内蒙古盐生肉苁蓉中松果菊苷和麦角甾苷的含量测定

目的:采用高效液相色谱法,测定盐生肉苁蓉中有效成分松果菊苷和麦角甾苷的含量。方法:Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6mm×250mm)。流动相:乙腈-甲醇-1%醋酸溶液(9:14:77)。流速:1.0mL/min,柱温为室温,检测波长334nm。结果:松果菊苷在0.0258mg-0.774mg呈良好的线性关系,回归方程为Y=2141.5X-35.72,r=0.9999;麦角甾苷在0.030mg-0.750mg呈良好的线性关系,回归方程为Y=4065.6X+159.35,r=0.9999。松果菊苷、麦角甾苷平均加样回收率分别为102.2%、103.9%。结论:本法测定简便、快速、灵敏、重复性好,方法可行。     

松果菊苷及异麦角甾苷对神经细胞尼古丁受体表达的影响

目的 研究肉苁蓉活性成分松果菊苷及异麦角甾苷对神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞神经型尼古丁受体表达的影响及其对抗β淀粉样蛋白(Aβ)神经毒性作用机制,以了解其神经保护作用机制.方法 比色法测定细胞MTT还原率筛选松果菊苷及异麦角甾苷安全浓度范围,并用Aβ<,25-35>处理细胞后,测定MTT还原率,蛋白质印迹法(Western blot)测定尼古丁受体α3、α7蛋白表达的变化.结果 松果菊苷及异麦角甾苷能提高细胞α3及α7神经型尼古丁受体亚单位蛋白质表达水平,呈剂量依赖关系;并能对抗Aβ<,25-35>引起的α3和α7受体亚单位蛋白质水平降低,减弱Aβ<,25-35>引起的细胞损伤.结论 松果菊苷及异麦角甾苷可能通过上调神经型尼古丁受体亚单位蛋白来发挥神经保护作用,在阿尔茨海默氏病的治疗中可能起到一定作用.     

松果菊苷对大鼠脑缺血损伤的保护作用

目的 观察松果菊苷(ECH)对大鼠脑缺血损伤海马区神经细胞凋亡的影响.方法 雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、川芎嗪组、ECH大剂量组、ECH小剂量组.采用大鼠大脑中动脉线栓法(MCAO)建立局灶性脑缺血损伤模型,各组造模后24 h处死,取脑.应用HE染色法观察脑组织病理改变,脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法观察大鼠脑缺血后海马区神经细胞凋亡.结果 脑缺血后,海马区神经细胞正常组织结构消失、胞核碎裂、溶解坏死等形态学改变,凋亡神经细胞数量明显增加;与模型组比较,川芎嗪组、ECH大剂量组和ECH小剂量组海马区凋亡神经细胞表达数量均有不同程度的减少.结论 ECH对脑缺血大鼠脑组织具有保护作用,其机制可能与抗细胞凋亡作用有关.     

杨梅素影响EA.hy926人血管内皮细胞增殖、侵袭迁移及微管形成的实验研究

目的:探讨杨梅素抗肿瘤血管新生的作用机制。方法:用不同浓度的杨梅素作用于体外培养的EA.hy926人血管内皮细胞株,采用MTT法观察药物对细胞的增殖抑制作用,划痕法及transwell小室实验观察药物对细胞侵袭迁移能力的影响,tube formation法观察药物对微管形成的影响。结果:杨梅素对EA.hy926细胞的增殖、侵袭迁移及血管生成呈浓度依赖性抑制,尤其在高浓度下(1 m M)其抑制作用最显著(P0.01)。结论:杨梅素的抗肿瘤血管生成作用不仅通过抑制内皮细胞的增殖,而且通过抑制内皮细胞的侵袭迁移及微管样结构的形成来实现。     

松果菊苷的药理研究进展

松果菊苷(ECH)具有显著的抗氧化、保护神经、保护肝脏、抗炎、抗肿瘤、改善学习记忆以及免疫调节等药理作用,值得深入研究开发.本研究对ECH近年来的药理研究进展作一综述.     

松果菊苷延缓衰老作用机制研究

 目的 探讨肉苁蓉提取物松果菊苷（ECH）延缓衰老的药理作用及其可能的作用机制。方法 小鼠皮下注射10% D-GAL 10 mL·kg-1,每天1次,连续8周,建立亚急性衰老模型。阳性组和ECH各组分别同时灌胃给予维生素E 40 mg·kg-1和ECH 20,40,60 mg·kg-1,每天1次。检测小鼠抗应激能力、血清中IL-2、IL-6含量以及脑组织中一氧化氮（NO）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量。结果 与正常组比较,模型组小鼠抗应激能力下降,血清IL-2含量和脑组织NO、SOD含量均显著下降,IL-6和脑组织MDA含量显著升高。ECH各剂量组和维生素E阴性对照组均能提高衰老小鼠抗应激能力、血清IL-2含量和脑组织NO、SOD含量,降低IL-6和脑组织MDA含量。结论 ECH能够提高衰老小鼠的免疫能力、NO含量,减轻D-GAL诱导衰老小鼠的活性氧自由基损伤,这些可能是其延缓衰老的机制之一。     

南疆不同产地肉苁蓉中松果菊苷含量的测定

目的:测定南疆不同产地管花肉苁蓉中松果菊苷的含量。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)进行测定。结果:不同产地和品种的内苁蓉松果菊苷的含量在0.35%～11.93%之间,其中吉木萨尔盐生内苁蓉含量最低,和田管花肉苁蓉含量最高。结论:南疆不同产地内苁蓉中松果菊苷含量的差异很大,同一产地栽培和野生管花肉苁蓉的松果菊苷含量也有差异,为评价肉苁蓉的药材质量提供一定的依据。     

人参皂苷Rg3影响EA.hy926人血管内皮细胞侵袭、增殖及微管形成的实验研究

目的探讨人参皂苷Rg3抗肿瘤血管新生的作用机制。方法用不同浓度的人参皂苷Rg3作用于体外培养的EA.hy926人血管内皮细胞株,采用transwell小室法观察细胞的侵袭能力,MTT法观察细胞抑制率,tube formation法观察微管形成情况。结果人参皂苷Rg3可以剂量依赖性地抑制EA.hy926细胞的侵袭能力及微管形成能力,但对EA.hy926细胞的增殖没有明显的抑制作用。结论人参皂苷Rg3的抗肿瘤血管生成作用不是通过直接抑制内皮细胞的增殖,而是通过抑制内皮细胞形成微管样结构及其侵袭能力来实现的。     

松果菊苷对乙肝病毒复制和抗原表达的影响

以HBV基因转染的HepG2.2.15细胞为体外模型,研究松果菊苷对乙肝病毒(HBV)复制和抗原表达的影响,采用ELISA法测定细胞上清乙肝表面抗原(HBsAg)和E抗原(HBeAg)水平;采用荧光定量PCR法检测HBV DNA水平。以HBV转基因小鼠为体内模型,研究松果菊苷对HBV复制的影响,首先采用荧光定量PCR法检测转基因小鼠肝组织HBV DNA水平,采用ELISA法检测小鼠血清HBsAg和HBeAg水平;同时检测血清转氨酶水平和肝组织病理变化;然后将HBV表达阳性的转基因小鼠随机分为5组:对照组、拉米夫定(50 mg·kg^-1)组和松果菊苷高、中、低剂量(50,25,12.5 mg·kg^-1)组。每天灌胃给药1次,连续给药30 d。第31天分离小鼠血清检测HBV DNA,HBsAg和HBeAg水平;提取肝组织DNA测定其HBV DNA水平,同时作肝组织病理检查。结果表明:松果菊苷在50,100 mg·L^-1作用HepG2.2.15细胞6 d后能显著抑制HBsAg和HBeAg表达,其最高抑制率分别为42.68%,46.29%;同时在100 mg·L^-1对HBV DNA具有抑制作用。此外,松果菊苷在50 mg·kg^-1剂量时能显著抑制HBV转基因小鼠HBsAg与HBeAg表达,其抑制率分别为42.82%,29.12%,同时对转基因小鼠血清HBV DNA水平有显著抑制作用。提示松果菊苷对HBV复制和抗原表达具有较强抑制作用。     

HPLC测定地黄中麦角甾苷的含量

目的:建立用高效液相色谱法测定生地黄和熟地黄中麦角甾苷含量的方法。方法:采用C₁₈柱,以乙腈-0.1%醋酸为流动相,梯度洗脱,检测波长334 nm,流速1.0 mL.min^-1。结果:麦角甾苷在10~500μg.mL^-1时,呈良好的线性关系(r=0.999 0),平均回收率为100.1%,RSD 3.7%。结论:本法可作为地黄质量控制方法。     

华北平原管花肉苁蓉干物质积累和松果菊苷含量动态变化研究

目的：通过对管花肉苁蓉干物质积累和松果菊苷含量的研究,为华北平原人工栽培管花肉苁蓉提供理论依据。方法：比较分析了华北平原管花肉苁蓉不同生长阶段干物质积累量的动态变化,高效液相系统分析了指标性成分松果菊苷含量。结果：管花肉苁蓉干物质积累呈“S”型动态变化,9月份干物质积累增加最多,生长12个月单株干物质量可达138.58 g;不同接种时间的管花肉苁蓉,随着接种时间的推迟,年内干物质积累量显著降低;管花肉苁蓉松果菊苷含量以生长5个月时最高,达到30.59%,之后逐渐降低,生长12个月时松果菊苷含量为9.76%。结论：明确了华北平原一年生管花肉苁蓉干物质积累和松果菊苷含量的动态变化规律。     

管花肉苁蓉中松果菊苷的提取和纯化

本文对管花肉苁蓉中松果菊苷的提取和纯化工艺进行了初步研究。确定了管花肉苁蓉中松果菊苷的最佳提取工艺条件：10倍量75％乙醇回流提取2次,每次1h,此条件下管花肉苁蓉提取物中松果菊苷的含量为11．2％。通过HPD-100大孔吸附树脂纯化后松果菊苷的含量达到32．8％,回收率为91．5％。     

松果菊苷治疗神经系统疾病作用机制的研究进展

松果菊苷是从肉苁蓉Cistanches Herba、玄参Scrophulariae Radix、地黄Rehmanniae Radix等中药中提取的一种苯乙醇苷类化合物,也是肉苁蓉的关键质量指标成分,具有显著的抗炎、抗氧化、神经保护等药理活性。松果菊苷对于神经系统疾病的治疗价值已得到众多基础研究的证实,临床运用潜力巨大。通过对松果菊苷治疗帕金森病、阿尔茨海默病、认知障碍、血管性痴呆等神经系统疾病的药理作用进行归纳,总结其治疗神经系统疾病的可能作用机制,以期为深入探索松果菊苷的后续研究提供参考,为神经系统疾病治疗药物的开发提供理论依据。     

松果菊苷诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的研究

目的:探讨松果菊苷诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的作用及可能的机制。方法:MTT实验观察不同浓度(7.867×10~3mg/L,78.67mg/L,0.7867mg/L,7.867×10~(-3)mg/L)松果菊苷对细胞增殖的影响,采用ELISA测定不同浓度松果菊苷组的碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(BGP)的表达,评价成骨分化的能力。免疫荧光和Western blot检测BMP2、Smad1、Runx2蛋白的表达,RT-PCR检测BMP2、Smad1、Runx2 m RNA的表达,分析成骨分化的可能作用机制。结果:MTT实验结果显示78.67mg/L和0.7867mg/L的松果菊苷促进细胞增殖的能力较好。经典成骨诱导组(10%FBS+3.061×103mg/Lβ-甘油磷酸钠+3.925×10-3mg/L地塞米松+8.806mg/L维生素C)和78.67mg/L的松果菊苷组的ALP(48.07)和BGP(141.67)表达均明显增强。经典成骨诱导组和松果菊苷组的BMP2、Smad1、Runx2蛋白表达及BMP2、Smad1、Runx2 m RNA表达明显增强。结论:松果菊苷可以促进体外培养的骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,其作用机制与BMP2、Smad1、Runx2表达增加有关。     

大鼠口服松果菊苷粪便中代谢物的HPLC-MS^n分析

目的：研究松果菊苷在大鼠粪便中的代谢物。方法：大鼠灌胃松果菊苷（100mg·kg^-1）后收集粪样，运用高效液相色谱和质谱联用技术检测松果菊苷的代谢产物。结果：在给药后大鼠的粪便中，发现并初步鉴定了4个主要代谢产物。结论：大鼠灌胃给予松果菊苷后，其粪便中的主要代谢产物为毛蕊花糖苷、去咖啡酰基毛蕊花糖苷、黄大花洋地黄苷及3,4-二羟基苯乙醇。     

HPLC测定苁蓉通便口服液中松果菊苷的含量

苁蓉通便口服液是用肉苁蓉、何首乌、枳实、蜂蜜等成分加工制成的口服溶液剂,主要用于治疗老年便秘、产后便秘。该制剂标准收载在新药转正标准第十二册,标准中对主药肉苁蓉的检验指标不明确,本文拟采用HPLC法,以肉苁蓉中所含松果菊苷为制剂中肉苁蓉的检验指标,对该制剂中肉苁蓉进行质量控制,结果比较满意。1仪器、试药与样品1.1仪器Agilent 1100 series高效液相色谱仪Agilent G1314A紫外检测器,Agilent化学工作站;XD205SM-DR型电子天平(Prec isa公司)。1.2试药乙腈为色谱纯,水为纯化水,甲醇、36%乙酸为分析纯,松果菊苷对照品(中国药…     

HPLC测定天地从容酒中松果菊苷的含量

目的:建立天地从容酒的质量控制方法。方法:采用HPLC法,以C18为色谱柱,流动相为甲醇-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量为1.0 m L·min~(-1);检测波长为330 nm;柱温为35℃。结果:松果菊苷在0.0255~0.612 mg·mL~(-1)范围内,峰面积与进样量呈良好的线性关系,r=0.999 9;平均回收率为100.59%,相对应的RSD为1.90%;该方法精密度、重复性、稳定性均良好,RSD均小于2.1%。结论:该法简便准确,重现性好,灵敏度高,可用于天地从容酒中松果菊苷含量的质量控制。     

熟地黄麦角甾苷对小鼠肾毒血清肾炎治疗作用的研究

目的：观察麦角甾苷对小鼠肾毒血清肾炎的作用，以期将麦角甾苷开发成治疗肾炎的新药。方法：采用小鼠肾毒血清肾炎模型，给予麦角甾苷10、30、90mg／kg口服，给药5天和10天后作肾功能及肾组织学检测。结果：给药5天和10天后，麦角甾苷三个剂量都能明显降低尿蛋白、尿素氮、总胆固醇（P值分别〈0．05，〈0．01，〈0．001）；明显升高白蛋白（P值分别〈0．05，〈0．01，〈0．001）。肾组织学检测发现三个给药组肾小球基底膜增厚程度均轻于模型组，肾小管蛋白管型亦比模型组轻。结论：麦角甾苷对小鼠肾毒血清肾炎有良好的治疗作用，提示麦角甾苷对于人类免疫性肾炎可能具有一定的临床意义和应用前景。     

益气消症法中药含药血清干预ERmRNA及VEGFRmRNA表达抑制EA.hy926增殖的研究

[目的] 探讨益气消症法中药含药血清对人脐血管内皮细胞株（EA.hy926）增殖的影响,了解其抑制子宫肌瘤血管生成的途径。[方法] 体外培养EA.hy926细胞,分为正常对照组、雌二醇（E2）组、E2加中药高、中、低剂量组,采用噻唑蓝（MTT）法、划痕法、流式细胞法、逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测细胞的增殖、迁移、凋亡率及ERαmRNA、ERβmRNA与VEGFR1mRNA、VEGFR2mRNA表达水平。[结果] 益气消症法中药可明显阻断E2对EA.hy926细胞增殖和迁移的促进作用,降低ERαmRNA与VEGFR1mRNA、VEGFR2mRNA表达,阻断E2 对EA.hy926细胞的凋亡的抑制作用,上调ERβmRNA的表达,与E2组比较差异有统计学意义（P<0.01）,且作用效果呈剂量相关性。[结论] 该法方药可通过下调ERαmRNA与VEGFR1mRNA、VEGFR2mRNA表达,上调ERβmRNA的表达,从而抑制EA.hy926细胞的增殖和迁移,促进其凋亡,干预血管生成是其治疗子宫肌瘤的作用机制之一。     

熟地黄麦角甾苷对小鼠肾毒血清肾炎治疗作用的研究

目的:观察麦角甾苷对小鼠肾毒血清肾炎的作用,以期将麦角甾苷开发成治疗肾炎的新药。方法:采用小鼠肾毒血清肾炎模型,给予麦角甾苷10、30、90mg／kg口服,给药5天和10天后作肾功能及肾组织学检测。结果:给药5天和10天后,麦角甾苷三个剂量都能明显降低尿蛋白、尿素氮、总胆固醇（p值分别<0．05,<0．01,<0．001）;明显升高白蛋白（p值分别<0．05,<0．01,<0．001）。肾组织学检测发现三个给药组肾小球基底膜增厚程度均轻于模型组,肾小管蛋白管型亦比模型组轻。结论:麦角甾苷对小鼠肾毒血清肾炎有良好的治疗作用,提示麦角甾苷对于人类免疫性肾炎可能具有一定的临床意义和应用前景。