温阳复元方联合miR-137模拟剂调控线粒体铁死亡对脑缺血再灌注损伤大鼠的作用机制

目的:阐明大鼠脑缺血再灌注(I/R)后miR-137对转铁蛋白受体(TFR)和胸腺癌抵抗蛋白(BCRP)表达的调控作用及温阳复元方的干预效应。方法:75只SD大鼠分为五组，假手术组和模型组予0.9%氯化钠溶液灌胃，余组予温阳复元方灌胃，miR-137模拟组和miR-137模拟对照组大鼠使用脑立体定位法分别将miR-137模拟剂和miR-137空载体注射到缺血侧MCA区，成模后再灌注24 h、7 d、14 d大鼠取材；评价各组大鼠的神经功能缺损评分以及TTC染色；分别通过RT-qPCR、Western blot检测各组大鼠脑组织中相关蛋白和mRNA的表达情况。结果:与假手术组相比，模型组大鼠神经功能缺陷评分较高(P<0.01);成模后大鼠脑组织出现明显的白色梗死灶。与模型组比较，温阳复元方组、miR-137模拟组和miR-137模拟对照组大鼠脑组织中miR-137以及TFR mRNA和蛋白表达量均明显降低，其中miR-137模拟组降低最为显著(P<0.01);同时，大鼠脑组织中BCRP mRNA和蛋白表达均明显升高，其中miR-137模拟组升高最为明显(P<0.01)。...     

白藜芦醇对脑缺血再灌注损伤后脑保护作用的研究

目的观察白藜芦醇对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响,探讨其可能作用机制。方法将32只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、白藜芦醇低剂量组、白藜芦醇高剂量组,每组8只。白藜芦醇低剂量组和白藜芦醇高剂量组大鼠分别给予白藜芦醇45 mg/kg和90 mg/kg灌胃,假手术组和模型组大鼠给予等体积的生理盐水灌胃,均每日1次,连续14 d。在末次灌胃2 h后,除假手术组外,其余组大鼠均采用线栓法制备脑缺血再灌注模型。采用姿势反射评分、平衡木测试评分、脱胶试验评分和神经功能缺损评分评估各组大鼠神经功能损伤情况,采用TUNEL染色检测各组大鼠海马区神经细胞凋亡率,采用Western blot技术检测各组大鼠脑组织中凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax、Bcl-2及Wnt1蛋白的表达水平。结果模型组大鼠姿势反射评分、平衡测试评分、脱胶试验评分、神经功能缺损评分、海马区神经细胞凋亡率均显著高于假手术组(P均0.05),而白藜芦醇低、高剂量组各项评分及海马区神经细胞凋亡率均显著低于模型组(P均0.05),且白藜芦醇高剂量组均显著低于白藜芦醇低剂量组(P均0.05)。模型组大鼠脑组织中Caspase-3、Bax、Wnt1蛋白表达水平均显著高于假手术组(P均0.05),Bcl-2蛋白表达水平显著低于假手术组(P0.05);白藜芦醇低、高剂量组大鼠脑组织中Caspase-3、Bax、Wnt1蛋白表达水平均显著低于模型组(P均0.05),Bcl-2蛋白表达水平均显著高于模型组(P均0.05),且白藜芦醇高剂量组各指标升高或降低幅度较白藜芦醇低剂量组更明显(P均0.05)。结论白藜芦醇可通过Wnt通路降低促凋亡蛋白的表达来抑制脑缺血再灌注大鼠神经细胞凋亡,从而发挥神经保护作用。     

滋肾通络方对局灶性脑缺血大鼠脑组织脑源性神经营养因子蛋白含量的影响

目的观察滋肾通络方对MCAO大鼠脑组织脑源性神经营养因子(brain derived neurophic factor,BDNF)蛋白含量的变化,以探讨BDNF在脑缺血中的意义及滋肾通络方对缺血周围区神经细胞损伤修复的作用。方法制作MCAO大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组和西药组。灌胃20天后,取大鼠脑组织,用免疫组织化学法检测各组BDNF的蛋白表达。结果假手术组海马区几乎见不到BDNF阳性细胞表达;模型组切片染色增强,阳性细胞略有表达;西药组、中药低剂量组及高剂量组均见到切片染色强,BDNF阳性细胞强表达,尤以中药高剂量组阳性细胞表达最强。结论 BDNF与损伤后神经元的修复作用有关。滋肾通络方可通过调节BDNF的合成,促进神经细胞的存活和损伤修复,从而减轻缺血性脑损伤。     

血府逐瘀汤下调Caveolin-1抑制自噬改善大鼠脑出血损伤的效应及机制研究

目的：探究血府逐瘀汤下调窖蛋白-1(Caveolin-1)抑制自噬改善大鼠脑出血（ICH）损伤的效应及机制。方法：将60只大鼠按随机数字表法分为空白组、假手术组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组10只。采用自体股动脉血注入脑尾状核建立ICH大鼠模型。各给药组大鼠分别灌胃给予相应药物,空白组、模型组、假手术组大鼠灌胃等体积生理盐水,1次/d,连续给药3周。观察各组大鼠状态,并行神经功能缺损评分。采集各组大鼠脑组织,HE染色观察脑组织结构的改变情况,免疫组织化学法检测LC3Ⅱ阳性表达,qPCR法检测Caveolin-1 mRNA相对表达量;Western blotting检测Caveolin-1、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、Caspase-3、Bcl-2/Bax、Beclin-1蛋白表达情况。结果：假手术组大鼠上述指标与空白组比较,差异均无统计学意义（P>0.05）;与空白组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分明显降低（P<0.05）,脑组织血肿区域明显,神经元胞浆减少,核固缩,脑组织中Caveolin-1、Caspase-3、Be...     

基于Nrf2/HO-1通路探讨益气活血化浊解毒方改善大鼠脑缺血再灌注损伤的实验研究

目的：研究益气活血化浊解毒方对大鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)的脑保护作用，及其与核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(Nrf2/HO-1)信号通路活性的相关性。方法：72只SD大鼠随机分为6组(n=12):假手术组、模型组、尼莫地平组和益气活血化浊解毒方高、中、低剂量组。除假手术组外均采用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)模型。再灌注后假手术组、模型组大鼠给予生理盐水，尼莫地平组和益气活血化浊解毒方各剂量组给予相应剂量药液。连续灌胃3 d后，对比各组间大鼠神经功能缺损评分；2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测脑梗死体积；原位末端标记法(TUNEL)检测脑组织细胞凋亡情况；Western blot检测脑组织Nrf2和HO-1蛋白的表达情况，实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测脑组织Nrf2和HO-1 mRNA的表达情况；试剂盒检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量。结果：与假手术组比较，模型组大鼠神经功能缺损评分与脑梗死体积显著增高(P<0.01),大鼠脑组织凋亡细胞显著增多(P<0.01),Nrf2...     

益气活血化浊解毒方对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织VEGF、Notch1、Dll4表达的影响

目的 观察益气活血化浊解毒方对脑缺血再灌注损伤大鼠的治疗作用,初步探讨其保护神经血管单元的机制。方法 将SPF级大鼠随机分为假手术组、模型组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组和尼莫地平组。采用线栓法制备大脑中动脉闭塞模型,各组予相应干预,3天后计算各组大鼠神经功能评分,TTC染色测定脑梗死面积,免疫组化检测大鼠脑组织血管内皮生长因子(vascular endothelial growth inhibitor, VEGF)蛋白表达,q-PCR检测大鼠脑组织Notch1、Dll4 mRNA表达,Western blot检测大鼠脑组织VEGF、Notch1、Dll4蛋白表达。结果 (1)神经功能评分结果显示：中药低、中、高剂量组及尼莫地平组较模型组大鼠神经功能缺失评分均有所降低(P<0.05);(2)脑梗死面积结果显示：中药低、中、高剂量组及尼莫地平组较模型组大鼠脑梗死面积显著缩小(P<0.05);(3)免疫组化结果显示：中药低、中、高剂量组及尼莫地平组较模型组大鼠脑组织VEGF蛋白表达显著增大(P<0.05);(4)q-PCR结果显示：中药低、中、高剂量组及尼莫地...     

丹龙醒脑方对脑缺血再灌注大鼠侧脑室室管膜下区神经干细胞增殖与c-myc、c-jun表达的影响

目的探讨丹龙醒脑方对局灶性脑缺血再灌注大鼠侧脑室室管膜下区(SVZ)神经干细胞(NSCs)增殖与c-myc、c-jun表达的关系。方法采用线栓法制备大脑中动脉栓塞局灶性脑缺血再灌注模型。150只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和丹龙醒脑方小、中、大剂量组。于再灌注24 h后,丹龙醒脑方各剂量组予相应剂量药液灌胃,模型组和假手术组予等体积蒸馏水灌胃。1次/d,连续7 d。再灌注1、3、7 d采用m-NSS法进行神经功能缺损评分,再灌注7 d取缺血侧SVZ脑组织,采用Brdu免疫组化检测NSCs增殖,RT-q PCR、Western blot分别检测c-jun、c-myc m RNA和蛋白的表达。结果与假手术组比较,其余各组神经功能缺损评分明显升高(P0.01);再灌注3、7 d,与模型组比较,丹龙醒脑方各剂量组神经功能缺损评分明显降低(P0.01)。与假手术组比较,其余各组Brdu阳性细胞率明显升高;与模型组比较,丹龙醒脑方各剂量组Brdu阳性细胞率亦明显升高(P0.01)。丹龙醒脑方各剂量组较假手术组、模型组c-jun、c-myc蛋白及m RNA表达均明显增强(P0.05,P0.01)。结论丹龙醒脑方能改善脑缺血后神经功能,促进SVZ NSCs增殖,其机制可能与增强c-jun和c-myc表达及延长表达持续时间有关。     

丹参酮ⅡA对鼠脑缺血再灌注损伤凋亡基因表达的影响

目的探讨丹参酮ⅡA（TanⅡA）对脑缺血再灌注损伤大鼠B细胞淋巴瘤／白血病基因-2（Bcl-2）及B细胞淋巴瘤／白血病基因伴随蛋白X（Bax）蛋白表达的影响。方法将大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、TanⅡA低剂量治疗组和TanⅡA高剂量治疗组。线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型。TanⅡA高、低剂量治疗组分别于术前连续灌胃给予相应剂量TanⅡA 3d,1次／d。除假手术组外的各组于脑缺血90min再灌注24h,进行HE染色观察病理形态学变化和神经症状评分,免疫组化法观察大鼠额顶部皮质Bcl-2和Bax蛋白表达。结果TanⅡA高、低剂量治疗组脑组织缺血损伤病理学改变明显轻于缺血再灌注组,TanⅡA高剂量治疗组缺血改变亦轻于低剂量治疗组。TanⅡA高、低剂量治疗组神经功能缺失评分较缺血再灌注组降低（P〈0．05）。与假手术组比较,缺血再灌注组Bcl-2和Bax表达增加,Bcl-2／Bax比值下降（P〈0．05）。与缺血再灌注组比较,TanⅡA高、低剂量治疗组均显著增加Bcl-2表达、减少Bax表达,上调Bcl-2／Bax比值,高、低剂量组之间差异亦具有显著性（P〈0．05）。结论TanⅡA对缺血再灌注脑损伤具有保护作用,其机制可能与通过增加Bcl-2表达,减少Bax表达,上调Bcl-2／Bax比值抗凋亡有关。     

汉黄芩素通过调控JNK/AP-1信号通路对缺血性脑卒中大鼠神经功能障碍、脑组织损伤的影响

目的 探讨汉黄芩素通过调控c-Jun氨基末端激酶(JNK)/激活蛋白-1(AP-1)信号通路对缺血性脑卒中(CIS)大鼠神经功能障碍及脑组织损伤的影响。方法 大鼠随机分为对照组、模型组、汉黄芩素低剂量组(0.07 mg/kg)、汉黄芩素高剂量组(0.14 mg/kg)、丁苯酞组(20 mg/kg)、汉黄芩素高剂量+JNK激活剂(Anisomycin)组(0.14 mg/kg+5 mg/kg),每组20只。对照组大鼠仅切开皮肤、分离血管，不进行拴线处理，其余各组均按照改良的线栓法构建CIS模型。建模成功后，各组给予相应剂量药物，每天1次，连续14 d。Zea-Longa评分法评价大鼠神经功能，TTC染色测定大鼠脑梗死体积，干湿重法测定大鼠脑组织含水量，HE染色观察大鼠脑组织海马CA1区神经细胞病理变化，试剂盒检测大鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)水平，TUNEL染色检测大鼠脑组织神经细胞凋亡，Western blot法检测大鼠脑组织p-JNK1、p-c-Jun、p-c-Fos蛋白表达。结果 与对照组比较，模型组大鼠海马CA1区神经细胞病理损伤严重，神经功能评分、脑梗...     

怀牛膝对重型颅脑损伤大鼠脑组织Nestin表达的影响

目的：观察怀牛膝对重型颅脑损伤大鼠脑组织巢蛋白（Nestin）表达的影响。方法：将大鼠分为怀牛膝高剂量组、怀牛膝中剂量组、怀牛膝低剂量组、模型组、假手术组,按自制改良的Feeney法制备重型颅脑损伤模型,治疗7d后处死各组大鼠取脑,用HE染色观察损伤灶脑组织病理变化,免疫组化法检测大鼠损伤灶脑组织Nestin的表达。结果：怀牛膝高剂量组Nestin表达明显高于模型组（P〈0.05）;怀牛膝中剂量组及低剂量组与模型组比较无明显差别;假手术组仅偶尔在海马区见极少量Nestin阳性细胞表达,部分切片无阳性表达。结论：高剂量怀牛膝能上调重型颅脑损伤大鼠脑组织Nestin的表达,对重型颅脑损伤大鼠神经干细胞的再生有促进作用。     

芪仙通络方对MACO大鼠髓鞘再生及MBP表达的影响研究

目的观察芪仙通络方不同剂量对大脑中动脉栓塞大鼠髓鞘再生及髓鞘碱性蛋白(MBP)表达的影响。方法大鼠随机分为假手术组、模型组、芪仙通络方高剂量组(31.32 g/kg)、中剂量组(15.66 g/kg)、低剂量组(7.83 g/kg)和丁苯酞组,线栓法制备大脑中动脉阻塞模型,造模后3 d后开始灌胃给药,同时腹腔注射5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EDU)标记脑内增殖细胞,每日1次,连续12 d。于造模后第3、7、14日对大鼠神经功能进行评分;采用罗克沙尔坚牢蓝(LFB)染色观察大鼠髓鞘的病理形态学改变;免疫荧光染色观察大鼠缺血侧EDU/少突胶质细胞转录因子2(Olig2)双标阳性细胞数;免疫组化检测大鼠缺血侧MBP蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠各时间点神经功能评分均明显升高(P <0.01),LFB染色平均光密度值降低(P <0.01),大鼠缺血侧EDU/Olig2双标阳性细胞数相当,差异无统计学意义(P> 0.05),MBP蛋白表达显著降低(P <0.01);与模型组比较,各给药组大鼠第7、14 d神经功能评分明显降低(P <0.05),LFB染色平...     

天珠散对缺血性脑卒中大鼠神经功能缺损及Wnt3a、MAP-2表达的影响

目的 研究天珠散对缺血性脑卒中大鼠神经功能损伤的保护作用机制。方法 选取90只雄性SD大鼠，随机取10只作为假手术组，其余大鼠参照Longa线栓法制备大脑中动脉栓塞脑缺血再灌注模型。将造模成功后的大鼠随机分为模型组、尼莫地平组及天珠散低、中、高剂量组，每组16只。造模12 h后，尼莫地平组给予尼莫地平20 mg/kg灌胃，天珠散低、中、高剂量组分别给予天珠散300 mg/kg、600 mg/kg、1 200 mg/kg灌胃，假手术组和模型组给予蒸馏水灌胃，均1次/d,连续10 d。分别于灌胃第1天、第3天、第5天、第7天、第10天对各组大鼠进行Longa评分及转棒实验(记录转棒停留时间);末次灌胃结束后2 h, MRI扫描成像和TTC染色测定大鼠脑梗死体积，HE染色观察脑组织病理形态，Western blot法检测脑组织中Wnt3a、微管相关蛋白2(MAP-2)蛋白表达情况。结果 与假手术组比较，模型组大鼠出现明显神经功能缺损和梗死灶，转棒停留时间明显缩短(P<0.05),脑组织中Wnt3a蛋白相对表达量明显升高(P<0.05),脑组织中MAP-2蛋白相对表达量明显降低(P...     

银杏叶提取物对局灶性脑缺血大鼠血管内皮因子表达的影响

目的探讨银杏叶提取物对大鼠局灶性脑缺血后神经行为及血管内皮因子(VEGF)表达的影响。方法采用线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型,将24只造模成功的SD大鼠随机分为模型组及银杏叶提取物低、中、高剂量组,每组6只,另选取正常大鼠6只作为假手术组。银杏叶提取物低、中、高剂量组分别给予银杏叶提取物注射液0.9,1.8,2.7 m L/100 g灌胃,假手术组及模型组给予1.8 m L/100 g生理盐水灌胃,均1次/d,连续14 d。通过平衡木实验评价大鼠的神经行为学改变,HE染色观察大鼠脑组织形态学变化,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫组织化学法检测大鼠脑内VEGF mRNA以及蛋白的表达情况。结果灌胃7 d和14 d后,银杏叶提取物低、中、高剂量组的平横木实验测试评分均明显高于模型组(P均<0.05),且银杏叶提取物中剂量组明显高于低剂量组和高剂量组(P均<0.05);HE染色显示银杏叶提取物能改变脑组织缺血区的组织形态;模型组VEGF mRNA及蛋白表达量均明显高于假手术组(P均<0.05),银杏叶提取物低、中、高剂量组VEGF mRNA及蛋白表达量均明显高于模型组(P均<0.05),且银杏叶提取物中剂量组VEGF mRNA及蛋白表达量均明显高于低剂量组和高剂量组(P均<0.05)。结论银杏叶提取物能够改善局灶性脑缺血大鼠的神经功能,可能与上调大鼠脑组织中VEGF mRNA及蛋白的表达有关;银杏叶提取物对缺血性脑损伤的改善程度与给药剂量有关。     

丹参酚酸A对脑缺血大鼠神经功能及热休克蛋白基因表达的影响

目的:探讨丹参酚酸A对脑缺血大鼠神经功能及热休克蛋白基因表达的影响,为其脑保护机制研究提供参考。方法:选用80只健康成年雄性SD大鼠作为研究对象,通过线栓法对动脉缺血再灌注损伤模型进行制备,并采用随机数字表法将其分为假手术组、模型组、低剂量组和高剂量组,每组各20只。比较各组大鼠实验后24 h脑梗死体积和实验72 h后胶质源性神经营养因子(GDNF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化物歧化酶(SOD)水平,分析实验24、48、72 h后神经行为学评分变化。在再灌注24、48、72 h后取大鼠脑组织,采用免疫组织化学染色和原位杂交法对大鼠脑组织HSP70蛋白和HSP70 mRNA水平进行测定。结果:低剂量组、高剂量组大鼠脑梗死面积均低于模型组,且高剂量组脑梗死体积明显更低。实验24、48、72 h后,低剂量组、高剂量组大鼠神经行为学评分均低于模型组,且高剂量组神经行为学评分明显更低。模型组、低剂量组、高剂量组大鼠脑组织BDNF、GDNF、MDA水平均明显高于假手术组,SOD、GSH-Px水平明显低于假手术组; 且模型组、低剂量组、高剂量组脑组织大鼠BDNF、GDNF、SOD、GSH-Px水平呈现升高的趋势,MDA水平呈现降低趋势。实验24、48、72 h后,模型组、低剂量组、高剂量组大鼠缺血皮层内HSP70 mRNA阳性细胞计数、HSP70蛋白表达OD值均明显高于假手术组,且模型组、低剂量组、高剂量组缺血皮层内HSP70 mRNA阳性细胞计数、HSP70蛋白表达OD值呈现升高的趋势,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:丹参酚酸A可以有效地对脑缺血再灌注损伤大鼠的自由基进行清除,减少梗死面积,增加HSP70蛋白基因的表达,具有较好的缺血脑保护作用。     

通络益脑方对急性局灶性脑缺血模型大鼠炎症因子及脑细胞自噬相关蛋白的影响

目的观察通络益脑方对急性局灶性脑缺血模型大鼠脑组织病理学、炎症因子及脑细胞自噬相关蛋白的影响。方法将50只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性组和试验组(低剂量和高剂量),每组10只。模型组,高、低剂量组和尼莫地平组采用开颅结扎法制备急性局灶性脑缺血大鼠模型,假手术组和模型组给予0.9%氯化钠注射液灌胃,尼莫地平组给予尼莫地平灌胃,高、低剂量组给予通络益脑方灌胃,3周后评估各组大鼠的神经功能评分、神经行为学评分,比较脑梗死体积和神经细胞凋亡。ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)、白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)炎症因子水平以及ICAM-1水平,RT-PCR检测PI3K、Akt、Beclin-1以及Bcl-2蛋白相对表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠的神经功能评分、神经行为学评分、脑梗死体积、神经细胞凋亡、ICAM-1水平、TNF-α、IL-1β、IL-2以及IL-6水平、PI3K、Akt、Beclin-1以及Bcl-2水平明显高于其余3组(P 0.05)。给药后,尼莫地平组和高、低剂量组大鼠的神经功能评分和神经行为学评分、脑梗死体积、神经细胞凋亡、ICAM-1水平、炎症因子水平以及自噬相关蛋白水平明显低于模型组(P 0.05),低剂量组与高剂量组以及尼莫地平组比较均有显著性差异(P 0.05),高剂量组与尼莫地平组比较无显著性差异(P 0.05)。结论通络益脑方对急性局灶性脑缺血大鼠脑组织有较好的保护作用,可减少其脑梗死面积,保护脑组织免受炎症因子的损伤,增加自噬相关蛋白水平,减少神经细胞的凋亡,激活脑细胞自我保护。     

化浊解毒活血通络方通过调控核因子E2相关因子2/Kelch 样环氧氯丙烷相关蛋白-1通路发挥对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织抗氧化作用的机制研究

目的 观察化浊解毒活血通络方通过调控核因子E2相关因子2(Nrf2)/Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)通路对脑缺血再灌注损伤大鼠的抗氧化作用,探讨其可能的神经保护机制。方法 将80只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组及化浊解毒活血通络方高、低剂量组,每组16只。除假手术组外,其余组采用Longa法制备大脑中动脉闭塞模型大鼠。造模成功后,化浊解毒活血通络方高、低剂量组给分别予化浊解毒活血通络方25、6.25 g/(kg·d)灌胃,尼莫地平组予尼莫地平混悬液9.375 mg/(kg·d)灌胃,模型组及假手术组均予等容积0.9%氯化钠注射液灌胃。灌胃3 d后比较各组大鼠改良神经功能缺损评分(mNSS),评分后处死取脑,2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色比较各组大鼠脑梗死体积;制作苏木精-伊红(HE)染色切片观察脑组织病理变化;干湿法测量脑组织含水量;检测脑组织丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性;蛋白免疫印迹法检测脑组织Nrf2、Keap1蛋白表达量;逆转录聚合酶链式反应检测脑组织Nrf2、Keap1基因表达。结果 与...     

血府逐瘀汤调控p38MAPK信号通路改善高血压性脑出血大鼠神经功能研究

目的:探讨血府逐瘀汤对高血压性脑出血大鼠神经功能的改善作用及对其p38MAPK信号通路的调控机制。方法:取8只WKY大鼠和48只SHR大鼠,前者记为假手术1组,从后者中随机取8只记为假手术2组,剩余40只均在收缩压≥21.3 kPa时以胶原酶+肝素尾状核注射法制备模型,而假手术2组注射生理盐水其余均同法操作。将模型制备成功的大鼠随机分为模型组、阳性药组、血府逐瘀汤低、中、高剂量组。阳性药组给予安宫牛黄丸25 mg/kg灌胃,血府逐瘀汤低、中、高剂量组分别给予血府逐瘀汤5、10、20 mg/kg灌胃,模型组、假手术1和2组分别给予等量生理盐水灌胃,均干预1周。对比干预前后各组大鼠血肿体积、行为学、神经功能变化,观察出血脑组织病理改变,检测各组出血脑组织p38MAPK蛋白表达,计算p-p38MAPK/p38MAPK。结果:与假手术1组比较,假手术2组向左扭转比率、Berderson、Rosenberg评分、脑组织病理改变、p38MAPK、pp38MAPK/p38MAPK均无明显变化。与模型组比较,阳性药组、血府逐瘀汤低、中、高剂量组血肿体积、向左扭转比率、Berderson评分、Rosenberg评分均下降,脑组织病理均减轻,p-p38MAPK/p38MAPK均升高。与阳性药组比较,血府逐瘀汤低剂量组血肿体积、向左扭转比率、Berderson评分、Rosenberg评分均升高,脑组织病理加重,p-p38MAPK/p38MAPK下降;血府逐瘀汤中剂量组和高剂量组血肿体积、向左扭转比率、Berderson评分、Rosenberg评分均下降,脑组织病理均减轻,p-p38MAPK/p38MAPK均升高。结论:血府逐瘀汤中、高剂量能减少高血压性脑出血大鼠的血肿体积,改善行为学和神经功能,减轻病理损伤,推测与上调p38MAPK蛋白的磷酸化水平有关。     

百事乐加味方对脑卒中后抑郁模型大鼠海马-前额叶皮层神经细胞凋亡蛋白的影响

目的观察百事乐加味方对脑卒中后抑郁(PSD)大鼠神经功能、形态学及海马(HP)、前额叶皮层(PFC)组织Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的影响,从神经细胞凋亡方面探讨百事乐加味方防治PSD作用机制。方法采用MCAO+CUMS+孤养法复合因素建立PSD模型。分组前进行行为学评分,随机分为假手术组、抑郁组、卒中组、PSD组、阳性药组和百事乐加味方高、低剂量组,各给药组给予相应药物,连续28 d。采用HE和Nissl染色观察HP、PFC组织形态学;采用免疫组化检测大鼠HP、PFC组织Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达。结果对神经功能缺损评分的影响:与PSD组大鼠比较,百事乐加味方高、低剂量组第21、28日神经功能缺损评分显著改善(P0.05,P0.01);对HP、PFC组织形态学的影响:与PSD组比较,百事乐加味方高、低剂量组大鼠病变明显改善。对凋亡蛋白的影响:百事乐加味方高剂量组大鼠HP、PFC组织Bax、Caspase-3蛋白表达显著降低,Bcl-2蛋白表达显著升高,Bcl-2/Bax比值显著增大(P0.01);百事乐加味方低剂量组大鼠HP、PFC组织Bcl-2蛋白表达显著升高,Caspase-3蛋白表达显著降低,HP组织Bax蛋白表达显著降低,Bcl-2/Bax比值显著增大(P0.05,P0.01)。结论百事乐加味方通过调控凋亡蛋白表达,抑制细胞凋亡,减少神经病变,改善神经功能,从而发挥治疗作用,是其抗PSD主要作用机制之一。     

抵当汤对高血压脑出血模型大鼠低氧诱导因子-1α的影响

目的:探讨抵当汤对高血压脑出血模型大鼠脑组织低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响。方法:将健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、抵当汤低剂量组、中剂量组、高剂量组,采用腹腔注射垂体后叶注射液复制大鼠高血压模型,脑内注射自体血复制脑出血模型,给予低、中、高(3.78,7.56,15.12 g.kg-1)3个剂量的抵当汤灌胃,治疗7 d,分别用免疫组织化学法、蛋白免疫印迹法、聚合酶联反应法检测大鼠脑组织HIF-1α的表达。结果:抵当汤各治疗组HIF-1α阳性细胞、HIF-1α蛋白、HIF-1αmRNA表达均显著高于模型组(P<0.05),其中低剂量组尤为明显。结论:抵当汤药理作用与上调大鼠脑组织HIF-1α表达密切相关。     

黄连总生物碱通过调控CaMKII减轻局灶性脑缺血(MCAO)大鼠神经功能损伤的研究

目的:研究黄连总生物碱调节钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKII)对局灶性脑缺血(MCAO)大鼠神经功能损伤后的影响。方法:随机将50只雄性SD大鼠分为假手术组、对照组、黄连总生物碱(高浓度、中浓度和低浓度)治疗组，采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血(MCAO)模型，假手术组不给予线栓处理，术后对大鼠进行神经功能评分。各治疗组给予黄连总生物碱灌胃治疗，按照人与大鼠等效剂量关系折算，假手术组用等量生理盐水灌胃；用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠脑组织中CaMKII的含量；采用BCA法和WST-1法分别测超氧化物歧化酶(SOD)的活力和丙二醛(MDA)的含量；制备脑组织病理切片，HE染色观察脑组织形态学变化。结果:与假手组相比，模型组评分和脑梗死体积明显升高，各个实验组经过黄连治疗后神经功能评分和脑梗死体积都有明显降低(P<0.05)。模型组与假手术组的CaMKII的含量相比明显升高(P<0.01)。与假手术组比较，模型组大鼠脑组织损伤程度加重，外周血氧化因子SOD活性降低，MDA含量升高；黄连治疗后，低、中、高剂量组SOD水平升高，MDA水平降低。HE染色观察脑组织病变程度，给...