GRP78mRNA在食管鳞状细胞癌中的表达

目的 检测GRP78 mRNA在食管鳞状细胞癌中的表达情况.方法 应用RT-PCR法检测30例食管鳞状细胞癌组织及其癌旁组织中GRP78 mRNA的表达情况.结果 食管鳞状细胞癌组织及癌旁组织中GRP78 mRNA的表达阳性率分别为56.67%(17 /30)和26.67%(8/30),GRP78 mRNA在食管鳞状细胞癌组织中表达水平明显高于癌旁组织.两组差异有统计学意义(P < 0.05).结论 与癌旁组织相比,食管鳞状细胞癌GRP78 mRNA呈现高表达,表明GRP78可能参与了食管鳞状细胞癌的发生过程,可以作为食管鳞状细胞癌的一种有价值的肿瘤分子标志物.     

人类膜联蛋白Ⅳ在肝细胞性肝癌中的表达及其意义

目的 研究人类膜联蛋白Ⅳ(ANXA4)在不同表型肝癌组织中的表达情况,探讨其临床病理意义.方法 先应用半定量RT-PCR技术验证ANXA4在不同类型肝组织中的基因表达,再应用免疫组化方法检测其在正常肝组织、乙型病毒性肝炎(乙肝)后肝硬化组织和不同表型肝癌组织标本中的表达,探讨其表达与临床病理资料之间的联系及其意义.结果 半定量RT-PCR扩增出长为300 bp的ANXA4片段,相对于520 bp的内参照β-actin片段计算,灰度的平均比值在正常肝组织、乙肝后肝硬化组织、肝癌组织中分别为0.3410±0.0161、0.8700±0.0341和0.9323±0.0142,两两比较差异均有统计学意义.免疫组化研究表明:ANXA4在正常肝组织中总阳性率为24.0%,在乙肝后肝硬化组织中总阳性率为28.0%;在肝癌组织中总阳性率为49.4%,相应癌旁组织中总阳性率为62.4%,其中小肝癌组织中总阳性率为53.8%,大肝癌组织中总阳性率为64.5%,多发癌组织中总阳性率为28.6%,相应癌旁组织中总阳性率分别为53.8%、64.5%、67.9%.统计学分析表明:随着肝细胞的恶性转化并进展,ANXA4呈逐渐上调趋势,但当肿瘤出现侵袭性转移时反而下调.与临床病理指标的相关性研究表明ANXA4与肝癌进展及侵袭相关.结论 从正常肝→肝硬化→肝癌组织,ANXA4的mRNA表达水平逐渐上调,与组织学蛋白表达水平变化相一致,提示与肝癌发生有关;ANXA4在肝癌组织中的表达明显失调,其变化可能与肝癌进展及侵袭相关.     

IL-10与IL-17水平在乙型肝炎病毒相关肝癌中的表达及临床价值研究

目的探讨白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)水平在乙型肝炎病毒相关性肝癌中的表达及其临床价值。方法选取2013年8月-2016年9月医院乙型肝炎病毒相关性肝癌患者104例作为研究组及同期健康体检者104名为对照组,比较乙型肝炎病毒相关性肝癌患者肝癌组织和癌旁组织及健康人群正常肝组织IL-10、IL-17表达及甲胎蛋白含量等。结果 IL-10在肝癌组织、癌旁组织中mRNA水平表达分别为(0.472±0.050)Gapdh、(0.022±0.004)Gapdh,高于健康人群的(0.010±0.002)Gapdh,IL-17在肝癌组织、癌旁组织中mRNA水平表达分别为(0.620±.0.087)Gapdh、(0.024±0.005)Gapdh,高于健康人群的(0.011±0.004)Gapdh,肝癌组织高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P<0.05),肝癌组织、癌旁组织中蛋白水平表达高于健康人群,肝癌组织高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P<0.05);在肝癌细胞株BEL-7402、HepG2中的水平高于正常肝细胞HL-7702,BEL-7402高于HepG2,差异均有统计学意义(P<0.05);IL-10、IL-17在mRNA和蛋白水平表达与甲胎蛋白含量呈正相关性(P<0.05)。结论 IL-10、IL-17高表达与乙型肝炎病毒相关性肝癌发生发展具有密切相关性,加强二者检测与干预,有助于乙型肝炎病毒相关性肝癌的诊断与疾病治疗,改善预后。     

TR6 mRNA在肝癌中的表达及其临床意义

[目的]研究肝癌中TR6mRNA的表达及其与临床病理特征之间的关系,阐明TR6在肝癌转移过程中的作用。[方法]应用半定量RT-PCR方法,检测TR6mRNA在肝癌组织中的表达和相对含量,分析TR6mRNA的相对含量与肝癌临床病理特征的关系。[结果]69例肝癌组织中,67例标本可扩增出426bp的条带,TR6mRNA的阳性表达率为97.10%,癌旁组织TR6mRNA的阳性表达率为76.81%（53/69）;癌组织中TR6mRNA相对含量明显高于癌旁组织（P﹤0.01）。TR6mRNA表达与转移复发和肿瘤大小有关,与年龄、性别、分化程度、临床分期、有无肝硬化、AFP、门脉癌栓、包膜浸润、肿瘤结节及HBsAg无关。序列分析发现其两例病例序列mRNA与源序列比较均有4个不同的碱基改变。[结论]肝癌中,TR6mRNA表达增高。肝癌TR6mRNA表达产物存在碱基改变。TR6mRNA的高表达在肝癌的转移复发过程中可能发挥重要的作用。     

白细胞介素17在原发性肝癌中的表达及意义

目的:对白细胞介素17(IL-17)在原发性肝癌组织中的表达及其意义进行探讨。方法:用酶联免疫吸附试验测定本院2011年5月-2012年5月的术前与术后165例原发性肝癌患者、35例肝良性肿瘤患者及30例健康对照者血清中的IL-17水平,对手术切除的肝癌组织、相应癌旁组织标本行实时荧光定量聚合酶链反应检测IL-17表达水平。结果:原发性肝癌组术前与术后血清IL-17表达水平明显高于良性肿瘤组与健康对照组,差异有显著性(P<0.01)。肝癌患者癌及癌旁组织中的IL-17的相对表达量高于良性肿瘤组,差异有统计学意义(P<0.05)。肝癌患者癌组织中IL-17的相对表达量高于其癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:IL-17表达升高与原发性肝癌密切相关,对临床诊疗可能发挥重要作用。     

Twist、p53和E-钙黏附蛋白联合检测在乳腺癌中意义

目的 观察乳腺癌中Twist、p53和E-钙黏附蛋白mRNA的表达及其相互关系.方法 选取初次就诊的30例乳腺癌患者行改良根治术的乳腺癌组织和癌旁组织及10例乳腺良性病变患者的正常乳腺组织,分别应用RT-PCR的方法检测Twist、p53和E-钙黏附蛋白mRNA的表达,与临床病理因素关系及其相互关系.结果 乳腺癌组织Twist mRNA表达与分化程度[高中分化93.33％(14/15),低分化53.33％(8/15)]、淋巴管浸润[是93.75％(15/16),否50.00％(7/14)]和TNM分期[Ⅰ～Ⅱ期46.15％(6/13),III～Ⅳ期94.12％(16/17)]有明显相关性(P＜0.05),而与年龄、肿瘤直径、外膜浸润、雌激素受体和孕激素受体无明显相关性(P＞0.05).乳腺癌组织中Twist和p53 mRNA表达较癌旁组织和正常乳腺组织明显升高[(112.36±12.53)％比(101.37±9.12)％和(98.03±9.04)％、(101.73±13.32)％比(91.43±7.43)％和(90.83±6.58)％,P＜0.01],而E-钙黏附蛋白mRNA表达较癌旁组织和正常乳腺组织明显降低[(55.43±12.49)％比(69.39±5.63)％和(72.73±7.93)％,P＜0.01],癌旁组织和正常乳腺组织比较差异无统计学意义(P＞0.05).乳腺癌组织中Twist mRNA表达与p53 mRNA呈正相关(r=0.526,P=0.004),而与E-钙黏附蛋白mRNA表达呈负相关(r=-0.500,P=0.000).结论 Twist和p53在乳腺癌组织中呈高表达,而E-钙黏附蛋白呈低表达.Twist可能通过上调p53的表达,同时下调E-钙黏附蛋白的表达,从而促进乳腺癌的浸润、转移,并在其中起重要作用.     

HIF-2α在肝癌组织中的表达及其临床意义

目的研究缺氧诱导因子-2d（HIF-2α）mRNA及蛋白在肝癌组织中的表达。方法免疫组织化学SP法和半定量RT—PCR法检测67例肝细胞肝癌标本及21例正常肝组织中HIF-2αmRNA和蛋白的表达。结果HIF-2αmRNA和蛋白在肝癌组织中的阳性表达率显著性高于癌旁组织和正常肝组织。肝癌组织中HIF-2αmRMA和HIF-2α蛋白表达在大小肝癌之间、是否伴有坏死之间和是否为浸润性生长之间差异有统计学意义;而在肝癌不同组织类型之间其表达差异无统计学意义。结论HIF-2α在肝癌组织中的表达较为普遍,其表达增高与肝癌的恶性生长有关。     

Th17/Treg细胞在肝细胞癌肿瘤微环境中的表达及意义

目的研究Th17/Treg细胞在肝癌组织及癌旁组织中的表达,探讨其在肝细胞癌肿瘤微环境中的变化及意义。方法选取2015年1月-2016年4月因肝细胞癌在本院普外科住院的患者28例,采用流式细胞仪检测肝细胞癌肿瘤组织(TIL)和癌旁组织(NIL)的Th17/Treg细胞频数,实时定量逆转录PCR(RT-PCR)检测IL-17和Foxp3的mRNA表达水平。结果 TIL组的Th17细胞和Foxp3+CD4+CD25+Treg细胞百分率明显高于NIL组,差异有统计学意义(P0.01)。TIL组的IL-17和Foxp3的mRNA表达水平明显高于NIL组,差异有统计学意义(P0.01)。经单因素相关分析Pearson检验,TIL组及NIL组中Th17细胞百分率与IL-17的mRNA表达水平呈正相关(r值分别为0.754、0.812,P0.05);TIL组及NIL组中Foxp3+CD4+CD25+Treg细胞百分率与Foxp3的mRNA表达水平呈正相关(r值分别为0.832、0.784,P0.05)。结论 Th17/Treg细胞可能参与了肝细胞癌肿瘤发展与浸润。     

肺鳞癌组织中热休克蛋白27表达及意义

目的 检测肺鳞癌组织中热休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)mRNA和蛋白表达水平变化及其意义.方法 应用实时荧光定量PCR(RQ-PCR)和免疫印迹(westorn blot)技术检测22例不同分期及分化程度的肺鳞癌组织及其相应癌旁正常组织中HSP27表达情况,并分析其与病理指标的关系.结果 HSP27在肺鳞癌组织和癌旁正常组织中mRNA表达水平差异无统计学意义;肺鳞癌组织中HSP27蛋白表达水平(0.85±0.11)明显高于癌旁正常组织(0.57±0.24);HSP27在低分化肺鳞癌组织中的蛋白表达水平明显高于高、中分化癌组织(P＜0.05);HSP27在早期(Ⅰ期+Ⅱ期)肺鳞癌组织和非早期(Ⅲ期)癌组织中的蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 HSP27在肺鳞癌中蛋白表达水平增高,可能与肺癌的发生、发展有关.     

GRP78蛋白在胰腺癌中的表达及对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响研究

目的：检测葡萄糖调节蛋白78（GRP78）在胰腺癌组织中的表达,探讨GRP78蛋白与胰腺癌发生、发展的相关关系.观察GRP78基因表达下调对胰腺癌细胞凋亡和增殖的影响,为以GRP78基因为靶基因治疗胰腺癌提供理论依据.方法：利用免疫组织化学技术检测93例胰腺癌组织及58例胰腺良性病变组织中GRP78蛋白的表达情况;Sh GRP78和Sh Neg克隆人真核表达载体,经脂质体转染胰腺癌细胞系BXPC-3,G418筛选阳性克隆,半定量RT-PCR检测GRP78 mRNA表达,Western blot检测GRP78蛋白表达.采用流式细胞仪、磺酰罗丹明B（SRB）染色法检测各组细胞增殖和凋亡情况.结果：GRP78蛋白在正常胰腺组织表达率为10.8％,在胰腺良性病变组织的表达率为41.4％,在胰腺癌组织中阳性率为88.2％,3组之间差异显著.建立了2组稳定转染细胞系：BXPC-3 sh GRP78和BXPC-3 sh Neg,BXPC-3 sh GRP78细胞中GRP78 mRNA和蛋白表达显著下调.GRP78基因表达抑制后BXPC-3细胞的增殖明显受到抑制,凋亡显著增加.结论：GRP78蛋白在正常胰腺组织,胰腺良性病变组织及胰腺癌组织中的表达水平依次升高;GRP78基因高表达是细胞组织恶性转化的重要标志物.     

Dietary energy restriction in mice reduces hepatic expression of glucose-regulated protein 78 (BiP) and 94 mRNA

The influence of life span-prolonging dietary energy restriction on hepatic expression of glucose-regulated protein 78 and 94 (GRP78 and GRP94) RNA was investigated in female C3B10RF1 mice. Mice were either fed ad libitum or fed diets reduced 20 or 40% in energy but containing approximately equivalent amounts of protein, fats, vitamins and minerals. Aging produced no changes in GRP mRNA. However, GRP78 and GRP94 mRNA levels were reduced approximately 50 and 40%, respectively, by 40% energy restriction. This level of energy restriction produced a 43% reduction in the mean plasma glucose levels of young and old mice. The changes in GRP mRNA expression appear to be specific, because the levels of these RNAs were normalized to the level of polyadenylated RNA, and no changes were detected in the levels of a number of other mRNAs. Although extreme glucose deprivation increases GRP mRNA levels in cultured cell lines, physiologically relevant reductions in blood glucose had the opposite effect in the liver, in vivo. The regulatory pathway responsible for these effects is not known. GRP mRNA levels are elevated by agents that increase the level of malfolded proteins in the endoplasmic reticulum. Thus, energy restriction may act to reduce malfolded proteins in the endoplasmic reticulum of hepatic cells.     

Ras相关核蛋白在肺鳞癌组织中的表达及意义

目的探讨肺鳞癌组织中Ras相关核蛋白(Ran)的mRNA和蛋白表达水平变化及其意义。方法采用实时荧光定量PCR(RQ-PCR)和Western Blot技术检测22例不同分期及分化程度的肺鳞癌组织及其相应癌旁正常组织中Ran的表达水平,并分析其与临床病理指标的关系。结果肺鳞癌组织中Ran mRNA表达水平是癌旁正常组织的2.35倍(P0.05),Ran在肺鳞癌组织中的蛋白表达水平高于癌旁组织。Ran在非早期(Ⅲ期)肺鳞癌组织中mRNA和蛋白的表达水平均高于早期(Ⅰ期+Ⅱ期)癌组织(P0.05),在低分化肺鳞癌组织和高、中分化癌组织中mRNA和蛋白表达水平的差异无统计学意义(P0.05)。结论 Ran的表达上调可能与肺癌的发生、发展相关。     

肝细胞癌合并肝硬化患者癌组织、癌旁肝组织ALB

目的探讨肝细胞癌合并肝硬化患者癌组织、癌旁肝组织ALBmRNA、IGF-1mRNA、IGFBP-3mRNA的表达。方法对24例肝细胞癌合并肝硬化行手术的患者和12例因胆石症或肝血管瘤行手术的患者进行研究。用RT—PCR法检测肝组织（包括癌组织、癌旁组织）ALBmRNA、IGF-1mRNA、IGFBP-3mRNA的表达,肝组织行Ki67免疫组织化染色。结果肝细胞癌合并肝硬化患者癌组织、癌旁肝组织ALBmRNA、IGF-1mRNA、IGFBP-3mRNA表达水平明显低于正常肝组织,且癌组织ALBmRNA、IGFBP-3mR．NA表达水平明显低于癌旁肝组织,而IGF-1mRNA表达水平明显高于癌旁肝组织。肝组织Ki67指数,癌组织、癌旁肝组织明显高于正常肝组织,且癌组织明显高于癌旁肝组织。结论IGF—1和IGFBP-3的不平衡可能与肝硬化患者肝癌的发生、发展有关。     

干细胞转录因子Foxd3在宫颈癌组织中的临床表达

目的:探讨干细胞转录因子Foxd3在宫颈癌组织中的表达情况及意义。方法:采用荧光实时定量(RT-PCR)方法检测22例宫颈癌组织和12例正常宫颈组织中Foxd3 mRNA的表达水平。采用组织芯片及免疫组织化学技术检测Foxd3的蛋白表达。结果:Foxd3 mRNA在宫颈癌组织与正常组织中均有表达,宫颈癌组织中表达水平显著高于正常组。Foxd3蛋白在正常组织中没有检测到,在宫颈癌中表达水平为90.9%,在宫颈癌组织中的表达水平显著高于正常组织。结论:宫颈癌组织中存在着Foxd3蛋白,可以作为宫颈癌治疗的一个新靶点。     

DNA切除修复标志物在肺癌、食管癌组织中的表达

[目的]研究切除修复中切除修复鼠缺陷交叉互补基因2(ERCC2)蛋白、尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)、细胞增殖核抗原(PCNA)在肺癌和食管癌组织中的表达水平差异。[方法]通过免疫组织化学和原位杂交方法研究三种生物标志物在不同部位的肿瘤组织和非肿瘤组织之间的表达水平进行比较。[结果]ERCC2蛋白和mRNA、UDG蛋白在肺和食管良性病变中的表达水平均明显高于其癌和癌周组织。UDG mRNA水平在食管良性病变组织中明显高于癌和癌周组织，在肺良性病变、癌和癌周组织中无显著差异。PCNA蛋白和mRNA在肺和食管癌和癌周组织中的表达水平均明显高于良性病变组织。三种标志物蛋白和mRNA表达水平在癌组织和癌周正常组织之间均无明显差异。[结论]ERCC2、UDG表达水平在良性病变组织中明显高于肿瘤组织、PCNA表达水平在肿瘤组织中明显高于良性病变组织。     

多效生长因子（PTN）mRNA及其蛋白在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨结直肠癌组织中多效生长因子（PTN）mRNA及其蛋白的表达情况及临床意义。方法：购买结直肠癌组织芯片标本90例（实验组）,正常结直肠组织芯片70例（对照组）,采用原位杂交和免疫组化染色方法,检测两组PTN mRNA及其蛋白的表达;另选择2009年11月-2013年12月手术治疗的原发结直肠癌患者90例,分析PTN mRNA及其蛋白表达与结直肠癌患者临床病理特征的关系。结果：实验组PTN mRNA阳性表达率为62.2%,PTN蛋白阳性表达率为58.9%,与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;不同年龄、性别及不同肿瘤类型之间,PTN mRNA及其蛋白表达差异无统计学意义（P〉0.05）;不同TNM分期和不同分化程度,PTN mRNA及其蛋白阳性表达差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：PTN mRNA及其蛋白与肿瘤分期和分化程度有密切关系,可作为判断结直肠癌预后的参考依据。     

hTRT和bax在甲状腺乳头状癌中的表达

目的研究不同类型甲状腺乳头状癌(PTC)中的人端粒酶逆转录酶(hTRT)mRNA和bax蛋白质的表达及意义。方法hTRTmRNA的检测采用原位杂交方法;bax蛋白质的检测采用免疫组化方法。结果hTRTmRNA在PTC、微小癌、腺内型、腺外型及癌旁组织中阳性表达率分别为86.21%、68.97%、93.33%、96.43%和41.79%;癌组织中hTRTmRNA的阳性表达显著高于癌旁组织(P<0.001);而各癌组间hTRTmRNA的阳性表达随PTC浸润程度增加而增强(P<0.05);bax在PTC、微小癌、腺内型、腺外型及癌旁组织中阳性表达率分别为72.41%、62.07%、76.67%、78.57%和55.22%,癌组织中bax的阳性表达显著高于癌旁组织(P<0.005);而各癌组间bax的阳性表达随PTC浸润程度增加而增强(P<0.05);在75例hTRTmRNA阳性病例中bax有58例阳性,hTRTmRNA和bax表达相关(P<0.05)。结论hTRTmRNA与bax蛋白质的表达均与PTC的浸润程度有关,hTRTmRNA与bax蛋白质的表达具有一致性;检测hTRTmRNA对PTC的诊断及其预后评估具有辅助价值。     

Notch-1在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的:探讨Notch-1在甲状腺乳头状癌中的表达特点及其生物学意义.方法:应用免疫荧光法和RT-PCR 法,分别检测人甲状腺乳头状癌组织标本中,Notch-1基因和蛋白的表达情况.结果:RT-PCR检测,甲状腺乳头状癌组织中Notch-lmRNA的表达明显低于正常甲状腺组织;免疫荧光法测定,Notch-1在正常甲状腺组...