生物可降解聚乳酸材料封端剂残留量的研究

建立了一种气相色谱法测定聚乳酸原料中封端剂十二醇残留的分析方法。着重研究了测定方法及样品的预处理方法。实验结果显示,采用DB-624(30m×0.530mm×3.0μm)毛细管柱,氢火焰离子检测器,进样口温度250℃,检测器温度260℃,程序升温(起始温度60℃,维持3 min,以30℃/min的速率升温至250℃,维持10min),十二醇的回归方程为A=2717.3C-11.646(γ=0.9998),线性范围为0.01~1.01mg/m L,平均回收率为99.21%(n=9),相对标准偏差1.55%,检测限为0.0005 mg/m L,定量限为0.001mg/m L。本实验所建立的方法能达到定量检测的目的,将该方法应用于聚乳酸原料中封端剂十二醇残留量的测定,结果可靠。     

高效液相色谱法测定聚乳酸中乳酸单体残留量

目的通过高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定聚乳酸材料中乳酸单体的残留量,完善此类材料的质量评价方法。方法用三氯甲烷溶解聚乳酸材料样品后,加入等体积磷酸二氢钾水溶液(20 mmol/L,pH=2.87)涡旋振荡,静置分层后取上清液,采用C18 Synergi4u Hydro-RP 80A色谱柱,进样20μL,以流速0.6 m L/min,磷酸二氢钾水溶液为流动相,柱温30℃,紫外检测波长210 nm,外标法定量并进行方法学研究,包括液相色谱系统适应性、线性范围、检出限、定量限、回收率。结果本方法中理论塔板数为10660,拖尾因子为1.32,分离度为3.81,重复性相对标准偏差为0.54%(n=5),乳酸在浓度1.05~105μg/m L范围内与峰面积保持良好的线性关系(r=0.999979),检出限为0.42μg/m L,定量限为1.05μg/m L,萃取平均回收率为94.76%(n=6),其相对标准偏差为3.04%。聚乳酸样品中乳酸单体平均残留量为144.17μg/g。结论高效液相色谱法测定聚乳酸中乳酸单体残留量具有良好的线性范围,准确度高,重复性好,萃取回收率较高且操作简单,可用于聚乳酸材料中乳酸单体残留量测定。     

基于高效液相色谱法的聚乳酸-羟基乙酸共聚物体外降解产物的测定

目的建立准确、不受基质干扰的测定聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA]降解液中降解产物乙醇酸和乳酸的分析方法并进行方法验证,为PLGA类产品的降解液的质量分析提供重要的技术参考。方法通过优化色谱柱、色谱条件和不同p H值的乳酸和乙醇酸标准溶液的色谱峰面积的比较等方法,确定色谱条件和样品降解液预处理方法,用Waters 1525高效液相色谱仪进行检测,紫外检测器检测波长210 nm,外标法定量。结果亲水性C18柱,20 mmol/L的KH2PO4水溶液为流动相(p H=2.8)和0.6 m L/min的流速等色谱条件可使降解液中的乙醇酸和乳酸得到良好的分离;同时,样品降解液的p H值宜调节至2.8~3.5范围内以对降解液中的乙醇酸和乳酸进行准确定量。此外,方法学验证结果显示,降解液中乙醇酸的线性范围为2.500~250.0μg/m L(r=0.9999),定量限为0.48μg/m L,加标回收率为99.4%~102.6%;降解液中乳酸的线性范围为2.642~264.2μg/m L(r=0.9999),定量限为1.0μg/m L,加标回收率为97.9%~103.2%。结论该方法简便、准确,实验成本较低,且不受磷酸盐缓冲液p H值的影响,稳定性好,可用于聚乳酸-羟基乙酸共聚物材料体外降解的降解产物的含量分析。     

生物可降解聚对二氧环己酮材料中单体残留的测定

建立聚二氧环己酮原料中单体二氧环己酮残留量的气相色谱测试方法。采用DB-624毛细管色谱柱(30.0 m×535μm×3.00μm),程序升温(146℃保持5 min,30℃/min升温至200℃,保持2 min)。载气为氮气,氢火焰离子化检测器(FID),进样口温度240℃,检测器温度250℃,分流比5:1,进样量2μL。结果显示单体在0.0239~0.1794 mg/m L范围内线性关系良好,平均回收率为100.3%,RSD为1.39,检测限浓度为0.2μg/m L,定量限浓度为0.5μg/m L。该方法简便快捷、准确度和灵敏度高。     

全降解冠脉雷帕霉素洗脱支架系统有机溶剂残留分析

目的采用顶空进样-气相色谱-质谱联用法(headspace sampling-gas chromatography-mass spectrometry,HS-GC-MS)测试全降解冠脉雷帕霉素洗脱支架系统有机溶剂残留的情况,最终建立顶空进样-气相色谱-氢火焰离子化检测器(headspace sampling-gas chromatography-flame ionization detector,HS-GC-FID)定量测定丙酮残留量的检测方法。方法采用HS-GC-MS,全扫描模式对全降解支架系统中的含药支架、球囊、输送系统、支架原料及裸支架5种被测对象进行残留有机溶剂的定性分析,并采用HS-GC-FID对其中残留较多的丙酮进行了定量分析。结果 5种被测对象中均有多种有机溶剂残留,主要为芳香烃类(甲苯)、酮类(丙酮)、卤化烃类(二氯甲烷、三氯甲烷)、醇类(乙醇等)、酯类(乙酸乙酯等)。丙酮在9.0~44.8μg/m L浓度范围内线性良好,相关系数为0.9995,平均加样回收率为100.3%(n=6,RSD=1.2%),精密度为2.0%(n=5)。结论新产品注册检测含药支架有机溶剂残留的同时,建议考察支架原料、裸支架的有机溶剂残留。建立的定量检测方法简便、快速、准确,可用于全降解支架系统中残留有机溶剂的检测与质量控制。     

高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆盐酸伪麻黄碱浓度

目的 建立一种高效液相色谱-质谱联用技术（LC-MS/MS）测定人血浆盐酸伪麻黄碱浓度的方法。方法 血浆样品经液液萃取后,以甲醇∶水∶甲酸（60∶40∶1,V/V/V）为流动相,流速0.35 ml/min,采用Cap cell pack C18色谱柱分离,150 mm×2.1 mm, 5 μm（USA）;柱温20℃,选择离子喷雾离子化源串联质谱,通过正离子方式检测;选择反应监测（MRM）方式转化m/z=166.3/148.2（盐酸伪麻黄碱）和m/z= 152.2/134.15（内标苯丙醇胺）进行定量分析,用内标法测定含量。结果 伪麻黄碱浓度分别在5.0~400.0 ng/ml的范围内线性良好,R=0.9962,最低检测限为1.0 g/ml。结论 本方法操作简便、快速,结果准确,可用于该药物的含量测定,同时也可为临床药动学研究提供一定的参考。     

LC-MS/MS法测定家兔血浆中奥昔布宁浓度及其在生物等效性评价中的应用

目的建立家兔血浆中奥昔布宁的液相色谱-串联质谱联用(HPLC-MS/MS)定量方法,用于评价自制盐酸奥昔布宁凝胶和国外上市品Gelnique的生物等效性。方法以盐酸苯海拉明为内标,血浆样品经0.5 mol/L NaOH碱化后采用叔丁基甲醚液-液萃取。用Kinetex C₁₈色谱柱分离,流动相采用水相(1‰甲酸-10 mmol/L乙酸铵缓冲液)-乙腈(50∶50,v/v)进行洗脱;电喷雾离子源正离子检测,离子对为m/z 358→142(奥昔布宁),m/z 256→167(苯海拉明)。用以上方法测定家兔单次经皮给予自制盐酸奥昔布宁凝胶和Gelnique后血浆中奥昔布宁的浓度,评价两者的生物等效性。结果奥昔布宁在1~200μg/L范围内线性关系良好,低中高质控浓度的批间和批内精密度(RSD)介于1.67%~9.79%,准确度在92.9%~103%。自制盐酸奥昔布宁凝胶和Gelnique经评价生物等效。结论本方法简便,专属性强,灵敏度好且准确性高,适用于透皮制剂在家兔体内的药动学研究和生物等效性评价。     

羧甲基交联淀粉止血颗粒中环氧氯丙烷残留量的测定

本研究建立了顶空气相色谱法测定羧甲基交联淀粉止血颗粒中环氧氯丙烷残留量的方法。使用Agilent DB-624(30 m×530μm×3.0μm)毛细管色谱柱,柱温为程序升温(50℃,保持2 min;50℃/min升温至180℃,保持5 min),进样口温度为200℃,检测器温度为250℃,载气为N_(2,)流速为3 mL/min,分流比为3∶1。精密度相对标准偏差为1.22%;环氧氯丙烷的浓度为0.84～6.72μg/mL,其峰面积与浓度线性关系良好,相关系数为0.9997;检测限为0.336μg/mL,定量限为0.84μg/mL;平均回收率为101.7%(n=9)。该方法重现性好,灵敏度高,简单准确。     

人胰岛素及其类似物中残留溶剂测定方法研究

目的 建立人胰岛素及其类似物中有机溶剂残留测定方法,用同一方法测定目前在人胰岛素及类似物生产工艺中普遍存在的甲醇、乙醇、异丙醇、乙腈和正丙醇5种残留溶剂。方法 采用顶空气相色谱法,使用DB-624毛细管柱(30 m×0.53 mm,3μm),载气为氮气,流速为2.5 ml/min,检测器为氢火焰离子化检测器,检测器温度为250℃,进样口温度为200℃,分流比为5:1,顶空平衡温度为85℃,平衡时间为20min,柱温程序为：起始温度40℃,保持10 min,随后以5℃/min升至80℃,随后以20℃/min升至200℃。结果 甲醇、乙醇、异丙醇、乙腈及正丙醇峰之间分离良好;专属性、耐用性、精密度良好;甲醇、乙醇、异丙醇、乙腈和正丙醇分别在1.5～60.8、1.1～98.9、0.8～100.4、0.7～10.4、0.8～100.1μg/ml浓度范围内呈良好的线性关系(r²均大于0.99);甲醇、乙醇、异丙醇、乙腈和正丙醇检出限分别为0.6、0.3、0.2、0.2、0.2μg/ml,定量限分别为1.5、1.1、0.8、0.7、0.8μg/ml;各溶剂在人胰岛素及其类似物...     

离子色谱法测定液体创可贴中的氮含量

目的建立离子色谱法检测液体创可贴中氮含量的方法,对液体创可贴中氮含量进行准确定量来衡量液体创可贴中硝化棉的投料量,进而间接衡量液体创可贴的成膜性、硬度、附着力等性能。方法用DIONX ICS-1100离子色谱仪进行检测,色谱柱AS9-HC柱(4 mm×250 mm),淋洗液为5.0 mmol/L对羟基苯甲酸和5.3 mmol/L N,N-二乙基乙醇胺混合液,流速1 mL/min,电导检测器,外标法定量,用不同浓度梯度的亚硝酸根离子对照品和不同浓度梯度的硝酸根离子对照品分别绘制工作曲线,分别分析不同浓度的亚硝酸根离子和硝酸根离子的出峰时间和峰面积,选取A医疗器械厂家的液体创可贴产品为待测样品,最后将待测样品消解后与对照品平行的进行样品处理并检测。结果亚硝酸根离子在浓度2.9998~6.9995μg/mL范围内与峰面积保持良好的线性关系(r=0.9990),检出限为0.14999 g/mL(S/N=3),精密度相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为1􀆰62%(n=5),平均加标回收率为99.9%(n=9);硝酸根离子在浓度1.7015~3.9701μg/mL范围内与峰面积保持良好的线性关系(r=0.9999),检出限为0.08507μg/mL(S/N=3),精密度RSD为1.48%(n=5),平均加标回收率为100.9%(n=9)。最后对测试样本测试的结果进行计算,得出测试样本中氮的平均含量为11.24 mg/g。结论该方法具备良好的线性范围,准确度高、重复性好,样品经过前处理后,不受样品中其他组分的干扰,可用于液体创可贴中氮含量的测定。     

一次性输液器中ATBC溶出量的测定方法

目的建立测定一次性输液器在使用过程中其增塑剂乙酰柠檬酸三丁酯(acetyl tributyl citrate,ATBC)溶出量的气相色谱(gas chromatography,GC)方法,并对其临床使用过程中的安全性进行研究和验证。方法分别利用非脂溶性和脂溶性溶液模拟临床输液环境,探讨一次性输液器中ATBC溶出量测定方法的准确性和有效性。非脂溶性溶液,色谱柱:岛津Rtx-624毛细管柱(30 m×0.53 mm,3μm);脂溶性溶液,色谱柱:DB-624毛细管柱(30 m×0.45 mm,3μm);其他条件二者均相同,氢气:40m L/min;空气:400 m L/min;氮气:15 m L/min作为流动相;内标物:十六烷;柱温:240℃;进样量:1μL。结果非脂溶性溶液中,ATBC在10~200μg/m L内呈良好线性关系,相关系数为0.9999,平均回收率为97.44%(RSD2.4%);脂溶性溶液中,ATBC在10~200μg/m L内呈良好线性关系,相关系数为0.9999,平均回收率为92.02%(RSD7.9%)。结论利用气相色谱法测定ATBC溶出量,精确度高、回收率好。该方法可用于ATBC含量分析,为以ATBC作为塑化剂的一次性输液器质量控制及进一步研究提供参考。     

HPLC法同时测定人血浆中帕罗西汀和喹硫平浓度

目的 建立同时测定人血浆中帕罗西汀和喹硫平浓度的高效液相色谱( HPLC)法.方法 采用HPLC法进行测定:Inertsil ODS-C18柱(4.6×150mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈-磷酸二氢钠(0.05 mol/L磷酸二氢钠)(39∶61),流速为1.0mL/m in,检测波长为210nm,柱温为40℃,以乙酸乙酯-二氯甲烷(体积比75∶25)为萃取剂.结果 帕罗西汀在10～640μ g/L、喹硫平在20 ～ 1200μg/L范围内峰面积与浓度呈良好线性关系,检测限分别为5μg/L,8μg/L.结论 该方法简单、快速、灵敏、准确,可用于临床帕罗西汀与喹硫平的血药浓度监测和药动学研究.     

烯酯酰辅酶A水解酶1基因在小鼠肝癌细胞株中的表达及其与增殖和迁移能力的关系

目的 研究烯酯酰辅酶A水解酶1( ECH1)在小鼠肝癌高、低淋巴转移Hca-F/Hca-P细胞株中的表达及ECH1基因表达下调后对Hca-F细胞增殖和迁移能力的影响.方法 采用免疫荧光方法检测ECH1在小鼠肝癌细胞株中的表达.构建pGPU6/GFP/Neo-shRNA-ECH1表达载体,稳定转染至高淋巴转移Hca-F细胞中干扰ECH1基因的表达,通过CCK8法检测肿瘤细胞的增殖能力,Transwell小室检测肿瘤细胞的迁移能力,并应用流式细胞仪检测肿瘤细胞的细胞周期情况.结果 ECH1在小鼠肝癌细胞株中主要表达于细胞质,且ECH1在Hca-F细胞的表达强于其在Hca-P细胞的表达.ECH1表达下调后,Hca-F细胞的增殖能力明显下降.Transwell小室检测穿膜细胞数pGPU6/GFP/Neo-shRNA-ECH1转染Hca-F组(27.07±17.49)较阴性对照组(72.38±18.83)和Hca-F组(59.06±30.33)明显减少,细胞周期S期pGPU6/GFP/Neo-shRNA-ECH1转染Hca-F组(86.1％)较阴性对照组(75.8％)和Hca-F组(66.2％)停留细胞数明显增多,G1期pGPU6/GFP/Neo-shRNA-ECH1转染Hca-F组(9.4％)较阴性对照组(24.2％)和Hca-F组(30.3％)停留细胞数明显减少.结论 ECH1可能在肿瘤淋巴转移中发挥作用,抑制ECH1的表达可有效降低体外高淋巴转移肿瘤细胞的增殖和迁移能力.     

Liquid chromatography-mass spectrometry assay of a thiadiazole derivative in mice: application to pharmacokinetic studies

Modern atmospheric pressure ionization (API) ion-trap mass spectrometry in connection with fast chromatographic separations using a short narrow-bore C8 column was developed to determine 5-phenyl-3-thioureido-1,2,4-thiadiazole (301029), a novel virus inhibitor in serum. Both 301029 and an internal standard (I.S.) were separated from serum samples by acetonitrile deproteinization and extraction without time-consuming reconstitution. The chromatographic separation was achieved on a C8 reversed-phase narrow-bore column using acetonitrile-water-acetic acid (90:10:0.01, v/v/v) as a mobile phase. The mass spectrometric analysis was performed by atmospheric pressure chemical ionization (APCI) mode with positive ion detection. Single ion monitoring (SIM) scan mode of m/z 237 and 158 was used to quantitatively determine 301029 and I.S., respectively. The low limit of quantitation was 25 ng/ml. The assay exhibited a linear range of 25-2500 ng/ml. Recovery from serum proved to be 100-113%. The precision (C.V.) and accuracy (RE) of the method were 2-12% and 94-112%, respectively. The present method was applied to determine the pharmacokinetic parameters of 301029 following oral administration of the agent to mice at 5 g/kg. The results revealed that the elimination half-life of 301029 was 413 min and the area under serum concentration-time curve was 354 microg/ml/min.     

血管腔内介入治疗下肢动脉硬化闭塞症40例

目的：探讨下肢动脉硬化闭塞症腔内治疗的临床经验。方法：采用血管腔内介入方法治疗下肢动脉硬化性闭塞症（ASO）患者40例（44条肢体）,包括髂动脉病变18例,其中单纯球囊扩张术（PTA）6例,内置支架术（PTA＋stenting）12例;股浅动脉病变13例,其中PTA5例,PTA＋stenting8例;腘动脉病变2例,行PTA治疗;膝下动脉病变7例,单纯deep球囊扩张,不放置支架。结果：本组无手术死亡。髂动脉18例手术全部获得成功;股浅动脉13例,11例获得成功,1例致血栓形成取栓治疗成功,1例介入失败转为人工血管转流手术;腘动脉2例获得成功;膝下动脉7例中5例获得成功。结论：血管腔内介入治疗下肢ASO,操作简单,短期效果良好,值得临床推广应用;     

Acute in vivo testing of a respiratory assist catheter: implants in calves versus sheep

A respiratory catheter that is inserted through a peripheral vein and placed within the vena cava is being developed for CO2 removal in patients with acute exacerbations of chronic obstructive pulmonary disease (COPD). The catheter uses a rapidly pulsating balloon to enhance gas exchange. In this study, the CO2 removal performance of our catheter was assessed in acute sheep implants and compared with calf implants, primarily because sheep have cardiac outputs (CO) that are more comparable with human CO and lower than calves. Respiratory catheters (25 mL balloon, 0.17 m2) were inserted acutely in sheep (n = 2) and calves (n = 6) through the jugular vein and placed within the vena cava in two positions: spanning the right atrium (RA) and within the inferior vena cava (IVC). The postinsertion CO in the sheep ranged from 4.1 to 7.2 L/min compared with 6.2 to 15.5 L/min for the calves. The maximum CO2 removal rates (vCO2) were 297 ml/min/m2 (calf) and 282 ml/min/m2 (sheep) in the RA position and 240 ml/min/m2 (calf) and 248 ml/min/m2 (sheep) in the IVC position. The respective removal rates between animal models were not statistically different (p values > 0 .05 for all data sets). The dependence of the vCO2 on balloon pulsation was also not statistically different between the animal models.     

PVC/PE液体复合硬片中HDI单体残留量考察

目的:检测样品中使用的粘合剂中HDI单体残留量。方法:样品提取后,与1,2-吡啶哌嗪溶液衍生化后采用反相高效液相色谱法测定。色谱柱:Waers Xterra(C184.6×250 mm5μm;流动相:乙腈-水-冰醋酸(58∶42∶0.15)用三乙胺调节pH至4.0;流速:0.9 ml.min-1;柱温:35℃;检测波长:310nm。结果:线性范围0~0.8208μg.ml-1(r=0.9998,n=7);精密度:0.4%;阴性回收率平均值:99.88%。结论:本方法专属性强、灵敏度高、准确、可靠、简便,可用于HDI残留量检测。     

The development of multifunction balloon dilatation catheter

Ｉｎ１９８４,ＪａｐａｎｅｓｅｐｈｙｓｉｃｉａｎＫａｎｊｉＩｎｏｕｅｆｉｒｓｔｒｅｐｏｒｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｐｒｏｃｅｄｕｒｅｏｆｔｒａｎｓｖｅｎｏｕｓｍｉｔｒａｌｃｏｍｍｉｓｓｕｒｏｔｏｍｙ（ＴＭＣ）ｗａｓｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｗｉｔｈｔｈｅｎｅｗｔｙｐｅｏｆｂａｌｌｏｏｎｃａｔｈｅｔｅｒｄｅｓｉｇｎｅｄｂｙｈｉｍ〔１〕．ＴＭＣｗａｓｓｏｓｉｍｐｌｅｉｎｏｐｅｒａｔｉｏｎ,ｓｏｇｏｏｄｉｎｅｆｆｅｃｔｓａｎｄｗｉｔｈｏｕｔｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｔｈａｔｉｔｗａｓｒａｐｉｄｌｙａｐｐｌｉｅｄ…     

Liquid chromatographic-mass spectrometric determination of celecoxib in plasma using single-ion monitoring and its use in clinical pharmacokinetics

Celecoxib is a cyclooxygenase-2 specific inhibitor, that has been recently and intensively prescribed as an anti-inflammatory drug in rheumatic osteoarthritis. A robust, highly reliable and reproducible liquid chromatographic-mass spectrometric assay is developed for the determination of celecoxib in human plasma using sulindac as an internal standard. The run cycle-time is <4 min. The assay method involved extraction of the analytes from plasma samples at pH 5 with ethyl acetate and evaporation of the organic layer. The reconstituted solution of the residue was injected onto a Shim Pack GLC-CN, C18 column and chromatographed with a mobile phase comprised of acetonitrile-1% acetic acid solution (4:1) at a flow-rate of 1 ml/min. The mass spectrometer (LCQ Finnigan Mat) was programmed in the positive single-ion monitoring mode to permit the detection and quantitation of the molecular ions of celecoxib and sulindac at m/z 382 and 357, respectively. The peak area ratio of celecoxib/sulindac and concentration are linear (r2>0.994) over the concentration range 50-1000 ng/ml with a lowest detection limit of 20 ng/ml of celecoxib. Within- and between-day precision are within 1.58-4.0% relative standard deviation and the accuracy is 99.4-107.3% deviation of the nominal concentrations. The relative recoveries of celecoxib from human plasma ranged from 102.4 to 103.3% indicating the suitability of the method for the extraction of celecoxib and I.S. from plasma samples. The validated LC-MS method has been utilized to establish various pharmacokinetic parameters of celecoxib following a single oral dose administration of celecoxib capsules in two selected volunteers.