产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药基因分型及药敏试验结果分析

目的 了解本地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型分布。方法 用表型确证试验确定临床标本中产ESBLs肺炎克雷伯菌64株，用琼脂稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC)，分别用TEM、SHV和CTX-M通用引物进行聚合酶链反应(PCR)，并对结果进行分析。结果 产ESBLs肺炎克雷伯菌对亚胺培南的敏感率最高(100％)；其次为头孢吡肟(84．4％)，哌拉西林／他唑巴坦和环丙沙星的敏感率则分别为71．9％和70．3％。PCR扩增结果显示SHV、CTX-M和TEM基因的阳性率分别为81．3％、65．6％和18．8％；53．1％的菌株同时携带多个基因。结论 该院医院感染产ESBLs肺炎克雷伯菌对亚胺培南的敏感率最高；最常见的基因型是SHV，其次为CTX-M。     

肺癌患者术后感染超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌分离株基因分型和耐药性

目的 探究肺癌患者术后感染超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌分离株基因分型和耐药性,为临床治疗ESBLs肺炎克雷伯菌用药提供指导。方法 收集2019年1月-2021年7月于武汉市肺科医院行胸腔镜肺段切除术后感染患者肺炎克雷伯菌分离株100株,分析菌株对常用抗菌药物的耐药率,双纸片扩散法进行ESBLs表型筛选及确证,聚合酶链式反应(PCR)检测产ESBLs菌株的耐药基因,将PCR阳性产物进行测序并确定基因型别。结果 100株肺炎克雷伯菌中检出35株产ESBLs菌株,占35.00%,主要来源于痰液;产ESBLs肺炎克雷伯菌对氨苄青霉素、头孢菌素的耐药率高于90%; 35株产ESBLs肺炎克雷伯菌主要耐药基因型为TEM、CTX-M和SHV,其中CTX-M型中,CTX-M-1有10株,CTX-M-9有12株,未检测出CTX-M-2、CTX-M-8及CTX-M-25型,所有TEM型均为TEM-1,SHV型均为SHV-12。结论 胸腔镜肺段切除术后感染肺炎克雷伯菌菌株产ESBLs检出率较高,产ESBLs肺炎克雷伯菌对替加环素、美罗培南及亚胺培南较敏感,且携带的基因型以CTX-M型、TEM...     

胆道感染大肠埃希菌产ESBLs菌株基因分型及耐药性

目的探讨胆道感染的病原菌谱及耐药性,并对产ESBLs的大肠埃希菌进行基因分型。方法胆道感染住院手术患者的胆汁行细菌培养和药敏测定,设计特异性引物PCR扩增。结果 240例胆汁标本中分离出细菌200株,真菌25株,培养阳性率达93.75%,其中大肠埃希菌80株,占35.56%;大肠埃希菌部分出现多药耐药,但对亚胺培南、美罗培南及阿米卡星较为敏感,表型确证试验发现20株为ESBLs菌株,PCR检测发现20株均携带有TEM基因,共携带了5个ESBLs基因,其中还有10株CTX-M-9基因型,6株CTX-M-1基因型,有4株OXA-1基因型,5株SHV基因型;部分菌株携带有≥2个β-内酰胺酶基因。结论胆道感染的主要致病菌是大肠埃希菌,医院分离株呈现多药耐药,以产ESBLs株为主,其主要基因型为TEM基因,但也存在CTX-M、OXA、SHV等多种基因型。     

新生儿大肠埃希菌败血症的药敏分析及ESBLs基因分型

目的 探讨医院新生儿大肠埃希菌败血症的耐药性,并对产ESBLs大肠埃希菌进行基因分型.方法 采用MicroScanWalkaway 96SI全自动微生物分析仪对45株新生儿败血症分离的大肠埃希菌进行鉴定及药敏试验,PCR检测大肠埃希菌的ESBLs基因分型,并采用SPSS13.O进行统计分析.结果 45株大肠埃希菌对亚胺培南敏感性最高,为100.O％,产ESBLs检出率高达57.8％,产ESBLs的大肠埃希菌对氨曲南、头孢菌素类几乎全部耐药,对含酶抑制剂类药物、碳青霉烯类和头霉素类抗菌药物敏感率较高(73.1％～92.3％);对26株产ESBLs菌株进行基因分型,发现11株携带有TEM基因,12株CTX-M- 14基因型,两株CTX-M-1基因型,5株SHV基因型,同时部分菌株携带有≥2种β内酰胺酶基因.结论 医院新生儿败血症分离大肠埃希菌耐药性严重,以产ESBLs株为主,其主要基因型为CTX-M基因,但也存在TEM、SHV等多种基因型.     

胆道感染大肠埃希菌耐药性和基因型分布的研究

目的 了解胆道感染大肠埃希菌的耐药性及ESBLs基因型分布状况.方法 采用纸片扩散法(K-B法)对大肠埃希菌进行抗菌药物的敏感性试验,通过PCR法分析其所产生基因型.结果 71株大肠埃希菌共检出产ESBLs菌23株,产酶率为32.4%,对亚胺培南、美罗培南和头孢哌酮/舒巴坦全部敏感,产ESBLs株对其他抗菌药敏感性较低;基因型分析显示在23株产ESBLs菌中有16株产TEM型酶,4株SHV型酶,12株产CTX-M型酶和5株产OXA型酶.结论 胆道感染产ESBLs大肠埃希菌耐药严重,TEM和CTX-M型ESBLs多见.     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌临床菌株耐药表型与基因型

目的调查临床分离鉴定的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的耐药表型与基因型的关系。方法以琼脂稀释法测定67株产ESBLs肺炎克雷伯菌对11种抗菌药物的MIC;应用PCR扩增其SHV、TEM和CTX-M型β-内酰胺酶编码基因,并对部分菌株的PCR产物进行克隆测序以确定其基因亚型。结果67株除未检出对亚胺培南耐药株外,对其他10种抗菌药物的耐药率在10.45%～89.55%,多重耐药率为74.63%;其中60株对氨基糖苷类耐药株和44株对β-内酰胺类耐药株的交叉耐药率各为88.33%和40.91%;67株SHV、TEM和CTX-M基因型检出率分别为91.04%、56.72%、28.36%,对其中7株克隆测序发现存在SHV-12、TEM-1及CTX-M-3基因亚型。结论67株产ESBLs肺炎克雷伯菌对除亚胺培南以外的大多数抗菌药物,呈现明显的多重耐药和交叉耐药,其中7株同时产SHV-12和CTX-M-3型超广谱和TEM-1型广谱β-内酰胺酶。     

新生儿产超广谱β-内酰胺酶细菌的基因型与耐药性分析

目的了解新生儿病房产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性和ESBLs的基因型,为临床合理治疗提供理论依据。方法对2010-2012年住院新生儿送检标本进行菌株鉴定;ESBLs鉴定采用VITEK-2Compact鉴定及药敏系统,采用PCR方法对ESBLs基因型进行检测。结果 2010-2012年新生儿住院患者中共分离不重复肺炎克雷伯菌1 260株、大肠埃希菌755株,ESBLs产酶率分别为70.8%和57.4%,对亚胺培南、美罗培南、阿米卡星、环丙沙星、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦等抗菌药物的敏感率高于65.0%;随机选取150株产ESBLs肺炎克雷伯菌、100株产EBSBLs大肠埃希菌进行PCR引物扩增;250株产ESBLs菌株中,TEM型引物扩增阳性176株,占70.4%;SHV型引物扩增阳性145株,占58.0%;CTX-M型引物扩增阳性227株,占90.8%;OXA型引物扩增阳性16株,占6.4%;PCR扩增阴性45株,占18.0%。结论在医院流行ESBLs的基因型主要是CTX-M型,加强ESBLs基因型监测、了解其基因型分布资料,对于产ESBLs菌株感染的治疗和控制具有重要指导意义。     

近4年产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌基因型分布及耐药性变化

目的了解我院近4年产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的基因型分布及耐药性性变化. 方法采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的表型确证试验,筛选出我院2000年6月～2003年8月产ESBLs肺炎克雷伯菌64株;应用PCR及DNA测序方法检测所有产酶株的TEM、SHV及CTX-M基因.应用琼脂稀释法测定11种抗菌药物对所有产酶株最低抑菌浓度(MIC). 结果 64株肺炎克雷伯菌产生的ESBLs 以SHV-12和CTX-M-14为主要基因型,在产酶株中的检出率分别51.6%和46.9%,2000年只检出SHV-12基因,2001年共检出9种基因型, 2002年共检出10种基因型, 2003年共检出8种基因型;2000年未发现携带多个基因的菌株,2001年多基因携带率达50%, 2002年多基因携带率达51.6%, 2003年多基因携带率达63.6%,2001～2003年3年间多基因携带率差异无显著性;2000年的6株菌均对头孢他啶和氨曲南的耐药,对氨苄西林/舒巴坦也有较高耐药性,对其他药物很敏感,2001～2003年间的产ESBLs肺炎克雷伯菌除对亚胺培南100%敏感外,对其余10种抗菌药物出现不同程度的耐药. 结论我院肺炎克雷伯菌临床分离株中的ESBLs基因型主要为SHV-12和CTX-M-14,且携带多种β-内酰胺基因产酶株检出率高,所有产酶株均对亚胺培南敏感.     

老年脑卒中患者分离的大肠埃希菌耐药特点及机制研究

目的 了解老年脑卒中住院患者分离的大肠埃希菌耐药特点、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检出率、ESBLs基因型及携带模式。方法 回顾分析本院老年脑卒中住院患者分离的206株大肠埃希菌对16种抗生素耐药性,双纸片协同试验检测大肠埃希菌产ESBLs率,PCR及产物测序确定菌株ESBLs基因型及携带模式。结果 未见亚胺培南和美罗培南耐药株,49. 5%的菌株产ESBLs,产ESBLs菌对大部分抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs株,TEM和CTXM基因型是ESBLs优势编码基因,TEM+CTX-M携带模式最常见。结论 本地区大肠埃希菌对碳青霉烯类抗生素敏感,产ESBLs菌株耐药率远较不产ESBLs菌株高,应加强对大肠埃希菌ESBLs监测,有效控制产ESBLs大肠埃希菌的散播以及耐药基因的传播。     

血培养产ESBLs分离株耐药基因初步分型及最低抑菌浓度检测

目的 了解我院导致菌血症的革兰阴性杆菌病原菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率、基因型分布及耐药性。方法 由临床血液培养标本中分离出的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌58株，采用ESBLs表型确证试验筛选出ESBLs阳性菌株，应用PCR法扩增产酶菌株的bla(TEM)、bla(SHV)、bla(CTX-M)基因，进行初步基因分型。琼脂稀释法测定11种抗生素对所有产ESB[鼻菌株的最低抑菌浓度(MIC)。结果 共检出19株ESBLs阳性株，总检出率为32．8％；其中8株检出bla(TEM)基因、7株检出bla(sHV)基因、14株检出bla(CTX-M)基因；所有产：ESBLs株对亚胺培南敏感，其MIC≤1μg／ml。结论 血液感染的大肠埃希菌和肺炎克雷伯ESBLs检出率较高，bla(CTX-M)是最常见基因型。     

肿瘤医院产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌分布及基因型研究

目的了解医院感染的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌医院感染的临床分布及其基因型特征。方法用表型确证试验确定临床标本中产ESBLs大肠埃希菌80株,应用PCR方法分别扩增产酶菌株的TEM、SHV和CTX-M 3种β-内酰胺酶基因,并对PCR扩增结果及ESBLs株临床分布进行分析。结果 PCR扩增结果显示,CTX-M、TEM和SHV基因的阳性率分别为79.5%、12.8%和18.2%;42.3%的菌株同时携带多个基因;产ESBLs大肠埃希菌广泛分布于各个临床科室,其中普外科占32.5%,肝胆外科和重症监护病房均占23.8%;标本分布较为集中,41.3%来自腹腔引流液,23.8%来自呼吸道标本,12.5%来自尿液。结论医院感染中,产ESBLs大肠埃希菌的主要基因型是CTX-M,腹腔引流液、呼吸道标本、尿液是其主要标本来源,CTX-M型产ESBLs菌分布广泛,应特别加强对它的监测,预防医院感染暴发流行。     

产ESBLs大肠埃希菌基因型分析

目的 了解医院感染的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌医院感染的临床分布及其基因型特征。方法用表型确证试验确定临床标本中产ESBLs大肠埃希菌151株，应用PCR方法分别扩增产酶菌株的TEM、SHV和CTX-M3种β-内酰胺酶基因，并对PCR扩增结果及ESBLs株临床分布进行分析。结果PCR扩增结果显示，CTX-M、TEM和SHV基因的阳性率分别为92．10％，49．7％和1．30％；48．3％的菌株同时携带多个基因。产ESBLs大肠埃希菌广泛分布于24个临床科室，其中普外科占23．2％，重症监护病房占10．6％。标本分布较为集中，29．8％来自尿液，24．5％来自呼吸道标本，23．9％来自穿刺液。结论医院感染中，产ESBLs大肠埃希菌的主要基因型是CTX-M，尿液、呼吸道标本、穿刺液是其主要来源，产ESBLs菌分布广泛，需引起重视。     

产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌相关耐药基因监测

目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌中常见的β-内酰胺酶基因的分布情况。方法采用聚合酶链反应(PCR)检测了77株产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中TEM、SHV和CTX-M等三种β-内酰胺酶基因,并进行了DNA测序。结果 50株产ESBLs的大肠埃希菌中,41株TEM基因阳性(82.0%),7株SHV基因阳性(14.0%),16株CTX-M基因阳性(32.0%),21株菌两种以上基因型同时阳性。27株产ESBLs的肺炎克雷伯菌中,21株TEM基因阳性(77.8%),24株SHV基因阳性(88.9%),3株CTX-M基因阳性(11.1%),16株菌两种以上基因型同时阳性。结论产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中携带多种β-内酰胺酶基因,且以TEM和SHV型较为流行。     

耐含酶抑制剂抗菌药物的肺炎克雷伯菌耐药表型及基因型研究

目的研究含酶抑制剂抗菌药物头孢哌酮/舒巴坦(CFS)和(或)哌拉西林/他唑巴坦(TZP)耐药的肺炎克雷伯菌耐药性和耐药基因。方法收集浙江大学医学院附属第一医院细菌室2006年4~6月分离非重复肺炎克雷伯菌75株,用琼脂稀释法检测12种抗菌药物的最低抑菌浓度,用含1μg/ml头孢噻肟平板法和纸片确证试验做为表型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)筛选;采用聚合酶链反应(PCR)、PCR产物测序、等电聚焦电泳检测其等电点、接合试验等方法明确基因型。结果75株肺炎克雷伯菌中共检测到CFS和(或)TZP耐药20株,表现为多药耐药且均检出β-内酰胺酶基因,其中15株(75.0%)携带CTX-M型基因,14株(70.0%)携带≥2种基因,3株(15.0%)产KPC-2碳青酶烯酶肺炎克雷伯菌高度耐药;11株(55.0%)产ESBLs同时产TEM-1型广谱酶,4株(20.0%)同时携带CTX-M、TEM和SHV基因。结论酶抑制剂耐药肺炎克雷伯菌存在多种耐药基因,表现为多药耐药。     

某院分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs基因检测及分型

目的了解某院分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产生的超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）基因型。方法采用表型确证试验测定并收集该院产ESBLs大肠埃希菌（40株）和肺炎克雷伯菌（20株）,提取质粒DNA。采用特异性引物扩增TEM、SHV和 CTX M系列基因,测序后进行序列分析。结果60株表型确证试验阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,聚合酶链反应（PCR）扩增均阳性,包括TEM、SHV、CTX M 3组和CTX M 9组4种基因型。大肠埃希菌中上述4种基因型阳性率分别为37.50%（15株）、2.50%（1株）、62.50%（25株）、50.00%（20株）;肺炎克雷伯菌上述4种基因型阳性率分别为40.00%（8株）、90.00%（18株）、65.00%（13株）、40.00%（8株）。100.00%的大肠埃希菌和80.00%的肺炎克雷伯菌产生blaCTX M,12.50%(5/40)的大肠埃希菌和25.00%(5/20)的肺炎克雷伯菌携带2种CTX M酶基因。23例TEM基因皆为TEM 1型;19例SHV型基因包括SHV 1型6株、SHV 11型6株、SHV 12型5株及SHV 25型2株,仅SHV 12为ESBLs基因,且均来源于肺炎克雷伯菌;66例CTX M型基因,其中CTX M 14在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率分别为45.00%和35.00%,CTX M 55检出率均为35.00%,CTX M 15检出率分别为20.00%和15.00%,检出少量CTX M 3、CTX M 65、CTX M 101及CTX M 123基因型。结论该院分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs基因型以CTX M 为主,其次为SHV 12。CTX M基因型中以CTX M 14最为常见,CTX M 101及CTX M 123型ESBLs为山东省首次检出。     

乌鲁木齐地区135株志贺氏菌耐药性调查

目的了解乌鲁木齐地区临床分离肠道致病菌中志贺氏茵的流行趋势及耐药情况,分析产生超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株的流行特征及耐药表型和基因型别,为临床合理使用抗生素提供依据。方法志贺氏菌选择培养基采用四区划线法分离培养出135株志贺氏茵,参照Kirby—Bauer纸片扩散法检测其对23种抗生素的耐药性：采用纸片确认试验对多重耐药菌株进行ESBLs表型确证检测;采用聚合酶链式反应（PCR）检测CTX—M、SHV、TEM等耐药基因,对PCR产物测序,通过与美国GenBank核酸库已登录的序列作比对确定基因亚型。结果135株志贺氏菌感染患者中,男性占53．3％（72／135）,女性占46．7％（63／135）;高发季节为6—8月;25岁以下发病人数占总发病人数的71．9％（97／135）;对氨苄西林、氯霉素和复方磺胺甲噫唑的耐药率较高,分别达91．1％、68．1％、70．4％。有43株（31．9％）ESBLs表型检测阳性。PCR扩增结果表明,共有19株携带CTX．M基因,其中CTX．M．1群6株,CTX．M-9群13株;4株携带SHV基因;6株携带TEM基因。基因测序确定各基因型存在多种亚型。结论福氏志贺氏茵为本地区优势志贺氏茵。对某些抗生素存在高度耐药性。应引起临床重视。ESBLs耐药菌株以CTX．M型为主,流行亚型为CTX．M．14、CTX—M．15和TEM-1。产CTX．M-24志贺茵在乌鲁木齐属首次报告检出。     

多重耐药阴沟肠杆菌流行状况及耐药机制的研究

目的了解多重耐药阴沟肠杆菌的流行状况及耐药机制。方法58株临床分离的对第三代头孢菌素耐药的阴沟肠杆菌进行琼脂稀释法药敏试验、表型筛选法和聚合酶链反应克隆测序。结果58株阴沟肠杆菌表型筛选结果显示，高产AmpC酶株、单产ESBLs株和同时产AmpC酶和ESBLs株的检出率分别为65．52％、13．79％和20．69％；58株阴沟肠杆菌对多种抗菌药物耐药，高产AmpC酶菌株、单产ESBLs菌株和同时产AmpC酶和ESBLs菌株对头孢哌酮／舒巴坦的敏感率分别为55．3％、87．5％和16．7％；对哌拉西林／他唑巴坦的敏感率分别为28．9％、50％和8．3％；对头孢吡肟的敏感率分别为97．4％、37．5％和16．7％；对亚胺培南的敏感率均为100％；58株临床分离株ESBLs编码基因的测序结果显示，分别为SHV-2、SHV-2a、SHV-12、CTX-M-14和CTX-M-3型ESBLs；58株临床分离株的ampD基因PCR扩增显示49株阳性，占84．48％，对其中8株进行克隆测序，均存在可疑的羧基端突变位点。结论产生AmpC酶和ESBLs是阴沟肠杆菌对头孢菌素耐药的主要机制。     

用多重PCR方法进行志贺菌超广谱β-内酰胺酶基因分型

目的 建立了一种志贺菌超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases,ESBLs)基因型分类的多重PCR方法,鉴别杭州市1998-2007年产ESBLs志贺菌散发菌株基因型.方法 用纸片扩散药敏法对1998-2007年杭州分离出的195株志贺菌进行产ESBLs筛选,利用多重PCR鉴定CTX-M、TEM、SHV、OXA-1等4个基因型别,并用8次单个PCR验证多重PCR结果.结果 在195株志贺菌中共筛选到17株产ESBLs菌株,阳性率为8.72%,与2005年全国监测点结果(阳性率为6.10%)比较,差异无统计学意义(χ2=1.464,P=0.226);多重PCR结果显示ESBLs基因型分别为:CTX-M型17株(CTX-M-9组亚型11株,CTX-M-1组亚型6株),TEM型2株,OXA-1型10株,无SHV型;多重PCR结果与8次单个PCR结果一致率为94.12%,其中1株OXA-1型结果不一致.结论建立了一种志贺菌ESBLs基因型分类的多重PCR方法,杭州市志贺菌中产ESBLs的比例与全国监测点水平相似,但存在上升的可能.