姜黄中芳姜黄酮的柱色谱制备及波谱鉴定

姜黄CurcumalongaL .系姜科姜黄属植物,具有抗炎,抗氧化,清除自由基,抗微生物及抗肿瘤作用[1] 。姜黄含有丰富的姜黄素和挥发油,挥发油中主要含有姜烯、芳姜黄烯、姜黄烯等倍半萜类化合物2 0余种,姜黄挥发油具有一定的抗癌、止咳平喘及抗生育活性[2 4 ] 。以芳姜黄酮为原料,还可合成一系列具有一定活性和用途的化合物[5] 。本实验以柱色谱技术,从姜黄油中分离出芳姜黄酮,并通过波谱法对其结构进行了鉴定。芳姜黄酮结构见图1。     

球姜酮对照品的制备

目的制备球姜酮对照品。方法水蒸气蒸馏法提取红球姜挥发油,GC?MS检测其中球姜酮含量,重结晶分离纯化该成分,MS、¹H?NMR、¹³C?NMR对其进行结构鉴定,TLC、HPLC法检测纯度,通过温度、湿度、光照试验考察稳定性,HPLC法研究色谱条件。结果挥发油中球姜酮含量为77.8%,纯度大于99%,在室温(25℃)、高湿(90%)、强光照(4500 lx)下外观性状无明显变化,含量稳定。最佳分析条件为Wonda Cract ODS?2色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈?水(80∶20);体积流量1 mL/min;柱温25℃;检测波长280 nm。结论该方法制得的球姜酮符合对照品要求,可用于含该成分药材(如红球姜等)及相关制剂的质量评价和药效物质基础研究。     

吴茱萸次碱的制备方法

目的以吴茱萸为原料,研究简单、快速、高效的分离、纯化吴茱萸次碱的制备方法。方法采用85%乙醇提取,硅胶柱层析分离,甲醇重结晶纯化吴茱萸次碱,薄层鉴别(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)、核磁方法检查纯度。结果吴茱萸次碱经TLC检查与对照品一致,无杂质斑点,经HPLC检测纯度达98.5%以上,经核磁鉴定。另外经考察,确定色谱条件为Waters C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm);检测波长225、290、215、365 nm;流动相乙腈-水溶液(50∶50);进样量10μL;柱温35℃;体积流量1.0 m L/min。结论吴茱萸次碱对照品已达到中药质量检测用化学对照品技术要求,所采取的分离、纯化方法简单、安全、可行性强,成本低、效率高,可用于吴茱萸药材及其制剂的质量控制。     

竹茹中苜蓿素对照品的高效液相半制备色谱制备研究

目的建立高效液相半制备色谱制备竹茹中苜蓿素对照品的方法。方法竹茹用50%乙醇提取,浓缩成浸膏,随后上聚酰胺柱色谱,采用70%乙醇柱色谱洗脱物进行HPLC分离制备。半制备色谱条件:色谱柱为Luna C18ODS(250 mm×10mm,10μm),流动相为乙腈-1%甲酸水溶液(35∶65);体积流量4 mL/min;进样量1 mL;检测波长345 nm。结果该法所得化合物用HPLC归一化法定量,质量分数大于98%,根据波谱学数据鉴定化合物为苜蓿素。结论建立的方法简便,所得苜蓿素纯度高,可作为分析方法的对照品。     

姜黄药材中有效成分含量测定

目的 测定不同产地姜黄药材有效成分类姜黄色素(包括姜黄素、去甲氧基姜黄素及双去甲氧基姜黄素)和挥发油的含量.方法 采用NUCLEOSIL 100-10C18(250 mm×8 mm,4μm)色谱柱,流动相为乙腈-4%冰乙酸(体积比为40∶60,pH=3.0);流速1.5 mL·min-1,检测波长为420 nm,测定姜黄素类化合物含量;采用中国药典(2005版)方法考察姜黄中挥发油的含量.结果 不同产地姜黄药材中姜黄素类和挥发油成分含量变化范围较大.根据药典标准,姜黄素合格率为80%,挥发油均未达标.结论 通过检测姜黄素类化合物和挥发油的含量可以为姜黄内在质量控制以及姜黄素类化合物的药理性能研究提供参考数据.     

姜黄及其3种近源品种的姜黄素类成分薄层色谱鉴别及HPLC特征图谱分析

目的：鉴别分析姜黄及其3种近源品种（蓬莪术、温莪术、广西莪术）的姜黄素类成分。方法：以姜黄对照药材,姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素对照品为对照进行薄层色谱鉴别;以姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素对照品为对照物质,采用HPLC对10批姜黄进行特征图谱研究,建立HPLC特征图谱共有模式,进行相似度比较,并将姜黄与3种近源品种进行相似度比对。色谱条件：采用月旭AQ-C18（200mm×4．6mm,5μm）色谱柱,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速1mL·min^-1,检测波长270nm,柱温30℃。结果：供试品色谱中,姜黄与3种莪术的斑点位置、颜色、数量有明显差别;建立了姜黄的HPLC特征图谱,确定了7个共有峰,10批姜黄药材样品的平均相似度在0.97,姜黄与3种近源品种的相似度均低于0．8,特征图谱差异明显。结论：姜黄及其3种近源品种的薄层色谱及HPLC特征图谱差异明显,且方法简便、准确、专属性强,可作为姜黄及其3种近源品种的鉴别,同时也为姜黄对照药材标定技术标准的建立提供了科学依据。     

不同炮制方法对川楝子中川楝素和异川楝素含量的影响

目的:通过HPLC法比较川楝子不同炮制品中川楝素和异川楝素含量的差异。方法:采用HPLC法对川楝子生品及各炮制品,以川楝素和异川楝素作为指标,进行含量测定。色谱条件:色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-水(30∶70);检测波长210 nm;柱温35℃;进样量10μL;流速1.0 m L/min。结果:炒品相对其他炮制品种而言,川楝素和异川楝素含量较高。结论:不同炮制方法中,炒品中川楝素和异川楝素含量下降幅度最小。     

姜黄药材及其饮片的HPLC指纹图谱比较研究

目的 采用HPLC法建立并比较姜黄药材及其饮片的HPLC指纹图谱。方法 用HPLC法,色谱柱为Welchrom-C₁₈柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-水,梯度洗脱;体积流量：0.8 mL/min,柱温25 ℃;检测波长：270 nm。结果 分别建立了姜黄药材及其饮片的HPLC指纹图谱共有模式,并进行了相似度比较。结论 姜黄中各成分均得到了较好的分离,可作为姜黄药材和饮片的专属性指纹图谱;姜黄药材和姜黄饮片的色谱图存在区别,说明炮制对姜黄药材的成分有一定影响。     

姜黄炮制前后姜黄素、挥发油含量比较研究

目的:比较姜黄炮制前后各样品中姜黄素及挥发油含量.方法:采用SHIMADZU,VP-ODS C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相乙腈-0.1％冰醋酸溶液(48:52),流速1.0 mL·min-1,检测波长430 nm,柱温35 ℃.挥发油采用水蒸气蒸馏法.结果:姜黄不同炮制品姜黄素的含量为原药材(10.77 mg·g-1)>微炒品(10.04 mg·g-1)＞生品(10.02mg·g-1)＞酒制品(9.44 mg·g-1)＞醋制品(9.28 mg·g-1).挥发油含量为:原药材(8.05％)＞生品(8.00％)＞酒制品(7.99％)＞微炒品(7.81％)＞醋制品(7.60％).结论:不同炮制方法对姜黄中姜黄素及挥发油含量均有一定的影响.     

不同产地姜黄挥发油的化学成分及其抗氧化活性

目的对不同产地姜黄挥发油成分及其抗氧化活性进行比较。方法气相色谱-质谱联用(GC-MS)法对挥发油化学成分进行分析,DPPH法对其抗氧化活性进行测试。结果四川、海南、泰国和越南产的姜黄挥发油中分别鉴定出31、33、26和25种化学成分,分别占总含有量的74.215%、66.618%、64.055%和66.748%。其中,共有成分11个,主要包括芳姜黄酮、α-姜黄酮、芳姜黄烯、姜烯、β-倍半水芹烯、β-红没药烯、(+)-α-大西洋(萜)酮等。而且,4个产地的姜黄挥发油均表现出一定的抗氧化活性,依次为海南四川泰国越南。结论不同产地姜黄挥发油的化学成分和抗氧化活性均有显著差异。     

金雀花中黄酮苷类组分鉴定及2种成分测定

目的鉴定金雀花中黄酮苷类组分,并测定芦丁和山柰酚-3-O-芸香糖苷的含有量。方法金雀花75%乙醇提取物的HPLC-ESI-MS鉴定采用Waters C18色谱柱(250 mm×3.0 mm,5μm);流动相乙腈-水(含0.2%甲酸),梯度洗脱;体积流量0.3 m L/min;柱温25℃。2种成分含有量的HPLC测定采用Inertsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-水(含0.2%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;检测波长254 nm;柱温25℃。结果金雀花中有9种主要黄酮苷类组分,其中芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷分别在8.83~176.60、4.86~97.20μg/m L范围内线性关系良好(r=0.999 0),平均加样回收率分别为102.35%、100.79%,RSD分别为2.52%、1.27%。结论该方法稳定可靠,可为金雀花的开发利用提供重要科学依据。     

HPLC法同时测定四味姜黄汤散中3种成分

目的建立HPLC法同时测定藏药四味姜黄汤散(姜黄、小檗皮、余甘子、蒺藜)中盐酸小檗碱、槲皮素和姜黄素的含有量。方法四味姜黄汤散甲醇-10%盐酸提取液的分析采用菲罗门Luna-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为0.1%磷酸-乙腈,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;检测波长为360 nm(盐酸小檗碱、槲皮素)和428 nm(姜黄素);柱温30℃。结果盐酸小檗碱、槲皮素和姜黄素的线性范围分别为39.6~198μg/m L、0.326~1.63μg/m L和25.6~128μg/m L(r≥0.999 8)。3种成分的平均回收率在96.9%~98.9%之间。结论该方法简单、灵敏、准确,可用于四味姜黄散的质量控制。     

川桑中桑皮素、桑呋喃A和总黄酮的测定

目的建立HPLC法同时测定川桑Morus notabilis Schneid.中桑皮素和桑呋喃A含有量,分光光度法测定总黄酮含有量。方法桑皮素和桑呋喃A的分析采用YMC-Pack ODS-A色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm);流动相甲醇-水(80∶20);体积流量1 m L/min;柱温25℃;检测波长210 nm。以亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠为显色剂,桑皮素为对照品,测定总黄酮含有量。结果无水乙醇对桑皮素和桑呋喃A的提取效率最高,两者分别在4.88~234.00μg/m L和4.16~199.88μg/m L范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为99.5%和95.0%,RSD(n=6)分别为7.5%和7.6%。总黄酮在7.987 2~199.68μg/m L范围内线性关系良好,吸光度RSD(n=5)为2.72%。两批样品中3者含有量均有显著差异。结论该方法灵敏稳定,重复性好,可用于川桑的质量控制。     

乌斯乃替代品、易混淆品HPLC鉴别

目的 HPLC法鉴别乌斯乃替代品、易混淆品。方法各样品乙酸乙酯提取物的分析采用岛津Shimpack PREP-ODS(HKIT) C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相甲醇-1%乙酸(79∶21);柱温30℃;检测波长285 nm;体积流量1.0 mL/min;进样量10μL。结果乌斯乃HPLC色谱图与市场上替代品、易混淆品相比,共有峰数明显不同,表明化学成分存在较大差异。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于乌斯乃的质量控制。     

不同炮制方法对川棟子中川棟素和异川棟素含量的影响

目的:通过HPLC法比较川棟子不同炮制品中川棟素和异川棟素含量的差异.方法:采用HPLC法对川棟子生品及各炮制品,以川棟素和异川棟素作为指标,进行含量测定.色谱条件:色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm);流动相:乙腈-水(30∶70);检测波长210hm;柱温35℃;进样量10μL;流速1.0 mL/min.结果:炒品相对其他炮制品种而言,川棟素和异川棟素含量较高.结论:不同炮制方法中,炒品中川棟素和异川棟素含量下降幅度最小.     

不同炮制方法对广西莪术挥发油的影响

目的考察不同炮制方法对广西莪术主要成分的影响。方法利用挥发油提取器提取,比较生品及各个醋炙品中挥发油含量;运用HPLC法测定不同炮制品中吉马酮的含量,色谱柱为C18柱(4.60mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-水(67∶33),检测波长210nm,流速为1.0 m L/min;柱温为35℃。结果挥发油的提取结果:麸炒=煨制生品醋煮醋磨醋炙醋炒酒炒醋浸;吉马酮含量比较:生品麦麸炒醋炒醋磨醋煮酒炒煨炙醋浸醋炙。结论不同的炮制品,挥发油和吉马酮含量差异明显。     

莪术不同炮制品挥发油中4种倍半萜类成分的比较

目的比较莪术不同炮制品提取的挥发油中莪术二酮、莪术醇、吉马酮和β-榄香烯的量。方法采用HPLC法测定4种倍半萜类成分的量,Elite Hypersil ODS色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈-水为流动相,梯度洗脱;体积流量1 mL/min;柱温30℃;VWD检测器;检测波长214 nm;进样量为10μL。结果在上述色谱条件下,4种成分均得到很好的分离,各成分的质量浓度与峰面积之间线性关系良好,平均回收率和RSD均符合定量测定的要求。莪术药材中β-榄香烯的量较高,经炮制后其量显著下降,莪术二酮、吉马酮、莪术醇在炮制过程中其量均有所下降,其中以醋煮品各成分量下降最为明显。结论所建立的HPLC法准确、灵敏,可作为莪术不同炮制品挥发油质量控制的方法;不同产地莪术饮片炮制品挥发油中这4种成分的量存在明显差异,经炮制后其量均显著下降。     

HPLC法快速测定生脉注射液指纹图谱

目的采用小粒径色谱柱和HPLC法,建立生脉注射液指纹图谱快速测定方法。方法色谱柱采用Waters X-Bridge~(TM) BEH Shield RP18(4.6 mm×100 mm,2.5μm);流动相为乙腈-水,梯度洗脱;流速为2 mL/min;检测波长为203 nm;柱温为30℃;进样量为4μL。检测10批生脉注射液,并建立对照指纹图谱。以指纹图谱轮廓计算快速法对照指纹图谱与法定对照指纹图谱相似度。结果快速法对照指纹图谱与法定对照指纹图谱相似度为0.944。结论快速测定法色谱轮廓与法定标准法一致。该方法检测快速、准确、可靠,可取代法定标准中指纹图谱检测法。     

藏药诃子的质量标准提高研究

目的:提高诃子的质量标准。方法:以没食子酸、诃子对照药材为对照,新增薄层色谱-生物自显影鉴别;建立HPLC测定没食子酸含量的方法,采用Phenomenex luna C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(5:95);流速1.0 m L/min;柱温30℃;检测波长271 nm;进样量10μL。结果:薄层色谱-生物自显影法鉴别斑点清晰,分离度好,不仅能对诃子进行定性鉴别,还能体现其抗氧化活性;在以上HPLC条件下,没食子酸在10.72~85.76μg呈良好线性关系,线性回归方程为Y=31.248X+9.037(r=0.9997),平均回收率96.1%(RSD 2.54)。结论:新增的方法简单易行,专属性强,重复性好,可用于诃子的质量控制。     

HPLC法同时测定侧柏叶、侧柏炭中的7种成分

目的建立HPLC法同时测定侧柏叶、侧柏炭中杨梅苷、槲皮苷、杨梅素、槲皮素、山柰酚、穗花杉双黄酮、扁柏双黄酮的含有量。方法侧柏叶、侧柏炭提取液的分析采用Welch Ultimate LP-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为甲醇-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱;检测波长330 nm;体积流量1 m L/min。结果杨梅苷、槲皮苷、杨梅素、槲皮素、山柰酚、穗花杉双黄酮、扁柏双黄酮的标准曲线均呈良好的线性关系(r0.999 5),平均回收率为97.6%~101.1%,RSD1.14%(n=6)。结论该方法简便易行,可用于侧柏叶、侧柏炭的含有量测定。