内质网应激在维生素E琥珀酸酯诱导的胃癌细胞凋亡和自噬中作用的研究

目的 明确内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)在维生素E琥珀酸酯(vitamin E succinate, VES)激活人胃癌MKN28细胞自噬和凋亡中发挥的作用。方法 体外培养人胃癌MKN28细胞,不同剂量(5,10,15,20μg/ml)VES处理细胞24小时后,Western blot检测ERS标志物GRP78,自噬标志物LC3、Beclin-1,凋亡相关蛋白Caspase-3和ERS凋亡通路关键信号分子CHOP的表达情况,流式细胞仪检测不同剂量组凋亡率。选择ERS抑制剂4-苯基丁酸(4-phenylbutyric acid, 4-PBA),ERS激活剂衣霉素(Tunicamycin, TM)自噬激活剂雷帕霉素(Rapamycin, RAPA),设置对照组、4-PBA组(3 mmol/L)、TM组(5μg/ml)、VES组(20μg/ml)、VES+4-PBA组、RAPA组(100 nmol/L),检测GRP78、LC3、Beclin-1、Caspase-3和CHOP蛋白的表达情况,同时检测不同组细胞凋亡率或在电子显微镜下观察自噬体形态...     

维生素E琥珀酸酯诱导胃癌细胞自噬对细胞抗氧化功能的影响

目的 探讨维生素E琥珀酸酯(VES)处理人胃癌SGC-7901细胞过程中自噬对细胞抗氧化功能的影响。方法 不同剂量(0、5、10、15、20μg/ml) VES处理人胃癌SGC-7901细胞24h,Western blot检测自噬标志蛋白LC3和Beclin-1的表达情况,Real-time PCR检测细胞内抗氧化酶SOD、CAT和GPX mRNA的表达情况,ELISA检测GSH水平;RNA瞬时干扰阻断自噬关键基因BECN-1基因的表达后,以20μg/ml VES处理人胃癌SGC-7901细胞24h,Real-time PCR检测抗氧化酶SOD、CAT和GPX mRNA的表达情况,ELISA检测GSH水平。结果 与对照组相比,随着VES作用剂量的增加,Beclin-1蛋白表达逐渐增高,可观察到LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ转化增加;Real-time PCR检测显示SOD、CAT和GPX等抗氧化酶的mRNA表达减少,ELISA显示细胞内GSH水平降低。阻断自噬关键基因BECN-1基因后,SOD、CAT和GPX等抗氧化酶的mRNA表达进一步减少(P<0.05),ELISA显示GSH水平进一...     

孕哺期及断乳后氯化镧暴露对子代大鼠大脑皮质GRP表达和PERK及IRE1磷酸化的影响

目的观察氯化镧(lanthanum chloride,LaCl_3)对大鼠大脑皮质细胞凋亡、葡萄糖调节蛋白(glucose regulated protein,GRP)表达、PKR样内质网激酶(PKR-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)和肌醇需求酶1(inositol requiring enzyme 1,IRE1)磷酸化的影响,研究LaCl_3对大脑皮质产生损害效应的机制。方法 32只成年雌性Wistar大鼠随机分为对照组、2.5、5和10 g/L LaCl_3组,2.5、5和10 g/L LaCl_3组妊娠大鼠从受孕起分别饮用2.5、5和10 g/L LaCl_3蒸馏水溶液,对照组妊娠大鼠从受孕起饮用蒸馏水。LaCl_3组子代大鼠断乳前经母鼠胎盘和母乳染镧,断乳后饮用2.5、5和10 g/L LaCl_3蒸馏水溶液1个月。取子代大鼠大脑皮质,以尼氏染色法检测大脑皮质神经细胞尼氏体表达水平,以流式细胞仪法测定大脑皮质神经细胞凋亡率,采用Western blot法检测大脑皮质GRP78、GRP94、PERK、IRE1、磷酸化的PERK(pPERK)和IRE1(pIRE1)及分别受PERK和IRE1调控的生长迟滞和DNA损伤诱导蛋白(growth arrest and DNA damage inducible protein,GADD)153和JUN氨基端激酶(JUN NH2-terminal kinase,JNK)的表达水平。结果各LaCl_3组子代大鼠大脑皮质神经细胞尼氏体表达水平低于对照组(P0.05),而细胞凋亡率高于对照组(P0.05),且均具有一定的剂量-效应关系。2.5 g/L LaCl_3组子代大鼠大脑皮质GRP78、GRP94、pPERK、pIRE1、GADD153和pJNK表达水平高于对照组(P0.05),5 g/L LaCl_3组子代大鼠大脑皮质GRP78、GRP94、pPERK、pIRE1、和GADD153表达水平高于对照和2.5 g/L LaCl_3组(P0.05),10g/L LaCl_3组子代大鼠大脑皮质GRP78、GRP94、pPERK、pIRE1、GADD153和pJNK表达水平高于对照、2.5 g/L和5 g/L LaCl_3组(P0.05)。结论 LaCl_3对大鼠大脑皮质的毒性效应机制可能涉及GRP78和GRP94表达上调、PERK和IRE1磷酸化水平升高所致凋亡增多。     

Bcl-2家族蛋白在维生素E琥珀酸酯诱导人胃癌细胞凋亡中的作用

目的:研究Bcl-2家族蛋白在维生素E琥珀酸酯(RRR-α-tocopheryl succinate,α-TOS;vitamin E succinate,VES)诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡线粒体途径中的作用。方法:采用噻唑蓝(MTT)法测定VES对SGC-7901细胞的半数抑制浓度(IC50值);吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色观察细胞凋亡;Mito Tracker Red CMXRos染色观察线粒体膜电位(ΔΨm)的改变;Western Blot法检测不同剂量VES对人胃癌SGC-7901细胞Bid、Bax、Bcl-2蛋白表达和细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)蛋白表达与定位的影响。结果:VES对SGC-7901细胞的IC50值为101.45μg/ml;VES可引起SGC-7901细胞发生凋亡和线粒体膜电位下降;并引起Cyt C蛋白在细胞内重新定位、Bid蛋白剪切活化、Bax蛋白表达增加和Bcl-2蛋白表达减少。结论:VES可抑制SGC-7901细胞的生长,并通过线粒体途径诱导凋亡,其机制可能是通过剪切活化Bid蛋白、上调Bax/Bcl-2相对水平来实现的。     

芒果苷对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡影响

目的探讨芒果苷对肌醇依赖酶1介导的糖尿病大鼠心肌细胞凋亡影响。方法健康雄性SD大鼠50只,随机分为对照组,糖尿病组,芒果苷低、中、高剂量组(15、30、60 mg/kg),灌胃12周,糖尿病组与芒果苷组大鼠给予链脲佐菌素45 mg/kg建立糖尿病模型;测定大鼠血糖,心功能;用原位末端转移酶标记技术检测心肌细胞凋亡;免疫组织化学法检测肌醇依赖酶1(IRE1)、凋亡信号调节激酶1(ASK1)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)表达。结果与对照组比较,糖尿病组大鼠血糖[(25.52±2.82)mmol/L]明显升高(P<0.01),左心室收缩压、左室内压最大上升和下降速率均明显降低,左室舒张末压明显升高(P<0.01),心肌细胞凋亡率[(25.63±1.41)%]增加(P<0.01),心肌细胞IRE1、ASK1、JNK蛋白表达明显增强(P<0.01);与糖尿病组比较,高剂量芒果苷组大鼠血糖[(12.04±1.86)mmol/L]降低,心肌细胞凋亡率[(13.22±1.71)%]下降(P<0.01),心功能明显改善,心肌细胞IRE1、ASKl、JNK蛋白表达均明显下调(P<0.01)。结论芒果苷可抑制糖尿病大鼠心肌细胞凋亡,其机制可能与下调血糖、内质网应激中IRE1介导的JNK信号通路表达有关。     

IRE1通路在高碘诱导甲状腺细胞凋亡中的作用

目的 观察IRE1通路在高碘诱导甲状腺细胞凋亡中的特征,进一步分析高碘诱导甲状腺细胞凋亡的作用机制.方法 用0(对照)、1、10、50 mmol/L的碘化钾(KI)染毒体外培养的Nthy-ori 3-1细胞,24h后采用流式细胞术检测Nthy-ori 3-1细胞凋亡率,用荧光定量PCR及Western blot检测葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)、肌醇需求酶-1(IRE1)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)基因蛋白的表达水平.结果 与0(对照)、l、10 mmol/L KI染毒组相比,50 mmol/L KI染毒组细胞凋亡率升高(P＜0.05);与对照组相比,各染毒组GRP78、IRE1 mRNA表达水平均无统计学差异(P＞0.05),CHOP mRNA表达水平升高(P＜0.05),GRP78、IRE1和CHOP蛋白表达差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 内质网应激中IRE1通路可能没有参与高碘诱导的Nthy-ori 3-1细胞凋亡过程.     

诱导胃癌细胞凋亡中天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶的表达

目的　研究天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶 (caspase 8)在维生素E琥珀酸酯 (VES)诱导胃癌细胞凋亡过程中的作用。方法　以人胃癌SGC 790 1细胞作为靶细胞 ,采用WesternBlot法、荧光分光光度法、DAPI染色法探讨caspase 8在VES诱导SGC 790 1细胞凋亡过程中的表达和活性。结果　经 5、10、2 0mg/LVES处理后 ,细胞中caspase 8蛋白表达增加 ,caspase 8活性分别为 ( 17 83±1 82 )U和 ( 33 74± 2 6 5 )U、( 5 2 34± 3 10 )U ,均呈剂量 效应关系 ;用caspase 8抑制剂z 异亮氨酸 谷氨酸 苏氨酸 天冬氨酸 (IETD fmk)处理SGC 790 1细胞后 ,降低了VES诱导的细胞凋亡率及caspase 8的活性。结论　caspase 8是VES诱导SGC 790 1细胞凋亡的重要参与者。     

维生素E琥珀酸脂对顺铂致人胚肾细胞毒性的保护作用

目的研究维生素E琥珀酸脂(Vitamin E succinate,VES)对顺铂(cis-diamminedichloroplatinum,CDDP)所致人胚肾293(HEK293)细胞毒性的保护作用。方法体外培养人胚肾293细胞(HEK293),设空白对照组、VES(20μg/ml)对照组、CDDP(25μg/ml)单独染毒组以及低剂量CDDP(25μg/ml)+VES(5μg/ml)联合处理组、中剂量CDDP(25μg/ml)+VES(10μg/ml)联合处理组、高剂量CDDP(25μg/ml)+VES(20μg/ml)联合处理组,染毒12 h。采用MTT法观察细胞增殖效应,测定细胞还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量和细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活力,采用荧光法检测DNA链间的交联情况。结果与CDDP单独染毒组比较,各剂量CDDP+VES联合处理组HEK293细胞的存活率均升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。VES能明显抑制CDDP所致HEK293细胞MDA含量和细胞培养液中LDH活力的升高,并能提高细胞GSH的含量(P<0.05,P<0.01)。高剂量CDDP+VES联合处理组HEK293细胞的交联率低于CDDP单独染毒组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 VES能抑制CDDP所致HEK293细胞的细胞毒性,其机制可能与VES的抗氧化作用和对DNA损伤的防护作用有关。     

VES抑制Raji细胞增殖中对CDK2和Bcl-2/Bax蛋白表达的影响

目的比较观察维生素E琥珀酸酯(VES)和维生素E(VE)对人单核细胞白血病Raji细胞的抗增殖作用及对细胞周期素依赖性激酶2(CDK2),细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的影响.方法应用荧光显微镜、流式细胞仪、免疫细胞化学染色等技术方法,体外观察VES和VE对Raji细胞的作用.结果 VES和VE对Raji细胞均有程度不一的生长抑制作用,20μg/mlVES对Raji细胞的生长抑制在72h即达100%,而20μg/mlVE的抑制率仅与5μg/mlVES的接近.VES较强的生长抑制作用与诱发细胞凋亡的明显增加同步发生,具有剂量效应和时间效应关系,同时VES作用后,细胞内CDK2蛋白,Bcl-2蛋白表达下降,Bax蛋白表达增加.结论 VES通过影响细胞周期调控因子CDK2,细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达可能是其抗肿瘤的途径之一.     

c-Jun N-末端激酶在维生素E琥珀酸酯诱导人胃癌细胞凋亡中的作用

c-Jun N-末端激酶(c-Jun N-terminal kinase，JNK)属于丝裂素活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases，MAPK)家族成员，多种细胞外应激信号可使其磷酸化而活化，在细胞应激反应中起重要作用。我们通过研究维生素E琥珀酸酯(vitamin E succinate，VES)对人胃癌SGC-7901细胞中JNKMAPK表达的影响，探讨该途径在VES诱导SGC-7901细胞凋亡中的作用。     

维生素E琥珀酸酯增加阿霉素在人胃癌细胞中的蓄积

目的 研究维生素E琥珀酸酯(vitamin E succinate,VES)对阿霉素(doxorubicin,DOXO)在人胃癌细胞中蓄积量的影响.方法 使用VES与DOXO单独或联合作用于人胃癌细胞株SGC-7901,收集含0.1％乙醇培养液,和用10 μmol/L VES,1.5 μmol/L DOXO,10μmol/L VES+1.5 μmol/L DOXO处理24 h后的细胞,将含0.1％乙醇培养液的溶剂对照组和10μmol/L VES处理组细胞混合作为对照;采用肉眼观察法,流式细胞仪法,高效液相色谱法分别检测DOXO在人胃癌细胞中的蓄积情况.结果 肉眼观察可见对照组细胞沉淀为白色,1.5 μmol/LDOXO处理24 h后,细胞沉淀呈浅红色,VES与DOXO联合作用后,细胞沉淀量深红色.联合用药组细胞荧光强度明显高于DOXO单独处理组.VES与DOXO联合作用后,DOXO在人胃癌细胞中的蓄积相比DOXO单独作用时增加( P＜0.001).结论 VES可增加DOXO在人胃癌细胞内的蓄积.     

高碘和/或高氟致人甲状腺细胞凋亡与内质网应激的关系

目的研究内质网应激在高碘和/或高氟致人甲状腺细胞(Nthy-ori 3-1)凋亡中的作用,探索高碘和/或高氟致甲状腺细胞凋亡的机制。方法用碘化钾(KI)1、10、50mmol/L,氟化钠(NaF)1mmol/L及高碘高氟联合(50mmol/L KI+1mmol/L NaF)作用于人甲状腺细胞(Nthy-ori 3-1)24h,利用噻唑蓝(MTT)法、比色法检测细胞活性和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,利用流式细胞术检测细胞凋亡率,利用逆转录PCR法、Western blot法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、肌醇需要酶(IRE1)和C/EBP同源蛋白(CHOP)的mRNA和蛋白及切割的X盒结合蛋白(sXBP-1)mRNA表达情况。结果 50mmol/L KI组、1mmol/L NaF组及50 mmol/L KI+1 mmol/L NaF组细胞活性[(73.54±8.37)%、(84.54±7.55)%、(72.62±7.15)%]低于对照组细胞活性[(100.00±0.00)%](P0.05),LDH漏出率[(38.00±2.04)%、(36.43±0.82)%、(38.73±1.36)%]高于对照组[(32.86±2.32)%](P0.05),凋亡率[(15.53±1.26)%、(12.42±2.05)%、(16.42±1.35)%]也高于对照组[(7.87±1.40)%](P0.05)。高氟和高碘高氟联合可诱导GRP78、IRE1和CHOP的mRNA和蛋白及sXBP-1mRNA表达上升(P0.05)。结论高碘和/或高氟可通过诱导细胞凋亡对甲状腺细胞造成毒性作用,高碘诱导的凋亡可能与IRE1途径无关,但高氟、高碘高氟联合诱导的甲状腺细胞凋亡可能与IRE1途径有关。高碘高氟共存作用于甲状腺时存在拮抗效应。     

营养

032 4 41　FADD在VES诱导人胃腺癌细胞凋亡中的作用 /李　…∥中国公共卫生 2 0 0 2 ,18( 4) 4 14～ 4 16了解带有死亡结构域的Fas相关蛋白 (FADD)在维生素E琥珀酸酯 (VES)诱导胃腺癌细胞凋亡过程中的作用。以人胃腺癌SGC_790 1细胞作为靶细胞 ,采用WesternBlot法、Lipofect转染法、DAPI染色法探讨FADD在VES诱导SGC_790 1细胞凋亡过程中的作用。结果 ,经不同剂量VES处理后 ,SGC_790 1细胞中FADD蛋白表达增加 ,呈剂量_效应关系 ;该细胞经FADD反义寡核苷酸转染与正义寡核苷酸转染相比 ,VES处理的细胞中FADD蛋白…     

PI3K/AKT/mTOR和MAPK/ERK信号通路在胃癌细胞中的相互作用机制

目的探讨磷脂酰肌醇3–激酶/蛋白激酶B/哺乳动物靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)、丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)两条信号通路对胃癌细胞功能的影响及相互作用机制。方法使用PI3K抑制剂LY294002、mTOR抑制剂AZD8055、MEK抑制剂AZD6244单独或联合作用于胃癌MGC-803细胞。应用CCK8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期;蛋白印迹法(Western blot)检测通路关键蛋白的表达。结果联合使用LY294002(25μmol/L)与AZD6244(125μmol/L)、AZD8055(0.1μmol/L)与AZD6244(125μmol/L)能够显著抑制胃癌MGC-803细胞的增殖活性,且联用组比单独作用组具有更强的抑制效果(P 0.05);联用组诱导细胞凋亡数量和阻滞于G0/G1期的MGC-803细胞数量增多,高于单独作用组(P 0.05)。与LY294002、AZD8055和AZD6244单独作用相比,LY294002与AZD6244、AZD8055与AZD6244联用组MGC803细胞p-AKT、p-P70S6K和p-ERK1/2蛋白表达明显受到抑制(P 0.05)。结论 PI3K/AKT/mTOR和MAPK/ERK两条信号通路在胃癌MGC-803细胞的生长中具有协同调控作用,对于两条信号通路的多靶点抑制能够更加明显的抑制癌细胞生长。     

炭黑颗粒对人支气管上皮细胞自噬水平及炎症反应的影响

目的探讨炭黑颗粒对人支气管上皮细胞(16HBE)自噬水平及炎症反应的影响。方法体外培养16HBE细胞,分为0μg/ml(空白对照组)及12.5、25、50、100μg/ml炭黑颗粒染毒组,染毒时间24 h。采用CCK-8法检测细胞存活率,Western blot法测定细胞内自噬体蛋白LC3-Ⅱ的表达水平,酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞上清液中细胞因子白介素8(IL-8)、白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6(IL-6)的含量。结果人支气管上皮细胞16HBE经12.5、25、50、100μg/ml炭黑颗粒悬液染毒24 h后,细胞存活率均低于空白对照组,且随浓度增加细胞存活率逐渐下降,呈明显的剂量-反应关系;各剂量染毒组16HBE细胞的自噬体蛋白LC3-Ⅱ表达水平均升高,其中100μg/ml组LC3-Ⅱ蛋白表达高于空白对照组,差异有统计学意义(P0.05);25、50、100μg/ml染毒组的细胞上清液中IL-8含量高于空白对照组,100μg/ml染毒组的IL-1β含量高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论炭黑颗粒可导致人支气管上皮细胞内自噬体蛋白LC3-Ⅱ表达水平增加,诱导细胞释放高水平的IL-8、IL-1β等炎性细胞因子。     

维生素E琥珀酸酯诱导人胃腺癌细胞凋亡途径

目的　探讨维生素E琥珀酸酯 (VES)诱导人胃腺癌SGC -790 1细胞凋亡的死亡受体 (Fas)信号转导途径。方法　人胃腺癌SGC -790 1细胞经不同剂量VES(5,10 ,2 0 μg/ml)处理 ,同时做琥珀酸、维生素E和空白对照 ,采用DAPI(4,6-贰脒基 -2 -苯基吲哚 )荧光染色法观察细胞凋亡情况 ,用WesternBlot法检测Fas、带有死亡结构域的Fas相关蛋白 (FADD)和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶 (caspase -8)蛋白表达情况 ,Fas和FADD反义寡聚核苷分别转染SGC -790 1细胞后 ,用荧光法检测caspase -8活性。 结果　经VES处理后的细胞DAPI染色可见凋亡的形态学改变 ,2 0 μg/mlVES处理 48h后的细胞凋亡率为 89.6% ;VES处理 48h后Fas、FADD和caspase -8蛋白表达明显增加 ,且呈剂量 -效应关系 ;阻断Fas可明显抑制FADD蛋白表达 ,Fas和FADD反义寡聚核苷转染细胞后caspase -8活性明显降低 (P <0 .0 1) ,其中阻断Fas的效果高于阻断FADD。结论　维生素E琥珀酸酯诱导人胃腺癌SGC -790 1细胞凋亡过程中启动了Fas信号转导途径 ,VES启动Fas后 ,FADD将Fas和caspase -8联接起来 ,活化caspases级联反应 ,从而构成Fas/FADD/caspase -8的凋亡信号途径     

苯代谢物氢醌促进人T细胞白血病细胞自噬的研究

目的探讨苯代谢物氢醌(hydroquinone,HQ)对人T细胞白血病细胞株(Jurkat细胞)自噬水平的影响及其作用机制。方法取对数生长期的Jurkat细胞,分别暴露于含终浓度为0(对照)、6.25、12.5、25、50μmol/L HQ的培养基处理24 h。采用单丹黄酰尸胺(MDC)染色法检测Jurkat细胞内自噬囊泡的生成;通过透射电子显微镜观察Jurkat细胞内自噬体的超微结构;采用Western blot法检测自噬标志性蛋白微管相关蛋白1A/1B轻链3B(LC3B)、P62蛋白及经典的自噬调节通路磷脂酰肌醇3激酶/丝苏氨酸蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路中人第10号染色体缺失的磷酸酶与张力蛋白同源等位基因(PTEN)、Akt与磷酸化Akt(p-Akt)蛋白的表达情况。结果 Jurkat细胞内MDC荧光强度随着HQ浓度的升高而增强,在胞浆中呈点状分布。HQ染毒组Jurkat细胞出现较多的双层膜自噬体结构,伴有线粒体明显肿胀,内质网扩张等超微结构的改变。与对照组比较,各剂量HQ染毒组Jurkat细胞内LC3B-Ⅰ、LC3B-Ⅱ蛋白的表达水平及6.25、12.5μmol/L HQ染毒组Jurkat细胞内P62蛋白的表达水平均较高,差异均有统计学意义(P0.05);且随着HQ染毒浓度的升高,Jurkat细胞内LC3B-Ⅰ、LC3B-Ⅱ蛋白的表达水平均呈上升趋势,而P62蛋白的表达水平呈先上升后下降的趋势。与对照组比较,12.5、25、50μmol/L HQ染毒组Jurkat细胞内PTEN蛋白的表达水平均较高,而各剂量HQ染毒组Jurkat细胞内p-Akt蛋白的表达水平均较低,差异均有统计学意义(P0.05);但各剂量HQ染毒组Jurkat细胞内Akt蛋白的表达水平均无明显改变(P0.05)。且随着HQ染毒浓度的升高,Jurkat细胞内PTEN蛋白的表达水平呈上升趋势,p-Akt蛋白的表达水平呈下降趋势。结论 HQ可促进Jurkat细胞内自噬水平的增加,其作用机制可能与PI3K/Akt信号通路被抑制有关。     

α-突触核蛋白在锰诱导神经细胞内质网应激中的作用

目的探讨α-突触核蛋白(α-Syn)在锰诱导神经细胞内质网应激中的作用。方法将野生型和α-Syn基因敲除(α-Syn~(-/-))型C57小鼠各24只,均随机分成4组(每组6只),即对照组(腹腔注射0.9%氯化钠)和低、中、高剂量染锰组(分别腹腔注射50、100和200μmol/kg氯化锰),注射容量为5 ml/kg,每周5次,共4周。而后处死小鼠,切取脑纹状体组织,检测锰含量、细胞凋亡率以及内质网应激和细胞凋亡相关信号分子表达情况。结果随着锰暴露剂量的增加,野生型和α-Syn~(-/-)型小鼠纹状体锰含量及细胞凋亡率均不断升高;高剂量染锰组α-Syn~(-/-)型小鼠细胞凋亡率明显高于野生型小鼠;与对照组比较,中、高剂量染锰组野生型小鼠PERK和eIF2α的磷酸化水平均明显升高,ATF4基因和蛋白表达均明显升高,IRE1磷酸化水平明显升高;中、高剂量染锰组,α-Syn~(-/-)型小鼠PERK和eIF2α蛋白表达升高,而磷酸化水平相对下降,IRE1磷酸化水平明显升高;高剂量组的总XBP-1及割裂的XBP-1基因表达升高,ATF6蛋白表达升高,野生型和α-Syn~(-/-)型小鼠CHOP和割裂的Caspase12蛋白表达均明显高于对照组,细胞凋亡率、IRE1磷酸化水平、CHOP和割裂的Caspase12蛋白表达则均明显高于野生型。结论α-Syn与锰诱导内质网应激PERK-eIF2α信号通路的活化有关,而且α-Syn对锰诱导的细胞凋亡在一定程度上有保护作用。     

维生素E琥珀酸酯对荷瘤小鼠相关免疫功能的影响

目的 探讨维生素E琥珀酸酯(VES)对荷瘤小鼠相关免疫功能的影响.方法 将人宫颈癌Hela细胞于裸鼠皮下接种,建立荷瘤小鼠模型.将24只雌性荷瘤小鼠随机分为溶剂对照组(CON)、低剂量处理组(VES40mg/kg)和高剂量处理组(VES 80mg/kg),每组8只,隔日腹腔注射入裸鼠体内、测量并观察各组荷瘤小鼠体重及生...     

1,25(OH)_2D_3调控内质网稳态改善自发性糖尿病大鼠心肌损伤

目的探讨1, 25(OH)_2D_3补充改善ZDF大鼠心肌损伤的潜在机制。方法健康雄性5～6 w龄Zucker瘦型鼠为正常对照组(C),胖型鼠按照体质量随机分为模型组(DM)、1, 25(OH)_2D_3低(DM+VD(L))、VD中(DM+VD(M))、高(DM+VD(H))剂量干预共4组。各组大鼠喂养至12 w龄,检测血糖血脂、心脏损伤及心肌细胞内质网应激相关指标。结果 DM组血脂、血糖显著升高,心肌出现严重损伤,内质网应激/未折叠蛋白反应标志蛋白GPR78显著降低,IRE1α-XBP1通路受阻;不同剂量1, 25(OH)_2D_3干预对ZDF大鼠血脂血糖及心肌损伤均有改善,其中、高剂量改善作用更为显著。1,25(OH)_2D_3低剂量干预未能显著改善ZDF大鼠未折叠蛋白反应的失活,1,25(OH)_2D_3中高剂量干预激活IRE1α-XBP1通路恢复内质网的稳态调节,中剂量的改善作用优于高剂量。结论适量的1,25(OH)_2D_3可通过IRE1α-XBP1通路调节内质网稳态,从而减轻糖尿病心肌损伤。[营养学报,2019,41(1):58-62]