淫羊藿苷对牛Ⅱ型胶原诱导型关节炎小鼠IL-17/RANKL轴的影响

目的 初步观察淫羊藿苷(Icariin,ICA)对牛Ⅱ型胶原诱导型关节炎(typeⅡcollagen-induced arthritis,CIA) DBA/1小鼠IL-17/RANKL的调节作用.方法 除正常对照组(N组,灌胃给予生理盐水3ml· kg-1 ·d-1)外以牛Ⅱ型胶原和弗氏不完全佐剂注射诱导DBA/1小鼠关节炎模型;将32只建模成功(关节炎指数评分≥4分)DBA/1小鼠随机分为模型对照组(Con组,灌胃给予生理盐水3ml· kg-1·d-1)、甲氨喋呤组(MTX组,灌胃给予每周MTX 1.5 mg·kg-1)、淫羊藿低剂量组(IL组,灌胃给予ICA 5 mg·kg-1·d-1)和淫羊藿苷高剂量组(IH组,灌胃给予ICA 20mg·kg-1·d-1),每组8只,连续干预15 d,并于第3,7,11,15 d记录各组小鼠关节炎指数评分值.干预结束后检测各组关节炎小鼠血清白介素-17(IL-17)、白介素-23(IL-23)、NF-KB配体的受体或激活因子(RANKL)和抗酒石酸酸性磷酸酶(Tracp)含量.结果 第2次免疫后1周左右,Con组足趾肿胀明显,关节炎指数评分明显高于N组,差异具有显著性(P＜0.01);干预15 d后,与N组比较,Con组IL-23、Tracp、IL-17和RANKL浓度升高,在IL-23和Tracp水平上差异有统计学意义(P＜0.05),而IL-17和RANKL 两个指标差异无统计学意义(P＞0.05);与Con组比较,MTX组血清IL-23水平降低(P＜0.05),IL组IL-23和RANKL含量降低(P＜0.01,P＜0.05),IH组IL-17、IL-23、RANKL和Tracp水平均显著降低(P＜0.01);IH组与IL组相比,RANKL和Tracp均明显降低,差异具有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05).结论 淫羊藿苷能改善CIA DBA/1小鼠足趾局部肿胀程度,下调血清IL-23和IL-17、RANKL和Tracp水平,具有调节骨免疫系统的潜能.     

二妙散对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎中Th17/Treg细胞分化的影响

目的 观察古代经典名方二妙散（EMS）对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎（CIA）中辅助性T细胞17（Th17）/调节性T细胞（Treg）分化的影响。方法 按体质量将20只DBA/1小鼠随机分为正常组、CIA组,EMS（5.4 g·kg^-1）组及甲氨蝶呤（MTX,0.5 mg·kg^-1）组。CIA组、EMS组及MTX组在第1天以等体积牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂免疫DBA/1小鼠,于第21天以等体积牛Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂于尾根部有别于第1次免疫部位免疫DBA/1小鼠建立CIA模型（此为第2次免疫）,并于第2次免疫当天开始灌胃给药,除MTX为每周3次外,其余每天1次,共给药28 d。第22天开始观察CIA小鼠的关节红肿等症状并进行关节炎评分,第49天取材后,采用苏木素-伊红（HE）染色观察CIA小鼠关节滑膜炎症的情况;免疫荧光（IF）双标法检测CIA小鼠关节中CD4⁺T细胞中Th17细胞标志物白细胞介素-17（IL-17）和Treg细胞标志物叉头框转录因子P3（FoxP3）在关节滑膜中的表达情况;流式细胞术检测小鼠脾脏及淋巴结中Th17和Treg的细胞比例情况。结果 与正常组比较,CIA组小鼠关节滑膜炎症情况明显,小鼠关节结构严重紊乱,关节软骨及骨破坏明显,骨侵蚀严重（P<0.01）;小鼠关节组织中Th17/Treg值显著升高（P<0.01）;小鼠脾脏及淋巴结中Th17的细胞表达比例显著增高（P<0.01）,Treg细胞表达比例显著减少（P<0.01）;与CIA组比较,EMS组和MTX组两组小鼠关节结构均相对正常,骨侵蚀、骨破坏较轻,关节面相对完整光滑;EMS组和MTX组两组中Th17/Treg值显著降低（P<0.01）;小鼠脾脏及淋巴结组织中,EMS组、MTX组Th17细胞表达比例显著降低（P<0.01）,Treg细胞的表达比例显著增加（P<0.01）。结论 EMS通过调节Th17/Treg平衡,抑制CIA小鼠中Th17细胞的表达,促进Treg细胞的表达,进而治疗RA。     

柚皮苷上调miR-21 对改善类风湿关节炎大鼠Treg/Th17 失衡的研究

目的:探讨柚皮苷通过上调miR-21改善类风湿关节炎(RA)大鼠的调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)失衡。方法:将雄性SD大鼠分为对照组、模型组、地塞米松组、柚皮苷低、中、高剂量组。除对照组外,其余各组大鼠制备Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)模型。模型制备成功后,地塞米松组给予2 mg/kg的地塞米松水溶液,柚皮苷组给予15 mg/kg、30 mg/kg、60 mg/kg的柚皮苷水溶液,对照组和模型组给予等体积蒸馏水。干预4周后,观察大鼠关节肿胀率和关节滑膜组织病理变化,检测大鼠血液中miR-21、叉头转录因子3 (Foxp3)、转录因子维甲酸受体相关孤儿受体γt (ROR-γt)mRNA表达量及关节液中白细胞介素-10 (IL-10)和白细胞介素-17 (IL-17)水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠膝关节滑膜明显增生,炎性细胞浸润,关节功能减退;关节肿胀率、血液ROR-γt mRNA、关节液中IL-17升高(P0.05),血液miR-21、Foxp3 mRNA及关节液中IL-10降低(P0.05)。与模型组比较,地塞米松组滑膜增生和炎性细胞浸润明显减少;柚皮苷各剂量组大鼠炎症细胞浸润程度较低,滑膜增生较小,且呈剂量依赖性。地塞米松组和柚皮苷各剂量组大鼠关节肿胀率、血液ROR-γt mRNA、关节液中IL-17显著降低(P0.05),血液miR-21、Foxp3 mRNA及关节液中IL-10升高(P0.05),且柚皮苷各剂量组呈剂量依赖性(P0.05)。结论:柚皮苷能够抑制CIA大鼠炎症反应,通过上调miR-21调节Treg/Th17失衡,对RA有保护作用,提示柚皮苷可能作为一种免疫抑制和软骨保护药物用于RA的治疗。     

甘草附子汤对胶原诱导性关节炎小鼠Th17和Treg细胞的影响

目的 探讨甘草附子汤(Gancaofuzi decoction, GCFZ)对胶原诱导型关节炎(collagen-induced arthritis, CIA)小鼠辅助性T细胞17(T helper cell 17, Th17)和调节性T细胞(Regulatory T cell, Treg)失衡的调节作用。方法 该研究包括4组小鼠：正常对照组(Control组),模型对照组(CIA组),GCFZ 2.4 g·kg^-1组和GCFZ 4.8 g·kg^-1组。检测各组小鼠足肿胀度、关节炎指数;苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining, HE)观察小鼠踝关节组织病理学变化;流式细胞仪检测脾脏Th17和Treg细胞比例;酶联免疫吸附试验检测血清白介素17(interleukin-17,IL-17)、白介素6(interleukin-6, IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha, TNF-α)和白介素10(interleukin-10, IL-10)水平。结果 与正常组比较,CI...     

苦参碱调节RhoA-ROCK 信号通路对冠心病模型大鼠Th17/Treg 细胞平衡的影响

目的 探讨苦参碱(Matrine)对冠心病(coronary heart disease,CHD)大鼠辅助T细胞17(helper T cell 17,Th17)/调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)细胞平衡及Ras同源基因家族成员A(RhoA)-Rho相关的卷曲螺旋激酶(ROCK)信号通路的影响。方法 建立冠心病模型,将实验大鼠分为对照组、模型组、苦参碱低剂量(50 mg·kg-1)组、苦参碱高剂量(200 mg·kg-1)组及苦参碱高剂量(200 mg·kg^-1)+LPA组(10 mg·kg^-1)。超声心动图进行大鼠心功能检测;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法进行白细胞介素17(IL-17)、转化生长因子β(TGF-β)水平检测;流式细胞术检测Th17、Treg数量及Th17/Treg比值;免疫组化进行内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、内皮素1(ET-1)蛋白表达水平检测;Masson染色进行大鼠心肌组织的病理形态变化观察;TTC染色检测各组大鼠心...     

白芍总苷对关节炎大鼠骨质破坏及T细胞表达RANKL的影响

目的:观察白芍总苷(白芍总苷)对关节炎大鼠原、继发足肿、关节骨质破坏及其对外周血中T淋巴细胞表达破骨细胞分化因子(RANKL)的影响。方法:分别制备佐剂型关节炎(AIA)和胶原型关节炎(CIA)大鼠模型,给药自造模第七天始,持续49天。分别计算各组大鼠足肿胀度,对各组大鼠进行关节摄片观察骨质破坏情况,并检测各组大鼠外周血T细胞表达RANKL的量。结果:AIA和CIA大鼠原、继发性足肿胀度增加,后肢关节的骨密度降低,关节腔间隙增宽,关节结构破坏,且T细胞RANKL表达率显著高于正常对照组;白芍总苷50mg/kg和100mg/kg剂量可不同程度地改善AIA和CIA大鼠原、继发性足肿胀,减缓后肢关节骨质破坏;同时白芍总苷50和100mg/kg剂量可降低关节炎大鼠外周血中T细胞RANKL的表达量。结论:白芍总苷可通过抑制T细胞表达RANKL,从而抑制破骨细胞(OC)的分化,减缓关节炎大鼠原、继发性足肿胀度和关节的骨质破坏。     

雷公藤多苷片对胶原诱导性关节炎大鼠血清HMGB1和IL-17的影响

目的:观察雷公藤多苷片对胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠血清中高迁移率族蛋白B1(high mobility group box chromosomal protein 1,HMGB1)及白介素17(interleukin 17,IL-17)含量的影响.方法:40只SD大鼠被随机分为正常对照组、模型对照组、甲氨喋呤对照组(3 mg·kg-1)、雷公藤多苷片低、高剂量组(5,10 mg·kg-1).用牛Ⅱ型胶原蛋白加不完全氟氏佐剂诱导大鼠关节炎模型,于免疫12d开始灌胃给药,连续4周.CIA大鼠模型建立后,观察各组大鼠关节指数变化,并采用ELISA法检测各组大鼠血清中HMGB1和IL-17的含量.结果:与正常组比较,模型组大鼠关节肿胀明显,血清中HMGB1和IL-17含量明显升高(P＜0.01或P＜0.05);与模型组比较,各治疗组大鼠关节肿胀程度均有一定程度缓解,甲氨喋呤组和雷公藤多苷片高剂量组大鼠血清中HMGB1和IL-17的含量显著低于模型组(P＜0.01或P＜0.05).结论:雷公藤多苷片治疗CIA大鼠关节肿胀可能与降低血清中HMGB1,IL-17的含量相关.     

黄芩苷对CIA大鼠足关节中炎症因子表达的影响

目的:探讨黄芩苷(Baicalin)治疗大鼠胶原诱导性关节炎(CIA)的可能作用机制。方法:制备CIA大鼠模型,分为正常对照组、CIA模型组、黄芩苷组(50mg·kg~(-1)·d~(-1))、甲氨蝶呤组(0.9mg·kg~(-1)·w~(-1)),观察膝关节切片进行HE染色及病理改变,免疫组化法检测关节中炎症因子TNF-α、IL-17、PGE2的表达。结果:与CIA模型组比较,黄芩苷大鼠组关节破坏程度明显减轻,关节炎症因子TNF-α、IL-17、PGE2表达明显降低(P0.01)。结论:黄芩苷能明显减少CIA大鼠关节中相关炎症因子的表达,减轻关节病理损伤。     

紫草素通过MAPK1/MAPK通路对小鼠胶原诱导型关节炎中滑膜炎症的影响

目的：探究紫草素对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎(CIA)中滑膜炎的影响。方法：将36只DBA/1小鼠按体质量随机分为6组，每组6只。6组分别为正常组、CIA组，紫草素1、2、4 mg·kg^-1组及甲氨蝶呤(MTX)0.5 mg·kg^-1组。CIA组、紫草素低、中、高剂量组及MTX组在第1天以等体积牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂免疫DBA/1小鼠，于第21天以等体积牛Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂二次免疫DBA/1小鼠建立CIA模型，并于二次免疫当天开始灌胃给药，除MTX为每周3次外，其余每天1次，共给药28 d。第22天开始观察CIA小鼠的关节红肿等症状并进行关节炎评分，第49天取材后，采用苏木素-伊红(HE)染色进行组织病理学检查观察CIA小鼠关节滑膜炎症的情况；免疫荧光(IF)双标法检测CIA小鼠关节滑膜中波形蛋白(Vimentin)和丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)的表达；网络药理学预测出紫草素作用于RA的靶标是MAPK1，采用分子对接方式进行验证；蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠关节滑膜中细胞外调节蛋白激酶(ERK)、c-J...     

清益调免方通过调控细胞因子纠正自然流产模型小鼠母胎界面Th17/Treg失衡

目的 探讨清益调免方通过对关键细胞因子的调控来调节辅助性T细胞17(Helper T cells 17,Th17)/调节性T细胞（Regulatory T cell,Treg）平衡的作用机制。方法 采用随机对照试验设计,将CBA/J雌鼠分为3组：正常对照组（Normal control group,N）、模型组（Model group,M）、清益调免方治疗组（QYTMtreated group,Q）,每组8只。N组雌鼠和BALB/c雄鼠合笼,M组和Q组雌鼠与DBA/2雄鼠合笼,Q组给予清益调免方溶剂,N组和M组给予等体积的蒸馏水。妊娠第14.5天处死孕鼠取材,计算胚胎丢失率;苏木精-伊红（HE）染色观察蜕膜组织的形态变化;流式细胞术检测孕鼠脾脏中CD4+CD25+Foxp3+(Treg)细胞、CD4+IL-17A+(Th17)细胞占CD4+T细胞的比例;酶联免疫吸附测定胎盘中白介素10(IL-10)、转化生长因子β1(TGF-β1)、白介素17A(IL-17A)、白介素6(IL-6)水平变化;实时荧光定量PCR检测胎盘组织中维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)、叉头状螺旋转录因子3(...     

基于Th17/Treg细胞平衡探讨抗纤益心方对自身免疫损伤小鼠免疫调节的作用机制

目的:探讨抗纤益心方干预自身免疫损伤小鼠免疫调节的作用机制,及其与辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞平衡的关系。方法:将60只SPF级BALB/c健康8周龄雄性小鼠按1∶5的比例随机分为正常组和造模组,在第0,7,28天于造模组小鼠腹股沟、腋下、背部多处皮下注射猪心肌肌球蛋白乳化液0.2 m L(含猪心肌肌球蛋白0.1 mg)以制备心肌免疫损伤小鼠模型。将造模成功的小鼠随机分为模型组,抗纤益心方组(KYP),缬沙坦组(Valsartan),抗纤益心方组给予抗纤益心方20.4 g·kg^-1·d^-1灌胃,缬沙坦组给予缬沙坦12 mg·kg^-1·d^-1灌胃,正常组和模型组给予同计算量的生理盐水灌胃,连续灌胃4周后取材,苏木素-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色检测心肌组织中病理损伤情况,酶联免疫吸附法检测小鼠血清中B型钠尿肽(BNP),抗心肌抗体,白细胞介素-17(IL-17)和白细胞介素-10(IL-10)的表达,流式细胞术检测脾脏Th17,Treg细胞的表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠心肌组织B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax),Bcl-2蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠脾脏转录因子维A酸相关孤独受体γt(RORγt),叉头框蛋白P3(Fox P3)m RNA表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠心肌病理损伤增加,血清BNP,抗心肌抗体,IL-17升高,IL-10降低(P<0.05),脾脏Th17细胞表达水平升高,Treg细胞的表达水平降低(P<0.05),心肌组织Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),Bax/Bcl-2值升高,脾脏RORγt m RNA表达升高,Fox P3 m RNA表达降低,RORγt/Fox P3升高(P<0.05);与模型组比较,抗纤益心方组及缬沙坦组心肌病理损伤减轻,血清BNP,抗心肌抗体,IL-17降低,IL-10升高(P<0.05),脾脏Th17细胞表达水平降低,Treg细胞的表达水平升高(P<0.05),心肌组织Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05),Bax/Bcl-2降低,脾脏RORγt m RNA表达降低,Fox P3 m RNA表达升高,RORγt/Fox P3值降低(P<0.05)。结论:抗纤益心方可能通过调节Th17/Treg细胞平衡改善心肌免疫损伤。     

芍药汤调控Th17\Treg细胞平衡改善大肠湿热证溃疡性结肠炎炎症反应的机制研究＊

目的 芍药汤治疗大肠湿热证溃疡性结肠炎（Ulcerative Colitis，UC）的机制研究。方法 将研究对象随机分为实验组65例，对照组62例。实验组予以芍药汤联合美沙拉嗪肠溶片口服，对照组口服美沙拉嗪肠溶片，疗程均为连续治疗4周。治疗前后进行Mayo评分，单项症状评分，生活质量评定，比较缓解率、有效率、内镜应答率、黏膜愈合率等临床指标。流式细胞术检测治疗前后两组外周血中Th17细胞比例，Treg细胞比例，Th17/Treg细胞，实时荧光定量多聚合酶链反应（RT-qPCR）检测ROR-γt和Foxp3在各组外周血单个核细胞（PBMCs）中转录水平表达，Elisa检测两组血清中IL-10和IL-17蛋白水平。结果 实验组和对照组患者在治疗后的各项临床指标均较治疗前好转（P < 0.05），实验组治疗后在缓解率、内镜应答率、黏膜愈合率和腹痛、腹泻、里急后重粘液脓血便等单项症状评分，以及生活质量评定的肠道症状、社会能力、全身症状、情感能力等方面较对照组治疗后显著好转（P < 0.05）。实验组和对照组治疗后均出现Th17细胞比例降低，ROR-γt mRNA水平和IL-17表达减少，Treg细胞比例升高，Foxp3 mRNA水平和IL-10的表达提高（P < 0.05）。实验组治疗后Th17细胞比例，Treg细胞比例，Th17/Treg细胞，ROR-γt和Foxp3 mRNA，IL-10和IL-17水平均较对照组治疗后变化明显（P < 0.05）。结论 芍药汤可通过调控Th17/Treg细胞平衡，大幅缓解大肠湿热证溃疡性结肠炎患者肠道症状，促进肠道黏膜恢复，提高患者生活质量。     

金匮肾气丸合补中益气汤加减治疗绝经后骨质疏松症的疗效及对免疫炎症因子的调节作用

目的:观察金匮肾气丸合补中益气汤加减治疗绝经后骨质疏松症(PMO)脾肾两虚证的临床疗效,对细胞免疫炎症因子的调节作用.方法 :将160例患者按随机数字表分为对照组和观察组,每组80例.两组患者均给予综合西医治疗措施,对照组口服壮骨止痛胶囊,4粒/次,3次/d;观察组口服金匮肾气丸联合补中益气汤治疗,1剂/d.两组均连续...     

血清25(OH)D、Th17/Treg失衡与新生儿缺氧缺血性脑病预后的关系研究

目的：探究新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）患儿血清25–羟基维生素D[25(OH)D]及辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞（Treg）与预后的关系。方法：选取郑州市儿童医院2019年1月至2021年1月收治的79例HIE患儿作为观察组，后进行临床病情分度，其中中度46例，重度33例；另选取同时期郑州市儿童医院健康新生儿79例作为对照组。利用流式细胞术检测外周血中Treg、Th17并计算Th17/Treg；采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清中25(OH)D水平。结果：与对照组相比，观察组患儿血清中Th17、Th17/Treg较高，25(OH)D、Treg较低，差异具有统计学意义（P <0.05）；与HIE中度患儿相比，HIE重度患儿血清中Th17、Th17/Treg较高，25(OH)D、Treg较低，入院时、治疗14 d后的新生儿神经行为测定评分法（NBNA）评分均较低，差异具有统计学意义（P <0.05）；对患儿随访12个月后，与神经发育正常组相比，神经发育不良组血清中Th17、Th17/Treg较高，25(OH)D、Treg较低，差异具有统计学意义（P <...     

芪灵汤联合高效抗逆转录病毒疗法对HIV／AIDS患者Thl7和Treg细胞表达水平的影响

目的探讨芪灵汤联合高效抗逆转录疗法（HAART）对HIV／AIDS患者外周血Thl7和Treg细胞表达水平的影响。方法将55例HIV／AIDS患者随机分成HAART治疗组28例和联合治疗组27例,并选取21例HlV阴性患者为健康对照组。HAART治疗组给予HAART治疗,联合治疗组给予芪灵汤联合HAART治疗,观察24周。同时根据治疗前外周血CD4＋T细胞计数水平,将HIV／AIDS患者分为3层,第一层：1～100个／μL;第二层：101～200个/μL;第三层：201～350个/μL,运用流式细胞术（FCM）检测HIV,AIDS患者治疗前基线、治疗4、12、24周时间点、健康对照组外周血Thl7、Treg细胞的表达水平及CD4＋T细胞数目。结果与健康对照组比较,HlV／AIDS患者外周血中Thl7细胞基线表达水平及CD4＋T细胞数显著降低,Treg细胞基线表达水平则升高,差异有统计学意义（P〈0．01）;与同组治疗前比较,HAART治疗组与联合治疗组治疗4、12和24周时CD4＋T细胞计数均升高,差异有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）。不同CD4＋T细胞水平,两组患者有效率差异无统计学意义（P〉0．05）。各时间点上,HAART治疗组与联合治疗组Thl7细胞、Treg细胞表达水平无统计学意义（均P〉0．05）。与HAART治疗组比较,治疗24周后,联合治疗组Thl7／Treg比例显著升高,差异有统计学意义（U=2．135,P=0．038）。结论芪灵汤能够改善Thl7/Treg细胞免疫平衡,这可能是芪灵汤提高HlV／AIDS患者免疫功能的机制之一。     

黄芪甲苷对结肠炎小鼠的抑炎作用及对外周血Th17细胞比例的影响研究

探讨黄芪甲苷对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的抑炎作用及对外周血辅助性T细胞(Th17)比例的影响。采用2%葡聚糖硫酸钠(DSS)建立结肠炎小鼠模型,阳性对照组以及黄芪甲苷低、高剂量组小鼠分别灌胃相应药物,计算疾病活动指数(DAI),ELISA法检测血清白细胞介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)含量,HE染色法观察结肠组织病理学变化,流式细胞仪检测外周血Th17细胞/调节性T细胞(Treg)比例,蛋白印迹法检测叉头蛋白p3(Foxp3)、视黄酸相关孤儿核受体γt(ROR-γt)蛋白相对表达量。结果显示,正常小鼠结肠组织结构完整,杯状细胞未减少,腺体排列整齐,无黏膜糜烂、出血,无阳性细胞浸润;模型组小鼠结肠组织黏膜结构严重破坏,腺体排列紊乱或缺失,可见血管扩张、充血,大量炎性细胞浸润;各药物治疗组结肠组织病理损伤出现不同程度减轻。与正常组比较,模型组Th17细胞百分比、IL-17和TNF-α含量、ROR-γt蛋白相对表达量升高,TGF-β含量、Treg细胞百分比、Foxp3蛋白相对表达量降低;与模型组比较,阳性对照组、黄芪甲苷低剂量组、黄芪甲苷高剂量组DAI评分、组织病理学评分、Th17细胞百分比、IL-17和TNF-α含量、ROR-γt蛋白相对表达量降低,TGF-β含量、Treg细胞百分比、Foxp3蛋白相对表达量升高;与阳性对照组比较,黄芪甲苷低剂量组DAI评分、组织病理学评分、Th17细胞百分比、IL-17和TNF-α含量、ROR-γt蛋白相对表达量升高,TGF-β含量、Treg细胞百分比、Foxp3蛋白相对表达量降低;与黄芪甲苷低剂量组比较,黄芪甲苷高剂量组DAI评分、组织病理学评分、Th17细胞百分比、IL-17和TNF-α含量、ROR-γt蛋白相对表达量降低,TGF-β含量、Treg细胞百分比、Foxp3蛋白相对表达量升高;阳性对照组与黄芪甲苷高剂量组比较,各指标差异无统计学意义。结果表明,黄芪甲苷可抑制结肠炎小鼠的炎症反应,降低Th17细胞比例。     

昆明山海棠胶囊对大鼠佐剂性关节炎T淋巴细胞的影响

目的:探讨昆明山海棠胶囊对大鼠佐剂性关节炎T细胞的作用.方法:复制大鼠佐剂性关节炎动物模型,采用免疫组化法对大鼠外周血及关节滑膜T细胞亚群CD4 和CD8 进行检测.结果:与正常组相比较,模型组大鼠外周血中CD4 细胞数以及CD4 /CD8 比值均明显增高;关节滑膜CD4 细胞免疫组化反应阳性,呈现弥散性黄染.经昆明山海棠胶囊治疗后,外周血中CD4 细胞数明显减少;CD4 /CD8 比值明显降低;可改善滑膜淋巴细胞浸润情况.结论:昆明山海棠胶囊具有免疫调节作用.     

加味归脾合剂治疗慢性免疫性血小板减少症气虚证临床研究

目的:观察加味归脾合剂治疗慢性免疫性血小板减少症(ITP)的疗效,探讨中药复方制剂对ITP患者Treg/Th17免疫紊乱调控的有效干预机制。方法:将符合标准的60例慢性ITP患者随机分为中药组和激素组各30例,中药组予加味归脾合剂治疗,激素组予泼尼松治疗,记录治疗前后ITP患者血清中细胞因子Treg细胞、Th17细胞以及Treg/Th17比值,Foxp3mRNA、RORγt mRNA、Foxp3/RORγt比值检测结果及外周血血小板计数。结果 :(1)血小板计数:中药组和激素组治疗后均有所上升,与治疗前比较差异有统计学意义(P0.01),组间比较差异无统计学意义(P0.05)。(2)Treg/Th17:中药组与激素组治疗前与正常对照组比较,Treg细胞、Th17细胞、Treg/Th17比值、Foxp3mRNA、RORγt mRNA表达、Foxp3/Ro Rγt比值差异均有统计学意义(P0.05);治疗后中药组Treg细胞表达与Treg/Th17比值、Foxp3mRNA表达、Foxp3/Ro Rγt比值检测均高于激素组,组间比较差异有统计学意义(P0.05);Th17和RORγtmRNA表达,组间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:加味归脾合剂可有效提升血小板计数及Treg细胞、Treg/Th17比值、Foxp3mRNA、Foxp3/Ro RγT比值,其上调Treg细胞及Foxp3mRNA表达,从而改善Treg/Th17免疫功能紊乱,健脾益气统血是治疗ITP气虚证的主要机制之一。     

中医药干预溃疡性结肠炎Th17/Treg平衡的研究进展

溃疡性结肠炎(UC)是一种常见的慢性非特异性的肠道炎症,其病程长且难以治愈,发病率逐年上升。辅助性T细胞17(Th17)是免疫促进细胞之一,而调节性T细胞(Treg)是一种免疫抑制细胞,Th17和Treg细胞共同维持着机体免疫微环境的平衡。在UC进展期间,引起炎症的Th17群体通常增加,而抑制Th17活性的Treg减少。其中,Th17介导免疫应答反应,Treg介导免疫抑制,两者协调平衡在溃疡性结肠炎的炎症和免疫过程中起关键作用。UC的西医治疗虽具有一定的效果,然而,副作用的频率和严重程度,不方便的剂量调节,以及部分价格过高限制了他们的临床应用。中药作为我国的传统医药,具有多靶点、多环节、多途径的治疗特点,在抗溃疡性结肠炎方面具有独特优势和广阔前景。近年来,中医药领域以Th17/Treg平衡为切入点,开展了大量中医药干预UC中Th17/Treg平衡的临床和实验研究,并取得了一定的成果,临床和实验证据明确表明干预Th17/Treg是中医药治疗溃疡性结肠炎的重要作用机制。本文主要对前人关于中药单体、组分或有效成分、中药复方对UC中Th17/Treg平衡的干预作用研究进行了总结与分析,有利于人们更为准确、全面地认识中医药干预UC中Th17/Treg平衡的作用机制,为临床合理设计抗溃疡性结肠炎治疗方案提供参考。     

养阴方对HSP65攻击下ApoE~(-/-)小鼠Th17、Treg细胞失衡的作用研究

目的考察在热休克蛋白(HSP)65攻击下养阴方对载脂蛋白E敲除(ApoE~(-/-))小鼠动脉粥样硬化(AS)的病变及辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞(Treg)的影响及可能机制。方法将ApoE~(-/-)小鼠分别饲喂普通和高脂饲料,并分别sc无菌PBS或HSP65,以辛伐他汀为阳性药,研究养阴方对AS模型小鼠血脂、斑块、Th17细胞与Treg细胞比例(Th17/Treg)及相关炎症指标的影响。给药方式皆为ig给药,并以等体积生理盐水做对照。采用酯酶法检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)及高密度脂蛋白(HDL)水平;油红O染色法测定主动脉斑块面积;流式细胞术测定抗凝血中IL-17A~+CD4~+Th17及Foxp3~+CD25~+CD4~+Treg细胞数量;ELISA法测定血清白细胞介素-6(IL-6)、IL-17、IL-2、转化生长因子-β(TGF-β)、IL-10水平;实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法测定脾脏中Stat3、Stat5a、Foxp3和主动脉中Stat3、Stat5a mRNA表达;Western blotting法测定脾脏中磷酸化STAT3(pSTAT3)、磷酸化STAT5(pSTAT5)、FOXP3和主动脉中pSTAT3蛋白表达。结果养阴方使小鼠血清TC、TG、LDL水平显著降低(P0.01),HDL显著升高(P0.05);主动脉斑块面积明显减小(P0.01);外周血IL-17A~+CD4~+Th17细胞显著减少(P0.05),Foxp3~+CD25~+CD4~+Treg显著增加(P0.05),Th17/Treg值大幅下降(P0.01);血清IL-6水平显著下降(P0.05),IL-2(P0.01)、TGF-β(P0.05)、IL-10(P0.05)水平显著升高;脾脏pSTAT3蛋白水平下降(P0.01),pSTAT5(P0.01)和FOXP3(P0.05)蛋白水平上升;主动脉Stat3 mRNA(P0.01)和pSTAT3蛋白(P0.05)水平下降。结论养阴方能够改善HSP65攻击下ApoE~(-/-)小鼠的高脂血症及AS,同时调节外周血中Th17/Treg的平衡和炎症因子的分泌从而改善炎症。养阴方对Th17、Treg的效应可能与减弱的IL-6/pSTAT3和增强的IL-2/pSTAT5信号有关。