针刺调控脑缺血再灌注损伤大鼠海马circRNA＿011989和circRNA＿009775表达

目的:观察针刺对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠缺血侧海马组织circRNA＿011989和circRNA＿009775表达的影响。方法:以SD大鼠为受试对象,通过线栓法制备CIRI模型,通过针刺(AC)手段进行治疗。采用Garcia评分法对大鼠神经功能进行评定,TTC染色法检测脑梗死体积比,运用靶点预测网站预测circRNA＿011989、circRNA＿009775结合的miRNAs及对应mRNAs,并采用Cytoscape构建circRNA-miRNA-mRNA共表达网络,通过qRT-PCR法检测缺血侧海马区circRNA＿011989、circRNA＿009775、miR-466b-5p、miR-3065-3p、Rims1、Slc30a3的表达。结果:与CIRI组相比,CIRI+AC处理组大鼠Garcia评分明显增加(P<0.01),梗死区体积缩小,患侧海马区circRNA＿011989、circRNA＿009775、Rims1、Slc30a3表达上调(P<0.05,P<0.01),miR-466b-5p、miR-3065-3p表达下降(P<0.05)。...     

针刺通过PI3K-Ⅲ/Beclin-1通路抑制脑缺血-再灌注损伤大鼠的细胞凋亡

目的:利用大脑中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)法制备大鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)模型，研究针刺对CIRI模型大鼠脑组织中Ⅲ型磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K-Ⅲ)/Beclin-1通路的影响。方法:利用MCAO/R方法制备SD大鼠CIRI模型，分别给予针刺和(或)自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)进行治疗。利用采用Garcia评分法检测大鼠神经功能，TTC染色法检测大鼠脑梗死面积，Western Blot法检测海马组织PI3K-Ⅲ、Beclin-1和B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白的表达水平，TUNEL法检测细胞凋亡。结果:MCAO/R手术后大鼠神经功能评分降低(P<0.01),TTC染色观察到脑梗死，同时海马区PI3K-Ⅲ、Beclin-1和Bcl-2表达显著下调(P<0.01),脑皮质细胞凋亡增多(P<0.01)。针刺治疗不但提高了大鼠神经功能评分(P<0.01),并且减少了脑梗死面积(P<0.01);同时显著上调了海马组织中PI3K-Ⅲ、Beclin-1和Bcl-2表达(P<0.01),并减少了脑细胞凋亡(P<0.01)。3...     

乌司他丁对脑缺血再灌注损伤大鼠海马CA1区的保护作用

目的:探究乌司他丁(UTI)对脑缺血再灌注损伤(CIRI)后大鼠海马CA1区神经元凋亡的影响及可能的作用机制。方法:32只SD大鼠随机分为假手术组(sham)、脑缺血再灌注损伤模型组(CIRI)、乌司他丁低剂量组(UTI-L)及乌司他丁高剂量组(UTI-H),采用神经功能评分评估大鼠神经功能损伤情况,通过商品化试剂盒检测大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性,并采用尼氏染色观察CA1区神经元形态学改变、TUNEL染色检测CA1区神经元凋亡水平,Western Blot检测CA1区脑组织血红素氧合酶1(HO-1)和核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达情况。结果:与sham组比较,CIRI组神经行为学评分及凋亡细胞数量显著增高,SOD、CAT、GPX活性降低,HO-1、Nrf2蛋白表达上调(P<0.05);与CIRI组比较,UTI-L组和UTI-H组神经行为学评分、细胞凋亡数量降低,SOD、CAT、GPx活性升高,HO-1和Nrf2蛋白表达下调(P<0.05);与UTI-L组相比,UTI-H组神经行为学评分、细胞凋亡数量降低...     

丙泊酚预处理对大鼠脑缺血再灌注线粒体凋亡的影响及可能机制

目的 探讨丙泊酚预处理对大鼠脑缺血再灌注线粒体凋亡的影响及可能机制。方法 30只SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、局灶性脑缺血-再灌注大鼠模型组（CIRI组）和丙泊酚预处理组（P组）。再灌注24h后实行神经功能缺陷评分;HE染色观察脑组织损伤情况;免疫荧光检测观察MAP-2表达;TUNEL染色观察脑组织细胞凋亡情况;Western blot检测脑组织AIF、Cyt-C、cleaved caspase-3以及RhoA/ROCK2信号通路蛋白表达水平。结果 与Sham组比较,CIRI组和P组神经功能缺陷评分明显升高,脑损伤严重,MAP-2表达降低(P<0.05),细胞凋亡率升高,脑组织中AIF、Cyt-C、cleaved caspase-3,RhoA和ROCK2蛋白的表达水平均升高(P<0.05)。而与CIRI组比较,P组神经功能缺陷评分明显降低,并且脑损伤程度降低,MAP-2表达升高(P<0.05),细胞凋亡率降低,脑组织中AIF、Cyt-C、cleaved caspase-3、RhoA和ROCK2蛋白表达降低(P<0.05)。结论 丙泊酚通过抑制RhoA/...     

针刺调控CIRI大鼠缺血侧海马组织差异表达circRNAs的功能研究

目的：探讨针刺对脑缺血再灌注损伤（CIRI）大鼠脑组织的保护作用，观察针刺对CIRI大鼠缺血侧海马组织环状RNAs(circRNAs)差异表达的影响，并对其进行基因本体（GO）分析。方法：6～8周龄SD大鼠54只，运用随机数字法随机分为造模组和假手术组（sham组），造模成功后再随机分为模型组（model组）和针刺组（AC组），每组18只。采用改良Longa线栓法制备大脑中动脉闭塞再灌注（MCAO/R）模型，激光散斑成像仪监测造模前、MCAO手术后及再灌注后脑血流量，假手术组只剥离血管，不插入线栓；干预期间模型组和假手术组只捆绑不针刺，针刺组捆绑+针刺。采用改良加西亚（Garcia）评分法对神经功能进行评定，TTC染色法检测脑梗死面积，Western blot法检测神经元核抗原（NeuN）的表达，尼氏染色法观察缺血侧海马组织神经元损伤程度，基因芯片微阵列分析筛选出缺血侧海马组织差异表达的circRNAs，并对模型组/假手术组、针刺组/模型组共同差异表达circRNAs的来源基因进行GO分析。结果：与假手术组比较，模型组大鼠脑梗死面积比显著升高（P<0.01）,Garcia神经功能...     

支链氨基酸转氨酶1基因沉默对缺血脑损伤大鼠的保护作用

目的:探讨支链氨基酸转氨酶1(BCAT1)基因沉默对大鼠缺血性脑损伤的保护作用。方法:选取40只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham)、MCAO模型组(MCAO)、MCAO+空白质粒脑室注射组(NC-shRNA)、MCAO+BCAT1干扰质粒脑室注射组(BCAT1-shRNA),利用大脑中动脉栓塞法(MCAO)制备脑缺血模型,通过神经功能缺损评分判断大鼠神经功能损伤情况;real time RT-PCR检测大鼠脑缺血部位BCAT1 mRNA的表达水平;利用商品化试剂盒测定缺血脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;TUNEL染色检测缺血脑组织细胞凋亡情况。结果:MCAO组大鼠神经功能缺损评分升高(P<0.05),BCAT1 mRNA表达水平升高(P<0.05),脑组织梗死灶增大,SOD活性降低(P<0.05),MDA水平升高(P<0.05),TUNEL染色阳性细胞数量增多(P<0.05)。而BCAT1基因沉默可降低缺血性脑损伤后大鼠神经功能缺损评分(P<0.05),降低BCAT1 mRNA表达水平(P<0.05),缩小...     

TTP减轻大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤

 目的：分析tristetraprolin （TTP）在大鼠蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage,SAH）后的相对表达水平,以及TTP对SAH后早期脑损伤（early brain injury,EBI）的作用及其可能机制。方法：将56只成年雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组（sham组）和SAH组,采用血管内穿刺法建立SAH模型,SAH组分别于出血后0、12、24、48、72 h和1周取脑组织,Western blot法检测TTP在不同组别中的表达;另取60只成年雄性SD大鼠,随机分成sham组、SAH组、SAH+对照质粒（vector）组和SAH+TTP组,SAH造模48 h后检测神经功能损伤和脑组织含水率;检测脑组织内伊文思蓝（Evans blue,EB）含量以评估血脑屏障通透性;TUNEL法检测大脑皮层细胞凋亡;ELISA法检测脑组织中白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的表达;Western blot法检测脑组织中TTP、Bax、Bcl-2和cleaved caspase-3的水平。结果：与sham组比较,TTP在SAH后12 h开始表达下调,在48 h时表达最低,随后呈上升趋势;SAH组大鼠Garcia神经功能评分较sham组明显降低,脑组织含水率和EB含量较sham组均明显升高（P<0.01）,脑组织中IL-6和TNF-α的表达上调（P<0.05）;SAH组大鼠脑出血后细胞凋亡率显著上升（P<0.01）,Bax和cleaved caspase-3的表达升高（P<0.01）,而Bcl-2的表达下调（P<0.01）;与SAH+vector组比较,SAH+TTP组大鼠Garcia神经功能评分明显升高,脑组织含水率和EB含量均明显降低（P<0.05）,IL-6和TNF-α在脑组织中的表达下调（P<0.05）,细胞凋亡率显著下调（P<0.01）,Bax和cleaved caspase-3的表达下调（P<0.01）,而Bcl-2的表达上调（P<0.01）。结论：大鼠SAH后早期TTP表达下调,并通过其促凋亡机制参与EBI发生;上调TTP可显著减轻大鼠SAH后EBI。     

川芎嗪防治大鼠脑缺血/再灌注损伤后炎症反应与细胞凋亡的作用

目的 探讨川芎嗪(TMP)防治大鼠炎症反应与细胞凋亡的作用机制.方法 选取180只健康雄性SD大鼠,将其随机分为假手术组(sham)、脑缺血/再灌注损伤组(CIRI)、尼莫地平组(N)和TMP组,TMP再分为低剂量组(L)、中剂量组(M)和高剂量组(H)3个亚组,CIRI组采用改良线栓法制备CIRI模型;TMP各组于术前30 min分别尾静脉注射5 mg/kg、10 mg/kg和30 mg/kg TMP进行干预,N组尾静脉注射尼莫地平(1 mg/kg),sham组和CIRI组给予等剂量的生理盐水.各组SD大鼠于构建CIRI模型苏醒后立即进行神经功能缺损评分,同时各组再灌注24 h进行2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色、苏木精-伊红(HE)染色及尼氏(Nissl)染色检测顶叶皮质缺血半暗带形态变化;ELISA检测顶叶皮质白细胞介素(IL)-1β及IL-8的表达,TUNEL检测顶叶皮质中的神经细胞凋亡,免疫荧光染色法检测β-catenin的阳性细胞在顶叶皮质表达,Western blotting检测顶叶皮质Bax和Bcl-2的表达.结果 与sham组相比,CIRI组神经功能缺损评分显著增高(P＜0.01),HE与Nissl染色见神经细胞肿胀变性,部分呈空泡样改变,细胞核固缩深染,神经元数量减少(P＜0.01),尼氏体数量显著减少(P＜0.01);炎症因子IL-1β和IL-8的浓度显著上升(P＜0.01),凋亡细胞与β-连环蛋白(β-catenin)阳性细胞及其平均吸光度值均显著增多、增高(P＜0.01);Bcl-2蛋白表达下降,而Bax蛋白表达显著增加(P＜0.01).与CIRI组比较,N组及TMP干预组大鼠的神经功能缺损评分降低(P＜0.01),HE及Nissl染色发现大神经元水肿减轻,少许神经元被破坏,神经元数量增多(P＜0.01),尼氏体数增多(P＜0.01);炎症因子IL-1β和IL-8浓度显著下降(P＜0.01),凋亡细胞与β-catenin阳性细胞及平均吸光度值均显著减少(P＜0.01);Bcl-2蛋白表达增加,而Bax蛋白表达显著下降(P＜0.01);与N组比较,随着TMP浓度的递增,神经功能、炎症反应与神经元病理变化呈现量效关系(P＜0.05).结论 TMP干预处理后可以减轻大鼠CIRI后神经功能缺损、神经元受损、组织水肿、炎症因子和细胞凋亡,其机制可能与抑制大鼠顶叶皮质区β-catenin蛋白表达有关.     

银杏叶提取物通过UCP2/SIRT3通路改善大鼠脑缺血-再灌注损伤

目的:研究银杏叶提取物(EGb761)能否通过线粒体解偶联蛋白2(UCP2)/去乙酰化酶3(SIRT3)通路改善大鼠脑缺血再灌注(CIRI)损伤。方法:雄性SD大鼠分成以下四组：假手术组(sham)、脑缺血再灌注(CIRI)损伤组(CIRI)、银杏叶提取物组(EGb761)和UCP2抑制剂组(EGb761+Genipin)。对EGb761组和EGb761+Genipin组每天尾静脉注射10 mg/kg EGb761注射液，sham组和CIRI组给予尾静脉注射等剂量生理盐水，连续7 d;在第5～7 d,同时对EGb761+Genipin组每天灌胃50 mg/kg Genipin生理盐水溶液。末次给药次日，通过大脑左侧中动脉闭塞法(MCAO)构建大鼠脑CIRI模型。记录各组大鼠Longa神经功能评分和体重变化，取鼠脑制成石蜡切片，通过HE和尼氏染色并观察脑皮质损伤区病理变化；通过免疫组织化学技术检测脑皮质损伤区UCP2、SIRT3及天冬氨酸蛋白半胱氨酸酶3(caspase-3)的表达；收集动脉血，测定血清中总超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)浓度。结果:与sham组比较，CIR...     

乐尔脉对脑缺血再灌注损伤后期大鼠海马神经细胞凋亡的作用

 目的： 探讨乐尔脉胶囊（LEM）对脑缺血再灌注损伤后期大鼠海马神经细胞凋亡的作用与机制。方法: 采用大鼠左侧大脑中动脉内栓线阻断法(MCAO)造成局灶性脑缺血再灌注模型。缺血2 h再灌注30 d后,应用原位末端标记法（TUNEL）检测海马神经细胞凋亡,免疫组化、RT-PCR 法检测海马神经细胞Fas、Bax、caspase-3、caspase-9蛋白及 mRNA的表达,并进行阳性细胞计数及Mias图像程序分析结果。结果: 大鼠缺血再灌注30 d后,模型组缺血侧海马CA1、CA2区凋亡细胞显著高于假手术组(P<0.05), Fas、Bax、 caspase-3、caspase-9蛋白表达明显增加,fas、bax、caspase-3、caspase-9 mRNA的表达上调(P<0.05)。LEM2.00 g/kg、0.87 g/kg和氟桂利嗪可显著减少海马神经细胞凋亡数,降低Fas、Bax、caspase-3、caspase-9蛋白表达,fas、bax、caspase-3、caspase-9 mRNA的表达下调,LEM 0.87 g/kg作用次于2.00 g/kg。LEM对bax mRNA有显著抑制作用。结论: LEM抑制海马神经细胞的凋亡,明显地减轻缺血再灌注后期大鼠海马神经细胞的损伤,其作用机制与调节细胞凋亡信号转导通路及相关蛋白有关。     

JNK通路促进大鼠脑缺血再灌注海马神经元凋亡

目的:探讨c-JunN端激酶(JNK)通路在大鼠脑缺血再灌注后海马神经元凋亡中的作用。方法:雄性SD大鼠90只,随机分为假手术组、全脑缺血再灌注组、全脑缺血再灌注+JNK抑制剂(SP600125)组、全脑缺血再灌注+JNK激动剂(茴香霉素)组和全脑缺血再灌注+溶剂对照组,每组再灌注后24h取材。分别采用免疫组化、Westernblotting和实时荧光定量PCR检测海马神经元caspase-3蛋白和mRNA的表达;采用TUNEL染色检测海马神经元凋亡情况。结果:全脑缺血再灌注组caspase-3蛋白和mRNA表达较假手术组增加(P<0.05);与全脑缺血再灌注组相比,全脑缺血再灌注+JNK抑制剂组caspase-3蛋白和mRNA表达均降低(P<0.05),而全脑缺血再灌注+JNK激动剂组caspase-3蛋白和mRNA表达均增加(P<0.05),全脑缺血再灌注+溶剂对照组则无明显变化(P>0.05)。各组海马神经元凋亡趋势与caspase-3蛋白和mRNA变化趋势一致。结论:JNK通路的激活可增加大鼠脑缺血再灌注后海马神经元caspase-3的表达,促进海马神经元凋亡。     

自噬水平变化对心脏骤停心肺复苏后大鼠海马神经元凋亡的影响

目的探讨自噬水平变化对心脏骤停心肺复苏(CA/CPR)后大鼠海马神经元凋亡的影响。方法将40只大鼠随机分为假手术组(sham)、CA/CPR模型组(model)、雷帕霉素(Rapa)组(CA/CPR+Rapa)及3-甲基腺嘌呤(3-MA)组(CA/CPR+3-MA)。采用呼气末夹闭气管窒息法复制大鼠CA/CPR动物模型,分别给予自噬激动剂Rapa 0.2 mg/kg及自噬抑制剂3-MA 10 mg/kg进行干预。采用神经功能缺陷评分(NDS)评价CA/CPR大鼠神经功能;用TUNEL染色法检测大鼠海马神经元的凋亡变化;用RT-PCR和Western blotting法检测大鼠海马内微管蛋白轻链3(LC3)、Beclin-1、Bax、Bcl-2及Caspase-3 mRNA和蛋白的表达水平。结果与假手术组比较,CA/CPR模型组大鼠NDS评分明显降低;海马神经元TUNEL染色阳性细胞数明显增多,凋亡率显著升高;海马内LC3、Beclin-1、Caspase-3、Bax表达上调,Bcl-2表达下调(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,CA/CPR+Rapa大鼠NDS评分明显降低,而海马神经元凋亡率明显有所增加,海马内LC3、Beclin-1、Caspase-3、Bax表达明显上调,而Bcl-2表达则明显有所下降;CA/CPR+3-MA大鼠NDS评分明显升高,而海马神经元凋亡率下降,海马内LC3、Beclin-1、Caspase-3、Bax表达明显下调,而Bcl-2表达则有所升高(P<0.05,P<0.01)。结论 CA/CPR后自噬水平升高促进海马神经元凋亡,自噬水平降低抑制海马神经凋亡,两者相互作用共同参与CA/CPR的病理过程。     

慢病毒载体介导HIF-1α基因修饰骨髓间质干细胞促进脑缺血大鼠的神经功能恢复

目的： 探讨静脉注射低氧诱导因子（HIF-1α）修饰的骨髓间质干细胞对脑缺血大鼠神经功能恢复的影响及其可能的作用机制。方法: 利用慢病毒载体介导HIF-1α基因修饰骨髓间质干细胞,获得稳定转染HIF-1α的骨髓间质干细胞,于缺血后3 h经股静脉进行体内移植。在细胞移植后的1、7、14、28 d进行神经功能检查,使用TTC染色观察缺血体积,分别通过TUNEL和pax6、DCX抗体免疫荧光双标分析缺血侧脑组织的神经细胞凋亡及内源性神经干细胞增殖、存活情况。结果: 脑缺血BMSCs-mHIF-1α治疗组在14 d和28 d大鼠神经功能评分显著低于缺血组 (P<0.05),神经功能得到明显改善;脑缺血BMSCs-mHIF-1α治疗组脑梗死灶体积小于缺血组;脑缺血BMSCs-mHIF-1α治疗组缺血侧脑组织的神经细胞凋亡在14 d和28 d明显少于缺血组 (P<0.05);细胞移植后7 d,脑缺血BMSCs-mHIF-1α治疗组在海马区域观察到pax6/DCX细胞数量明显多于缺血组（P<0.05）。结论: 静脉注射HIF-1α修饰骨髓间质干细胞能够促进脑缺血大鼠神经功能恢复;抗凋亡及激活并促进内源性神经干细胞迁移至缺血区可能是静脉注射HIF-1α修饰骨髓间质干细胞治疗脑缺血的机制。     

依达拉奉联合灯盏花素对局灶性脑缺血大鼠皮层神经元凋亡的影响

目的:探讨依达拉奉联合灯盏花素(简称灯盏花素)治疗对大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型大鼠局灶性脑缺血后大脑皮层神经细胞凋亡的影响。方法:将25只SD大鼠随机分为5组:假手术组、MCAO组、MCAO+依达拉奉组、MCAO+灯盏花素组、MCAO+依达拉奉+灯盏花素(n=5),应用微创开颅法制作大鼠MCAO模型,药物组于术前2 h,术后12、24、36、48、60 h经腹腔注射依达拉奉5 mg/kg,灯盏花素100 mg/kg,依达拉奉+灯盏花素(5 mg/kg+100 mg/kg)。假手术组和MCAO组均给予生理盐水。各组分别于术后1 d、3 d和7 d断头取脑,制备常规石蜡组织切片。应用神经功能缺损评分法评估大脑缺血后的神经功能。利用尼氏染色观察不同时间点脑缺血大鼠大脑皮层神经元的形态和数量变化。采用TUNEL方法显示脑缺血后细胞凋亡。应用免疫组织化学法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax在脑缺血大脑皮层中的表达变化。结果:(1)大鼠脑缺血后神经功能缺损评分结果显示:假手术组大鼠神经功能正常;MCAO组大鼠神经功能评分在不同点显著增高于假手术组(P0.05);MCAO+依达拉奉+灯盏花素组大鼠神经功能评分在10 d、14 d较依达拉奉组、灯盏花素组明显降低,与单药组相比差异有统计学意义(P0.05),但各时间点均高于假手术组(P0.05)。(2)假手术组大鼠脑缺血大脑皮层尼氏染色和TUNEI检测显示依达拉奉+灯盏花素组各时间点大脑皮层核固缩神经元及凋亡细胞与两种药物单独使用相比数量明显减少(P0.01)。(3)免疫组化结果显示:依达拉奉+灯盏花素组缺血侧大脑皮层Bcl-2阳性细胞表达显著增强,Bax阳性细胞表达明显减少、减弱,与单独用药相比差异有统计学意义(P0.01)。结论:依达拉奉联合灯盏花素治疗大鼠脑缺血可能通过增强/抑制神经元凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax的表达,提高Bcl-2/Bax的比值,抑制神经细胞凋亡和增强神经元的抗凋亡作用,对缺血脑组织发挥神经保护作用。     

大豆异黄酮对脑缺血/再灌注诱导的线粒体损伤和脑细胞凋亡的影响

 目的:研究大豆异黄酮（SI）对全脑缺血/再灌注大鼠脑组织线粒体超微结构、细胞凋亡和细胞色素C（Cyt-C）、caspase-3及caspase-9表达的影响,探讨大豆异黄酮对脑缺血/再灌注损伤的作用及机制。方法: 60只健康成年SD 大鼠随机分为假手术组（sham）、缺血再灌注组（I/R）和大豆异黄酮预处理组（SI）。SI组给予SI 120 mg·kg-1·d-1连续灌胃21 d,其余2组用等体积生理盐水灌胃,每天1次,第22天I/R组和SI组行手术阻断三血管制备全脑缺血/再灌注模型。缺血1 h,再灌1 h后处死,取大脑皮层,光镜观察脑细胞形态学变化,透射电镜观察线粒体超微结构变化,流式细胞术检测细胞凋亡率,半定量RT-PCR法和免疫组织化学法测定脑组织中Cyt-C、caspase-9及caspase-3的表达。结果: I/R组线粒体膜崩解、嵴消失,脑细胞大量凋亡。与I/R组相比,大豆异黄酮预处理能明显改善线粒体超微结构的损伤,减少脑细胞凋亡率（P<0.01）。I/R组Cyt-C、caspase-9和caspase-3 mRNA的表达和蛋白的含量高于sham 组（P<0.01）,与I/R组相比,SI组Cyt-C、 caspase-9及caspase-3 mRNA 和蛋白的表达显著降低（P<0.01）。结论: 大豆异黄酮可能通过稳定线粒体结构,减少线粒体释放Cyt-C,降低caspase-9和caspase-3的表达,抑制细胞凋亡,从而减轻脑缺血/再灌注损伤。     

脂肪来源的干细胞移植对大鼠脑缺血后神经细胞凋亡及Bcl-2、caspase-12表达的影响

目的:探讨脂肪来源的干细胞(ADSCs)移植对大鼠脑缺血后神经细胞凋亡的影响及其机制研究。方法:72只清洁级成年雄性Sprague-Darley大鼠,随机分为假手术组(Sham组)、局灶性脑缺血组(MCAO组)、溶剂对照组(Vehicle组)和ADSC治疗组(ADSC组),每组18只,采用改良Zea-Longa线栓法制作大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,ADSC组于造模成功1d后经侧脑室注射入30μL的ADSC细胞悬液(内含1×106个细胞),分别于术后4d、7d和14d采用TUNEL法检测缺血区神经细胞凋亡,用免疫组织化学法和RT-PCR法检测脑组织Bcl-2、caspase-12表达的变化。结果:大鼠脑缺血后缺血周边区可见大量细胞凋亡,ADSC组较MCAO组和Vehicle组细胞凋亡明显减少(P<0.05);ADSC组术后4d、7d和14d脑组织中Bcl-2的表达水平较MCAO组和Vehicle组明显增高(P<0.05),而caspase-12的表达水平较MCAO组和Vehicle组明显降低(P<0.05)。结论:ADSCs移植减少脑缺血大鼠缺血区细胞凋亡,其机制可能与促进Bcl-2的表达和抑制caspase-12的表达有关。     

抑制小凹蛋白减轻大鼠脑缺血/再灌注诱导的神经功能损伤

目的 探讨小凹蛋白1(Cav1)的磷酸化在大鼠脑缺血/再灌注后神经功能损伤中的作用机制。方法 将大鼠随机分为假手术组(sham)、模型组(model)和抑制剂组(PP2)。用改良神经功能缺损评分(mNSS)评价大鼠神经功能,氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测脑梗死体积,Nissl染色检测脑缺血/再灌注后组织形态,Tunel染色检测梗死灶周围细胞凋亡数量,Western blot和免疫荧光检测脑梗死周围组织中p-Cav1、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和离子钙结合接头分子1(Iba1)的表达。结果 与假手术组相比,模型组大鼠mNSS评分增加(P<0.05);脑梗死体积明显增加(P<0.05),尼氏体数量减少(P<0.05);凋亡细胞数量增加(P<0.05);p-Cav1、GFAP和Iba1蛋白的表达量上调(P<0.05)。而抑制剂PP2能减轻上述指标的变化,保护脑缺血/再灌注损伤大鼠神经功能(P<0.05)。结论 抑制p-Cav1可以改善大鼠脑缺血/再灌注后神经功能,其机制可能与抑制胶质细胞激活及相互作用有关。     

Fas蛋白在糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后海马区的表达及意义

目的探讨Fas蛋白在糖尿病大鼠脑缺血再灌注海马区神经元损伤中的表达及意义。方法健康雄性Wister大鼠60只,随机分为4组:①正常对照组,②假手术组,③脑缺血再灌注组(NIR),④糖尿病脑缺血再灌注组(DIR组);采用STZ诱导糖尿病和线栓法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,HE法观察海马CA1神经元缺失,用免疫组化方法检测Fas在糖尿病大鼠脑缺血再灌注海马神经元损伤中的表达。结果HE染色:正常对照与假手术组未见神经元缺失和细胞凋亡,DIR组与脑缺血再灌注组均见神经元缺失和神经细胞凋亡,而DIR组比脑缺血再灌注组神经元缺失严重(P<0.05)。正常对照与假手术组极少见Fas免疫染色阳性细胞,DIR组与脑缺血再灌注组明显见Fas免疫染色阳性细胞,且DIR组比脑缺血再灌注组多(P<0.05)。结论Fas介导的细胞凋亡可能是糖尿病脑缺血再灌注损伤后海马区神经元损伤的机制之一。     

静脉移植脐血干细胞可抑制脑缺血大鼠的神经细胞凋亡

背景：已有实验证实脐血干细胞移植后可迁移至脑损伤区域,存活并分化为神经细胞。 目的：探讨经静脉移植脐血干细胞治疗大鼠脑缺血的疗效以及对神经细胞凋亡的影响。 方法：改良线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型,48只大鼠随机数字表法分成治疗组和对照组,分别在造模1 d后经尾静脉注射脐血干细胞和PBS进行观察。 结果与结论：治疗后3,7 d两组神经功能评分比较,差异无显著性意义(P > 0.05);14,21 d治疗组神经功能评分明显低于对照组(P < 0.05)。对照组未见BrdU阳性细胞,治疗组大鼠脑组织切片中可见BrdU阳性细胞,对侧半球也可见少量BrdU阳性细胞。对照组大鼠缺血侧凋亡细胞显著多于治疗组(P < 0.05)。提示经静脉移植的脐血干细胞可迁移至大鼠缺血侧脑组织,抑制神经细胞凋亡,并显著改善大鼠神经功能。     

一氧化氮和Ca~(2+)含量对缺血再灌注大鼠脑细胞凋亡的影响

目的:通过观察脑缺血再灌注时脑组织一氧化氮(NO)和Ca2+含量及脑细胞凋亡的变化,探讨NO、钙对脑细胞凋亡的作用。方法:本实验在建立大鼠急性全脑缺血再灌注损伤模型的基础上,用Green法测定脑组织NO的含量,用原子分光光度仪测定脑组织Ca2+含量,用流式细胞仪检测脑凋亡细胞。结果:脑缺血再灌注12h、24h,NO含量及Ca2+含量均较假手术组增加(P<0.05,P<0.01),脑细胞凋亡数亦增加(P<0.01),且随时间延长进一步增加(P<0.05)。脑缺血再灌注12h、24h时,脑组织Ca2+含量与脑细胞凋亡数呈正相关(P<0.05)。结论:全脑缺血再灌注损伤时发生脑细胞凋亡与脑组织NO、Ca2+含量增高有关。