胚胎至性成熟小鼠睾丸中的碱性磷酸酶及亮氨酸氨基肽酶的研究

对胚胎至性成熟小鼠睾丸中的碱性磷酸酶（ＡＬＰ）及亮氨酸氨基肽酶（ＬＮＡｓｅ）的分布进行了研究。发现胚胎期ＡＬＰ位于原始生殖细胞，体细胞则呈阴性反应；生后２０ｄ至性成熟，ＡＬＰ位于曲细精管的基膜，曲细精管生精细胞及支持细胞则为阴性。ＬＮＡｓｅ于胚胎期位于原始生殖细胞及支持细胞；生后及性成熟期原始生殖细胞及支持细胞也都显示较强阳性。酶的这些表现提示其与生殖细胞的增殖与分化关系密切。     

氩离子激光凝堵输精管后睾丸附睾的形态学观察

对氩离子（Ａｒ＾＋）激光凝堵输精管后不同时期的睾丸和附睾做了形态学观察，发现在术后半月，无论在肉眼和镜下睾丸和附睾均无明显变化，术后１个月，附睾出现淤积现象２～３个月后，睾丸肉眼形态无明显改变，镜下睾丸部分曲细精管生精细胞萎缩，肉眼观附睾体积增大，镜下输出小管和附睾管扩张，个别标志间质内有精子性肉芽肿形成；术后６个月或更长时间，睾丸和附睾的变化基本同前，提示氩离子激光凝堵输精管后，部分睾丸生精细胞     

性成熟期前后睾丸及附睾碱性磷酸酶分布的观察

目的：探讨睾丸、附睾精子发生、发育和分化过程中碱性磷酸酶的分布规律,以期为男性生殖理论及抗生精药物的研究提供科学依据。方法：取不同鼠龄雄性小白鼠睾丸、附睾恒冷箱切片,碱性磷酸酶钙钴法染色。结果：３周、４周小鼠睾丸生精小管周组织中碱性磷酸酶反应产物基本接近于成熟期小鼠。８周小鼠其碱性磷酸酶反应产物已达成年水平。３周小鼠附睾处碱性磷酸酶均呈阴性反应,４周小鼠仅在附睾头部分附睾管上皮细胞游离缘呈碱性磷酸酶阳性反应,８周小鼠附睾头处附睾管上皮细胞游离缘碱性磷酸酶呈强阳性反应。附睾体、尾处碱性磷酸酶呈阴性反应。结论：性成熟期前睾丸生精小管周组织中碱性磷酸酶反应已接近成熟期水平。附睾中碱性磷酸酶分布有明显的阶段性,不仅与性成熟有关,还与附睾内精子密集程度有一定关系     

小鼠生后卵巢发育的形态学与组织化学研究

将小鼠分为生后１、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０ｄ、成体１０组，进行不同发育阶段的卵巢形态学和组织化学研究。发现小鼠生后第１ｄ的卵巢含有许多原始卵泡及少量间质，５ｄ卵泡开始生长，１０ｄ卵泡膜形成，１５ｄ透明带形成，间质腺出现，２０ｄ后很多卵泡生长发育，至４０ｄ时可见成熟卵泡与黄体。３－β－ＨＳＤＨ与脂类于第１０ｄ出现于卵泡膜内层，继而在粒层、间质腺及黄体出现，卵泡膜内层及间质腺随发育而阳性增强。碱性磷酸酶（ＡＬＰ）在生后１ｄ的初级卵母细胞为阳性，５ｄ变为阴性，１０ｄ卵泡膜内层为阳性，以后逐渐增强．亮氨酰氨基肽酶（ＬＮＡｓｅ）、酸性磷酸酶（ＡＣＰ）及糖原在卵巢分布很广，阳性随发育而增强。     

缺锌对大鼠睾丸精子细胞凋亡的影响

目的了解缺锌对睾丸发育及其功能的影响,研究缺锌对睾丸生精细胞凋亡的影响。方法选用Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠１６只,均分为对照组和缺锌组。喂养４周后,采用原子吸收分光光度法,测定血清和睾丸锌的含量;采用原位缺口平移技术观察睾丸曲细精管中细胞凋亡数目的变化。结果在缺锌组大鼠血清锌（１６．４±０．８μｍｏｌ／Ｌ）较对照组血清锌（２１．６±１．４μｍｏｌ／Ｌ）明显降低的情况下,锌缺大鼠睾丸内锌含量（３９．７±１０．８μｇ／ｇ）也较对照组（５４．４±１２．４μｇ／ｇ）明显降低,睾丸曲细精管生精细胞凋亡的数目（２１．４±３．８Ｎｏ．／１０个曲细精管）则较对照组的凋亡细胞数目（６．９±１．３Ｎｏ．／１０个曲细精管）明显增多。结论锌是睾丸发育所必需的营养素,缺锌可诱发睾丸生精细胞凋亡。     

一氧化氮合酶在大鼠睾丸及附睾中的表达和定位

目的：了解一氧化氮合酶（NOS）在睾丸及附睾中的分布。方法：运用免疫组织化学ABC法观察2种NOS（nNOS,iNOS,eNOS）在性成熟大鼠睾丸、附睾中的分布。结果：①nNOS免疫反应阳性见于睾丸间质细胞、睾丸间质血管壁平滑肌细胞、附睾脂肪垫细胞;②iNOS免疫反应阳性见于睾丸间质细胞、管周类肌细胞、精原细胞、精母细胞、支持细胞、输出小管上皮细胞、附睾输出小管上皮细胞、腔内精子;③eNOS免疫反应阳性见于睾丸间质细胞、附睾脂肪垫细胞。结论：NOS广泛表达于睾丸及附睾组织细胞中,推测其参与了包括精子发生和精子成熟的生殖活动多个过程。     

大鼠睾丸间质细胞发育的形态学研究

采用光、电镜技术对６３例胚胎及出生后不同发育时期大鼠睾丸间细胞的发育进行了研究。结果表明：（１）大鼠睾丸间质细胞自胚胎１５天出现，胚胎１７天已初具分泌类固醇激素的结构特点；（２）大鼠睾丸间持细胞幼稚型、成熟型和退化型３种形式，但其分化、成熟与退化是相伴存在的；（３）大鼠丸间质细胞在整个发育过程中存在２个细胞增殖峰；胚胎１７－１９天和青春期。二峰之间有一个低谷，在约在生后第２周；（４）生后第２周后，     

大鼠睾丸支持细胞雄激素结合蛋白mRNA在生精周期中的 …

目的 研究大鼠睾丸支持细胞（ｓｅｒｔｏｌｉ ｃｅｌｌ,ＳＣ）雄激素结合蛋白（ＡＢＰ）ｍＲＮＡ水平与曲细精管上皮周期的相关关系。方法 以地高辛标记的大鼠ＡＢＰ ｃＤＮＡ探针在ＳＤ大鼠睾丸冰冻切片上进行原位杂交,应用激光密度扫描系统对阳性信号进行定量。结果 ＡＢＰ ｍＲＮＡ在１－６期维持低水平,７－８期迅速升高达到高峰,９～１１期骤然下降,但仍高于１～４期水平,７－１６期略有回升,随后迅速下降 至１～     

大鼠严重烫伤后睾丸病理变化的实验研究

对大鼠体表３０％、Ⅲ＾。烫伤后３０ｄ内睾丸病理变化的动态观察表明：（１）生精细胞、支持细胞、曲细精管界膜及间质细胞均有不同程度的损伤，生精细胞的病变以精母细胞及精细胞为重，精原细胞无明显损伤；伤后３０ｄ生精上皮形态基本恢复正常。（２）间质细胞内３β－ＨＳＤ活性迅速降低，伤后３０ｄ仍保持较低水平。（３）烫伤后血清中睾酮迅速下降，伤后３０ｄ仍保持较低水平；而血清ＬＨ则无明显变化。作者认为曲细精管界膜及     

内毒素对呼吸道上皮分泌内皮素、血栓烷素、前列腺素E_2的影响及氧自由基的介导作用

目的探讨内毒素对培养小牛呼吸道上皮分泌内皮素－１（ＥＴ－１）、血栓烷素（ＴＸＡ２）、前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）的影响，并探讨氧自由基的介导作用。方法大肠杆菌内毒素（ＬＰＳ）与培养小牛呼吸道上皮细胞孵育４小时后，测定培养呼吸道上皮细胞上清液中ＥＴ－１、ＴＸＡ２、ＰＧＥ２的含量。结果内毒素可明显促进小牛呼吸道上皮细胞ＥＴ－１、ＴＸＡ２的分泌，抑制ＰＧＥ２分泌，并呈浓度依赖性，用氧自由基清除剂ＳＯＤ、Ｃａｔ预处理呼吸道上皮细胞可拮抗内毒素的作用。结论内毒素诱发支气管高反应性形成，可能与其促进呼吸道上皮分泌ＥＴ－１、ＴＸＡ２，抑制ＰＧＥ２分泌有关，氧自由基可能参与其诱发支气管高反应性过程。     

小白鼠生精上皮周期的形成

在小白鼠生后第1天到第56天,根据细胞核及精细胞顶体的形态变化,分别观察睾丸生精上皮周期的形成。结果表明,小白鼠在生后第1天睾丸的生精上皮由原始生殖细胞和支持细胞组成。生后7天出现精原细胞。生后14天出现分裂前期的初级精母细胞。生后21天出现发育早期的精细胞。生后35天少数曲细精管内出现了成熟精子,生精上皮周期已经形成,并与成鼠一样,生精上皮周期由12种时相组成。     

生后不同发育阶段大鼠睾丸生精小管和间质细胞形态学的变化

目的通过对生后不同年龄SD大鼠睾丸生精小管、间质细胞的组织形态学观察,探讨生后不同发育阶段睾丸生精细胞和间质细胞的发育及变化规律。方法取10天、20天、30天、4月、12月、24月龄雄性大鼠睾丸,常规石蜡包埋、切片、HE染色,镜下观察不同发育阶段生精小管和间质细胞的变化,并进行定量组织学分析。结果⑴生后10天睾丸生精小管细而稀疏,小管中仅见精原细胞和支持细胞,可见单个和成群存在的间质细胞,20天小管中出现初级精母细胞,间质细胞消失,30天龄出现精子细胞,间质细胞再度出现;⑵4月龄生精小管密集、小管外直径和细胞层数均明显增加（P（0.05）并达最大值,上皮内生精活跃,间质内见有大量嗜酸性的间质细胞;⑶12月龄生精细胞层数减少并出现空泡变性,上皮变薄,间质细胞数量减少,体积变小,成纤维细胞增多,界膜增厚;⑷24月龄生精小管明显稀疏,上皮层数降低（P（0.05）,生精细胞和间质细胞均明显减少,内空泡增多,支持细胞也出现空泡变。结论生后10~30天生精小管内尚无精子形成,处于幼年期,除20天龄外,间质内均可见较多的间质细胞;4月龄的青年期生精小管内生精能力和激素分泌能力达高峰,处于生殖旺盛的性成熟阶段;12月龄的中年期睾丸出现衰老性变化,至24月龄老年期生精能力和激素奇泌能力均明显降低.     

成人睾丸组织在裸鼠体内的存活情况研究

目的以成人睾丸组织为供体,免疫缺陷小鼠为受体,研究成人睾丸组织中生精细胞异种移植后的存活及变化情况。方法将成人正常睾丸组织植入去势裸鼠背部,于移植后110d取出移植物,进行组织形态学观察。结果在一例移植前显示非正常生精上皮结构标本的移植物中,大多数生精小管中只含有Sertoli细胞,而另一例移植前显示出正常生精上皮结构的标本,在移植到裸鼠背部110d后,仍然观察到圆形和长形精子细胞存在。结论将成人睾丸组织移植到免疫缺陷小鼠体内,110d后仍观察到有生精细胞的存活。     

血清抗精子抗体与睾丸组织的免疫组化观察

取成年健康雄兔的附睾精子加佛氏佐剂免疫日本大耳白雄兔。免疫后第6周开始检出抗精子抗体,继续免疫6周后取睾丸组织作间接免疫酶和间接免疫荧光观察。结果表明,直接加酶或荧光标记的羊抗兔IgG孵育者呈阴性反应。但用稀释的自体血清孵育后,再加酶或荧光标记的羊抗兔IgG则呈阳性反应。提示血清抗精子抗体不能透过血-睾屏障进入曲细精管内,故不能与曲细精管内成熟的精细胞接触。因此,要通过免疫产生血清抗精子抗体,来达到抑制精子生成的目的,至少对于血睾屏障正常者是不适宜的。     

Rad18缺失对雄小鼠生殖细胞的影响

[目的]了解Rad18敲除雄小鼠生殖细胞的变化。[方法]用免疫组织化学方法检测2、6、12月龄Rad18-/-雄小鼠生精小管生殖细胞的特异性标记物TRA98的表达及分布,并与野生(WT)雄小鼠比较;用原位杂交技术检测Rad18在1周龄WT雄小鼠生精小管未分化精原细胞中的表达。[结果]缺失TRA98标记的早期精原细胞的生精小管比例在12月龄Rad18-/-和WT雄小鼠中分别为39.50%和2.76%,差异有显著性意义(P<0.05);但Rad18-/-退化生精小管中保留正常的Sertoli细胞,其附睾中未见TRA98阳性的生殖细胞,且精子形态正常;1周龄WT小鼠睾丸未分化精原细胞中有Rad18蛋白表达。[结论]Rad18可能对精原干细胞有维持作用。     

Damage of the mouse testis by tritiated water and 137Cs-gamma-rays

Tritiated water at 23.2, 46.3 or 92.5 MBq/animal and 137Cs-gamma-rays at 9.5 Gy (equivalent 370 MBq) or lower doses were administered to 6-week old male C3H/HeNCrj and C57BL/6NCrj mice, as well as F1 Crj: B6C3F1 (C3H x C57BL) progeny. Each set of six to ten animals were autopsied 30 days after the first irradiation. Testis weights were decreased dose dependently, relative values being highest in the C3H and lowest in the C57BL case, with B6C3F1 intermediate. Vacuolization in seminiferous tubules appeared in the 23.2 MBq group and increased with the dose. Focal pyknosis and karyomegaly were found at 46.3 MBq, while primary and secondary spermatocytes and spermatids disappeared with 92.5 MBq. Only a few spermatogonia and Sertoli cells remained after exposure to 9.5 Gy 137Cs-gamma-rays. Sizes of seminiferous tubules were decreased dose dependently, with no strain differences. When male B6C3F1 mice were irradiated with Cs-gamma-rays at 0.119 (equivalent 4.63 MBq tritiated water) or 2.38 Gy (equivalent 92.5 MBq tritiated water), body weights and size of the seminiferous tubules were decreased at both doses, and the larger dose also caused reduction of testis weight and abnormal sperm. However, all changes except for the alteration in weights had disappeared 1 month after the final irradiation. It is considered that the size of seminiferous tubules may be a good parameter for radiation damage in the testis.     

经输精管向附睾内注射甲酸棉酚的抗生育研究

对72只Wistar大鼠经输精管向附睾内注射甲酸棉酚,观察附睾中精子数量、形态、移动距离和附睾、睾丸的组织学改变。结果:注射12h后精子移动距离缩短,24h后精子计数下降,组织学观察见附睾管呈无精状态,睾丸曲细精管各级生精细胞出现变性等损伤性改变,精母细胞脱落入曲细精管管腔,注射甲酸棉酚后2～40d内交配的雌鼠全部不孕。     

Rad18打靶小鼠模型遗传稳定性分析

  目的探讨RAD18在维持遗传稳定性中的作用。方法对Rad18-/-小鼠模型进行生育力检测。观察不同月龄Rad18-/-雄小鼠睾丸质量、结构以及精子发生和形态的变化。结果Rad18-/-小鼠具有生育能力,但随着年龄增加睾丸质量和生育力下降。组织学检测显示Rad18-/-小鼠睾丸的生精小管有正常的精子发生,睾丸特异性tH2B分布正常。但在12月龄时,25%的生精小管中仅残留已分化的生殖细胞,缺失精原细胞,并且附睾中的精子形态无异常。结论含有精原干细胞的精原细胞耗尽导致了Rad18-/-小鼠随年龄增加而生育力下降。     

Ki-67、Thy-1和Oct4在小鼠生精恢复过程中的表达及其意义

目的:探讨精子再生过程中Ki-67、Thy-1和Oct4的表达及其意义。方法:采用间隔24d2次白消安[10mg/(kg.次)]小鼠腹腔内注射建立精子再生模型,于第2次给药后第1,2,3,4,6和8周运用免疫组化检测Ki-67、Thy-1和Oct4在生精上皮表达及其表达规律。结果:形态学显示第2次给药后3周主要为精原干细胞增殖期,4周为分化期,6-8周为精子发生恢复期。Ki-67表达见于精原细胞和少量精母细胞。精原细胞Ki-67阳性率在第2次给药后3周最高,第4周明显下降,6-8周恢复至正常对照组水平。Thy-1表达于精原细胞,在精子再生各阶段阳性表达率均较高,其中,第3周表达最高,第2周次之。Oct4表达仅见于紧贴曲细精管基底膜的精原细胞,在第3周表达较对照组显著上调,第4周下降,6-8周恢复至对照组水平。精原细胞Oct4和Ki-67阳性率之间的相关系数为0.779。结论:Thy-1并非特异性表达于精原干细胞。Oct4表达上调是促进精原干细胞增殖的重要因素。     

氯化锰对小鼠睾丸组织形态学的影响

目的研究锰对小鼠睾丸组织形态学的影响,探讨其时间-效应关系和剂量-效应关系。方法将雄性小鼠随机分为3个染锰组和1个对照组,分别给予腹腔注射7.5、15.0、30.0mg/kg氯化锰和生理盐水,于染锰第3、7、14、28、56天处死小鼠5只/组。观察小鼠睾丸组织学的变化和染锰56d各计量组曲细精管横截面积及生精上皮细胞数量。结果与对照组比较睾丸组织的损伤随染锰剂量的增加和时间的延长而逐渐加重;染锰56d与对照组比较,曲细精管横截面积和生精上皮细胞数差异均有统计学意义(P<0.01)。结论各剂量的MnCl2对雄性小鼠睾丸组织形态结构均有损害作用,以染锰56d,30mg/kg对小鼠的损害最为严重,染锰56d,7.5mg/kg对小鼠睾丸曲细精管横截面积和生精上皮细胞明显减少,证实7.5mg/kg的锰对小鼠睾丸曲细精管横截面积和生精上皮细胞有明显的损害。