对各细胞的IC₅₀均呈负相关(P<0.05)。土槿皮乙酸可抑制Hela细胞中PAX2蛋白表达;土槿皮乙酸和低表达PAX2均可诱导Hela细胞凋亡并抑制其迁移,可降低Bcl-2、Cyclin D1、Survivin、MMP2、MMP9、β-catenin和p-β-catenin蛋白和升高BAX蛋白表达(P<0.05),可使Hela细胞中β-catenin的进核量减少。结论土槿皮乙酸在宫颈癌细胞中抑制PAX2表达和Wnt/β...     

补气活血药含药血清对血管内皮细胞迁移的影响

目的:观察补气活血类中药含药血清对体外培养的人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）迁移的影响,并初步筛选出对HUVEC 迁移能力具有较明显的促进、抑制作用的药物。方法：建立HUVEC的体外培养的细胞模型,将赤芍、川芎、丹皮、丹参、莪术、三棱、黄芪、人参按照1∶2,1∶1,2∶1 3种配比两两配伍组合,组成13对补气活血药药对,采用血清药理学方法,制备含药血清,应用划痕法观察不同活血化瘀药和补气活血药药对的10%含药血清对HUVEC（5×105/mL 密度）作用24 h后迁移能力的影响。结果：与空白血清组相比较,丹参组、川芎组、赤芍组,丹参黄芪（1∶2）组、丹参黄芪（1∶1）组、川芎黄芪（1∶2）组对血管内皮细胞的迁移能力具有明显促进作用（P＜0.05或P＜0.01）;三棱组、莪术组、丹皮组,莪术黄芪（2∶1）组、三棱人参（2∶1）组、莪术黄芪（1∶1）组对血管内皮细胞的迁移能力具有明显抑制作用（P＜0.05或P＜0.01）。结论：不同的活血化瘀药和补气活血药配伍组成对HUVEC 的迁移能力具有不同的促进或抑制作用,这可能是这些药物在细胞层面上促进或抑制血管生成的作用机制之一。     

土槿皮乙酸体外对前列腺癌PC-3细胞增殖的抑制作用及机制

目的:研究土槿皮乙酸(PAB)对人雄激素非依赖性前列腺癌(AIPC)PC-3细胞系增殖的抑制作用及其可能机制。方法:体外培养AIPC PC-3细胞,以不同浓度PAB进行处理一段时间后,再用MTT法测定PAB对PC-3细胞的生长抑制情况;用台盼蓝染色计数活细胞,用吉姆萨染色法检测凋亡细胞,进一步用Hoechst33342染色进行凋亡确认;用PI染色法检测PAB对PC-3细胞周期的影响;用考马斯亮兰G-250染色法检测PAB对细胞质蛋白的影响;用荧光双染法检测细胞微管蛋白表达。结果:PAB明显抑制体外培养的PC-3细胞生长,其抑制率在一定浓度和时间范围内呈依赖关系,作用36h的IC50值为6.20μM。PAB可以通过诱导PC-3细胞凋亡而抑制期增殖,凋亡细胞的数量随PAB浓度的增加而增加。PAB能明显增加PC-3细胞时G2期细胞的比例,G1期和S期细胞数减少,细胞周期的变化与PAB浓度相关。PAB可以减少PC-3细胞胞质内蛋白含量,抑制微管蛋白形成。结论:PAB可以抑制AIPC PC-3细胞增殖,阻滞细胞于G2/M期(M晚期),呈浓度依赖性;机制可能与PAB降低胞质蛋白量,抑制微管蛋白形成有关。     

血府逐瘀汤对牛内皮细胞增殖和迁移的影响

目的：探讨血府逐瘀汤对牛内皮细胞增殖和迁移的影响。方法：采用MTT法检测含血府逐瘀汤鼠血清对牛内皮细胞增殖的影响，琼脂糖刮除法检测含血府逐瘀汤鼠血清对牛主动脉内皮细胞迁移的影响。结果：含血府逐瘀汤鼠血清对牛内皮细胞增殖和迁移均有显著抑制作用，且呈剂量依赖性，对迁移的影响要大于增殖。结论：血府逐瘀汤对牛内皮细胞增殖和迁移有抑制作用，具有抑制血管生成的作用。     

参麦有效部位对血管内皮细胞增殖和迁移的影响

目的：探讨参麦中提取的总皂苷、总多糖对血管内皮细胞增殖和迁移的影响.方法：用MTT法检测不同浓度的总皂苷、总多糖及总皂苷＋总多糖对ECV-304、胃癌SGC-7901细胞增殖及SGC-7901条件培养液诱导ECV-304增殖的影响;用琼脂糖刮除法检测它们对血管内皮细胞迁移的影响.结果：当参麦总多糖浓度为0.18～2.44mg/mL时,对ECV-304、胃癌SGC-7901增殖及SGC-7901诱导ECV-304增殖均无影响;当参麦总皂苷浓度为0.05～0.8mg/mL时,对胃癌SGC-7901增殖无影响,而对ECV-304及SGC-7901条件培养液诱导ECV-304增殖有抑制作用,抑制率为13.16%～62.77%.参麦总多糖对ECV-304迁移没有影响,参麦总皂苷对ECV-304迁移有明显抑制作用,抑制率为42%～80%.总皂苷＋总多糖抑制ECV-304增殖和迁移作用与参麦总皂苷相比差异无显著性.结论：参麦中提取的总皂苷对血管内皮细胞和胃癌细胞条件培养液诱导的血管内皮细胞增殖具有抑制作用,并能抑制血管内皮细胞的迁移,是参麦抗血管生成的有效部位.     

参麦注射液对内皮细胞增殖和迁移的影响

目的：探讨参麦注射液对血管生成的影响。方法：采用MTT法检测参麦注射液对牛血清和肿瘤细胞条件培养液促进的牛主动脉内皮细胞增殖的影响，采用琼脂糖刮除法检测参麦对牛血清和肿瘤条件培养液促进的牛内皮细胞迁移的影响。结果：在含10％新生小牛血清培养液中和在肿瘤细胞条件培养液中，参麦都能明显抑制牛主动脉内皮细胞增殖，且呈量效关系，对肿瘤细胞条件培养液诱导的内皮细胞迁移抑制作用显著。方法：参麦能抑制牛内细胞增殖和迁移，具有抑制血管生成的作用。     

参麦有效部位对血管内皮细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨参麦中提取的总皂苷、总多糖对血管内皮细胞增殖和迁移的影响。方法:用MTT法检测不同浓度的总皂苷、总多糖及总皂苷 总多糖对ECV-304、胃癌SGC-7901细胞增殖及SGC-7901条件培养液诱导ECV-304增殖的影响;用琼脂糖刮除法检测它们对血管内皮细胞迁移的影响。结果:当参麦总多糖浓度为0.18~2.44mg/mL时,对ECV-304、胃癌SGC-7901增殖及SGC-7901诱导ECV-304增殖均无影响;当参麦总皂苷浓度为0.05~0.8mg/mL时,对胃癌SGC-7901增殖无影响,而对ECV-304及SGC-7901条件培养液诱导ECV-304增殖有抑制作用,抑制率为13.16%~62.77%。参麦总多糖对ECV-304迁移没有影响,参麦总皂苷对ECV-304迁移有明显抑制作用,抑制率为42%~80%。总皂苷 总多糖抑制ECV-304增殖和迁移作用与参麦总皂苷相比差异无显著性。结论:参麦中提取的总皂苷对血管内皮细胞和胃癌细胞条件培养液诱导的血管内皮细胞增殖具有抑制作用,并能抑制血管内皮细胞的迁移,是参麦抗血管生成的有效部位。     

基于Akt/ERK探讨丹蒌片对主动脉平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡的影响＊

目的 观察丹蒌片对同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）诱导的兔主动脉血管平滑肌细胞（rabbit aortic smooth muscle cell，RASMC）增殖、迁移和凋亡的影响，并探讨其与Akt及ERK信号通路的关系。方法 培养RASMC，建立Hcy诱导RASMC增殖模型，实验分为空白组、Hcy组、丹蒌片组、瑞舒伐他汀组（即可定组）、丹蒌片联合瑞舒伐他汀组（即混合组），后三组分别给于丹蒌片、瑞舒伐他汀及丹蒌片联合瑞舒伐他汀含药血清。作用24 h后，Cell Titer-Glo法测细胞增殖，Transwell法测细胞迁移，流式细胞仪Annexin V/PI双染法测细胞凋亡率，蛋白印迹法（Western blot）测信号通路相关蛋白Akt和ERK总蛋白及磷酸化蛋白表达量。结果 ①与空白组相比，Hcy组细胞增殖和迁移显著增加（P < 0.01），凋亡率显著降低（P < 0.01）；与Hcy组相比，三种含药血清组细胞增殖和迁移明显减少（P < 0.01），凋亡率明显增加（P < 0.01）；其中混合组增殖和迁移较丹蒌片组和可定组明显降低（P < 0.01），凋亡率更高（P < 0.01）；与可定组比，丹蒌片组增殖略高，但差异均无统计学意义（P > 0.05），丹蒌片组细胞迁移数明显多于可定组（P < 0.05），凋亡率明显低于可定组（P < 0.05）。②各组Akt及ERK总蛋白表达水平无明显变化（P > 0.05）；与空白组比较，Hcy组p-Akt及p-ERK蛋白表达量均显著上调（P < 0.01）；与Hcy组相比，三种含药血清组p-Akt及p-ERK蛋白表达量明显下调（P < 0.01）；其中混合组的p-Akt及p-ERK蛋白表达较丹蒌片组和可定组进一步下降（P < 0.01）；与可定组比，丹蒌片组p-Akt及p-ERK蛋白表达量增加，但差异无统计学意义（P > 0.05）。结论 丹蒌片可拮抗Hcy诱导的兔动脉血管平滑肌细胞增殖和迁移，促进其凋亡，其作用可能与上调p-Akt及p-ERK信号通路蛋白有关。     

土槿皮乙酸抗肿瘤作用及其分子机制的研究进展

 目的 概要介绍土槿皮乙酸的抗肿瘤作用和可能的分子机制。方法 查阅文献,总结土槿皮乙酸体内外抗肿瘤活性的研究成果,依据作用靶点不同对其分子机制进行综述。结果 土槿皮乙酸抗肿瘤作用机制因肿瘤的种类而有所不同,它可通过抑制在某些肿瘤发生过程中异常表达的环氧化酶-2(COX-2),调节相关上下游基因和蛋白的表达,抑制肿瘤新生血管生成、阻止肿瘤细胞增殖并促进其凋亡。 结论 国内外近年来对该药抗肿瘤作用的机制研究获得了多方面的新成果,有助于我们找到新的治疗肿瘤的靶点。     

基于血管新生探讨活血化瘀中药对肿瘤转移的影响＊

血瘀贯穿肿瘤发生发展的始终，而血瘀所致缺血缺氧状态是肿瘤血管新生发生的始动因素，对肿瘤发生远端转移起着至关重要的作用。活血化瘀是中医治疗肿瘤的重要法则。但关于活血化瘀中药对肿瘤转移是促进还是抑制，长期以来存在争议，引起临床医生的极大困惑，亟待解决。考虑到血瘀所致血管新生异常在肿瘤血行转移中的作用，课题组以血管新生为切入点，探讨活血化瘀中药对肿瘤转移的影响，为临床提供重要参考。     

淫羊霍苷对HCY诱导的血管内皮细胞内质网应激的影响

目的:研究淫羊藿苷(icariin,ICA)对同型半胱氨酸(homocysteinemia,HCY)诱导的血管内皮细胞内质网应激的影响,探讨ICA抗动脉粥样硬化的机制。方法:建立HCY诱导的兔血管内皮细胞损伤模型,与不同浓度的ICA共同培养48h后,TUNEL法检测细胞凋亡率;RT-PCR检测葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein78,GRP78)基因表达;目的基因克隆、鉴定并测序。结果:荧光显微镜观察显示HCY模型组可见多数凋亡细胞,ICA组细胞未见明显凋亡形态学改变;ICA处理组细胞GRP78mRNA表达明显减少,与HCY组比较差异显著(P0.01);测序结果表明,来源于血管内皮细胞的全长648bp的基因片断与兔GRP78基因高度同源。结论:ICA拮抗HCY诱导的血管内皮细胞凋亡,减缓血管内皮细胞内质网应激可能是其作用机制之一。     

苦参总碱对血管内皮细胞增殖和迁移的抑制作用

 目的探讨苦参总碱对血管内皮细胞(ECV304)增殖和迁移的影响。方法采用MTT比色法分析测定苦参总碱对血管内皮细胞(ECV304)增殖的影响;流室系统检测生理剪切流场下(1.5Pa)血管内皮细胞(ECV304)。结果用0,0.5,0.75,1,2.5,5g·L^-1苦参提取物培养ECV304细胞24h后,其增殖抑制率分别是0,6.97%,11.37%,29.27%,35.43%,39.26%。在生理剪切流场下,苦参总碱可显著抑制ECV304细胞的迁移(P<0.01)。结论苦参提取物抑制内皮细胞(ECV304)增殖和迁移。     

丹酚酸B预处理内皮祖细胞在大鼠骨髓间充质干细胞分化过程中对心肌早期基因表达的影响

目的 探讨丹酚酸B预处理内皮祖细胞(EPCs)联合大鼠骨髓间充质干细胞（BMSc）移植于梗死心肌对BMSc分化过程中早期基因Nkx2-5、GATA-4 mRNA表达的影响, 从而找出能够使两种细胞达到最佳协同作用的移植方法。     

苦参碱对CVB_3感染CMVECs的保护作用

目的:研究苦参碱对CVB_3感染CMVECs的保护作用。方法:采用倒置显微镜观察CMVECs形态,CCK8检测细胞活性,选择苦参碱最佳干预时间点和稀释浓度。在最佳条件下通过免疫荧光法、western blot法检测内皮细胞标志物CD31的表达。结果:苦参碱最佳干预时间点和浓度是:72 h,0.012 5 mg/L。与空白对照组比较,CVB_3组CMVECs形态固缩、变异,内皮细胞标志物CD31表达减少;与CVB_3组比较,CVB_3+苦参碱组CMVECs形态趋于正常,CD31表达增强。结论:苦参碱对CVB_3感染CMVECs具有保护作用,增加内皮细胞功能可能是其作用机制。     

中药对糖尿病状态下血管内皮细胞的保护作用

分析中药对糖尿病血管内皮损伤保护作用的研究,指出中药通过抑制蛋白质非酶糖基化、多元醇通路、己糖胺途径活性、蛋白激酶C(PKC)的激活、内皮细胞氧化应激、炎症反应、血管内皮细胞凋亡对糖尿病血管内皮细胞起保护作用。     

血府逐瘀汤诱导内皮细胞迁移的机制研究

目的:探讨血府逐瘀汤促进内皮细胞迁移作用及其机制。方法:运用血清药理学方法,以1.25%,2.5%,5%的血府逐瘀汤含药血清和空白血清培养内皮细胞ECV304,采用划痕损伤法和侵袭实验检测药物对细胞迁移作用的影响,并分别通过酶联免疫法和硝酸还原酶法检测细胞培养上清液中血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和一氧化氮(NO)浓度,荧光探针法检测胞内NO浓度,eNOS酶活性以及RT-PCR法检测VEGF,bFGF,eNOS基因的表达,以进一步阐明药物的作用机制。结果:1.25%含药血清可促进细胞在划痕平面上的迁移作用,5.0%含药血清可显著提高细胞侵袭穿越的迁移作用,而2.5%含药血清对这两类迁移均有促进作用。1.25%,2.5%,5.0%含药血清均可明显提高上清液中bFGF、胞内外NO浓度和胞内eNOS活性,只有2.5%含药血清能提高上清液中VEGF的含量。RT-PCR结果显示,1.25%,2.5%,5.0%含药血清均可提高bFGF的转录;2.5%和5.0%含药血清可上调eNOS的表达;而药物对VEGF的影响较复杂,仅2.5%含药血清上调VEGF的表达,1.25%含药血清却呈抑制作用。结论:血府逐瘀汤通过上调VEGF,bFGF,NO的表达与分泌,诱导内皮细胞迁移,从而发挥促血管新生功能。     

中药对血管内皮细胞损伤的保护作用的研究进展

血管内皮细胞在创伤修复、血管生成、止血等一系列生理和病理过程中起着重要作用。血管内皮细胞的损伤是多种疾病发生、发展的基础,寻找改善血管内皮功能障碍的药物具有重要意义。从中药对血管内皮细胞脂质过氧化损伤、血管内皮细胞活性物质的释放、血管内皮细胞凋亡的影响3个方面入手,综述近年来中药及提取物对于血管内皮功能的影响,为进一步实验研究血管内皮功能提供参考依据。     

淫羊藿苷对缺氧诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

目的 研究淫羊藿苷(icariin,ICA)对缺氧所致血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)损伤的影响。方法 建立体外细胞缺氧模型,用MTT法观察ICA对缺氧损伤的血管内皮细胞活性的影响,测定细胞中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)及乳酸脱氢酶(LDH)活力,并对细胞进行Hoechst33342荧光染色、电镜观察细胞超微结构,运用流式细胞仪及DNA琼脂糖凝胶电泳分析DNA断裂情况,以观察ICA对缺氧诱导的内皮细胞凋亡的影响。结果 ICA能抑制缺氧引起的血管内皮细胞的减少,降低LDH活力,并抑制缺氧条件下MDA生成,提高SOD活力;缺氧能诱导血管内皮细胞凋亡,表现为细胞核浓缩,沿核膜排列成块状,DNA琼脂糖凝胶电泳显示典型“梯形条带”,流式细胞仪分析呈现典型凋亡亚二倍体峰。ICA能显著抑制缺氧诱导的内皮细胞凋亡。结论 ICA具有保护缺氧诱导的血管内皮细胞损伤的作用,其作用机制与抗脂质过氧化物产生、提高SOD活力以及抗细胞凋亡有关。     

扇贝糖胺聚糖对受氧化损伤的内皮细胞功能的影响

 目的观察血管内皮细胞受到氧自由基损伤后,血管内皮细胞粘附分子-1(VCAM-1)、血小板衍生生长因子B链(PDGF-BB)表达、内皮素(ET)以及血管紧张素Ⅱ(AⅡ)分泌的改变,研究扇贝裙边提取物-糖胺聚糖(SS-GAG)对上述变化的影响,探讨SS-GAG对血管内皮细胞损伤的保护作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),建立氧自由基诱导的HUVEC损伤模型,采用ELISA法观察SS-GAG对Fenton体系所引发的氧化损伤后HUVEC表达VCAM-1,PDGF-BB的影响;应用放射免疫方法,观察SS-GAG对氧化损伤的HUVEC分泌ET及AⅡ的影响。结果与对照组比较,Fenton体系损伤组血管内皮细胞(VEC)VCAM-1,PDGF-BB的表达明显提高(P<0.01),ET及AⅡ的分泌明显增多(P<0.01)。而细胞经不同浓度的SS-GAG预先处理后,上述表达及分泌均减少(P<0.01)。结论SS-GAG可减少氧自由基损伤血管内皮细胞后VCAM-1,PDGF-BB的表达以及ET和AⅡ的分泌,提示SS-GAG具有保护血管内皮细胞的作用,此作用可能是其抗AS的机制之一。