当归红芪超滤物对TM40D人乳腺癌荷瘤小鼠的放射增敏作用

目的探讨当归红芪超滤物是否对TM40D人乳腺癌荷瘤小鼠具有放射增敏效应,并探讨其效应的可能机制。方法 40只TM40D人乳腺癌荷瘤小鼠随机分为对照组、药物组、放射组和联合组,每组10只。各组小鼠待肿瘤体积为120mm3时,对照组给予0.9%NaCl溶液0.3ml/d灌胃;药物组给予当归红芪超滤物1.44g/kg灌胃;放射组给予一次性6Gy射线照射;联合组给予当归红芪超滤物1.44g/kg灌胃和一次性6Gy射线照射。各组连续灌胃30 d后,观察小鼠移植瘤重量和抑瘤率、肿瘤生长延迟时间(TGD)、肿瘤体积生长至放射治疗前3倍所需时间(TGT3)及联合组的增敏系数(EF),检测各组小鼠肿瘤组织中p53mRNA及其蛋白的表达。结果联合组小鼠移植瘤重量显著低于对照组、药物组、放射组(P0.05或P0.01);联合组的抑瘤率显著高于药物组和放射组(P0.01)。联合组小鼠TGT3、TGD较药物组和放射组明显增加(P0.05或P0.01),EF为1.95。联合组p53 mRNA及蛋白表达亦明显高于药物组、放射组(P0.05)。结论当归红芪超滤物可以增强TM40D人乳腺癌荷瘤小鼠的放射敏感性,其机制可能是通过上调p53蛋白及其mRNA表达而发挥作用。     

生脉注射液对人鼻咽癌CNE-2细胞抗拒株的放射增敏作用＊

目的 探讨生脉注射液对人鼻咽癌CNE-2细胞抗拒株及其裸鼠移植瘤的放射增敏作用以及对STAT3、p-STAT3蛋白表达的影响。方法 通过细胞毒性实验筛选生脉注射液的最佳浓度，克隆形成实验检测用药前后放射敏感性；建立人鼻咽癌裸鼠移植瘤模型，荷瘤鼠随机分为空白组，生脉注射液低、高剂量组，生脉注射液低、高剂量联合照射组，照射组和姜黄素联合照射对照组。计算肿瘤体积抑制率和抑瘤率。蛋白免疫印迹法检测基因表达。结果 生脉注射液给药后，CNE-2R细胞放射敏感性增加；与单纯照射组比较，高剂量联合照射组肿瘤体积抑制率及抑瘤率明显升高，其STAT3、p-STAT3表达亦显著下调。结论 生脉注射液对人鼻咽癌CNE-2细胞抗拒株CNE-2R及其裸鼠移植瘤具有放射增敏作用，其增敏作用可能与抑制STAT3表达与活化相关。     

新型厚朴酚-二甲双胍缀合物对HepG2移植瘤小鼠抗肿瘤作用及机制研究

目的探讨新型厚朴酚-二甲双胍缀合物(MMC)对人肝癌细胞(HepG2)移植瘤小鼠的抗肿瘤作用及相关机制。方法将HepG2人肝癌细胞接种于雌性Balb/c小鼠构建肝癌移植瘤小鼠模型。将40只荷瘤小鼠随机分为对照组、顺铂组(2 mg·kg^-1)及MMC低、高剂量组(22、44 mg·kg^-1),共4组,每组10只;采用腹腔注射给药,连续给药21 d。记录小鼠体质量、测量并计算肿瘤体积;采用HE染色观察肿瘤组织病理形态;Tunel法检测小鼠肿瘤细胞凋亡情况;Western Blot法检测小鼠HepG2移植瘤组织中P-SAPK/JNK、p53、Bax、Bcl-2、细胞色素C(Cyt-C)、Pro-caspase 3和Cleaved-caspase 3等凋亡相关蛋白的表达。结果与对照组比较,各给药组荷瘤小鼠的体质量及移植瘤质量均明显降低(P<0.01),而MMC低、高剂量组去瘤小鼠的体质量明显增加(P<0.01),顺铂组去瘤小鼠的体质量明显降低(P<0.01);各给药组小鼠肿瘤组织的细胞排列相对紊乱,部分肿瘤细胞细胞核深染、固缩,表现出凋亡现象,肿瘤组织细胞凋亡率均明显升高(P<0.01);各给药组的Bax、Cleaved-caspase 3蛋白表达水平明显上调,Bcl-2蛋白表达水平明显下调(P<0.05,P<0.01);MMC低、高剂量组的p53蛋白表达水平明显上调(P<0.01);MMC高剂量组的P-SAPK/JNK蛋白表达水平明显上调,Pro-caspase 3蛋白表达明显下调(P<0.05);MMC高剂量组及顺铂组的小鼠移植瘤组织中线粒体内Cyt-C蛋白表达水平明显下调,细胞质内Cyt-C蛋白表达水平明显上调,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论MMC能够抑制小鼠人肝癌细胞HepG2移植瘤生长,促进肿瘤细胞凋亡,可能与调节P-SAPK/JNK/p53信号转导通路诱发线粒体凋亡有关。     

黄芪多糖对人乳腺癌MDA-MB-231裸鼠移植瘤生长及肿瘤相关凋亡蛋白的影响

目的:观察黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS)对人乳腺癌MDA-MB-231裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其对肿瘤细胞凋亡的影响,研究APS抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-231生长、诱导其凋亡的作用及其分子机制。方法:通过将人乳腺癌细胞MDA-MB-231接种于BALB/c-nu雌性裸鼠右侧腋窝皮下建立人乳腺癌裸鼠移植瘤模型; 18只乳腺癌荷瘤裸鼠随机分为3组:模型组(每天予生理盐水),APS低、高剂量组(200,400 mg·kg~(-1)),每组6只;每天灌胃给药200μL,连续21 d。实验结束,观察比较APS低、高剂量组与模型组荷瘤鼠肿瘤质量、瘤体体积的变化,计算肿瘤抑制率;苏木精-伊红(HE)染色观察瘤体组织细胞形态学变化;原位末端标记法(TUNEL)检测乳腺癌肿瘤组织的凋亡;蛋白免疫印迹法检测肿瘤组织中B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase)等凋亡相关蛋白表达。结果:与模型组比较,APS低、高剂量组中的乳腺癌肿瘤体积、瘤重减小(P 0. 05,P 0. 01),其肿瘤抑制率分别为37. 9%,57. 57%; HE染色观察APS干预组肿瘤组织均呈现明显形态学改变,组织细胞出现凋亡状态; TUNEL染色显示APS组肿瘤组织细胞凋亡率增加;蛋白免疫印迹法发现,与模型组比较,APS低、高剂量组肿瘤组织中Bcl-2蛋白水平下降(P 0. 05,P 0. 01),Bax,Caspase-9,Caspase-7蛋白表达水平上调(P 0. 05,P 0. 01)。结论:APS能有效抑制MDA-MB-231乳腺癌裸鼠移植瘤生长,诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞发生凋亡,其作用机制与APS影响乳腺癌细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax,Caspase-9,Caspase-7蛋白表达水平有关。     

瘤内125I粒子植入对Lewis肺癌细胞生长及凋亡相关蛋白表达的影响

目的:探讨瘤内125I粒子植入对Lewis肺癌细胞生长及凋亡相关蛋白Caspase-9、Caspase-3表达的影响。方法:昆明小鼠被注入1×107个瘤细胞(0.2ml),当肿瘤生长至0.20-2.5cm2大小时,随机分为3组(对照组、5Gy组和10Gy组),分别植入粒子。观察并测量肿瘤的生长曲线和抑瘤率,应用免疫组织化学技术检测125I粒子照射后肿瘤凋亡相关蛋白Caspase-9、Caspase-3的表达。结果:粒子植入前各组平均瘤体积差异无统计学意义(p>0.05),但是植入后1.0mCi组在第4天(5Gy)和第9天(10Gy)时远小于对照组;0.5mCi组在第9天(5Gy)时瘤体变化不大,在第19天(10Gy)时小于对照组(p>0.05)。同时Caspase-9和Caspase-3的表达基本与肿瘤体积变化一致(p<0.05orp<0.01)。结论:125I粒子低剂量照射能够明显的控制肿瘤生长并可促使凋亡相关蛋白Caspase-9、Caspase-3高表达,使肿瘤细胞凋亡,最终杀灭肿瘤。这可能是粒子照射诱导细胞凋亡从而杀伤肿瘤的途径之一。     

华蟾素注射液对小鼠肝癌组织Smac及Caspase-9表达的影响

目的:观察华蟾素注射液对H22肝癌小鼠肿瘤组织Smac(半胱氨酸)和Caspase-9(天冬氨酸蛋白酶)基因(m RNA)及蛋白表达的影响。方法:40只ICR小鼠采用皮下接种H22肝癌细胞株的方法复制小鼠肝癌模型;造模成功后,将小鼠随机分为4组:模型组,华蟾素注射液低、高剂量组,顺铂(DDP)组;观察各组小鼠肿瘤生长情况变化,采用荧光定量RT-PCR方法和Western Blot方法检测各组H22小鼠肿瘤组织中Smac、Caspase-9基因及蛋白表达。结果:华蟾素低剂量组不能有效抑制肿瘤的生长,而华蟾素高剂量组、DDP组的抑瘤率分别为43.13%、47.06%,具有明显的抑制肿瘤生长作用(P0.01)。与模型组比较,华蟾素低剂量组小鼠肝癌组织中的Smac、Caspase-9表达无明显差异,而华蟾素高剂量组、DDP组能明显促进肝癌组织中的Smac、Caspase-9的m RNA及蛋白表达(P0.01)。结论:华蟾素注射液具有抑制肝癌细胞生长的作用,上调肿瘤组织Smac、Caspase-9基因及蛋白的表达,促进肝癌细胞发生凋亡是其部分作用机制。     

生脉姜黄散对鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤的放射增敏作用

目的:探讨生脉姜黄散对人鼻咽癌细胞CNE-2裸鼠移植瘤的放射增敏作用及对细胞周期素依赖性激酶6(cyclin-dependent kinase 6,CDK6)蛋白表达的影响,并讨论其增敏作用的相关机制。方法:通过皮下注射肿瘤细胞的方法建立人鼻咽癌裸鼠移植瘤模型,荷瘤鼠随机分为空白组、照射组、生脉姜黄散组、生脉姜黄散联合照射组、顺铂联合照射组,其中生脉姜黄散组和生脉姜黄散联合照射组按照药物高、低剂量(12.87,4.29 g·kg-1)各分为2个亚组。经处理后各组隔日测量移植瘤的最大径,计算肿瘤体积抑制率和抑瘤率。免疫组化、蛋白免疫印迹法检测CDK6蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测CDK6 mRNA表达。结果:与空白组比较,其余各组肿瘤生长都受到一定程度的抑制,与照射组比较,生脉姜黄散(12.87 g·kg-1)联合照射组、顺铂联合照射组肿瘤生长明显受到抑制(P0.05),肿瘤体积抑制率分别为54.94%,64.9%。与照射组比较,生脉姜黄散(12.87 g·kg-1)联合照射组、顺铂联合照射组CDK6 mRNA和蛋白表达均明显升高(P0.05)。结论:生脉姜黄散对人鼻咽癌裸鼠移植瘤具有放射增敏作用,其增敏作用可能与细胞周期调控因子CDK6相关。     

熟地黄多糖对荷瘤小鼠肿瘤组织Cyt-C及Caspase-3基因表达的影响

目的:探讨熟地黄多糖对荷瘤小鼠肿瘤组织细胞色素C(Cytochrome C,Cyt-C)及天冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白水解酶(cysteinyl aspartate specific proteinases,Caspase-3)基因表达的影响。方法:采用Real-time PCR法检测肿瘤组织中Cyt-C m RNA及Caspase-3 m RNA的表达情况,采用Western blot法检测Cyt-C及Caspase-3蛋白质的表达情况。结果:熟地黄多糖低剂量组、中剂量组、高剂量组、阳性对照组和联合用药组肿瘤组织中Cyt-C和Caspase-3 m RNA的表达量分别是模型对照组的0.46、0.76;4.82、1.26;0.43、0.60;13.91、4.65;20.17、9.23倍。Cyt-C和Caspase-3蛋白质的表达量分别是模型对照组的0.31、0.90;1.82、1.46;0.62、0.87;2.60、1.54;2.80、1.60倍。结论:熟地黄多糖能促进肿瘤组织中Cyt-C和Caspase-3基因的表达。     

华蟾素注射液对小鼠肝癌组织Caspase-8、Caspase-3基因及蛋白表达的影响

目的:观察华蟾素注射液对H22肝癌小鼠肿瘤组织中Caspase-8、Caspase-3基因(mRNA)及蛋白表达的影响。方法:40只ICR小鼠采用皮下接种H22肝癌细胞株的方法复制小鼠肝癌模型,造模成功后,将小鼠随机分为4组:模型组,华蟾素注射液低、高剂量组,顺铂(DDP)组。观察各组小鼠肿瘤生长情况变化。采用荧光定量RT-PCR方法和Western Blot检测方法检测各组H22肝癌小鼠肿瘤组织中Caspase-8、Caspase-3基因及蛋白表达的影响。结果:华蟾素低剂量组不能有效抑制肿瘤的生长,而华蟾素高剂量组、DDP组的抑瘤率分别为41.67%、52.78%,具有明显的抑制肿瘤生长作用(P<0.01)。与模型组比较,华蟾素低剂量组小鼠肝癌组织中的Caspase-8、Caspase-3表达无明显差异,而华蟾素高剂量组、DDP组能促进肝癌组织中的Caspase-8、Caspase-3的mRNA的表达升高(P<0.05)及蛋白表达明显升高(P<0.01)。结论:华蟾素注射液具有抑制肝癌细胞生长的作用,其分子机制可能是上调肿瘤组织Caspase-8、Caspase-3基因及蛋白的表达,从而促进肝癌肿瘤细胞发生凋亡,达到抗肿瘤作用。     

益气除痰方对肺癌A549移植瘤细胞凋亡途径Caspase-4及DNA-PK的影响

目的:探讨益气除痰方是否通过内质网UPR介导的细胞凋亡途径发挥抗肿瘤作用。方法:建立40只肺癌A549裸鼠皮下移植瘤模型,于接种第7天将小鼠随机分为模型组(生理盐水组)、顺铂注射液组(0.002 g/kg)、益气除痰方(3.0 g/kg)+顺铂注射液(0.002 g/kg)组及益气除痰方低、高剂量组(3.0、6.0 g/kg),每组8只。中药灌胃给药,1次/d,连用21 d。顺铂注射液腹腔注射,1次/d,连用7 d。干预第22天,处死所有小鼠,测量瘤体质量、体积,采用免疫组化及Western blot法检测肿瘤组织中Caspase-4、DNA-PK的表达。结果:与模型组比较,益气除痰方各剂量组及益气除痰方+顺铂注射液组肿瘤体积、肿瘤质量显著降低,肿瘤组织中Caspase-4、DNA-PK表达均显著升高(P0.01);益气除痰方+顺铂注射液组效果优于顺铂注射液组(P0.05)。结论:益气除痰方对小鼠A549肺癌有一定抑制作用,其机制可能与通过升高Caspase-4、DNA-PK蛋白的表达介导细胞凋亡途径有关。     

黄芪注射液对H22荷瘤小鼠瘤组织Bax 及Bcl-2蛋白表达的影响

目的:研究黄芪注射液对H22荷瘤小鼠瘤组织Bax及Bcl-2蛋白表达的影响。方法:建立H22荷瘤小鼠模型进行体内抗肿瘤试验,将50只荷瘤小鼠随机分为空白对照组(模型组)、环磷酰胺组(CTX组)、黄芪注射液(高、中、低剂量)组,连续ip给药10 d,观察肿瘤生长情况以及小鼠一般情况,绘制肿瘤生长曲线。10 d后处死小鼠,剥取瘤组织称重,计算抑瘤率;采用流式细胞术测定药物作用后肿瘤细胞凋亡率;免疫组化方法检测肿瘤组织Bax及Bcl-2的蛋白表达。结果:小鼠移植瘤H22试验结果显示,在128,,4 g.kg-1的剂量下黄芪注射液的抑瘤率分别为52.36%,33.68%,17.28%。流式细胞术及免疫组化结果表明黄芪注射液各剂量组均可明显增加肿瘤细胞凋亡率;增强Bax蛋白表达,降低Bcl-2蛋白表达,且Bax/Bcl-2明显增高(P<0.05)。结论:黄芪注射液通过促进Bax蛋白表达、抑制Bcl-2蛋白表达来诱导H22肿瘤细胞凋亡,进而发挥抑瘤效应。     

调气行水合剂联合腹腔注射顺铂IL-2治疗肝癌腹水的实验研究

目的:研究调气行水合剂结合顺铂、IL-2腹腔注射对肝癌腹水小鼠模型治疗作用及细胞凋亡基因Bax、Caspase-3蛋白表达的影响,从分子生物学水平揭示其治疗肝癌腹水的机制及其效果。方法:将72只纯系昆明小鼠随机分为对照组,纯中药组,中西医结合大、中、小剂量组及西药组。用药结束后,处死小鼠,测量腹水量、瘤重,记小鼠生存期。应用免疫组化法检测小鼠肝肿瘤组织Bax、Caspase-3蛋白表达情况。结果:中西医结合组腹水量明显减少,较对照组及西药组比较差异显著。中西医结合组小鼠瘤重明显小于对照组,差异有显著性。生存期:中西医结合组、中药组、西药组均较对照组明显延长,差异有统计学意义。中西医结合大剂量组细胞凋亡基因Bax蛋白的阳性表达率显著高于对照组(P0.01)。中西医结合大、中剂量组细胞凋亡基因Caspase-3蛋白的阳性表达率显著高于对照组(P0.01)。结论:中西医结合治疗可减少腹水量,减轻瘤重,延长生存期。中西医结合大剂量组可明显增加细胞凋亡基因Bax蛋白表达,中西医结合大、中剂量组可明显增加细胞凋亡基因Caspase-3蛋白表达,诱导细胞凋亡。揭示了调气行水合剂联合顺铂、IL-2腹腔注射治疗肝癌腹水的作用机制。     

姜黄素对直肠癌细胞放疗增敏作用的研究

目的:探讨姜黄素(curcumin)对人直肠癌细胞放射增敏作用。方法:体外实验:将HR8348细胞,分成四组:对照组(给予DMSO液);姜黄素组(给予2.5μM姜黄素);照射组(单纯X线照射);联合组(给予2.5μM姜黄素,联合X线照射)。分别采用MTT和流式细胞仪检测细胞的生长抑制情况和凋亡情况;体内实验:建立裸鼠移植肿瘤模型,单独及联合应用姜黄素和放射处理裸鼠移植瘤,通过观察肿瘤生长变化及瘤体凋亡情况并进行统计分析。结果:姜黄素对人直肠癌HR8348细胞增殖有明显的抑制作用,明显提高放射对裸鼠移植瘤的杀伤作用。结论:姜黄素对人直肠癌HR8348细胞有放射增敏作用,姜黄素在直肠癌治疗中可能成为一种有希望的放射增敏剂。     

“肠胃清”对结肠癌皮下移植瘤奥沙利铂治疗的增敏作用及对肿瘤组织坏死凋亡的影响研究

目的:研究肠胃清对裸鼠结肠癌皮下移植瘤奥沙利铂(L-OHP)治疗的增敏作用及对肿瘤组织坏死凋亡的影响。方法:构建裸鼠结肠癌细胞HCT-116皮下移植瘤模型,将造模成功的裸鼠随机分为模型组、L-OHP组、肠胃清组和肠胃清联合L-OHP组(联合组),分别给药或生理盐水3周后,观察各组裸鼠肿瘤体积,计算抑瘤率,苏木精-伊红染色法(HE)观察肿瘤组织病理形态学变化,DNA断裂的原位末端标记法(TUNEL染色法)检测肿瘤组织细胞凋亡情况。结果:各给药组给药后瘤体体积明显小于模型组(P0.01),联合组瘤体体积明显小于L-OHP组和肠胃清组(P0.01)。各组抑瘤率比较,联合组明显高于L-OHP组和肠胃清组(P0.01)。各给药组肿瘤组织坏死面积百分比和肿瘤细胞凋亡指数均高于模型组(P0.01),联合组明显高于L-OHP组和肠胃清组(P0.05或P0.01)。结论:肠胃清对裸鼠结肠癌皮下移植瘤L-OHP治疗有增敏作用,并可促进肿瘤细胞坏死及凋亡。     

黄芪注射液对小鼠4T1乳腺癌细胞移植瘤CyclinD1、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的影响

目的:通过构建小鼠4T1乳腺癌细胞移植瘤Balb/c小鼠模型,探讨黄芪注射液对移植瘤Cyclin1、Bcl-2及Caspase-3蛋白表达的影响。方法:体外培养小鼠乳腺癌4T1细胞,注射接种于Balb/c小鼠右侧腹股沟皮下构建乳腺癌移植瘤模型。50只成瘤小鼠随机分为模型对照组、黄芪注射液2. 60 g/kg、5. 20 g/kg、10. 40 g/kg组和顺铂2. 5×10-3g/kg组。观察黄芪注射液对移植瘤生长的影响; HE染色观察移植瘤形态改变;流式细胞仪分析移植瘤细胞周期;免疫组织化学法检测移植瘤组织细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)蛋白表达; Western Blot法检测移植瘤组织Cyclin D1蛋白及凋亡相关蛋白Bcl-2、Cleaved caspase-3蛋白水平。结果:不同浓度黄芩注射液对小鼠乳腺癌移植瘤生长有显著抑制作用,黄芪注射液2. 6 g/kg、5. 2 g/kg、10. 4 g/kg抑瘤率分别为9. 1%、27. 3%、45. 5%。与模型对照组相比较,黄芪注射液5. 2 g/kg、10. 4 g/kg组及顺铂组移植瘤体积和体质量明显降低(P <0. 05或P <0. 01),G1期细胞比例明显增高,S期细胞比例显著降低(P <0. 05或P <0. 01)。黄芪注射液2. 6 g/kg、5. 2 g/kg、10. 4 g/kg组、顺铂组移植瘤组织Cyclin D1阳性区域吸光度值显著降低,Cyclin D1、Bcl-2蛋白水平明显下调,而Cleaved caspase-3蛋白水平显著上调(P <0. 05或P <0. 01)。结论:黄芪注射液对小鼠4T1乳腺癌细胞移植瘤生长有显著抑制作用,其机制与黄芪注射液下调Cyclin D1蛋白表达,促进肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖有关。     

大黄素对裸鼠体内K562细胞移植瘤的抑制作用及其与调控Caspase-3和Caspase-9表达的关系

目的探讨大黄素对K562细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其与Caspase-3和Caspase-9表达变化的关系。方法建立裸鼠K562细胞皮下移植瘤模型,随机分为大黄素低、中、高剂量(25、50、100mg/kg)3个实验组,以及模型组和羟基脲(120mg/kg)阳性对照组,每组5只,ip连续给药12d,测量各组裸鼠肿瘤体积,称取瘤体质量,计算抑瘤率。采用HE染色光镜和透射电镜观察肿瘤细胞的凋亡情况,应用RT-PCR检测肿瘤组织中caspase-3和caspase-9mRNA表达水平。Western blotting法检测肿瘤组织中proCaspase-3和proCaspase-9蛋白的表达。结果大黄素低、中、高剂量组肿瘤相对体积(RTV)分别为5.23±0.24、4.38±0.17、3.57±0.31;与模型组(10.45±0.47)相比,大黄素处理组肿瘤体积明显缩小,具有统计学意义(P0.01)。光镜和电镜结果表明大黄素能够诱导K562细胞发生明显的凋亡。RT-PCR结果表明不同剂量的大黄素能够引起caspase-3和caspase-9mRNA的表达上调且有剂量依赖性。与模型组相比,大黄素处理组的proCaspase-3和proCaspase-9蛋白均出现明显的下调。结论大黄素能够明显抑制人K562细胞裸鼠移植瘤的生长,其机制可能与激活Caspase-3和Caspase-9信号转导通路有关。     

苦参碱的体内抑瘤作用及机制研究

目的 观察苦参碱(Matrine)对裸鼠的体内抑瘤作用.方法 通过建立可视化大肠癌移植瘤模型,动态观察苦参碱对裸鼠体内SW480-EGFP实体瘤生长的影响.结果 苦参碱高剂量组的抑瘤率为59.52％,与对照组相比具有显著性差异(P＜0.001);透射电镜结果显示苦参碱用药组结肠癌细胞核周可见凋亡小体出现;线粒体和内织网肿胀,空泡样变.结论 苦参碱通过诱导凋亡抑制裸鼠体内结直肠癌细胞的生长.     

南方红豆杉水提物对HER2阳性人NCI-N87胃癌移植瘤生长及凋亡作用

目的:探讨南方红豆杉水提物对HER2阳性人胃癌NCI-N87细胞裸鼠移植瘤的抑制作用,及诱导凋亡的作用。方法:通过建立人胃癌NCI-N87细胞裸鼠移植瘤模型,采用随机数字法将80只裸鼠随机分为8组:生理盐水对照组,南方红豆杉低、中、高剂量组,西药赫赛汀组,南方红豆杉低、中、高剂量联合赫赛汀组;给药处理后颈椎脱臼法处死裸鼠,剥离瘤组织,称瘤重、测量瘤径,计算移植瘤体积,绘制肿瘤生长曲线,计算瘤重得抑瘤率;TUNEL法检测移植瘤细胞凋亡,计算凋亡指数。结果:同对照组比较治疗组均可抑制肿瘤生长(P0.05),且联合组表现出比单药组更为显著的抑制作用;中剂量联合组对肿瘤的抑制作用优于红豆杉高剂量及赫赛汀单药组(P0.05)。对照组凋亡细胞数少,凋亡率低,低、中、高剂量单药组均可见到凋亡细胞,凋亡率同对照组比较(P0.05);各剂量联合用药组凋亡细胞数目较多,与单药组比较均有明显差异(P0.05),中剂量联合组差异性最为显著(P0.01)。结论:南方红豆杉水提物对HER2阳性高表达NCI-N87胃癌裸鼠移植瘤的生长有抑制作用,联合赫赛汀可以增强其增殖抑制效果,中剂量联合组显著提高赫赛汀的抑瘤作用;南方红豆杉水提物可以促进胃癌细胞的凋亡,联合赫赛汀能增强其诱导凋亡作用。     

健脾活血祛湿方通过干预AQP9表达调控线粒体细胞凋亡通路对荷H22肝癌移植瘤裸鼠的影响研究

目的观察健脾活血祛湿方通过干预水通道蛋白9(AQP9)蛋白靶点调控线粒体细胞凋亡途径对H22肝癌移植瘤裸鼠的影响。方法采用H22肝癌移植瘤裸鼠模型,随机分为空白对照组、阳性药物(CTX)对照组、健脾活血祛湿方低、中、高剂量组,分别给予相应干预后,观察裸鼠一般情况,测量移植瘤、脾脏重量、计算抑瘤率和脾指数;免疫组化检测各组肿瘤细胞AQP9表达;检测Cty-C、Caspase-3活性;TUNEL检测细胞凋亡水平。结果各组成瘤裸鼠生存状态基本良好,与空白组相比,药物高剂量组和阳性对照组抑瘤率明显增高(P0.05),脾指数降低(P0.05),中、高剂量组AQP9高表达且肝癌细胞呈现凋亡趋势,高剂量组的Cty-C、Caspase-3活性显著增强(P0.05),TUNEL显示高剂量组的凋亡细胞数增多(P0.05)。与阳性对照组相比,AQP9、Cty-C和Caspase-3的活性表达均呈剂量依赖性升高(P0.05),以上均提示阳性对照组和药物高剂量组有效促进肝癌细胞凋亡。结论健脾活血祛湿方可诱导AQP9高表达,调节线粒体细胞凋亡通路中相关凋亡因子的表达,促进肝癌细胞凋亡,从而抑制肿瘤细胞增殖。AQP9在线粒体细胞凋亡通路中可能起着重要作用。     

苦参碱通过抑制mTOR通路介导的糖酵解作用增强非小细胞肺癌细胞的放疗敏感性

目的:探讨苦参碱对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞A549的放疗敏感性的影响及其可能机制。方法:采用不同浓度(0、1、2、3、4g/L)苦参碱处理A549细胞48 h,MTT法检测其增殖活性并计算半数抑制浓度(IC_(50))和20%IC_(50);根据实验目的将A549细胞分为空白对照组、苦参碱(1.22 g/L)组、放疗(4 Gy X射线照射处理)组、联合组(1.22 g/L苦参碱处理48 h后,再进行4 Gy X射线照射处理)。采用MTT法检测各组细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;克隆形成实验检测细胞放射敏感性,并绘制剂量-细胞存活曲线;采用2-脱氧葡萄糖类似物(2-NBDG)法检测细胞葡萄糖摄取率;比色法检测细胞乳酸产量、己糖激酶(HK)以及丙酮酸激酶(PK)的活性;Western blot检测凋亡相关蛋白cleaved-Caspase-3、Bax、Bcl-2,通路蛋白p-mTOR、mTOR及糖酵解相关蛋白己糖激酶2(HK2)、M2型丙酮酸激酶(PKM2)蛋白的表达水平。结果:苦参碱呈剂量依赖性抑制A549细胞增殖活性(P0.05),作用48 h的IC_(50)为(2.69±0.11)g/L,选择20%IC_(50)值1.22 g/L作为苦参碱后续作用剂量。苦参碱联合放疗处理后A549细胞的拟合存活曲线较单独放疗处理左移,放射增敏比为1.324。与苦参碱或单独放疗处理组比较,苦参碱联合放疗处理可显著降低A549细胞增殖活性(P0.05),升高细胞凋亡率(P0.05),降低A549细胞葡萄糖摄取率、乳酸产量及PK活性(P0.05),并能显著上调cleaved-Caspase-3、Bax蛋白表达水平(P0.05),下调Bcl-2和PKM2蛋白表达及p-mTOR水平(P0.05),但对细胞HK活性以及HK和mTOR蛋白表达水平无明显影响(P0.05)。结论:苦参碱能升高A549细胞的放疗敏感性,其机制可能与抑制mTOR信号通路介导的糖酵解作用有关。