庆大霉素对猪肾小管上皮细胞凋亡与细胞内钙浓度的影响

目的了解中毒性肾病中细胞凋亡的发生机制。方法用不同浓度的庆大霉素（０．５、１、２、４、８、１６ｍｍｏｌ／Ｌ），作用于体外培养的猪肾小管上皮细胞株（ＬＬＣＰＫ１），观察有无细胞凋亡发生以及细胞凋亡与细胞内Ｃａ２＋浓度变化的关系。结果庆大霉素能引起体外培养的肾小管上皮细胞发生凋亡，该凋亡分别经光镜、电镜、琼脂糖凝胶电泳对ＤＮＡ片断的测定以及原位细胞死亡检测等方法证实。利用流式细胞仪，定量测定表明，随着庆大霉素浓度的增加（２～１６ｍｍｏｌ／Ｌ），凋亡细胞所占比例也增加（８．８％、１０．２％、１６．１％、１８．３％，Ｐ＜０．０１）。通过激光共聚焦显微镜对细胞内Ｃａ２＋浓度的测定，发现庆大霉素组（４ｍｍｏｌ／Ｌ）平均细胞内Ｃａ２＋浓度明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）。结论庆大霉素能诱导ＬＬＣＰＫ１细胞凋亡，凋亡的发生与培养液中庆大霉素浓度及作用时间有关，凋亡细胞内Ｃａ２＋浓度比正常组显著增加，提示ＬＬＣＰＫ１凋亡的发生与细胞内Ｃａ２＋浓度升高有关     

雷公藤内酯醇通过细胞凋亡阻止人T细胞增殖

目的：通过观察雷公藤内酯醇是否能导致人外周血Ｔ细胞发生细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ），探讨该化合物阻止淋巴细胞增殖的作用机理。方法：选择被ＰＨＡＰ，佛波脂（ＰＭＡ），及白介素２（ＩＬ２）等有丝分裂原刺激的人Ｔ细胞为研究对象，以吖啶橙染色细胞的形态，ＤＮＡ片断的测定，和ＤＮＡ凝胶电泳作为判断细胞出现细胞凋亡的标准。结果：①未发现雷公藤内酯醇能使处于静止状态的Ｔ细胞出现细胞凋亡；②雷公藤内酯醇与有丝分裂原同时作用于Ｔ细胞后，其３ＨＴｄＲ掺入率明显降低的同时，只有少量的Ｔ细胞呈细胞凋亡的表现，ＤＮＡ片断检测也无显著变化；③对已活化的Ｔ细胞，雷公藤内酯醇可使大量Ｔ细胞呈细胞凋亡样变化，此时其ＤＮＡ片断的测定和ＤＮＡ凝胶电泳均证实活化的Ｔ细胞已发生了细胞凋亡；而且，作者还证实活化的Ｔ细胞细胞凋亡的发生与雷公藤内酯醇呈浓度依赖性。活化的Ｔ细胞３ＨＴｄＲ掺入明显减少。结论：雷公藤内酯醇阻止活化Ｔ细胞增殖的效应与其诱导细胞凋亡作用相关     

葛根素诱导血管平滑肌细胞凋亡的实验研究

目的：观察葛根素促进人脐动脉血管平滑肌细胞凋亡的作用，探讨葛根素抑制平滑肌细胞增殖的机制。方法：分离培养人脐动脉平滑肌细胞，不同浓度葛根素与细胞孵育，TUNEL检测葛根素诱导细胞凋亡，rt-PCR实验检测促凋亡基因Bax和抗凋亡基因Bcl-XL。结果：随着葛根素浓度升高，细胞生长受抑制，TUNEL阳性细胞显著增加。rt-PCR实验发现促凋亡基因Bax随药物浓度和作用时间的增加而上升，而且Bax、Bcl-XL基因表达比例有一定升高。结论：葛根素通过调节经典的Bax、Bcl-XL通路对血管平滑肌细胞凋亡有一定诱导作用。     

干扰素α对U937细胞的诱导凋亡及其作用机制探讨

目的：探讨干扰素α对白血病U937细胞的生长抑制作用及其作用机制。方法：以不同浓度的干扰素α作用于体外培养的U937细胞，MTT法检测细胞生长抑制率，应用流式细胞仪及hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡，TRAP-PCR-ELISA法检测细胞凋亡前后的端粒酶活性。结果：干扰素α可显著地降低U937细胞端粒酶活性，抑制细胞的生长及诱导细胞发生凋亡。并呈现出明显的量一效与时一效关系。结论：干扰素α能抑制U937细胞的生长并诱导细胞发生调亡，降低细胞端粒酶活性可能是其重要作用机制之一。     

胰岛β细胞凋亡与糖尿病

细胞凋亡的过程是受基因调控的主动过程，与细胞凋亡相关的基因中，Ｃ－ｍｙｃ基因可诱导细胞凋亡，抑癌基因Ｐ５３，其野生型诱导细胞凋亡，而突变型却抑制细胞凋亡；ｂｃｌ－２基因是人体细胞长寿基因，该基因产物通过抵抗多种形式的细胞凋亡来延长细胞寿命。糖尿病的发生与胰岛β细胞凋亡密切相关。胰岛淀粉样多肽能诱导β细胞凋亡，这与Ⅱ型糖尿病的发生有关，细胞因子在Ｉ型糖尿病发病中起重要作用。ＩＬ－１β、ＩＮＦ－α、Ｉ     

凋亡与平滑肌细胞的关系

细胞凋亡与细胞分化，增生共同维持和调节细胞，组织和器官的正常形态和功能。近年来倍受关注的一种发现平滑肌细胞的凋亡参与也多种临床疾病的形成过程。本文简述平滑肌细胞发生凋亡的现象，有关的诱导物质及基因调控，并扼要介绍了受平滑肌细胞发生凋亡的细胞，从而较系统地总结了凋亡与平滑肌细胞的关系。     

IL-1β、IFN-γ对胰岛β细胞凋亡及胰岛素释放的影响

体外分离培养SD大鼠胰岛细胞，分别或共同加入IL-1β（终浓度20u／mL）和IFN-γ（终浓度150u／mL）处理。加入11．1mM的葡萄糖刺激胰岛素释放。应用放射免疫分析法测定培养液上清中胰岛紊浓度，流式细胞术检测胰岛细胞凋亡。结果：IL-1β单独作用于胰岛细胞，能抑制高糖刺激下胰岛素分泌及促进胰岛细胞凋亡。但与对照组比较差异无显著性（P〉0．05）；IFN-γ单独或联合IL-1β能显著抑制胰岛紊分泌（P〈0．05），促进胰岛细胞凋亡（P〈0．05）。结论：IFN-γ和IL-β能诱导胰岛β细胞凋亡，并且有协同作用。与自身免疫性糖尿病的发生、发展有一定关系。     

西咪替丁对人胃癌细胞MKN45的生长抑制和促凋亡的研究

目的 探讨西咪替丁对胃癌细胞MKN45生长的抑制和凋亡作用。方法 采用MTT比色法测定不同浓度西咪替丁作用下胃癌细胞MKN45培养液的OD值，并用流式细胞仪测定西咪替丁对MKN45的细胞周期和细胞凋亡的影响。结果 西咪替丁作用72小时，抑制胃癌细胞。MKN45的生长并呈剂量依赖趋势。胃癌细胞MKN45细胞周期发生改变，G1期百分比减少，S期百分比增加，并出现明显的细胞凋亡峰。结论 西咪替丁可能通过诱导胃癌细胞。MKN45凋亡从而抑制其细胞增殖。     

犀黄丸诱导Bel-7402细胞凋亡及其细胞内钙离子浓度的变化

研究犀黄丸(含药血清)诱导肝癌Bel—7402细胞凋亡的作用及凋亡过程中细胞内游离钙离子浓度的变化。DNA琼脂糖凝胶电泳法检测细胞凋亡，流式细胞仪检测凋亡过程中细胞内游离钙离子浓度的变化。DNA琼脂糖凝胶电泳法显示有明显的DNA梯带，同时在细胞凋亡过程中细胞内游离钙离子浓度明显升高，以凋亡早期较为明显。犀黄丸能诱导肝癌细胞凋亡，细胞内游离钙离子浓度升高可能是其机制之一。     

向日葵盘黄酮对前列腺癌DU145细胞的抑制作用

目的探讨向日葵盘黄酮对前列腺癌细胞株DU145的影响。方法应用不同浓度向日葵盘黄酮培养DU145细胞,倒置显微镜观察细胞形态,检测细胞的生长抑制率、细胞凋亡情况及细胞周期。结果不同浓度的黄酮化合物均对细胞生长具有明显的抑制作用,且随着浓度的增加和作用时间的延长,对DU145细胞的生长抑制率逐步提高。倒置显微镜显示细胞有凋亡小体等形成,且琼脂糖凝胶电泳显示不同浓度黄酮作用DU145细胞24h后,细胞发生了凋亡,并且处在晚期凋亡阶段。流式细胞仪检测显示不同浓度黄酮作用细胞48h后,随着黄酮浓度的增高,DU145细胞S期细胞增多,M期细胞有减少趋势,同时可检测到凋亡细胞的亚G1峰。结论向日葵盘黄酮可抑制人前列腺癌细胞株DU145的生长,能使细胞凋亡增加,G/M期细胞百分数升高,并能引起细胞凋亡相关基表达改变。     

隐丹参酮对U937细胞的生长抑制作用及机制

目的探讨隐丹参酮对U937细胞的生长抑制作用及其作用机制。方法以不同浓度的隐丹参酮作用于体外培养的U937细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,收集药物作用48 h后的细胞行AnnexinⅤ染色,并通过流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率和细胞周期,JC-1法检测细胞线粒体膜电位的变化,RT-PCR法检测细胞凋亡前后Bcl-2表达水平的变化。结果隐丹参酮可显著抑制细胞生长及诱导细胞发生凋亡,显示出明显的量—效与时—效关系。FCM检测结果表明,不同浓度的药物作用于48 h后,随药物浓度增加细胞凋亡率逐渐升高,亚G1期细胞逐渐增多,线粒体膜电位逐渐下降。RT-PCR结果表明,Bcl-2表达水平显著下降。结论隐丹参酮能抑制U937细胞的生长及诱导细胞发生凋亡,降低线粒体膜电位及Bcl-2水平可能是其重要作用机制之一。     

胰岛β细胞凋亡与糖尿病

细胞凋亡的过程是受基因调控的主动过程，与细胞凋亡相关的基因中，Ｃ－ｍｙｃ基因可诱导细胞凋亡；抑癌基因Ｐ５３，其野生型能诱导细胞凋亡，而突变型却抑制细胞凋亡；ｂｃｌ－２基因是人体细胞长寿基因，该基因产物通过抵抗多种形式的细胞凋亡来延长细胞寿命。糖尿病的发生与胰岛β细胞凋亡密切相关。胰岛淀粉样多肽能诱导β细胞凋亡，这与Ⅱ型糖尿病的发生有关。细胞因子在Ⅰ型糖尿病发病中起重要作用。ＩＬ－１β，ＩＮＦ－α、ＩＦＮ－γ是通过诱导β细胞凋亡而起到破坏胰岛β细胞的作用，其作用途径可通过ＮＯ途径也可通过非ＮＯ途径。细胞因子诱导胰岛β细胞凋亡的过程还与磷脂酶Ａ２的激活有关。     

细胞凋亡与胰岛素依赖性糖尿病

细胞凋亡机制与胰岛素依赖性糖尿病的发生，发展密切相关，ＩＤＤ患者的淋巴细胞出现多种异常，影响了细胞凋亡过程，其中有的针对胰岛β细胞自身反应性Ｔ淋巴细胞凋亡受损，使免疫耐受丧失，导致ＩＤＤＭ的发生，相反，有的Ｔ淋巴细胞具有自发凋亡倾向。Ｂ淋巴细胞存在ＣＤ９５表达缺陷，引发了针对胰岛β细胞特异的Ｂ淋巴细胞凋亡受阻。由非特异性免疫反应发生的ＩＬ－１，ＴＮＦ等细胞因子，通过ＮＯ介导使胰岛β细胞发生凋亡。这     

白藜芦醇诱导人卵巢癌细胞COC1细胞凋亡的研究

目的 探讨白藜芦醇（resveratrol，Res）对妇女卵巢癌COC1细胞凋亡的诱导作用。方法 采用Hoechst 33258和PI荧光染色法、DNA电泳及流式细胞术分析法，检测Res对COC1细胞的作用。结果 经Res处理的COC1细胞出现核固缩，胞浆凋亡小体形成，琼脂糖凝胶电泳呈现出细胞凋亡特征性的DNA梯状带。凋亡细胞发生率与药物浓度和作用时间呈正相关。结论 Res对肿瘤细胞的杀伤作用主要是通过诱导细胞凋亡。     

过量碘化物诱导原代培养的大鼠仔鼠皮层神经元细胞凋亡的实验研究

目的观察过量碘化物对原代培养的大鼠仔鼠皮层神经元细胞凋亡的诱导作用，并对其机制作初步探讨。方法取新生0～1d的大鼠仔鼠皮层神经元培养24h后，加入不同浓度的碘化钾，采用光镜及荧光显微镜观察细胞的形态改变；流式细胞术分析DNA的降解；分光光度法检测细胞的一氧化氮（NO）含量及一氧化氮合酶（NOS）活性。结果实验组加入过量碘化物12h可见细胞形态发生改变，经荧光染色后可见凋亡细胞，染色质浓集，呈致密的斑块状或新月状，并可见凋亡小体及核碎片，48h左右达到高峰。流式细胞术分析细胞凋亡率随碘化物浓度的升高而升高。实验组细胞的NO含量及NOS活性较正常对照组增高。结论过量碘化物可以诱导原代培养的大鼠仔鼠皮层神经元细胞凋亡，并呈剂量依赖关系，其机制可能与NOS活性及NO含量增高有关。     

氧化型高密度脂蛋白对细胞凋亡及细胞内钙离子浓度的影响

目的通过研究氧化型高密度脂蛋白对培养的内皮细胞致凋亡以及细胞内钙离子浓度的影响,阐述其致动脉粥样硬化机理,并探讨其引起细胞损伤的机制.方法用铜离子引发脂质过氧化过程,制备氧化型高密度脂蛋白,用MTT检测法检测细胞活性,PI染色法检测细胞凋亡.结果氧化型高密度脂蛋白可诱导内皮细胞发生凋亡;细胞内钙离子浓度则随氧化型高密度脂蛋白浓度的升高呈现逐渐下降的趋势.结论氧化型高密度脂蛋白引起细胞损伤的机制可能与钙离子浓度升高有关,体内氧化型高密度脂蛋白通过内皮细胞凋亡的途径损伤血管内皮,引发动脉粥样硬化.     

5-氟脲嘧啶诱导人胆囊癌细胞凋亡的研究

为研究 5 -氟脲嘧啶 (5 - FU)对胆囊癌细胞凋亡的影响 ,在体外培养的胆囊癌细胞中加入不同浓度的 5 -FU ,应用光镜、电镜、DNA凝胶电泳及流式细胞仪检测癌细胞凋亡的形态学特征、生化学特征、细胞凋亡百分率及细胞周期变化。在 5 - FU作用下 ,凋亡的胆囊癌细胞出现膜小泡、凋亡小体等特征性改变 ;DNA电泳呈现典型的“梯状”条带 ;流式细胞仪测定出现典型的凋亡峰 ;其凋亡百分率随着药物浓度的提高而明显升高 (与对照组比较 ,P<0 .0 5 )。认为 5 - FU可诱导胆囊癌细胞发生凋亡 ,其凋亡率随药物浓度的提高而升高     

人蛔虫Ⅱ期幼虫提取物诱导人肺上皮细胞凋亡

目的　探讨人蛔虫Ⅱ期幼虫提取物诱导体外培养的人肺上皮细胞A549凋亡,以及提取物浓度和作用时间与细胞凋亡的相互关系。　方法　根据四氮唑盐酶还原法(MTT)结果,选用5种不同浓度的提取物诱导人肺上皮细胞凋亡。分别在诱导后的5个时间段,采用苏木素伊红(HE)染色盲法计数和二苯胺法检测DNA断裂率,观察肺上皮细胞凋亡情况。同时对某个时间和浓度组的样本,用DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测细胞凋亡。　结果不同浓度人蛔虫Ⅱ期幼虫提取物诱导A549细胞凋亡,在5h之内细胞凋亡率随提取物浓度增加而增加,两者呈正相关关系,且细胞凋亡率显著高于对照组(P<005),5h细胞凋亡率达高峰(652%)。　结论　人蛔虫Ⅱ期幼虫提取物可诱导人肺上皮细胞凋亡,细胞凋亡与其提取物浓度呈明显的相关关系。在时间上表现为双向变化关系,其变化程度同时受提取物浓度的影响     

苦参碱诱导人结肠癌SW1116细胞凋亡及机制探讨

目的观察苦参碱（Ma）诱导结肠癌SW1116细胞凋亡的作用，并探讨其机制。方法采用不同浓度的Ma处理SW1116细胞48h，并设正常对照组，MTT法检测细胞增殖抑制率，流式细胞仪检测细胞凋亡率，半定量RT-PCR检测Fas和Bax mRNA表达水平。结果与正常对照组相比，不同浓度Ma处理的SW1116细胞抑制率、胞凋亡率显著升高（P均〈0.01），Fas和Bax mRNA表达上调（P〈0.05，P〈0.01）。结论Ma可诱导SW1116细胞凋亡，其作用机制可能与上调Fas和Bax mRNA表达有关。     

DHA对人肝癌HepG2细胞的生长抑制作用观察

体外加入二十二碳六烯酸（DHA）培养人肝癌细胞HepG2,MTT法观察细胞生长增殖情况,油红染色、荧光染色、透射电镜观察细胞形态及结构,流式细胞仪分析细胞凋亡率。结果显示,DHA能抑制HepG2生长,呈浓度和时间依赖性（P〈0．01）;细胞内有大量脂滴,并呈典型的凋亡改变,HepG2发生早期凋亡。认为DHA可抑制人肝癌细胞HepG2的生长,并使细胞发生早期凋亡。