Notch1/Hes1信号调控C/EBPα表达对AECII细胞增殖与分化的影响

目的:探讨Notch1/Hes1信号通路能否通过调控CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)的表达从而影响肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)的增殖与分化功能。方法:体外培养人AECⅡ,将细胞随机分为对照组、激活剂组(加入Notch通路激活剂Jagged1蛋白500μg/L)和抑制剂组(加入Notch通路抑制剂DAPT 10μmol/L),于干预后24 h收获各组细胞。采用RT-qPCR和Western blot法分别检测Notch1、Hes1及C/EBPα的mRNA与蛋白表达水平;CCK-8法检测细胞活力;细胞计数检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期及分化。结果:与对照组相比,激活剂组Notch1、Hes1和C/EBPα的mRNA和蛋白表达显著增加(P0.05),促进AECⅡ从S期进入G_2/M期,增殖增加而分化减少(P0.05);抑制剂组Notch1、Hes1和C/EBPαmRNA和蛋白表达水平明显降低(P0.05),AECⅡ被阻滞于G_0/G_1期,增殖减少而分化增加(P0.05)。结论:Notch1/Hes1信号可调控C/EBPα表达并能影响AECⅡ增殖与分化。     

Notch1/Hes1信号通路在调控低分化胃腺癌细胞钙离子和侵袭能力中的作用

目的 探讨Notch1/Hes1信号通路对胃癌细胞钙离子水平的影响及其与侵袭的关系.方法 采用免疫组化法检测32例原发性低分化胃腺癌组织及32例癌旁正常组织中Notch1、Hes1、Calpain-1和E-cadherin蛋白的表达.将MGC-803细胞分为对照组、Lipofectamine 2000组、Notch1 ...     

Notch1及其下游靶分子Hes1在肾细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的检测Notch1及其下游靶分子Hes1在肾细胞癌组织中的表达情况,并分析Notch1的表达与临床病理特征的相关性。方法利用免疫组织化学染色,Western blot法和实时定量PCR(qRT-PCR)分别检测肾细胞癌组织及对应的癌旁正常肾组织中Notch1的表达,用qRT-PCR检测Notch下游靶分子Hes1的表达,并用SPSS17.0软件分析Notch1的表达水平与临床病理特征的相关性。结果免疫组织化学染色,Western blot法和qRT-PCR结果均显示Notch1在肾细胞癌组织中的表达低于正常肾组织,qRT-PCR结果显示Hes1在肾细胞癌组织中的表达低于正常肾组织,且Notch1的表达与肿瘤Fuhrman分级和AJCC分期呈负相关。结论 Notch1及其下游靶分子Hes1在肾细胞癌的发生发展过程中可能具有肿瘤抑制基因的作用。     

白藜芦醇抑制高糖诱导的H9C2心肌细胞系肥大

目的观察白藜芦醇对高糖诱导H9C2心肌细胞系氧化应激和肥大的作用及其可能机制。方法将H9C2心肌细胞分为正常糖浓度组(NG组)、高糖组(HG组)、白芦藜醇组(Res组)和白藜芦醇+DAPT组(Res+DAPT组)。用鬼笔环肽检测细胞表面积;DCFH-DA法检测细胞内活性氧簇(ROS);比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量;实时荧光定量PCR及Western blot检测Notch1、Hes1、ANP、BNP mRNA和蛋白表达。结果与NG组相比,高糖可诱导心肌细胞肥大(P0.01),ROS和MDA含量增加(P0.01),SOD活性下降(P0.01),伴随ANP和BNP基因及蛋白表达增加(P0.05),Notch1和Hes1表达下降(P0.05),白藜芦醇处理后可逆转心肌细胞肥大(P0.01),减轻ROS和MDA氧化损伤(P0.01),增加SOD活性(P0.01),抑制ANP和BNP表达(P0.05),增加Notch1及Hes1表达(P0.05)。结论白藜芦醇可能通过改善氧化应激,活化Notch1/Hes1信号通路抑制高糖引起的H9C2心肌细胞肥大。     

Notch信号通路蛋白在糖尿病肾病患者肾组织中的表达及意义

目的观察糖尿病肾病肾组织中Notch信号通路的表达情况,探讨其与糖尿病肾病肾脏损害的关系。方法收集10例手术切除的远离肿瘤的瘤旁肾组织及34例糖尿病肾病肾穿刺组织,免疫组化检测Jagged1、Notch1、NICD1和Hes1蛋白表达情况。结果 Jagged1、Notch1、NICD1和Hes1蛋白在糖尿病肾病肾组织中高表达,并与24小时尿蛋白成正相关,而与肾小球滤过率成负相关。结论 Notch信号通路在糖尿病肾病肾组织中激活,与糖尿病肾病肾脏损伤有关。     

Notch信号通路对脑缺血大鼠神经干细胞移植后神经再生的影响

目的 探讨抑制Notch信号通路促进脑缺血大鼠神经干细胞（NSCs）移植后神经再生的机制。方法 采用大脑中动脉阻塞MCAO）方法构建局灶性脑缺血模型,体外培养NSCs,移植入纹状体缺血区。将40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、移植组（移植神经干细胞）、氮-［氮-(3,5-二氟苯乙酰)-L-丙氨酰］-S-苯基甘氨酸丁酯］（DAPT）+移植组。采用HE染色观察各组大鼠神经元损伤程度,利用免疫组织化学、Western blotting检测各组大鼠脑组织中Notch1、Hes1及Hes5的表达情况。结果 与假手术组相比,模型组神经元损伤严重,出现核固缩和核溶解,Notch1、Hes1及Hes5阳性细胞表达明显增多,Notch1、Hes1及Hes5蛋白表达显著上调（P＜0.05）。与模型组相比,移植组和DAPT+移植组神经元损伤均不同程度缓解,Notch1、Hes1及Hes5阳性细胞均有部分表达,各项蛋白表达均有所降低（P＜0.05）;DAPT+移植组神经元损伤明显恢复,较移植组各项蛋白阳性细胞和蛋白表达进一步降低(P＜0.05)。结论 抑制Notch信号通路可促进脑缺血大鼠神经干细胞移植后的神经再生,其机制主要与下调Notch1、Hes1及Hes5的表达有关。     

Notch1和Notch2在星形细胞瘤及髓母细胞瘤中的表达及其意义

目的 探讨Notch1和Notch2在人脑星形细胞瘤及髓母细胞瘤中的表达及其在肿瘤形成和发展中的作用.方法 应用组织芯片和免疫组织化学SP法染色以及Western blot技术检测正常脑组织、不同级别大脑星形细胞瘤、小脑髓母细胞瘤中Notch1和Notch2蛋白的表达情况.结果 正常脑组织中Notch1和Notch2蛋白呈阴性表达;Notch1在Ⅳ级星形细胞瘤中阳性比为15/15,Ⅲ级中阳性比为14/15,Ⅱ级中阳性比为10/15,Ⅰ级中阳性比为9/15,总阳性率为80.0%(48/60),阳性部位均为胞质.Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级星形细胞瘤中表达阳性比及表达强度随肿瘤级别增高而增高.在髓母细胞瘤中阳性比为2/10,且表达水平较低.Notch2在Ⅳ级星形细胞瘤中无表达(0/15),Ⅲ级表达阳性比为1/15,Ⅱ级中阳性比为2/15,Ⅰ级中阳性比为3/15,总阳性率为10%(6/60),表达率及表达强度都很低.在髓母细胞瘤中阳性比为9/10.Notch1在各级别胶质瘤中表达强度的差异均有统计学意义(x2=18.495,P<0.05).Spearman等级相关检验证实肿瘤病理分级与Notch1表达强度之间呈正相关(r=0.859,P<0.05).在星形细胞瘤中,Notch1和Notch2表达的总阳性率差异有统计学意义(x2=56.807,P<0.05),在髓母细胞瘤中,Notch1和Notch2的表达差别有统计学意义(x2=13.778,P<0.05).结论 Notch1和Notch2在星形细胞瘤及髓母细胞瘤中表达不同,并呈现相反的趋势,可能与两者在脑发育过程中的作用不同有关.     

Notch1受体在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系

目的 探讨Notch1受体与乳腺癌患者的临床病理特征及预后的关系.方法 应用免疫组化技术检测106例乳腺癌组织中Notch1受体、ER、PR、CerbB-2受体表达情况,分析其与临床病理特征及预后的相关性.结果 乳腺癌组织中Notch1受体表达明显高于癌旁正常组织(P＜0.05);Notch1受体表达与CerbB-2具有相关性(P＜0.05),与ER、PR无显著相关性(P＞0.05);Notch1受体高表达组5年生存率低于低表达组(P＜0.05).结论 乳腺癌组织中Notch1受体表达明显高于癌旁正常组织;Notch1受体表达与CerbB-2具有相关性,推测Notch1受体可能与CerbB-2存在交互作用;Notch1受体高表达与预后不良有关.     

STC2 基因在乳腺癌中的表达及抑制其表达对癌细胞生物学特性的影响研究

目的:探讨斯钙素鄄2(STC2)基因在乳腺癌中的表达及抑制其表达对癌细胞增殖、周期及凋亡的影响。方法: RT鄄PCR 及Western blot 分别检测乳腺癌组织中STC2 基因的mRNA 及蛋白表达,并分析其与病理特征的关系;将STC2-siRNA 转染人乳腺癌MCF-7 细胞,另设空白对照组(Control)和阴性对照组(NC-siRNA),转染48 h 后,Western blot 检测各组细胞中 STC2、ki67、细胞周期素(cyclin D1)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved caspase3)、Notch1、Hes1 蛋白表达; CCK8 检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡。结果:STC2 基因在乳腺癌中的mRNA 及蛋白表达均显著高于癌旁组 织(P<0.05);STC2 基因表达与乳腺癌患者年龄、组织学分级及是否发生转移无关(P>0郾05),与病理分期、肿瘤大小相关(P< 0.05);NC-siRNA 组STC2 的蛋白表达与Control 组差异无统计学意义(P>0.05),STC2鄄siRNA 组STC2 的蛋白表达显著低于 Control 组(P<0.05);STC2鄄siRNA 组细胞存活率、S 期和G2/ M 细胞及ki67、cyclin D1、Notch1、Hes1 蛋白表达显著低于Control 组,细胞凋亡率、G0/ G1 期细胞及Cleaved caspase3 蛋白表达显著高于Control 组(P<0.05)。结论:STC2 基因在乳腺癌中高表 达,其表达与病理分期和肿瘤大小相关,抑制其表达可降低癌细胞的增殖,阻滞细胞于G1 期,并诱导细胞凋亡,其机制与下调 ki67、cyclin D1 和上调Cleaved caspase3 表达及下调Notch1 信号通路有关。     

早中期食管鳞状细胞癌中Notch1与血管内皮生长因子C的表达及其意义

目的 研究Notch1与血管内皮生长因子C(VEGF-C)在早中期食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达及其与临床病理特征的关系.方法 收集2007年5月至12月在本院行食管癌根治术的40例早中期ESCC和8例正常食管组织病理标本,免疫组化方法检测Notch1和VEGF-C的表达,并探讨其与临床病理特征的关系,分析Notch1和VEGF-C表达的相关性.结果 与正常食管组织比较,早中期ESCC组织Notch1表达阳性率下降[47.5%(19/40)比100.0%(8/8),P=0.006)],而VEGF-C表达升高[67.5%(27/40)比0.0%(0/8),P=0.000].高、中、低分化ESCC组织中Notch1表达阳性率分别为80.0%(8/10)、50.0%(7/14)、25.0%(4/16),Notch1表达阳性率随肿瘤分化程度降低而降低(P=0.023),但在肿瘤浸润程度和淋巴结转移中差异无统计学意义(均P＞0.05).高、中、低分化ESCC组织中VEGF-C表达阳性率分别为30.0%(3/10)、71.4%(10/14)、81.3%(13/16),VEGF-C表达阳性率随分化程度的降低而升高(P=0.024).淋巴结转移阳性组VEGF-C表达阳性率高于淋巴结转移阴性组[100.0%(16/16)比45.8%(11/24),P=0.000].与T2分期组比较,T3～T4分期组ESCC组织VEGF-C表达阳性率升高[82.1%(23/28)比33.3%(4/12),P=0.000].Notch1与VEGF-C表达呈负相关(r=-0.486,P=0.003).结论 Notch1在早中期ESCC中表现为抑癌基因,其异常低表达可能是引起VEGF-C异常高表达的因素之一.     

免疫荧光联合电镜检测诊断不典型膜性肾病的价值

目的 探讨免疫荧光联合电镜检测诊断不典型膜性肾病(atypical membranous nephropathy,AMN))的价值.方法 连续选择2010年1月至2015年1月入我院经肾穿刺活检诊断为AMN的92例和特发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)165例.分析外周血的尿素氮、肌酐、胱抑素C和24 h尿蛋白定量、免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)A、IgM、IgG和补体3(complement3,C3),肾组织中的IgA、IgM、IgG及IgG亚型、Clq)、纤维蛋白相关抗原(fibrinogen-related antigen,FRA)、M型磷脂酶A2受体(M-type phosphorlipaseA2 receptor,PLA2R)和Nephrin,电镜和光镜下检查病理改变.结果 AMN和IMN组患者血尿素氮、肌酐、胱抑素C和24 h尿蛋白定量,血清IgA、IgG、IgM和C3的差异均无统计学意义(P＞0.05).与IMN组比较,AMN患者的IgA[69(75.0％)比50(30.3％),x2=47.461,P＜0.05]、IgM[68 (73.9％)比55(59.8％),x2=38.977,P ＜0.05]、C1q[72(78.3％)比33(20.0％),x2=112.423,P ＜0.05]、FRA[28 (30.4％)比32(19.4％),x2=4.023,P＜0.05]、IgG4[64 (69.6％)比82(49.7％),x2 =9.503,P＜0.05]和PLA2R[75(81.5％)比99(60.0％),x2=12.512,P＜0.05]的阳性沉积率均增高(P＜0.05),Nephrin[28(30.4％)比81(49.1％),x2=8.417,P＜0.05]阳性沉积率低于IMN(P＜0.05),AMN与IMN组的IgG、IgG1、IgG2和IgG3和C3阳性沉积率比较差异无统计学意义(P＞0.05).AMN组与IMN组相比,光镜下肾小球钉突形成比例增加[64(69.6％)比52(31.5％),x2=34.533,P＜0.05],其他病理改变无差异.电镜下AMN系膜细胞和系膜基质增生比例增加[78(84.8％)比33(20.0％),x2=101.029,P＜0.05],电子致密物多沉积在上皮下、基膜内、系膜区等部位,MN电子致密物多沉积在上皮下及基底膜区,很少沉积在系膜区[82(89.1％)比0(0.0％),x2=215.976,P＜0.05]在系膜区沉积差异有统计学意义.结论 免疫荧光联合电镜检测对鉴别AMN有重要应用价值,推荐临床免疫荧光检测IgA、IgM、C1q、FRA、IgG4、PLA2R和Nephrin,电镜检测系膜细胞和系膜基质增生及电子致密物沉积于系膜区等病理改变.     

前列腺癌组织中Skp2、p27的表达及临床意义

目的 研究前列腺癌(prostate cancer,PCa)组织中细胞S相激酶相关蛋白2(Skp2)、p27蛋白的表达及临床意义.方法 选取2016年1月至2017年1月我院120例PCa住院患者手术标本纳入研究,依据分化程度差异将PCa分为低分化组(n=56)、中分化组(n=28)与高分化组(n=36),并将这120例患者癌旁组织纳入对照组(n=120),以免疫组化法分析Skp2、p27在PCa中表达程度及PCa危险因素等级之间相关性.结果 PCa组Skp2阳性表达率(53.33％)明显高于对照组(23.33％),且p27蛋白阳性表达率(41.67％)明显低于对照组(86.67％);高、中、低分化组Skp2阳性表达率排序为:高＜中＜低,三组比较差异具有统计学意义(P＜0.05);高、中、低分化组p27蛋白阳性表达率排序为:高＞中＞低,三组比较差异具有统计学意义(P ＜0.05);Skp2阴性表达组术前PSA水平＜4μg/L比例(67.86％)与肿瘤穿透前列腺被膜比例(89.29％)明显高于阳性组(28.13％、62.50％)(P＜0.05);p27蛋白阴性表达组术前PSA水平＜4μg/L比例(31.43％)与肿瘤穿透前列腺被膜比例(68.57％)明显低于阳性组(68.00％、92.00％)(P＜0.05);Skp2表达与PCa危险因素等级具有正相关关系(r =0.513,P＜0.05),而p27蛋白表达与PCa危险因素等级具有负相关关系(r=-0.747,P＜0.05).结论 PCa组织中,Skp2为高表达,p27蛋白为低表达,和PCa分化程度存在紧密联系,Skp2与p27蛋白的检测能够为PCa的发生、发展及患者治疗提供帮助.     

上皮性卵巢癌中E盒结合锌指蛋白2和转化生长因子β1的表达及其预后的关系

目的 研究上皮性卵巢癌中E盒结合锌指蛋白2(ZEB2)和转化生长因子β1(TGF-β1)的表达及预后意义.方法 采用免疫组化SP法检测52例上皮性卵巢癌、23例卵巢良性上皮性肿瘤和15例正常卵巢组织中ZEB2和TGF-β1的表达,分析二者在卵巢上皮癌中的相关性及与临床病理特征和预后的关系.结果 ZEB2和TGF-β1在上述三种组织中均定位于细胞质,其阳性表达率分别为67.3％、21.7％、13.3％和71.2％、30.4％、20.0％,差异均有统计意义(x2=21.34、18.087,p均＜0.05);ZEB2和TGF-β1在卵巢上皮癌中的表达存在正相关(rs=0.552,P＜0.05),且与分化程度、FIGO分期有关(P＜0.05),与年龄、病理类型无关(P＞0.05);ZEB2和TGF-β1表达与卵巢上皮癌患者总生存率有关(P＜0.05);COX风险比例模型显示ZEB2阳性表达是预后危险因素(OR=2.653,P＜0.05).结论ZEB2和TGF-β1可能促进上皮性卵巢癌进展,ZEB2可能作为评估预后的新指标.     

结肠癌P53、 nm23免疫组化表达特征及与临床病理的关联分析

目的 探讨结肠癌患者P53、nm23的表达及其与相关临床病理特征的关联.方法 选取2013年至2017年间于本院就诊并经病理确诊为结肠癌的患者121例,分析其P53、nm23的表达及与临床病理特征的相关性.结果 p53在肿瘤组织中的阳性率(76.03％)显著高于癌旁组织(4.96％)(P＜0.05),而nm23的表达在肿瘤组织(80.17％)和癌旁组织(86.12％)中无明显差异(P＞0.05).p53的阳性率随着肿瘤分化程度的减低逐渐增高,最高达92.50％,组间差异具有统计学意义(P＞0.05);nm23则相反,高分化组织的nm23表达阳性率最高,为86.84％.在有转移的患者的肿瘤组织中,p53的表达明显上升,nm23的表达明显下降(P＜0.05).结果 肿瘤组织中p53蛋白过量表达提示肿瘤恶性程度高,转移可能大,nm23蛋白在组织分化程度高的组中和未发生淋巴结转移组中高表达,与抑制肿瘤生长相关,两者均可以作为判断结直肠癌预后效果的重要参考指标之一.     

儿童与成人急性白血病患者外周静脉留置中心静脉导管置管并发症的差异

目的:比较儿童与成年急性白血病患者外周静脉留置中心静脉导管(peripherally inserted central catheter,PICC)置管的并发症发生率,为不同类型患者提供更好的护理和治疗策略.方法:选取保定市第一医院52例儿童及100例成人急性白血病化疗行PICC置管患者,观察两组PICC置管后不同并发症及其发生率,探讨儿童与成人急性白血病PICC并发症的不同.结果:在儿童急性白血病PICC置管后出现并发症的总发生率为55.8％,显著高于成人急性白血病PICC置管后并发症总发生率的39.0％(x2=3.89,P＜0.05).其中感染发生率36.5％ vs.21.0％(x2=4.26,P＜0.05)、导管阻塞发生率23.1％ vs.11.0％(x2=3.89,P＜0.05);机械性静脉炎发生率19.2％ vs.5.0％(x2=7.79,P＜0.05).平均置管日儿童[(98.7±58.7)d]显著低于成人[(130.6±71.8)d](t=2.76,P＜0.01).非计划拔管率儿童为17.3％,显著高于成人的5.0％(x2=4.81,P＜0.05).结论:PICC置管后儿童与成人急性白血病患者各种并发症发生率及平均置管时间存在一定差异,可能与配合程度及年龄特点密切相关.     

肝细胞核因子-1α和肝细胞核因子-4α在人肝细胞癌中的表达及意义

目的 检测肝细胞癌（HCC）标本中肝细胞核因子-1α(HNF-1α)和肝细胞核因子-4α(HNF-4α)的表达,探讨其在肝癌发生、发展中的作用。 方法 采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组织化学方法检测HNF-1α、HNF-4α mRNA和蛋白质在肝癌组织和癌旁肝组织中的表达。 结果 HNF-1α mRNA在癌旁肝组织中的相对表达量0.818±0.371明显高于肝细胞癌组织0.383±0.102,差异有显著性（P＜0.05）。HNF-4α mRNA在癌旁肝组织中的相对表达量0.846±0.384明显高于肝细胞癌组织0.397±0.105,差异有显著性（P＜0.05）。HNF-1α和HNF-4α mRNA 的表达与肿瘤分化程度有关（P＜0.05）。HNF-1α 蛋白在癌旁肝组织中的阳性率（92.3%）明显高于肝细胞癌组织（42.3%）,差异有显著性（P＜0.05）。HNF-4α 蛋白在癌旁肝组织中的阳性率（96.2%）明显高于肝细胞癌组织（50.0%）,差异有显著性（P＜0.05）。HNF-1α和HNF-4α 蛋白的表达与肿瘤分化程度有关（P＜0.05）。在肝细胞癌组织中HNF-1α与HNF-4α mRNA表达水平呈负相关关系。 结论 HNF-1α和HNF-4α在肝细胞癌中表达下调,这可能与肝癌的发生、发展相关。     

Sonic hedgehog mRNA及其蛋白在大肠癌的表达及其临床意义

目的 探讨大肠癌中Hedgehog信号通路相关基因Sonic hedgehog(SHH)的表达及其临床意义.方法 应用RT-PCR及免疫组织化学法(Envison二步法)检测本院2008年12月至2009年4月收集的43例大肠癌组织和距离癌10 cm以上的癌旁组织的SHHmRNA及蛋白的表达情况,并与20例非肠癌患者的正常大肠组织对照,分析其与大肠癌患者临床和病理各变量的相关性.结果 凝胶成像分析显示阳性表达的样本SHH mRNA片段大小为280 bp,与理论值相符,未表达的样本则未见相应条带.大肠癌组织SHHmRNA表达阳性率为27.9%(12/43),与癌旁组织的18.6%(8/43)差异无统计学意义(P＞0.05),但均显著高于正常大肠黏膜的0%(0/20)(均P＜0.05).SHH mRNA在大肠癌组织的表达强度显著高于癌旁组织(P＜0.05),在正常大肠黏膜则未见其表达.免疫组织化学显示SHH蛋白在大肠癌组织和癌旁组织均有阳性表达,细胞膜及胞质内出现棕黄褐色颗粒,背景不着色;正常大肠黏膜阴性表达.SHH蛋白在大肠癌组织的表达阳性率显著高于正常大肠黏膜[25.6%(11/43)比0%(0/20),P＜0.05],在大肠癌组织与癌旁组织、癌旁组织与正常大肠黏膜的表达阳性率差异则无统计学意义(均P＞0.05).SHH蛋白的表达强度大肠癌组织＞癌旁组织＞正常大肠黏膜(均P＜0.05).大肠癌组织中的SHH mRNA和蛋白表达强度与患者的年龄、性别、临床分期、肿瘤部位、肿瘤浸润深度、病理分型等变量均无明显关系(均P＞0.05).结论 SHH mRNA和蛋白在大肠癌组织中表达显著增强,但与临床和病理各变量无关联.     

DAPT对脑缺血再灌注损伤小鼠学习记忆的影响以及Notch信号通路的调节作用

目的探讨DAPT对脑缺血再灌注损伤小鼠学习记忆能力的影响,以及Notch信号通路的调控作用。方法 140只健康雄性小鼠随机分为假手术组(sham组)、模型组(I/R组)和DAPT组,每组再分为3d、7d、14d 3个亚组。取材前1 d Y型迷宫检测小鼠学习记忆能力;然后TTC染色测定脑梗死面积;比色法测定脑组织超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量;光学显微镜下观察海马CA3区形态结构变化;免疫荧光检测Hes1阳性细胞;Western blotting检测Hes5蛋白表达变化并进行定量分析。结果与sham组相比,I/R组和DAPT组小鼠学习记忆能力均下降,脑梗死面积增加,SOD活性降低,MDA含量升高(P<0.05)。与I/R组相比,DAPT组小鼠学习记忆能力提高,脑梗死面积减小,SOD活性升高,MDA含量降低(P<0.05)。光学显微镜下,sham组小鼠海马CA3区神经元结构未见异常;I/R组细胞水肿,染色较深,排列疏松,大量神经元缺失,出现核固缩现象;DAPT组细胞数量增加,染色变浅。与sham组相比,I/R组与DAPT组Hes1阳性细胞明显增多,Hes5蛋白表达增加;而DAPT各亚组较I/R各亚组Hes1阳性细胞减少,Hes5蛋白表达降低(P<0.05)。结论 DAPT对小鼠缺血再灌注损伤有改善作用,其作用机制可能与阻断Notch信号通路有关。