白术、附子、肉桂合剂对老年小鼠脑细胞凋亡作用的实验研究

目的　研究白术、附子、肉桂合剂对老年小鼠脑细胞凋亡作用及相关基因表达的影响。方法　用TUNEL法观察老年小鼠神经细胞凋亡率 ,并用免疫组织化学法检测相关基因表达 ,比色法测定脑线粒体细胞色素C(cytC)。以白术、附子、肉桂合剂灌胃老年小鼠 30d ,观察合剂对老年小鼠脑细胞凋亡的影响。结果　老年小鼠有典型的凋亡特征 ,bcl 2表达下调 ,线粒体cytC明显降低。结论　白术、附子、肉桂合剂对老龄小鼠脑神经细胞凋亡有明显的抑制作用。     

老年小鼠脑线粒体细胞色素C与脑神经细胞凋亡作用的研究

目的　研究老龄小鼠线粒体细胞色素 C(cyt C)与脑神经细胞凋亡的关系。方法　用 TUNEL法观察老年小鼠神经细胞凋亡作用 ,并用比色法测定脑线粒体 cyt C。结果　老年小鼠脑线粒体 cyt C含量减少 ,脑细胞有典型的凋亡特征 ;与青年组比较细胞凋亡率有差异。结论　脑线粒体 cyt C与脑神经细胞凋亡有明显的相关性。     

白术、附子、肉桂合剂对老年小鼠脑线粒体Ca~(2+)和脑细胞凋亡的影响

目的从Ca2+与细胞凋亡角度探讨白术、附子、肉桂合剂对老年小鼠脑细胞保护作用。方法将昆明种小鼠分为青年组、对照组和合剂组,合剂组按11.6 g/kg灌服白术、附子、肉桂合剂(简称合剂),30 d后检测脑线粒体Ca2+,以及脑细胞凋亡率。结果与青年组比较,对照组脑线粒体Ca2+的含量减低(P0.01);与对照组比较,合剂组脑线粒体Ca2+的含量升高(P0.01),脑凋亡细胞减少(P0.05)。结论白术、附子、肉桂合剂能增加老年小鼠脑线粒体Ca2+含量,降低脑细胞凋亡数,改善脑细胞功能。     

冠心病患者线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅱ基因片段的重排

采用玻璃粉微量吸附法获取DNA直接作为PCR反应的模板,利用巢式PCR技术,检测冠心病患者血细胞内编码细胞色素C氧化酶亚基II的线粒体DNA扩增片段多态性,探讨线粒体DNA的片段缺失与动脉粥样硬化发生发展的关系。研究发现在全部冠心病患者编码细胞色素C氧化酶亚基II的基因中出现了大约100bp的缺失片段,其中1例冠心病患者中还出现了大约450bp核基因组和600bp的线粒体DNA扩增片段,而在正常对照老人中没有出现片状的重排现象,表明冠心病患者中存在该基因片段的缺失和模板量减少的现象,该基因可能参与了冠状动脉弱样硬化的形成与发展,编码呼吸链复合物一些亚基线粒体DNA片段的重排可能是动脉粥样硬化进行性发展的恶化因素。     

细胞色素C氧化酶与神经疾病研究现状

神经疾病的发病机制及其防治研究一直是生物医学领域的重要课题之一.近年来研究报道显示细胞色素C氧化酶(COX)与许多神经疾病密切相关[1,2].COX是线粒体呼吸链氧化磷酸化过程的限速酶,直接参与线粒体氧的利用和能量产生.COX是一种内源性代谢标志物,可以作为疾病发病机制及防治研究的理想靶标.但是,COX亚基的表达调控、COX的组装、COX的作用机制等方面尚未完全明了,涉及影响因素较多.本文就近年来COX及其与神经疾病的相关研究进行简要综述.     

湖北省庙河地区钉螺细胞色素C氧化酶1基因差异的研究

目的　比较湖北省庙河沿岸地区钉螺CO1基因序列的差异 ,探讨光壳螺与肋壳螺差异的原因。方法　在该地区选 7个点 (上游 4个点 ,下游 3个点 )采集钉螺 ,用CTAB法提取钉螺基因组DNA ,PCR方法扩增CO1基因 ,纯化后测序 ,运用ESEE软件排序并比较变异位点 ,观察各点钉螺的CO1基因单倍体型 ,运用PHYLIP软件计算遗传距离 ,绘制基因进化树。结果　获得CO1基因大小为 638bp ,上游和下游累积变异位点数分别为 2 9和 46,两者差异具有显著性 ;各采集点内钉螺按变异位点多少可分为两组 ;各采集点间存在有相同的基因单倍体型 ;上游和下游螺群之间的遗传距离为 0 0 2 2 1± 0 0 10 5 ;在FITCH绘制的基因进化树上 ,上游和下游地区钉螺交错分布在同一亚种不同的两个分支中。结论　在不同的生态环境下 ,下游地区钉螺CO1基因的变异强度比上游大 ;庙河各采集点螺群间存在一定的基因流动 ;庙河地区螺群属湖北钉螺湖北亚种 (O h hupensis) ,可能存在着两种不同进化速率的螺群。     

细胞色素C氧化酶与慢性阻塞性肺疾病

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是以气流的不完全可逆为特征,且呈进行性加重,多与吸烟有关,但其发病与加重的确切机制并未完全阐明.细胞色素C氧化酶(cytochrome C oxidase,COX)是线粒体内膜呼吸链的未端复合物,广泛的存在于真核细胞,在细胞能量代谢、氧化应激、衰老、神经元功能障碍和肿瘤发生等多种生理、病理过程中发挥了重要作用.近年来发现CoX在COPD的发生中也起着十分重要的作用.本文主要阐述COX在COPD中的研究进展.     

瑞香素对恶性疟原虫细胞色素C氧化酶及核糖核酸还原酶活性的影响

目的 体外测定瑞香素对恶性疟原虫细胞色素C氧化酶（COX）及核糖核酸还原酶（RNR）活性的影响。方法 Trager &; Jensen法体外培养恶性疟原虫FCC1/HN分离株，超声波破碎恶性疟原虫提取总蛋白，用紫外分光光度计检测瑞香素与瑞香素-Fe复合物在不同作用时间和不同作用浓度对恶性疟原虫COX活性的影响，以电子自旋共振法检测经瑞香素与瑞香素-Fe复合物作用1、2、3和4 h后，恶性疟原虫酪氨酸（Tyr）自由基的量以反映恶性疟原虫RNR的活性。 结果 体外同步培养的恶性疟原虫经瑞香素（100 μmol/L）作用2、4、8和12 h后，COX活性分别被抑制了0、6%、73%和80%；在瑞香素浓度为0.1、1、100和1 000 μmol/L，作用6 h后，COX活性分别被抑制3%、31%、53%和84%；而瑞香素-Fe复合物对COX的影响几乎消失。经瑞香素（100 μmol/L）作用1、2、3和4 h后RNR活性分别被抑制7%、51%、69%和75%；在瑞香素浓度为0.1、1、100和1 000 μmol/L，作用6 h后，RNR活性分别被抑制3%、31%、58%和93%；而瑞香素-Fe复合物作用6 h后RNR活性分别被抑制8%、6%、11%和9%。 结论 在体外瑞香素可显著降低恶性疟原虫的细胞色素C氧化酶（COX）及核糖核酸还原酶（RNR）活性。     

低剂量黄绿青霉素对大鼠心肌细胞色素C氧化酶与琥珀酸脱氢酶活性的影响

目的观察低剂量黄绿青霉素（CIT）对大鼠心肌细胞色素c氧化酶（COX）、琥珀酸脱氢酶（SDH）活性的影响。方法将刚断乳的Wistar雌性大鼠随机分为4组，3个实验组饲料加入乙醇提取的CIT粗毒素．按动物体质量给予CIT剂量分别为0．5、1．5、3．0mg／kg，对照组正常饲料加乙醇。饲养30d后用乙醚麻醉处死大鼠，取心室肌，酶组织化学染色法观察COX和SDH酶活性变化。结果1．5mg／kgCIT剂量组可见酶染颗粒减少，与对照组相比呈浅染；3．0mg／kgCIT剂量组酶染颗粒大量减少，且分布不均，局部可见点灶样缺失。图像定量分析表明，与对照组相比，1．5、3．0mg／kg剂量组的COX、SDH酶活性均明显降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论CIT剂量达1．5mg／kg时可致大鼠心肌组织COX、SDH酶活性显著减弱，且呈剂量效应关系。     

美洲钩虫及十二指肠钩虫细胞色素C氧化酶1基因测序

目的：比较美洲钩虫及十二指肠钩虫线粒体细胞色素Ｃ氧化酶１（ＣＯ１）基因序列,确定两种钩虫间ＣＯ１基因差异。方法：现场采集钩虫成虫样本,蛋白酶Ｋ消化抽提线粒体基因组ＤＮＡ,ＰＣＲ方法扩增ＣＯ１基因,ＤＮＡ测序及分析。结果：ＰＣＲ扩增获得约７００ｂｐ美洲钩虫及十二指肠钩虫ＣＯ１基因片段,其序列比较显示两种钩虫ＣＯ１基因同源性达８９．７％,存在特定的核苷酸差异。结论：ＣＯ１基因可作为鉴别两种人体钩虫虫种标记性基因。     

脑缺血耐受中线粒体及细胞色素C的作用

脑动脉自然闭塞或由于治疗疾病原因而人为闭塞可能会造成脑缺血损害,其发展取决于很多病理生理机制的内在联系,例如神经递质的释放、膜离子成分的崩溃、线粒体功能障碍、凋亡机制的触发、反应性氧的产生、炎性细胞的释放、血脑屏障的破坏、微循环灌注的障碍及很多其他因素〔1～4〕。这些反     

高盐摄入对盐敏感者血清细胞色素C氧化酶亚单位Ⅱ的影响

目的探讨高盐干预对盐敏感者血清细胞色素C氧化酶亚单位Ⅱ(cytochrome C oxidase subunitⅡ,COX-Ⅱ)水平的影响。方法选取陕西蓝田农村汉族44名成年人参与为期2周的慢性盐负荷试验,试验阶段包括基线期3天,低盐期(每天摄盐3 g,相当于钠51.3 mmol/d)和高盐期(每天摄盐18 g,相当于钠307.8mmol/d)各7天。每个阶段均测量血压,并收集血、尿标本。用ELISA法测定血清COX-Ⅱ浓度。结果盐敏感者中,低盐期血清COX-Ⅱ水平较基线期显著升高[(1.14±0.12)ng/ml比(1.45±0.13)ng/ml,P=0.019];而高盐饮食能够明显降低血清COX-Ⅱ的水平[(1.45±0.13)ng/ml比(1.02±0.13)ng/ml,P=0.003],而在盐不敏感者中未发现此变化。此外,两组血清COX-Ⅱ水平变化与收缩压呈显著负相关。结论膳食盐.的摄人能够影响盐敏感者血清COX-Ⅱ浓度,提示COX-Ⅱ可能参与血压盐敏感性的形成。     

异丙基肾上腺素损伤的大鼠心肌线粒体中细胞色素氧化酶的…

大鼠在异丙基肾上腺素损伤后（每千克大鼠体重异丙基肾上腺素用量为０．１ｍｇ，每２４ｈ腹腔注射一次，连续８次），其心肌线粒体中细胞色素氧化酶活力下降６１．２％，当损伤的心肌线粒体中加入心磷脂及卵磷脂后，细胞色素氧化酶的活力随添加磷脂含量的增加而提高，当磷脂浓度达到一定程度后，酶活力可恢复到正常大鼠的水平。     

幽门螺杆菌对胃癌细胞线粒体DNA编码的细胞色素氧化酶基因表达的影响

既往研究表明胃黏膜细胞核基因组有线粒体DNA（mtDNA）片段整合,且这种整合与幽门螺杆菌（H. pylori）感染有关,并参与胃癌的发生.mtDNA片段与核基因整合后,是否会引起所编码基因表达的改变,这种改变是否与H.pylori感染有关尚不明确.目的：观察H.pylori作用于胃癌细胞后线粒体编码基因细胞色素氧化酶（COX）Ⅰ、COXⅡ和COXⅢmRNA表达的变化,探讨H.ptkiri致胃癌的分子机制.方法：将6μl/ml H.pylori培养滤液与胃癌细胞分别作用4 h、8 h和12 h,收集细胞,提取RNA,应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测各时间点COXⅠ、COXⅡ和COXⅢmRNA的表达.结果：H.pylori作用4 h后,线粒体COX Ⅰ、COXⅡ和COXⅢmRNA的表达有所降低,8 h时下降更明显,12 h时段下降速度减缓;除COXⅡ4 h时与对照组无差异外,其余各时间点的表达量均显著低于对照组（P＜0.05）.结论：H.pylori可引起胃癌细胞线粒体编码基因COX Ⅰ、COXⅡ和COXⅢmRNA表达下调,影响线粒体的功能.     

黄芪多糖对衰老模型大鼠肝细胞色素C氧化酶Ⅰ、Ⅳ表达的影响

目的 研究黄芪多糖对衰老模型大鼠肝细胞色素C氧化酶Ⅰ(COⅠ)、COⅣ表达的影响及其作用机制.方法 测定各组大鼠肝线粒体锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)、CO活性及丙二醛(MDA)含量,采用RT-PCR法检测COⅠ、COⅣ、核呼吸因子1(NRF-1)和线粒体转录因子(mtTFA)mRNA的表达水平.结果 黄芪多糖可提高模型大鼠肝Mn-SOD、CO活性(P<0.01,P<0.05),降低MDA含量(P<0.01,P<0.05)和COⅠ、COⅣ、mtTFA 和NRF-1 mRNA的表达(P<0.01).NRF-1和COⅣ表达,mtTFA和COⅠ表达,NRF-1和mtTFA表达,分别呈显著正相关.结论 黄芪多糖可下调mtTFA 和 NRF-1 的表达,且对COⅠ、COⅣmRNA表达的影响与mtTFA和NRF-1有密切相关.     

乙型肝炎病毒X蛋白与细胞色素C氧化酶Ⅲ的特异性结合

目的 探讨HBV X蛋白与细胞色素c氧化酶Ⅲ(COXⅢ)之间的结合作用.方法 采用交合实验验证HBV X蛋白和COXⅢ在酵母细胞内的结合作用,利用离体结合实验证实两者在体外的结合作用,采用免疫共沉淀实验证实两者在哺乳动物细胞中的结合作用.结果 携带COXⅢ基因的酵母与携带X基因的酵母交合后发生反应,β-半乳糖苷酶(LacZ)活性检测菌落呈现蓝色,离体结合实验Western印迹中出现特异性结合活性反应条带,提示X蛋白和COXⅢ在体外存在直接相互作用,免疫共沉淀实验在相对分子质量为17 000处出现蛋白条带,提示在哺乳动物细胞水平仍能检测到X蛋白和COXⅢ的特异结合.结论 COXⅢ与X蛋白在原核细胞和哺乳动物细胞中均存在特异性结合,HBV可能通过此反应干扰线粒体呼吸链功能及能量代谢过程.     

异丙基肾上腺素损伤的大鼠心肌线粒体中细胞色素氧化酶的复活研究

大鼠在异丙基肾上腺素损伤后(每千克大鼠体重异丙基肾上腺素用量为0.1mg,每24h腹腔注射一次,连续8次),其心肌线粒体中细胞色素氧化酶活力下降61.2％。当损伤的心肌线粒体中加入心磷脂及卵磷脂后,细胞色素氧化酶的活力随添加磷脂含量的增加而提高,当磷脂浓度达到一定程度后,酶活力可恢复到正常大鼠的水平。     

细胞色素氧化酶P450与中毒性肝损伤

细胞色素氧化酶P450（cytochrome P450，CYP450）是一组结构和功能相关的超家族基因编码的同工酶，主要存在于生物体的内质网内，是混合功能氧化酶中最重要的一种酶系。CYP450主要参与多种内源和外源性化合物氧化、还原代谢，在肝脏的解毒功能中起关键作用，但此一过程亦可生成有毒的活性物质（如自由基、亲电子基等），导致肝损伤。近年来随着研究的不断深入，CYP450这一致肝损伤特性日益受到关注，对其功能活性的广泛研究将有利于探明中毒性肝损伤的发病机理，并为临床干预提供重要线索。本文拟对CYP450与中毒性肝损伤的关系的最新研究进展作一综述，以便于今后的临床和科研工作。     

细胞色素氧化酶P4502 C9以及维生素K环氧化物还原酶复合体1基因多态性对华法林抗凝疗效的影响

目的 研究年龄、体重、身高、体表面积、细胞色素氧化酶P450(CYP2C9)和维生素K环氧化物还原酶复合体1(VKORC1)基因型与华法林剂量的关系.方法 收集临床使用华法林的患者共191例,记录患者的年龄、性别、身高、体重等.利用聚合酶链反应(PCR)和限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)技术检测CYP2C9以及VKORC1基因型.结果 VKORC1(-1639G＞A)基因型检测有159例患者为突变纯合子AA型,31例患者为杂合子GA型,1例患者为纯合子GG型.CYP2C9基因型检测有176例患者为*1/*1型,15例患者为杂合子*1/*3型.VKORC1(-1639G＞A)GA+GG组,华法林平均剂量明显高于AA组[(3.36±0.97)mg/d比(1.75±0.56)mg/d,P＜0.01].CYP2C9*1/*1型患者华法林平均剂量高于杂合子*1/*3型患者[(2.06±0.83)mg/d比(1.55±1.32)mg/d,P＜0.05].多元线形回归分析提示年龄、体重以及VKORC1基因型分别解释了约9.3％、7.4％、51.9％的个体间剂量差异,包括年龄、体重、VKORC1和CYP2C9基因型的多变量模型能解释个体间剂量差异约为64.1％.结论 年龄、体重、VKORC1和CYP2C9基因多态性明显影响了华法林剂量.用年龄、体重、VKORC1和CYP2C9基因型的多变量模型给药方法希望提高华法林使用的安全性.     

日本血吸虫 NADH脱氢酶 1和细胞色素 C氧化酶 1基因部分序列

目的 :测定和比较日本血吸虫浙江株和安徽株 NADH脱氢酶 1( NADH1)和细胞色素 C氧化酶 1( Cytc1)基因部分序列。方法:用 PCR方法从特定的引物扩增出 NADH1和 Cytc1DNA基因 ,然后进行测序。结果 :获得两株日本血吸虫成虫 NADH1和 Cytc1基因及其序列。结论 :两株日本血吸虫成虫 NADH1基因及其部分序列除第 382位核苷酸不同 ( C/T)外 ,其余的均相同。两株日本血吸虫成虫Cytc1基因及其部分序列完全相同。