中药抑制肝星状细胞活化治疗肝纤维化研究进展

肝纤维化（Hepatic fibrosis, HF）是肝脏受到损伤时产生的病理变化。其实质是肝脏受到慢性损伤后,肝星状细胞（Hepatic stellate cells, HSCs）产生大量细胞外基质并在肝脏中过度堆积形成瘢痕组织,是慢性肝病发展到肝硬化的重要环节。中药能够通过多靶点、多途径作用于HSCs,抑制细胞外基质的大量堆积,达到抗纤维化的作用。本综述通过总结HSCs活化机制、中药活性成分、中药有效部位、中药复方抑制HSCs活化的研究进展,为深入研究中药治疗HF提供理论依据。     

肝星状细胞与肝纤维化

肝纤维化(hepatic fibrosis)是指肝脏纤维结缔组织的过度沉积,是细胞外基质(extracellular matrix,ECM)合成和降解不平衡的结果,是各种慢性肝病向肝硬化发展所共有的病理改变和必经途径。而肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)是ECM产生的主要细胞来源,它的激活、凋亡受到众多细胞因素及细胞内信号转导系统的调节,因此阐明肝星状细胞的生物学特性与功能及其在肝纤维化中的作用机制,对肝纤维化的预防和治疗都有     

肝星状细胞与肝纤维化

肝纤维化是一切慢性肝病的共同病理学基础 ,是形成肝硬化的必经病理阶段。肝纤维化的形成机理目前多数认为是致病因子造成肝细胞 (HC)损伤 ,引起肝枯否氏细胞 (KC)激活 ,分泌多种细胞因子 (CK) ,随同血小板、肝窦内皮细胞 (SEC)和肝细胞等分泌多种细胞因子 ,与某些化学递质共同作用于肝星状细胞 (HSC) ,使其激活 ,转化为肌成纤维细胞 (MFBLCs) ,通过旁分泌与自分泌作用 ,使 HSC增殖 ,合成大量的细胞外基质(ECM) ,ECM的分泌增加 ,降解减少 ,以致其在肝内大量沉积 ,肝纤维化逐渐形成 [1]。但肝纤维化与其它组织纤维化不同 ,很少有…     

肝星状细胞的凋亡与肝纤维化的研究进展

<正>肝星状细胞(HSC)是肝脏的一种间质细胞,肝纤维化(HF)是肝脏对各种原因所致肝损伤的创伤愈合反应,由于损伤引起HSC激活及其转化为肌成纤维细胞(MF),从而大量合成各种细胞外基质(ECM)沉积于肝脏,最终导致HF。激活状态HSC减少主要通过HSC的凋亡来实现,抑制HSC激     

缺氧诱导因子-1α对肝星状细胞影响的研究进展＊

肝纤维化是慢性肝病进程中肝脏反复损伤和修复的结果，是以细胞外基质过度累积为主要特征的病理过程。肝星状细胞异常活化是肝纤维化的细胞学基础，其活化受多种因素影响，其中，缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）发挥了重要作用。HIF-1α作为机体适应缺氧应激的关键细胞因子，对肝星状细胞的活化、增殖和促细胞外基质形成、促血管新生能力的改变有重要意义。中医药可通过调控HIF-1α的表达以及改善肝脏乏氧微环境减轻肝纤维化的程度，因此HIF-1α有望成为中医药防治肝纤维化的新靶点。本文就HIF-1α的概述、HIF-1α调控肝星状细胞活化、自噬、凋亡等功能以及中医药调控HIF-1α的表达防治肝纤维化等方面作一综述。     

中药抑制肝星状细胞活化作用的研究进展

多项研究表明中药可通过抑制星状细胞活化而干预肝纤维化的形成和发展.其途径主要有两种:第一是抑制星状细胞的激活.第二是使已活化的星状细胞数量减少.但目前研究仍存在一些问题:(1)中药产地、剂型、品系存在差异.如何统一其疗效作用;(2)需进一步明确复方制剂相互作用的机制及各自作用的靶点,以最好的发挥中药协同抗纤维化的作用:(3)现有的中药制剂可抗纤维化和延缓纤维化的形成,但对已形成的肝纤维化无明显疗效;(4)部分中药对肝功能存在不可避免的损害.这些都将成为今后抗纤维化研究的重要课题.     

中药有效成分作用于肝星状细胞抗肝纤维化分子机制研究进展

肝纤维化是多种慢性肝病进展至肝硬化的中间过程,抑制肝星状细胞(HSC)激活,促进HSC凋亡两方面成为预防和治疗肝纤维化的关键。中药能够多途径、多靶点,通过多种细胞因子及细胞通路作用于HSC,发挥抗肝纤维化作用。该文总结HSC激活及凋亡主要分子机制,及近几年有关中药有效成分作用于HSC抗肝纤维化分子机制研究,为深入开展抗肝纤维化提供参考。     

参七内金散对四氯化碳肝纤维化模型大鼠肝星状细胞活化与凋亡的影响

目的：观察参七内金散抗大鼠肝纤维化的作用机制。方法：雄性SD大鼠30只随机分为3组：正常组、模型对照组、参七内金散组。以CCl4皮下注射造模,首次注射100%CCl45mL/kg体重,之后40%CCl4 橄榄油溶液3mL/kg皮下注射,2次/周,连续注射6周。造模成功后以0.8g/kg的参七内金散灌胃模型大鼠共2周,正常组与模型对照组则予以等量生理盐水灌胃,共2周。以盐酸水解法测定肝组织羟脯氨酸含量,分别以HE、天狼猩红染色观察肝组织的炎症与纤维化病理。免疫印迹及免疫组化检测α-SMA的表达,观察肝星状细胞活化;连续切片,依次TUNEL染色与α-SMA免疫组化双染色,观察肝星状细胞凋亡。结果：与正常大鼠比较,模型大鼠肝组织可见大量肝组织脂肪变性及胶原病理沉积,并可见纤维间隔形成;参七内金散显著能改善模型大鼠肝组织脂肪变性与胶原病理沉积,降低肝组织Hyp含量。正常大鼠仅表达少量α-SMA,主要分布于血管壁,未见凋亡星状细胞;模型组大鼠可见大量α-SMA表达,可见少量凋亡星状细胞;与模型组比较参七内金散组肝组织α-SMA表达显著减少（P≤0.01）,但凋亡肝星状细胞显著增多。结论：参七内金散具有抗肝纤维化作用;抑制肝星状细胞活化、促进活化的肝星状细胞凋亡是参七内金散抗肝纤维化的机理之一。     

中药血清与肝星状细胞研究进展

肝星状细胞（hepatic stellate cells,HSCs）的活化、增殖是肝纤维化形成和发展的中心环节。利用中药血清药理学研究方法发现,中药血清可干预肝纤维化形成和发展。综述了中药血清与肝星状细胞的研究进展,指出中药血清从抑制HSCs活化、HSCs增殖、HSCs收缩,促进HSCs凋亡等多靶点作用于肝星状细胞。可能是一种有效的抗肝纤维化治疗方法。     

中医药调控肝纤维化细胞机制研究进展

肝纤维化是指各种致病因素所致的肝脏内纤维结缔组织增生,其特点是大量细胞外基质(extracellular matrix,ECM)在窦周间隙沉积,为诸多慢性肝病发展至肝硬化过程中所共有的病理组织学变化,是影响慢性肝病预后的重要环节.近年来,中医药调控肝纤维化的细胞机制的研究取得了较大进展,笔者按照肝脏细胞在肝纤维化中的作用及中医药对其的调控作用机制综述如下.     

表没食子儿茶素没食子酸酯对肝星状细胞LX-2中STAT1信号的影响

目的 通过考察绿茶提取物中主要活性成分表没食子儿茶素没食子酸酯（（一）-epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对人源肝星状细胞株LX-2中STAT1信号的影响,探讨EGCG抗肝纤维化的新作用机制。方法 用不同浓度的EGCG处理LX-2细胞,利用蛋白印迹法检测磷酸化STAT1、总STAT1以及procollagen-α1,α-SMA蛋白表达;利用RT-PCR检测干扰素-γ（IFN--γ）的mRNA表达水平。进一步通过蛋白印迹法考察JAK1/2抑制剂AG490对EGCG调控磷酸化STAT1以及procollagen-α1、α-SMA蛋白表达的影响。通过荧光素酶报告基因方法检测EGCG对STAT1二聚化的影响。结果 EGCG剂量依赖性和时间依赖性地增加了LX-2细胞中磷酸化STAT1的表达,并增强了IFN-γmRNA表达水平。同时EGCG剂量依赖性地降低了LX-2细胞中procollagen-α1和α-SMA蛋白表达。JAK1/2抑制剂AG490阻断EGCG诱导的磷酸化STAT1上调,同时逆转了EGCG对procollagen-α和α-SMA表达的抑制。此外,EGCG增加了LX-2细胞核蛋白中STAT1的二聚体化程度。结论 EGCG可以通过促进LX-2细胞中STAT1磷酸化以及二聚体形成,并增加IFN-γ的表达抑制肝星状细胞功能。     

虎杖苷抑制肝星状细胞活化研究

目的：研究虎杖苷的抗肝纤维化药理作用。方法：采用转化生长因子-β1（TGF-β1）刺激人肝星状细胞株（LX-2）诱导肝纤维化细胞模型,采用虎杖苷（20μM）进行干预。Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。结果：虎杖苷能显著抑制TGF-β1诱导的LX-2细胞α-SMA的表达。结论：虎杖苷具有显著改善肝纤维化的作用,有望成为新型的抗肝纤维化药物。     

抗纤软肝冲剂药物血清对肝星状细胞增殖的影响

目的从细胞学水平探讨抗纤软肝冲剂抗肝纤维化的作用机制.方法采用酶消化法、密度梯度离心法,分离正常大鼠肝星状细胞(HSC),培养、鉴定及传代.制备抗纤软肝冲剂药物血清,温育传一代HSC,并设生理盐水组和秋水仙碱组为对照.3H-proline掺入法测定细胞活力;3H-TdR掺入法和MTT比色法测定细胞增殖.结果抗纤软肝冲剂组药物血清对细胞形态无影响,还能明显提高细胞的3H-proline掺入(P＜0.01),明显抑制细胞的3H-TdR掺入量和MTT转化(P＜0.01),且对MTT的抑制作用呈浓度依赖性递增趋势.结论抗纤软肝冲剂能提高细胞活力,无细胞毒性作用;能抑制HSC的增殖,这可能是该方抗肝纤维化的细胞学机制之.     

姜黄素与阿米洛利联用对大鼠肝星状细胞氧应激所致纤维化的抑制作用

目的：探讨钠氢交换抑制剂阿米洛利(Amibride)与抗氧化剂姜黄素(curcumin，Cur)联用对大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells，HSC)氧应激所致纤维化的作用。方法：HSC与三醋酸亚硝酸铁(FeNTA)共同培养。以MTY法观察阿米洛利、姜黄素对HSC增殖的效应。LDH法观察阿米洛利、姜黄素对HSC的毒性作用。以：ELISA法测定细胞培养液中Ⅰ型胶原的水平。以试剂盒推荐方法分别测定细胞培养液中丙二醛(MDA)、谷胱苷肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果：HSC与FeNTA共同培养，细胞内MDA、GSH水平明显升高，GSH-Px、SOD活力明显降低。FeNTA与HSC共同培养，能明显促进：HSC增殖和提高细胞培养上清中Ⅰ型胶原的水平。阿米洛利、姜黄素可以逆转上述所有FeNTA所致效应，且联用组优于单用组。结论：作用于HSC不同靶点的抗纤维化药物姜黄素、阿米洛利合用优于单用。     

红景天苷抗大鼠肝星状细胞氧应激脂质过氧化作用的研究

目的:探讨红景天苷(Salidroside,SDS)对大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)氧应激所致脂质过氧化的作用.方法:HSC与FeNTA共同培养产生氧应激.以MTT法测定红景天苷对HSC增殖的效应;LDH法测定红景天苷对HSC的毒性作用;以ELISA法测定细胞培养液中Ⅰ型胶原的水平;以试剂盒分别测定细胞培养液中MDA、GSH、GSH-PX、SOD水平.结果:HSC与FeNTA共同培养后,细胞内MDA、GSH水平明显升高,GSH-PX、SOD活力明显降低,并能明显促进HSC增殖和提高细胞培养上清中Ⅰ型胶原的水平.红景天苷可以逆转上述所有FeNTA所致效应.结论:红景天苷抗肝纤维化作用可能与其抑制脂质过氧化有关.     

丹芍化纤胶囊对大鼠肝纤维化的预防作用及对HSCs增殖和活化的影响

目的：探讨中药复方制剂丹芍化纤胶囊对大鼠免疫性肝纤维化的预防作用及其对肝星状细胞增殖、活化的影响。方法：Wistar雄性大鼠分为正常组、病理模型组、丹芍化纤胶囊低剂量组（0．3g／kg）、中剂量组（0．6g／kg）、高剂量组（0．9g／kg）及秋水仙碱组（0．15mg／kg）。除正常组外，各组均腹腔内注射猪血清（0．5mL／只，2次／周，持续12周）诱导大鼠免疫性肝纤维化模型，并同时灌胃给予相应药物，持续12周。实验第8、10周检测尿羟脯氨酸排出情况。大鼠肝脏常规病理切片行Masson三色法观察纤维化程度。肝脏免疫组织化学SABC法染色结蛋白（desmin）及α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）观察肝星状细胞（HSCs）的增殖、活化。结果：丹芍化纤胶囊中、高剂量给药能增加大鼠尿羟脯氨酸的排出量（P〈0．01），抑制HSCs的增殖（P〈0．01）。减少活化HSCs的数量（P〈0．01），减轻肝纤维化程度。结论：丹芍化纤胶囊能减轻肝脏损伤，增加胶原降解，抑制HSCs的增殖和活化，具有预防大鼠肝纤维化的作用。     

丹芍化纤胶囊对大鼠肝纤维化的预防作用及对HSCs增殖和活化的影响

目的:探讨中药复方制剂丹芍化纤胶囊对大鼠免疫性肝纤维化的预防作用及其对肝星状细胞增殖、活化的影响。方法:W istar雄性大鼠分为正常组、病理模型组、丹芍化纤胶囊低剂量组(0.3g/kg)、中剂量组(0.6g/kg)、高剂量组(0.9g/kg)及秋水仙碱组(0.15mg/kg)。除正常组外,各组均腹腔内注射猪血清(0.5mL只/,2次/周,持续12周)诱导大鼠免疫性肝纤维化模型,并同时灌胃给予相应药物,持续12周。实验第8、10周检测尿羟脯氨酸排出情况。大鼠肝脏常规病理切片行M asson三色法观察纤维化程度。肝脏免疫组织化学SABC法染色结蛋白(desm in)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)观察肝星状细胞(HSCs)的增殖、活化。结果:丹芍化纤胶囊中、高剂量给药能增加大鼠尿羟脯氨酸的排出量(P<0.01),抑制HSCs的增殖(P<0.01),减少活化HSCs的数量(P<0.01),减轻肝纤维化程度。结论:丹芍化纤胶囊能减轻肝脏损伤,增加胶原降解,抑制HSCs的增殖和活化,具有预防大鼠肝纤维化的作用。     

莪术对肝星状细胞活化的影响

目的:观察莪术对肝星状细胞活化的影响。方法:莪术水煎液(0.3g/ml)按10ml/kg 大鼠体重给正常大鼠灌胃,每天2次,连续3天,第4天1次给予全日剂量,1h 后采血,离心分离血清,56℃灭活,制备药物血清。以正常鼠血清及秋水仙碱药物血清作为对照。将药物血清温育传一代的肝星状细胞,氚标胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入法及噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖;酶联免疫吸附(ELISA)法测定培养上清Ⅰ型胶原含量,改良 Lowrv's 法测定细胞层总蛋白以校正细胞数;貂肺上皮细胞株-Mvllu 抑制 MTT 法测定培养上清转化生长因子β_1(TGF β_1)。结果:莪术药物血清和秋水仙碱药物血清对活化的肝星状细胞增殖均有显著抑制作用(P<0.01)。莪术的抑制作用强于秋水仙碱(P<0.01),二者都能抑制肝星状细胞生成Ⅰ型胶原(P<0.01),并且都能显著抑制肝星状细胞分泌 TGF β_1,两者作用比较,差异无显著性(P>0.05)。结论:莪术能抑制肝星状细胞增殖,减少胶原和 TGF β_1的生成,从而抑制肝星状细胞的活化。