血吸虫循环抗原检测的现场试验Ⅱ

制备血吸虫病单克隆抗体诊断试剂盒,将其用于Dot—ELISA,分别检测江苏、安徽流行区急性血吸虫病患者及四川、江西、安徽流行区慢性血吸虫病患者血清中循环抗原。结果不同流行区Dot—ELISA反应的平均“+”值、阳性率和抗原滴度的几何均数不同,循环抗原水平可以反映流行区的疫情。另将Dot—ELISA、ELISA检测四川慢性血吸虫病人治前及治后半年、1年的血清循环抗原及抗体,结果循环抗原在病人治疗后很快下降,治后1年77.8％(35/45)病人的循环抗原转为阴性。循环抗体在病人治疗后也逐渐下降,但速度甚为缓慢。治疗后1年,仅21.7％(10/46)病人转为阴性。上述结果表明,循环抗原能更直接、更真实地反映防治效果。     

Dot-IGSS和Dot-ELISA检测班氏微丝蚴血症者血清特异性抗体的比较研究

以马来丝虫成虫可溶性抗原作为靶抗原，采用斑点免疫金银染色（Dot－IGSS）和斑点酶联免疫吸附试验（Dot－ELISA）检测班氏微丝蚴血症者血清特异性抗丝虫抗体。Dot－IGSS和Dot－ELISA的检测阳性率分别为100％（50／50）和90％（45／50）。两法均为阳性反应的45份血清的滴度为1∶100－1∶2560．其平均滴度在Dot－IGSS为1∶184，在Dot－ELISA为1∶150。两法检测滴度相同者30例，Dot－IGSS滴度高于Dot－ELISA的13例，低于Dot－ELISA的2例。Dot－IGSS和Dot－ELISA所检测抗体滴度呈直线相关（r=0．8433）。与Dot－ELISA相比，Dot－IGSS具有操作简便、容易判断结果等优点，还具有更高的敏感性和特异性，且不使用酶反应底物。建议将Dot－IGSS作为丝虫病免疫学诊断和血清流行病学调查的方法。     

应用ABC—Dot—ELISA检测弓形虫抗体的研究

应用弓形虫可溶性抗原行ABC—Dot—ELISA,对10份病人血清28份感染兔血清和10份阴性人血清及38份阴性兔血清进行检测,与常规Dot—ELISA相比,两者的符合率一致,但其敏惑度可提高5.0倍。与卫氏并殖吸虫、华枝睾吸虫和日本血吸虫病人和感染动物,进行了交叉反应,除与急性血吸虫病人出现阳性反应(14/16)外,其余未见交叉反应。阳性血清经吸收抑制后,抗体滴度下降明显。本法特异性高、敏感性强、重复性好,抗原可长期保存;结果判断方便,阳性反应斑点经久不退,可待复查。     

应用斑点金免疫渗滤法诊断日本血吸虫病

目的：探索一种便捷的血吸虫病诊断方法。方法：在原已建立的ELISA法的基础上，应用3个针对日本血吸虫抗原的不同表位的单克隆抗体标记胶体金，建立检测日本血吸虫病患者血清中血吸虫抗原的斑点金免疫渗滤法。抗原与抗体通过渗滤在硝酸纤维薄膜上进行反应，数分钟用肉眼观察结果。结果：本法检测SEA的敏感度为16ng／ml，在69例慢性日本血吸虫病患者血清的检测中，阳性率为60．8％，特异性为95．2％；同时用dot－ELISA检测137例慢性日本血吸虫病患者，阳性率为54．7％、特异性为94．6％；夹心ELISA检测118例 慢性日本血吸虫病患者，阳性率为61．9％、特异性为95．7％。结论：经数理统计G检验证实斑点金免疫渗滤法的敏感性和特异性同ELISA 相近, 且操作更简便且快速。     

快速斑点免疫金染色法检测抗日本血吸虫抗体方法的建立与初步应用

目的 建立简便、经济和敏感、特异的快速免疫学诊断方法。方法 将日本血吸虫可溶性虫卵抗原点加于混合纤维素酯微孔滤膜，以快速斑点免疫金染色法(F—Dot—IGS)检测日本血吸虫病患者血清抗体。结果 初步结果显示，共检测55例日本血吸虫病患者血清抗体，阳性率100％；检测40例义务献血员血清均为阴性；50例肝吸虫病患者血清，l例出现阳性反应，交叉反应率为2．0％；10例肺叹虫病人血清末见交叉反应。结论 本法快速，更为简便、经济，有较高的敏感性和特异性，适于基层、流行病学调查和临床快速诊断。     

不同载体ELISA诊断囊虫病的实验研究

本文使用Dot－ELLSA、滤纸血快速ELISA和血清快速ELISA试验,同步对91份囊虫病人血清抗体进行检测。结果三法的阳性率依次为93．2％,82．4％和85．7％;三法的几何平均滴度分别是1097,45和716。三法符合率为87.9％。实验表明,Dot—ELISA以敏感性高,可长期保存,无需特殊设备而成为囊虫病诊断和在流行病学调查中值得推广的好方法;滤纸血快速ELISA则以简便易行而更适宜在边远条件差的地区使用。     

金免疫斑点渗滤法检测日本血吸虫抗体的应用

建立了检测血吸虫病人血清抗体的金免疫斑点渗滤法（DIGFA）。以该法检测107例粪检阳性血吸虫病人血清,阳性率为96．2％,119份健康人血清均为阴性;与常规ELISA对照,符合率达99．1％,显示两法敏感性和特异性相近,但DIGFA操作更为简便快速。     

金标免疫渗滤法诊断试剂盒诊断血吸虫病的价值研究

目的：评价金标免疫渗滤法诊断试剂盒（DIGFA－kit)用于血吸虫病血清流行病学调查的价值。方法：采用DIGFA与ELISA单盲平行检测各期血吸虫病病人血清，非流行区人群血清，疫区人群血清和血吸虫病已控制地区人群血清共2304份。结果：DIGFA检测血吸虫抗体的敏感性为96．8％，对非流行区健康人群的特异性为100％，该法检测疫区居民血清508份，抗体阳性检出率为35．6％，在Kato法粪检阳性的81人中，其中抗体阳性79人，阳性符合率为97．5％；检测血吸虫病已控制地区人群血清，抗体阳性率为4．6％，根据DIGFA的敏感性和对非流行区人群的特异性，计算其Youden's指数为0．926，上述各项结果与ELISA比较，差异无显著性（P＞0．05），结论：DIGFA与ELISA有相似的敏感性和特异性，且方法简便，快速，胶体金标记物制备容易，试剂稳定，运送方便，在现场和临床诊断更具有优越性。     

胶乳凝集试验检测日本血吸虫病抗体的实验观察

本文对检测血吸虫病抗体的胶乳凝集试验重新进行了评价,证明共价结合的日本血吸虫卵胶乳抗原有较高的敏感性和特异性。143例慢性及32例急性血吸虫病患者的阳性率分别为89.5％及93.8％;92份北京地区献血员及142份美国献血员血清未发现假阳性反应;100份上海居民血清假阳性率3％。曼氏血吸虫病和埃及血吸虫病患者的阳性率分别为40.5％(17/42)及45.5％(5/11);与丝虫病、华支睾吸虫病及肺吸虫病间有7.7～10％的交叉反应,但强度明显低于同种反应。本法抗原稳定、操作简便、快速,适合现场应用。     

金标免疫渗滤法诊断试剂盒诊断血吸虫病的价值研究

目的　评价金标免疫渗滤法诊断试剂盒（DIGFA-kit）用于血吸虫病血清流行病学调查的价值。方法　采用DIGFA与ELISA单盲平行检测各期血吸虫病病人血清、非流行区人群血清、疫区人群血清和血吸虫病已控制地区人群血清共2304份。结果　DIGFA检测血吸虫抗体的敏感性为96.8%，对非流行区健康人群的特异性为100%；该法检测疫区居民血清508份，抗体阳性检出率为35.6%，在Kato法粪检阳性的81人中，其中抗体阳性79人，阳性符合率为97.5%；检测血吸虫病已控制地区人群血清，抗体阳性率为4.6%；根据DIGFA的敏感性和对非流行区人群的特异性，计算其Youdens指数为0.926。上述各项结果与ELISA比较，差异无显著性（P>0.05）。结论　DIGFA与ELISA有相似的敏感性和特异性，且方法简便、快速，胶体金标记物制备容易，试剂稳定，运送方便，在现场和临床诊断更具有优越性。     

金标渗滤法快速检测血吸虫循环抗原的现场应用研究

将抗重组蛋白ＳＶＬＢＰ－ＩｇＧ用于ＤＩＧＦＡ检测２２２１例血清中血吸虫循环抗原,其中急性血吸虫病人血清７０份,慢性血吸虫病人血清３０７份,循环抗原检出率分别为１００％和６８．４％。非流行区健康人血清２００份,未见阳性反应。除肺吸虫外,与其它寄生虫或非寄生虫感染病人血清无明显交叉反应。用ＤＩＧＦＡ单盲法检测２批血清,结果显示对急性血吸虫病人的敏感性均为１００％;对慢性血吸虫病人的敏感性分别为６９．４     

用抗日本血吸虫虫卵单克隆抗体NP28-5B检测循环抗原的研究

本研究使用杂交瘤技术制备鼠抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)单克隆抗体NP28-5B,其同型鉴定为IgGl,针对的靶抗原分子量为140kD。将酶标记单抗NP28-5B进行Dot-ELISA直接法检测急性患者血清100份和慢性血吸虫病患者血清200份中循环抗原,阳性率分别为96％和98％,检测正常人血清200份,仅3例假阳性(1.5％)。用双盲法检测血吸虫病流行区江西矶山岛居民血清339份,其中粪检阳性血清114份,阳性率为89.47％,粪检阴性血清225份,阳性率为69.33％,研究证明NP28-5B具有高度诊断潜能。     

HRP-ASSP用于Dot-ELISA检测日本血吸虫抗体的实验研究

目的探讨辣根过氧化物酶标记猪蛔虫可溶性蛋白质( HRP-ASSP)用于Dot-ELISA检测日本血吸虫病患者血清(Sj-S)中抗日本血吸虫抗体的可行性。方法参照改良过碘酸钠法，采用HRP标记ASSP得到HRP-ASSP，经Dot-ELISA观察HRP-ASSP与ASSP免疫兔血清反应，并测定效价；再将HRP-ASSP分别用于直接Dot-ELISA和间接Dot-ELISA检测10份Sj-S，并与检测10份健康人血清(Hp-S)、8份卫氏并殖吸虫病患者血清(P-S)、10份囊尾蚴病患者血清(C-S)和6份旋毛虫病患血清(T-S)进行比较。结果  HRP-ASSP与ASSP免疫兔血清呈阳性反应；直接Dot-ELISA检测Sj-S阳性反应率为100%，Hp-S、P-S、C-S、T-S阳性反应率为20%一50%；间接Dot-ELISA检测Sj-S阳性反应率为100%，其他血清阳性反应率均为O。结论ASSP与日本血吸虫特异性抗体可能具有高亲和力，HRP-ASSP用于间接Dot-ELISA检测Sj-S中抗日本血吸虫抗体具有潜在的应用价值。     

Dot-IGSS检测日本血吸虫病人血清抗体的研究

运用斑点免疫金银染色法(Dot-IGSS)检测了日本血吸虫病人血清抗体,并与斑点酶联免疫试验(Dot-ELISA)作了比较。检测了急性血吸虫病人血清38份,两法结果全部阳性;慢性血吸虫病人血清70份,Dot-IGSS阳性69份(98.6％),Dot-ELISA阳性65份(92.9％);治疗后血吸虫病人血清40份,Dot-IGSS阳性15份(37.5％),Dot-ELlSA阳性11份(27.5％)。用两法检测华枝睾吸虫病人血清20份,均有1份为阳性;检测正常人血清40份,均未出现阳性反应。将8份阳性血清作倍比稀释(1:20～1:61440)后分别用该两法检测,Dot-IGSS的敏感性明显高于Dot-ELISA(P<0.05)。对120例过去无血吸虫病史、接触疫水且皮试阳性者血清检测结果表明,Dot-IGSS的阳性检出率明显高于Dot-ELISA、COPT及循环抗原测定法(P<0.01)。     

抗日本血吸虫单克隆抗体的制备及其在诊断中的应用

The present paper reported on an anti-CCA monoclonal antibody, McAb-IIID 10, which could be used in determinations of both parasite-oriented circulating antigens and specific anti-CCA antibodies. The established competitive ELISA (C-ELISA) using McAb-IIID 10 to detect schistosome-antibodies showed high sensitivity and specificity in the diagnosis of schistosomiasis with few cross-reactions. In field trials, coincident rates in 3 separate batches of serum samples when subjected to double-blind detections were obtained. A total of 1,915 serum samples had been determined by C-ELISA, among them 113 acute cases achieved a 100% positive rate, 765 chronic and 25 late cases showed 96.3% and 72% positive respectively. 70% of the 66 cured schistosomiasis cases turned to be negative. None of the 750 normal individuals showed positive reactions. No cross reaction was found in 27 sera from hydatidosis, whereas 1 and 2 positive reactions were found in 43 paragonimiasis sera and 126 clonorchiasis sera respectively. The established McAb-IIID 10 involved Dot-ELISA was found of value in the assessment of effective chemotherapy and showed a high negative conversion rate of 97.9% in 48 cured schistosomiasis patients. In 16 experimentally infected rabbits, 12 became negative in Dot-ELISA determinations at the 8th week post treatment, and the remaining 4 treated ones, the titer as well as the reaction intensity were also found reduced. A good coincidence rate was also found between C-ELISA and Dot-ELISA, their detection results may be complementary each other.     

血吸虫病低度流行区筛查方案的研究

目的探索血吸虫病低度流行区合适的筛查方案.方法在江苏省南京市血吸虫病低度流行区,选择一近江滩的自然村,以粪便孵化法3送3检和胶体染料试纸条(DDIA)同时筛查病人.结果465人送检粪便,粪检阳性13例,阳性率为2.80%.其中1检465人,阳性9例;2检331人,新检出阳性4例;3检210人,无阳性.465人做DDIA,阳性65人,阳性率13.97%;1 3例粪检阳性者DDIA均为阳性.无血吸虫病史者408人DDIA检测阳性39例,其中10人粪检阳性;有史者57人DDIA检测阳性26例,其中末次治疗1～2年的24例中阳性18例,末次治疗≥3年的33例中8例阳性,包括3例粪检阳性者.结论在血吸虫病低度流行区用DDIA筛查病人的方案是可行的.     

血吸虫循环抗原检测及疗效考核价值

采用单克隆抗体(McAb)S31/32双夹心ELISA法检测感染不同寄生虫病人血清中循环抗原(CAg)427份,其中慢性血吸虫病188例,阳性检出率为95.2%,晚期血吸虫病阳性率4.5%(2/44),正常53人假阳性率5.7%.测定其他寄生虫感染患者及肝炎病人,除发现肺吸虫病、旋毛虫病和华枝睾吸虫病有交叉反应外,其它均呈阴性反应.同时,检测血吸虫病治疗前、后CAg,计495 份血清,慢性血吸虫病治疗前188例,阳性率95.2%,吡喹酮治疗后3、6、12和36个月,其阴转率分别为20.4%、31.9%、96.2%和87.7%.比较双夹心ELISA法和一步法ELISA检查CAg,无显著差异.测试结果提示,采用单抗S31/32建立的双夹心ELISA检测血吸虫循环抗原有很高的敏感性和良好的特异性,病人在治疗后一年其阴转率高,有很好的疗效考核价值.     

日本血吸虫抗独特型抗体NP30抗体检测法在云南大山区应用效果的评价

目的评价日本血吸虫抗独特型抗体NP30抗体检测法在云南大山区血吸虫病流行现场的应用效果.方法对云南大山区血吸虫病流行区的506位居民进行粪检,同时用NP30抗体检测法和血吸虫抗体ELISA检测试剂盒(SEA-ELISA)分别对其血清进行检测,评价NP30抗体检测法的敏感性;同时检测非流行区的100份血清确定其特异性.结果 NP30抗体检测法和SEA-ELISA法的粪检阳性符合率分别为87.80%(144/164)和84.76%(139/164);两者的特异性分别为96.00%(96/100)和94.00%(94/100),差异均无显著性(P均＞0.05),但在粪孵阴性人群血清样本中,NP30抗体检测法和SEA-ELISA法的检出率分别为44.15%(151/342)和70.47%(241/342),差异有显著性(P＜0.05).结论 NP30抗体检测法可用于云南大山区血吸虫病筛查.     

Dot－ELISA检测抗原与IHA、COPT检测抗体诊断血吸虫病的比较

本文比较了斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）检测循环抗原，间接血凝试验（ＩＨＡ）、环卵沉淀试验（ＣＯＰＴ）检测抗体诊断血吸虫病的效果。１２例急性血吸虫病患者血清３种方法检测均为阳性；２７７例慢性血吸虫病患者血清３种方法检测阳性率分别为７９．４２％、６４．６２％和６３．１８％。１４例华支睾吸虫病患者血清和８９例健康人血清Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测均为阴性。１０例急性血吸虫病患者，在离开流行区经吡喹酮治疗后３７周时粪检全部转阴，检测血清循环抗原４例转阴，其余６例滴度大幅度下降；ＩＨＡ检测３例转阴，其余７例几何平均倒数滴度（ＧＭＲＴ）由４７．５７降至９．３５；ＣＯＰＴ检测平均环沉率由２１．５％降至４．１２％。结果表明Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测血吸虫循环抗原具有较好的敏感性和特异性。这３种方法在血吸虫病诊断及疗效考核中均有一定价值。     

胶体染料试纸条法免疫诊断试剂盒在大山区型血吸虫病流行区的现场应用

目的现场评价胶体染料试纸条法(DDIA)免疫诊断试剂盒在大山区型血吸虫病流行区筛查病人中的应用价值。方法在云南省大山区型血吸虫病流行区,选择3个自然村作为调查现场, 随机抽取10-70岁的村民作为调查对象,进行血吸虫病病史个案调查;收集粪便标本,采用改良 Kato-Katz法(1送3检)作病原学检查;静脉采血,分离血清,分别采用DDIA诊断试剂盒、酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断试剂盒和环卵沉淀试验(COPT)诊断试剂盒进行血吸虫病免疫学诊断。结果 3个村共筛查村民659人,Kato-Katz法粪检阳性187例,阳性率为28．4％;DDIA、ELISA和 COPT的阳性率分别为70．9％,84．2％和54．9％;在187例粪检阳性者中,DDIA、ELISA和COPT 的阳性符合率分别为98．4％、96．8％和81．8％。结论 DDIA免疫诊断试剂盒在大山区型血吸虫病流行区现场大规模筛查病人中具有较高的敏感性和特异性。