吉西他滨联合热疗对胰腺癌ASPC-1细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及机制研究

目的:探讨吉西他滨(GEM)联合热疗对胰腺癌ASPC-1细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及可能的机制。方法:将ASPC-1细胞随机分为对照组(无任何处理)、GEM组(给予30μmol/L GEM)和热化疗组(给予热疗联合30μmol/L GEM)。采用MTT法检测细胞增殖及活力情况。采用划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。流式细胞仪检测细胞凋亡情况。采用Westerm blot和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测特异性蛋白1(Sp1)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、环氧合酶-2(COX-2)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)蛋白及mRNA表达情况。结果:30μmol/L GEM对ASPC-1细胞增殖有抑制作用，热化疗组抑制作用更明显(均P<0.05)。GEM前24 h给予43℃热疗1 h对细胞抑制作用更明显(均P<0.05)。与对照组比较，GEM组和热化疗组细胞迁移能力降低，且热化疗组降低更加明显(均P<0.05)。GEM组和热化疗组细胞侵袭能力较对照组降低，且热化疗组更明显(均P<0.05)。与对照组比较，GEM组和热化疗组细...     

HSP90抑制剂17-DMAG调控胰腺癌细胞PANC-1增殖及凋亡的初步研究

目的探讨热休克蛋白90(HSP90)功能特异性抑制剂17-DMAG对胰腺癌细胞PANC-1增殖与凋亡的影响。方法体外培养腺癌细胞PANC-1,17-DMAG处理PANC-1细胞后,CCK8法测定细胞生长曲线,观察细胞增殖的抑制情况,流式细胞仪测定细胞凋亡率的变化,Jc-l染色检测线粒体膜电位变化,RT-PCR法测定17-DMAG处理PANC-1细胞前后Bcl-2、Bax表达变化。结果 17-DMAG处理组24 h时D(490)值较对照组差异无统计学意义(P>0.05),48、72 h后较对照组D(490)值分别减少(18.3±2.4)%、(21.5±3.2)%,差异有统计学意义(P<0.05)。17-DMAG处理组48 h时较对照组能显著地抑制PANC-1细胞增殖(P<0.05),细胞凋亡率[(22.4±2.4)%]较对照组[(4.2±1.7)%]显著增加(P<0.05);线粒体电位显著降低(P<0.05)。RT-PCR结果显示,17-DMAG处理组抑制Bcl-2的表达,促进Bax的表达。结论 17-DMAG可抑制胰腺癌细胞PANC-1增殖并诱导其凋亡,该效应可能是通过调控凋亡相关蛋白Bcl-2家族成员的表达实现。     

伏立诺他抑制胰腺癌PANC-1细胞增殖及其血管生成拟态的相关研究

目的 研究伏立诺他(SAHA)对人胰腺癌PANC-1细胞体外增殖、迁移及其细胞凋亡的影响，观察SAHA对胰腺癌PANC-1细胞主导的血管生成拟态的作用以及对PANC-1细胞中基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)表达水平的影响。 方法 倒置显微镜下观察不同浓度的SAHA对PANC-1细胞增殖的作用。MTT比色法检测SAHA对PANC-1细胞的毒性作用。行细胞划痕试验观察SAHA对PANC-1细胞迁移的作用。流式细胞仪分析SAHA对胰腺癌PANC-1细胞凋亡的影响。利用细胞三维培养技术观察经SAHA诱导24 h后的胰腺癌PANC-1细胞体外类血管结构形成情况。Western blotting技术检测SAHA处理后的胰腺癌PANC-1细胞中MMP-2的表达水平。 结果 SAHA能显著抑制人胰腺癌PANC-1细胞的生长，且呈明显的剂量依赖性关系。与对照组相比，SAHA组均能抑制PANC-1细胞迁移(均P＜0.01)。SAHA可诱导人胰腺癌PANC-1细胞发生细胞凋亡。体外三维培养显示，SAHA组较对照组均能抑制PANC-1细胞主导的血管生成拟态(均P＜0.05)。随着SAHA浓度的递增，PANC-1细胞中MMP-2的表达水平呈现下降趋势(P＜0.05)。 结论 组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA能有效抑制人胰腺癌PANC-1细胞体外增殖、迁移并诱导其发生细胞凋亡，SAHA下调MMP-2的表达可能是SAHA抗胰腺癌血管生成拟态的机制之一。      

热疗联合柔红霉素对人急性髓细胞白血病KG1a细胞增殖抑制及凋亡的影响

目的观察热疗联合柔红霉素(DNR)对人急性髓细胞白血病细胞株KG1a体外增殖抑制和凋亡的影响。方法甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测DNR作用KG1a细胞48 h抑制50%的药物浓度(IC50),以此浓度为工作浓度,设对照组(正常培养)、热疗组(单纯加热)、化疗组(单纯DNR处理)和热化疗组(加热联合DNR处理),热疗和热化疗各设40℃、42℃、43℃3个温度组,热疗在恒温水浴箱中加热60 min;MTT法检测作用前后对KG1a细胞的抑制作用;甲基纤维素培养体系分析细胞克隆能力;流式细胞仪检测KG1a细胞凋亡率。结果热疗、化疗和热化疗均能抑制KG1a细胞增殖,热化疗组细胞抑制率明显高于化疗组及相同温度的热疗组,且抑制作用随温度的升高而增强(P<0.05);热疗组、化疗组和热化疗组细胞克隆形成率明显低于对照组(P<0.05),热化疗组克隆集体落形成率明显低于热疗组、化疗组(P<0.05);热疗组、化疗组和热化疗组的细胞凋亡率均较对照组显著升高(P<0.05),热化疗组与化疗组及相同温度热疗组相比细胞凋亡率均显著提高(P<0.05)。结论热疗联合DNR能增强对KG1a细胞的体外抑制作用,提高其凋亡率。     

去甲斑蝥素对人胰腺癌PANC-1 细胞凋亡作用的研究

目的 探讨去甲斑蝥素对人胰腺癌PANC-1细胞凋亡的作用及其机制。方法 将PANC-1 细胞株随机分为处理组 和对照组,处理组加入不同浓度的去甲斑蝥素培养24h后,CCK-8 法检测细胞增殖情况;流式细胞术分析细胞的凋亡情况;免疫印迹法检测细胞内质网应激和凋亡相关蛋白的表达;荧光定量PCR 技术检测细胞内质网应激和凋亡相关蛋白mRNA表达。结果 不同浓度去甲斑蝥素处理PANC-1细胞24h后,与对照组相比,能降低细胞的存活率并诱导其凋亡。与对照组相比,处理组中内质网应激和凋亡相关蛋白的表达水平均上调（均P＜0.05）,同时其mRNA 的表达水平亦均上调（均P＜0.05）。结论 去甲斑蝥素能明显抑制人胰腺癌PANC-1 细胞的生长并诱导其凋亡,并且具有浓度依赖性,这一作用可能是通过内质网应激介导的凋亡途径实现的。     

热疗联合奥沙利铂对胃癌MGC803细胞X连锁凋亡抑制蛋白和血管内皮生长因子表达的影响

目的:探索奥沙利铂(OXA)热化疗对人胃癌MGC803细胞血管内皮生长因子(VEGF)和X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)表达的影响。方法:将人胃癌MGC803细胞株,密度为5×104个/ml分为正常对照组、单纯热疗组、单纯化疗组、热疗联合化疗组,各组细胞培养48h后,MTT法检测细胞增殖抑制率,确定工作浓度为48h的半数抑制浓度(IC50)。应用流式细胞术(FCM)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测四组细胞对VEGF和XIAP蛋白及mRNA表达变化,并分析影响因素。结果:FCM及RT-PCR分析显示与对照组比,热疗组、化疗组及热化疗组VEGF和XIAP表达下调,热化疗组VEGF与XIAP下调最显著,各组之间比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:热疗联合奥沙利铂能抑制人胃癌细胞增殖,促进细胞凋亡,两者联用强于单独使用热疗或奥沙利铂,其作用机制与下调VEGF和XIAP表达有关。     

敲除hsa_circRNA_102958调节胰腺癌PANC-1细胞增殖、氧化应激和线粒体功能

目的 探讨敲除hsa_circRNA_102958对胰腺癌PANC-1细胞增殖、氧化应激和线粒体功能的影响.方法 胰腺癌PANC-1细胞转染shRNA-NC和3种不同的circ_102958shRNA 序列,RT-PCR 检测 circRNA_102958表达,选取干扰效果最好的circ_102958 shRNAl进行后续实验,CCK8检测细胞增殖倍数;Hoechst染色观察细胞形态变化;总超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒、丙二醛(MDA)检测试剂盒和DCFH-DA试剂盒分别测定SOD、MDA、活性氧(ROS)含量;流式检测JC-1红/绿荧光比值;Western blot检测 Bax/Bcl-2、cleaved cas9/cas9、cleaved cas3/cas3、c-Myc蛋白表达.结果 与Control组相比,干扰circRNA_102958表达抑制胰腺癌PANC-1细胞增殖能力(P＜0.05),细胞形态趋于紊乱,凋亡细胞增多,MDA和ROS含量上调(P＜0.05),SOD活性降低(P＜0.05),JC-1红/绿荧光比值下调(P＜0.05),Bax/Bcl-2、cleaved cas9/cas9和 cleaved cas3/cas3蛋白表达增高(P＜0.05).结论 干扰circRNA_102958表达抑制胰腺癌PANC-1细胞增殖能力和线粒体功能,促进细胞凋亡和氧化应激水平.     

丙酮酸乙酯对人胰腺癌细胞的抑制作用

目的观察丙酮酸乙酯(ethyl pyruvate,EP)对人胰腺癌细胞PANC-1和AsPC-1增殖、凋亡及高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)mRNA表达水平的影响。方法采用MTT和FCM法分别检测EP与5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)单独及联合作用(EP组,E组;5-FU组,F组;联合组,EF组)对PANC-1和AsPC-1细胞增殖和凋亡的作用;通过Real Time-PCR(RT-PCR)观察各用药组对PANC-1和AsPC-1细胞HMGB1mRNA表达水平的影响。结果随着药物浓度的增加,各用药组细胞增殖活性及HMGB1mRNA表达水平逐渐降低,凋亡率逐渐增高。E0.5225F10、E1.0450F20、E2.0900F40、E3.1350F80组的胰腺癌细胞抑制率均比相应E组高(P<0.05),EF组的胰腺癌细胞凋亡率均比相应E组高(P<0.05),E3.1350F80、E4.1800F160组均比相应E组的胰腺癌细胞HMGB1mRNA表达水平高(P<0.05)。结论 EP可能通过对HMGB1表达的影响,抑制胰腺癌细胞增殖和诱导细胞凋亡,从而起到抗胰腺癌作用,但是其具体机制及在体内的作用有待进一步深入研究。     

热化联合对肺癌患者A549细胞生长、c-Jun N-末端激酶磷酸化及热休克蛋白70表达的影响

目的观察热化联合对肺癌患者A549细胞生长的影响及机制探讨。方法对A549细胞分别进行单独热疗、单独化疗,热化联合干预及热化联合并SP600125干预,同时选取未做任何处理的A549细胞作为对照组。观察各组细胞增殖率、细胞侵袭力的变化。同时采用蛋白免疫印记法(Western Bolt)检测JNK磷酸化以及热休克蛋白70(HSP70)的表达。结果热化联合组的A549细胞增值率明显低于单独热疗、单独化疗和热化联合并SP600125组(P<0.05)。热化联合组JNK磷酸化表达明显高于对照组及单独化疗组(P<0.05),热化联合组HSP70表达明显低于单独热疗组(P<0.05)。热化联合干预下,p-JNK表达水平出现上升,与对照组、单独热疗组和单独化疗组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05);热化联合并SP600125组的p-JNK的表达水平较热化联合组显著下降(P<0.05)。结论热化联合抑制A549细胞增殖的效果优于单独热疗或单独化疗,作用机制可能与激活JNK信号通路或抑制HSP70表达有关。     

车叶草苷通过内质网应激促进胰腺癌细胞凋亡的机制研究

目的:探讨车叶草苷(ASP)通过内质网应激(ERS)诱导胰腺癌(PC)细胞凋亡的机制。方法:选取人胰腺癌PANC-1细胞作为研究对象。将PANC-1细胞按照随机数字表法分为4组，分别为对照组、ASP组、ERS抑制剂4-苯基丁酸(4-Phenylbutyric acid, 4-PBA)组和ASP+4-PBA组。采用CCK-8检测细胞增殖情况，采用流式细胞术检测细胞凋亡情况，Transwell法检测细胞迁移，蛋白质印迹法检测细胞中活化转录因子6(ATF6)、C/BEP环腺苷酸反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)、活化的半胱氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase 3)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)及肌醇依赖性激酶1α磷酸化蛋白(p-IRE1α)相对表达水平。结果:随着ASP浓度的增加，PANC-1细胞增殖率呈下降趋势。与对照组相比，ASP组迁移细胞数量降低，细胞凋亡率增加，ATF6、CHOP、cleaved-caspase-3、PERK及p-IRE1α蛋白相对表达水平上升，差异均有统计学意义(P<0.05)。与ASP组相比，ASP+4-PBA组细胞迁移数量增多、细胞凋亡...     

microRNA-10调控PTEN基因在促进胰腺癌细胞增殖和迁移的作用

目的：研究胰腺癌患者血浆和癌组织中microRNA(miRNA)-10和张力蛋白同源物基因(PTEN)的表达,并探讨两者在胰腺癌中的调控关系;研究miRNA-10在人胰腺癌PANC-1细胞中的表达及其对PANC-1细胞增殖和迁移的影响。方法：选择80例胰腺癌患者为研究组及80例健康体检者为对照组。采用实时荧光定量PCR技术检测胰腺癌患者血浆中miRNA-10和PTEN基因及组织中miRNA-10的表达,并分析miRNA-10和PTEN基因表达的相关性。采用四甲基偶氮唑盐法和细胞集落形成实验研究miRNA-10在人胰腺癌PANC-1细胞生长和增殖能力,采用划痕实验检测细胞的迁移能力。结果：两组血浆中miRNA-10和PTEN mRNA的表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。miRNA-10和PTEN mRNA在胰腺癌患者血浆中表达呈线性负相关(r=-0.716,P<0.01)。miRNA-10在胰腺癌患者血浆和组织中表达呈正相关(r=0.938,P<0.01)。MTT法检测结果显示,miRNA-10细胞转染24、48、72、96 h的A值均高于对照组(P&l...     

吉西他滨诱导胰腺癌细胞PANC-1中甲基化诱导静止基因的表达与半胱氨酸天冬氨酸酶-1、核转录因子活性的研究

目的检测吉西他滨（gemeitabine,GEM）诱导胰腺癌细胞株PANC-1中甲基化诱导静止基因（TMSl／ASC）的表达,并探讨半胱氨酸天冬氨酸酶-1（cysteine aspartase,caspase-1）、核转录因子（nuclear factor—κB,NF—κB）的活性与TMSl／ASC之间的关系。方法用噻唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium,MTr）比色法检测GEM在不同浓度（1、2、4、8、16μg／m1）及不同时间（24、48h）下对胰腺癌细胞PANC-1存活率的影响;RT—PCR技术检测PANC—1细胞在GEM（4．27μg／m1）刺激组（实验组）和空白组（对照组）培养24h和48h后TMS1／ASCmRNA的表达情况。用抗KB抑制蛋白（inhibitory protein of NF—κB,IKBR）多克隆抗体、抗caspase-1多克隆抗体和内参β—actin单克隆抗体通过Western blot技术检测并比较IKBa和caspase-1在实验组和对照组中的蛋白表达水平,从而分析NF．KB和caspase-1的活化状态。结果GEM对PANC-1细胞生长的抑制有浓度和时间依赖性,其半数抑制率（IC50）为24h4．27μg／ml;24h时实验组和对照组TMSl／ASC的表达量分别为（0．3±0．004）和（0．1±0．001）,48h实验组和对照组分别为（0．63±0．007）和（0．21±0．006）,2组相比较,差异有统计学意义（P〈0．01）。Westernblot结果显示：随着培养时间延长,caspase-1在对照组中未发生活化,GEM可促进其活化;GEM实验组与对照组相比It（Bet的表达量无明显变化,GEM不能促使NF—KB活化。结论GEM能抑制胰腺癌PANC-1细胞增殖并促进凋亡,随着作用时间的延长其药物敏感性减低。GEM作用-定时间可诱导TMS1／ASC表达增加,caspase-1可能参与GEM诱导胰腺癌细胞株PANC-1凋亡的信号转导途径,NF-κB不参与GEM诱导胰腺癌细胞株PANC—1凋亡的信号转导途径。     

过表达NPM1对胰腺癌细胞增殖、凋亡影响的研究*

目的：探讨NPM1过表达对胰腺癌细胞增殖、凋亡的影响。方法：对人胰腺癌细胞株AsPc-1，BxPc-3，PANC-1，CFPAC-1及人正常胰腺细胞株HPDE6CT作传代培养，检测其中NPM1表达。选择表达较低的细胞行NPM1过表达质粒转染，并设立空白质粒转染对照组。48小时后，采用RT-PCR及Western检测NPM1表达水平变化，并行MTT及流式细胞技术检测细胞增殖、凋亡情况。结果：（1）NPM1在BxPc-3细胞系中表达最低；（2）NPM1过表达组与空白质粒组相比，NPM1的mRNA表达量及蛋白表达量明显增多，差异显著（P<0.05）；（3）NPM1过表达组相比空白质粒组，细胞增殖增加，早期凋亡细胞明显减少（P<0.05）。结论：NPM1的过表达可促进胰腺癌细胞增殖，减少凋亡。     

MAD1基因在主动脉夹层中的表达及对主动脉平滑肌细胞的影响

收集病变的升主动脉中膜组织标本为主动脉夹层组；收集同期在本院行尸检且无手术史、大血管病变史的升主动脉壁内组织标本18份为对照组；RT-PCR和Western blot检测有丝分裂阻滞缺陷蛋白(MAD1) mRNA和蛋白表达水平。在体外建立MAD1基因高表达人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC)模型,检测细胞增殖和凋亡情况以及凋亡相关蛋白。结果显示主动脉夹层组患者主动脉夹层中MAD1 mRNA和蛋白相对表达量明显高于对照组(P<0.05)。随着转染时间的延长,各组细胞增殖水平均逐渐增加,转染48 h、72 h后MAD1过表达组细胞增殖情况低于空白对照组及空载体转染组(P<0.01)。转染48 h后,MAD1过表达组细胞凋亡率明显高于空白对照组及空载体转染组(P<0.01)。MAD1过表达组含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 mRNA和蛋白相对表达量明显高于空白对照组及空载体转染组(P<0.05)。实验结果表明,MAD1过表达可通过抑制细胞增殖,激活细胞外凋亡途径和细胞内凋亡途径来促进人主动脉平滑肌细胞HA-VSMC细胞凋亡,参与主动脉夹层的发生与发展。     

靶向RNAi抑制survivin基因增强胰腺癌对厄洛替尼化疗敏感性的实验研究

目的:胰腺癌的化疗药物耐药是一个亟待解决的问题.存活素(survivin)基因是肿瘤化疗耐药的重要原因.运用RNAi载体抑制survivin的表达对增强胰腺癌对厄洛替尼敏感性的影响.为增强胰腺癌化疗敏感性奠定一定的实验基础.方法:培养胰腺癌细胞PANC-1,构建以U6为启动子的RNAi载体并转染PANC-1,运用FCM检测加入厄洛替尼前后胰腺癌细胞凋亡指数和Hoechest 33258检测凋亡形态,MTT检测转染前后IC50.结果:转染survivin的RNAi载体后48h,流式细胞仪检测的凋亡指数为15.24％±1.35％,与对照组比较差异有显著性(P＜0.05);Hoechst33258染色显示,PANC-1细胞出现核皱缩、浓染和碎裂等典型的凋亡形态,MTT检测转染前及转染后48h厄洛替尼的IC50分别为(1.35±0.05) μg/mL,(0.46±0.08) μg/mL,与对照组比较差异有显著性(P＜0.05).结论:Survivin的RNAi载体,能有效地增强胰腺癌对厄洛替尼的化疗敏感性.     

siRNA沉默EPAS1基因对胰腺癌细胞凋亡和增殖的影响

目的 研究由2型重组腺相关病毒(rAAV2)介导的靶向缺氧诱导因子2(EPAS1/HIF-2)的小干扰RNA(siR-NA)对人胰腺癌PANC-1细胞凋亡和增殖的影响.方法 将人胰腺癌细胞株PANC-1分为实验组、阴性对照组(阴性组)和空白对照组(空白组),实验组和阴性组分别转染rAAV2-EPAS1-siRNA和rAAV2-EGFP病毒,空白组不转染病毒,进行常氧和缺氧培养.RT-PCR和Western blot检测EPAS1基因表达,Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡,MTT法检测细胞增殖能力.结果 在常氧和缺氧状态下,实验组细胞EPAS1 mRNA和蛋白表达受抑制,显著低于阴性组和空白组,差异均有高度统计学意义(p<0.001).在缺氧状态下,实验组细胞的凋亡率明显升高,增殖受抑制,与阴性组和空白组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 通过siRNA抑制缺氧状态下胰腺癌细胞中EPAS1基因表达,能诱导胰腺癌细胞凋亡,抑制胰腺癌细胞增殖.     

趋化因子Fractalkine通过调控IL-6/STAT3信号通路对人胰腺癌细胞株增殖和侵袭的影响研究

目的 探讨趋化因子Fractalkine(FKN)通过调控白细胞介素(IL)-6/信号传导与转录激活因子(STAT)3信号通路对人胰腺癌细胞株PANC-1和SW-1990增殖、侵袭的影响.方法 以腺病毒为载体构建、合成FKN-小干扰RNA(siRNA)并转染PANC-1和SW-1990.应用CCK-8法和Transwell检测细胞增殖和侵袭力,蛋白质印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测FKN、IL-6和STAT3蛋白及mRNA的表达.结果 转染FKN-siRNA 24 h时,PANC-1及SW-1990各组细胞吸光度值(A值)无明显变化,在48 h和72 h时,FKN-siRNA组A值明显高于对照组和FKN-siRNA阴性组(P＜0.05).转染FKN-siRNA后,PANC-1及SW-1990 FKN-siRNA组细胞侵袭力明显强于对照组和FKN-siRNA阴性组(P＜0.05).PANC-1及SW-1990转染FKN-siRNA后,与对照组和FKN-siRNA阴性组相比较,FKN-siRNA组细胞FKN蛋白和mRNA的表达明显减少(P＜0.05),IL-6与STAT3蛋白和mRNA的表达明显增加(P＜0.05).结论 趋化因子FKN可能通过IL-6/STAT3信号通路对胰腺癌细胞生物学活性发挥了抑制作用.     

VEGF-C表达对胰腺癌细胞凋亡的影响

目的 研究VEGF-C反义寡核苷酸对胰腺癌原位种植瘤模型中PANC-1细胞凋亡的影响.方法 建立人胰腺癌细胞株PANC-1裸鼠原位种植瘤自发性淋巴结转移模型,分离、原代培养原位灶和淋巴结转移灶中的胰腺癌细胞,并应用real time定量PCR、流式细胞术检测VEGF-C反义寡核苷酸转染对其凋亡能力的影响.结果 VEGF-C反义寡核苷酸抑制胰腺癌细胞VEGF-C的表达后,淋巴结转移灶组PANC-1细胞凋亡率为(15.2±2.7)%,显著高于空白组、SODN组(P＜0.05);原发灶组PANC-1细胞凋亡率为(5.5±2.7)%,与空白组、SODN组的差异无统计学意义(P＞0.05);并且淋巴结转移灶组PANC-1细胞的凋亡率高于原发灶组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 VEGF-C表达下调能显著诱导淋巴结转移灶中胰腺癌细胞的凋亡.     

放疗联合热疗诱导肝癌HepG2细胞凋亡及其与Bcl-2和Bax蛋白表达关系的研究

目的探讨放疗联合热疗诱导人肝癌HepG2细胞凋亡及其与Bcl-2和Bax蛋白表达的关系。方法将体外培养的肝癌HepG2细胞随机分为未治疗对照组、单纯放疗组、单纯热疗组、放疗联合热疗组,采用流式细胞术检测细胞的凋亡情况,免疫组化法检测细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax蛋白表达水平。结果 4组肝癌HepG2细胞凋亡率比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中单纯热疗组、单纯放疗组及放疗联合热疗组较未治疗对照组明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);放疗联合热疗组较单纯热疗组和单纯放疗组明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。4组肝癌HepG2细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达和Bax/Bcl-2比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中单纯热疗组、单纯放疗组及放疗联合热疗组较未治疗对照组Bcl-2蛋白阳性表达率明显降低,Bax蛋白阳性表达率明显升高,Bax/Bcl-2明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);放疗联合热疗组较单纯热疗组和单纯放疗组Bcl-2蛋白阳性表达率明显降低,Bax蛋白阳性表达率明显升高,Bax/Bcl-2明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论放疗联合...     

RAB10对胰腺癌细胞生物学功能的影响及临床意义

目的 研究RAS癌基因家族成员RAB10在胰腺癌中的表达情况及其对人胰腺癌细胞系SW1990细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法 利用癌症基因数据库GEPIA和TCGA中胰腺癌的数据分析RAB10 mRNA在胰腺癌组织中的表达；Cox回归分析RAB10 mRNA表达水平与胰腺癌患者预后关系；靶向RAB10的小干扰RNA(RAB10-siRNA)作为沉默组、构建过表达RAB10质粒(RAB10-OE)作为过表达组；使用Q-PCR检测沉默及过表达效果；Western blot实验检测蛋白表达水平；EdU细胞增殖实验、划痕实验、Transwell实验、流式细胞实验分别分析RAB10对SW1990增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。结果 胰腺癌组织中RAB10 mRNA的表达量明显高于正常胰腺组织(P<0.05);EdU细胞增殖实验结果显示，RAB10-OE组的SW1990细胞的增殖率明显高于对照组，RAB10-siRNA组SW1990细胞的增殖率低于对照组(P<0.05);Transwell实验和划痕实验结果显示，RAB10-OE组细胞侵袭率及迁移率均高于对照组，RAB10-siR...