血府逐瘀汤对大鼠血管平滑肌细胞MMP-2、TIMP-1表达的影响

目的 观察血府逐瘀汤含药血清对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)迁移、侵袭的影响,以及其生成MMP -2、TIMP -1情况,探讨其作用机制.方法 通过划痕损伤实验、Boyden - chamber细胞侵袭实验观察VSMCs的迁移、侵袭,RT - PCR检测血府逐瘀汤含药血清对基质金属蛋白酶-2(MMP -2)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的mRNA表达.结果 与空白对照组比较,血府逐瘀汤高剂量组和中剂量组能显著抑制VSMCs的增殖和迁移(P＜0.05);与空白对照组比较,血府逐瘀汤组均能明显下调MMP-2 mRNA的表达同时上调TIMP-1 mRNA的表达(P＜0.01).结论 血府逐瘀汤含药血清有抑制VASMCs迁移和侵袭的作用,MMP -2表达降低、TIMP -1的表达升高可能是其机制之一.     

泽泻汤对Ox-LDL介导的血管平滑肌细胞SM22a表达的影响

目的:观察泽泻汤对VSMCs标志性蛋白SM22a表达的影响,研究其在抑制VSMCs表型转化方面的作用。方法:用Ox-LDL(0.05mg/mL)处理大鼠VSMCs 24h,经泽泻汤醇提取物低中高浓度(0.075mg/mL、0.3mg/mL、0.6mg/mL)干预24h,免疫细胞化学法检测表型转化标志性蛋白SM22a的表达情况。结果:与空白组比较,模型组(Ox-LDL诱导)SM22a表达明显降低(P0.05);经泽泻汤干预后,SM22a蛋白表达水平较模型组显著增加(P0.05),且随浓度增高呈递增趋势(P0.05)。结论:泽泻汤能明显上调表型转化标志蛋白SM22a的表达,表明泽泻汤有一定的抑制VSMCs表型转化的作用。     

中药对血管平滑肌细胞的影响

整理和分析中药对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)的影响。血管疾病对患者的危害较大,VSMC的表型转化、过度增殖和迁移是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)、血管成形术后再狭窄和高血压等血管疾病形成的主要环节,故研究中药对VSMC的调节作用对血管疾病的防治意义重大。对中药促使VSMC表型转化、抑制细胞异常增殖和迁移及其分子机制、基础动物实验等方面的研究文献报道进行总结,并对血管平滑肌细胞与内皮细胞、内皮祖细胞及巨噬细胞之间的关系进行分析。结果表明,中药在AS等血管疾病的防治中具有良好的效果,但由于其成分复杂,作用机制难以明确、质量难以控制及毒副作用限制了其在临床中的应用,故结合中药血清药理学等方法,加强中药活性单体化合物对VSMC调节作用的深入研究或将给血管疾病的防治带来新的希望。     

血管平滑肌细胞表型对动脉硬化类疾病的影响

正收缩型血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMCs)是一种处于低分泌状态的分化型细胞,主要作用是维持血管的收缩性能。由于VSMCs的表型具有可塑性,在受到生物刺激或机械损伤后,表型会由收缩型转变成合成型,又称去分化型。合成型VSMCs分泌能力较强,可以大量地增殖、迁移,产生细胞外基质蛋白,导致功能性紊乱、管壁增厚、管腔狭窄、血管顺应性降低和血管重塑。表型转变成     

阿魏酸对血管内皮细胞生长因子诱导的血管平滑肌细胞迁移的影响

目的研究单体阿魏酸对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)迁移的影响,并探讨相关机制。方法体外培养VSMCs,在血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)诱导条件下,用单体阿魏酸进行干预,划痕实验、侵袭实验检测对VSMCs迁移的影响;PT-PCR检测对基质金属蛋白酶(matrix metal loproleinase,MMP)-2、MMP-9mRNA表达的影响;Western blot法检测对金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP)-1、TIMP-2蛋白表达的影响。结果 (1)在VEGF诱导条件下,阿魏酸102、103ng/mL可抑制VSMCs的迁移;(2)阿魏酸102、103ng/mL可下调VEGF诱导的VSMCs MMP-9mRNA的表达;(3)阿魏酸102、103ng/mL均可上调VEGF诱导的VSMCs TIMP-2蛋白的表达。结论阿魏酸102、103ng/mL均可抑制VEGF诱导的VSMCs迁移,阿魏酸可通过抑制VEGF诱导的VSMCs MMP-9的表达,促进VEGF诱导的VSMCs TIMP-2的表达起到抑制VEGF诱导的VSMCs迁移的作用。     

奥美沙坦对动脉粥样硬化大鼠斑块稳定性的影响

目的观察奥美沙坦对动脉粥样硬化（AS）大鼠斑块中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、血管平滑肌细胞、巨噬细胞数量的影响,探讨其稳定AS斑块的作用及可能机制。方法应用高脂饮食建立AS大鼠模型,将16只健康雄性Wistar大鼠随机分为两组,每组8只。模型组饲喂含1%胆固醇、5%猪油的高脂饲料;奥美沙坦组饲喂含1%胆固醇、5%猪油高脂饲料加奥美沙坦1 0mg/（kg.d）,连续用药3个月。免疫组化法检测AS斑块中MMP-9的蛋白表达水平及粥样斑块中血管平滑肌细胞和巨噬细胞数量。结果免疫组化显示,奥美沙坦组与模型组相比MMP-9蛋白表达显著减少（P〈0.0 5）,平滑肌细胞数量显著增加（P〈0.05）,巨噬细胞数量明显降低（P〈0.05）。结论奥美沙坦可通过下调MMP-9的水平,增加斑块中平滑肌细胞数量,减少斑块内巨噬细胞的数量来稳定AS斑块。     

阿魏酸、绿原酸对血管平滑肌细胞黏附的影响

目的:研究单体阿魏酸、绿原酸对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)黏附的影响,并探讨相关机制。方法:体外培养VSMCs,用单体阿魏酸、绿原酸进行干预,检测其对VSMCs与基质的黏附、VSMCs之间的黏附的影响;PT-PCR检测对基质金属蛋白酶(matrix metal loproleinase,MMP)MMP-2、MMP-9 m RNA表达的影响。结果:(1)阿魏酸(102ng/m L、103ng/m L)、绿原酸(102ng/m L、103ng/m L)对VSMCs与基质的黏附无影响;(2)阿魏酸(102ng/m L、103ng/m L)促进了VSMC之间的黏附;(3)阿魏酸(102ng/m L、103ng/m L)可下调VSMCs MMP-9 m RNA的表达。结论:阿魏酸可促进VSMC之间的黏附,这种作用是通过抑制VSMCs MMP-9 m RNA的表达实现的。     

水蛭素对高同型半胱氨酸大鼠血管平滑肌细胞的影响

目的：观察水蛭素对高同型半胱氨酸(Hcy)大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)的作用机制。方法：50只SD大鼠,采用随机数字表法分为正常组、模型组和水蛭素3个不同剂量组(25、50、100 AT-U/mL),每组10只。正常组予以普通饲料喂养,模型组及水蛭素组大鼠予以普通饲料及DL-蛋氨酸灌胃,造模21周,测血脂4项、血清Hcy,水蛭素组皮下注射水蛭素,2周后测血脂和Hcy,取胸主动脉组织。采用苏木精-伊红(HE)染色和免疫组织化学染色观察胸主动脉组织病理变化及B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)和胱天蛋白酶3(Caspase3)表达;实时荧光定量(RT-qPCR)检测Bcl-2、Bax和Caspase3的mRNA表达。结果：水蛭素各剂量组三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量显著降低(P<0.01),水蛭素高剂量组血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量显著升高(P<0.01);水蛭素各剂量组主动脉内膜增厚、VSMC增生减轻;水蛭素高、中剂量组胸主动脉组织Caspase3、Bax蛋白表达增多,Bcl-2蛋白的...     

基质金属蛋白酶组织抑制剂与动脉粥样硬化

基质金属蛋白酶组织抑制剂（TIMPs）在动脉粥样硬化（AS）形成过程中起着十分重要的作用，TIMPs通过抑制基质金属蛋白酶（MMPS）从而可延缓或阻止AS发生和发展。     

转化生长因子β对动脉粥样硬化中血管平滑肌细胞的作用及其影响

血管平滑肌细胞(VSMCs)的活化、增殖和迁移是动脉粥样硬化病变发展的必要条件[1].在生理状态下,VSMCs合成并分泌胶原等细胞外基质维持血管的正常的正常结构和功能.但是,粥样斑块形成早期,VSMCs从血管中膜迁移至内膜,进而增殖并发生表型变化,合成并分泌细胞外基质、释放多种生长因子、细胞因子.还可摄取脂质成为肌源性泡沫细胞.经过几十年的发展,VSMCs最终和其他细胞一起形成阻碍血流的巨大粥样斑块.     

水蛭粉对高脂血症大鼠动脉粥样硬化形成过程的干预机制

目的探讨水蛭粉干预高脂血症大鼠动脉粥样硬化形成过程的机制。方法将健康雄性SD大鼠50只随机分为5组,即空白对照组、模型对照组、水蛭粉低、中、高剂量组。采用高脂饮食法建立高脂血症大鼠模型,药物组在造模的同时给予药物灌胃,共饲养8周。用生化法检测血清和肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)水平;用ELISA法检测主动脉壁单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达。结果与模型对照组相比,水蛭粉可明显降低肝脏指数、脂肪指数和MDA水平,增加SOD活性,下调MCP-1的表达(P<0.05或P<0.01)。结论水蛭粉可通过减少体内脂质沉积、调节机体代谢紊乱、减轻氧化损伤、抑制炎症反应等环节,干预动脉粥样硬化的形成。     

水蛭通过p38MAPK信号通路对早期动脉粥样硬化大鼠VSMCs的影响

为了探究中药水蛭干预作用下p38MAPK信号转导通路对早期动脉粥样硬化(AS)大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖与凋亡的影响及其可能机制。实验通过生化分析仪检测中药水蛭对大鼠血脂(TG,TC,LDL-C,HDL-C)水平的调控;ELISA检测血清中TGF-β1的水平;免疫组织化学法(IHC)检测VSMCs的PCNA,Caspase-3表达水平;Western blot检测中药水蛭对VSMCs中MKK3,p38及C-myc蛋白表达的影响;HE染色观察大鼠胸主动脉形态变化。结果显示,中药水蛭可使TC,LDL-C明显降低,HDL-C升高,TGF-β1,PCNA的表达水平明显下降,Caspase-3表达上调,MKK3,p38及C-myc蛋白表达水平下降,以及抑制内膜增厚、减少斑块形成。以上结果表明中药水蛭可能通过调降血脂,降低TGF-β1水平,影响p38MAPK信号通路蛋白表达,从而抑制VSMCs的增殖、促进其凋亡,抑制内膜增厚、减少斑块形成等环节,进而干预早期AS进程。     

动脉粥样硬化大鼠"痰瘀"病理演变与血管平滑肌细胞凋亡的相关性研究

目的 探讨动脉粥样硬化模型大鼠随着造模时间的推移“痰瘀”演变规律。方法 采用高脂饲料喂饲法复制大鼠动脉粥样硬化模型,用生化法及免疫组化法,根据造模时间先后动态检测血脂、血液流变学、血糖、胰岛素及血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡指标的变化。结果 动脉粥样硬化大鼠由痰到瘀的变化,血脂、血液流变学、血糖、胰岛素及胰岛素敏感指数等指标均随病情加重而变化,细胞凋亡逐渐增加。结论 细胞凋亡增加是动脉粥样硬化大鼠由痰致瘀终至痰瘀互结的必然结果。     

银杏叶提取物(EGb761)通过调控AMPK/KLF4途径抑制血管平滑肌细胞表型转化

目的探讨银杏叶提取物(EGb761)对血小板源生长因子(PDGF)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化的影响及其机制。方法体外培养原代VSMCs,使用20 ng·mL^-1的PDGF诱导VSMCs表型转化,采用MTT法和划痕实验检测不同浓度(1、10、100μg·mL^-1)EGb761对VSMCs增殖和迁移的作用;采用免疫荧光和Western blot分别检测VSMCs肌丝排列情况和表型转化相关蛋白α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、calopnin、骨桥蛋白(OPN)以及AMPK/KLF4通路蛋白表达的改变。结果与对照组相比,PDGF诱导VSMCs增殖和迁移明显增强,而EGb761呈浓度依赖性抑制PDGF诱导的VSMCs增殖和迁移;与对照组相比,PDGF组细胞肌丝F-actin排列紊乱、荧光减弱;α-SMA、calponin表达减弱,而OPN表达增强;PDGF+EGb761组细胞肌丝F-actin排列较整齐、荧光较强;α-SMA、calponin表达增强,OPN表达减弱,且呈浓度依赖性。此外,与对照组相比,PDGF能明显诱导AMPK磷酸化水平增加和KLF4表达上调,EGb761呈浓度依赖性抑制AMPK/KLF4通路的激活。使用AMPK通路抑制剂compound C抑制AMPK/KLF4通路后,EGb761对PDGF介导的VSMCs表型转化的抑制作用得到加强;反之,使用AMPK通路激活剂AICAR激活AMPK/KLF4通路后,EGb761对介导的VSMCs表型转化的抑制作用得到逆转。结论EGb761通过抑制APMK/KLF4通路拮抗PDGF诱导的VSMCs表型转化。     

电针水沟穴对脑梗死急性期大鼠血管平滑肌细胞表型标志性蛋白的影响

目的：观察脑梗死急性期大鼠血管平滑肌细胞表型标志性蛋白PLN、MGP的变化,并探讨电针干预效应。方法：健康雄性Wistar大鼠60只随机分为空白组、假手术组、模型组和电针组,空白组和假手术组各6只,模型组和电针组又按术后3 h、6 h、24 h与72 h分为4个时相,每个时相6只,以改良的Longa腔内线栓法制备永久性大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。电针组予2/15 Hz, 2 mA电针刺激水沟穴20 min, 3 h、6 h与24 h组造模后即刻针刺1次,72 h每日针刺1次。模型组、假手术组和空白组在对应时间点抓取固定。采用NSS评分法对各组不同时相大鼠神经功能缺损情况进行评估;运用免疫组化法检测急性期(3 h、6 h、24 h与72 h)大鼠右侧大脑中动脉血管平滑肌细胞表型标志性蛋白受磷蛋白(PLN)、基质Gla蛋白(MGP)的变化及电针干预效应;运用Western Blot法检测各组急性期(3 h、6 h、24 h与72 h)大鼠右侧大脑中动脉血管平滑肌细胞表型标志性蛋白PLN、MGP的变化及电针干预效应。结果：MCAO后,模型组及电针组大鼠NSS评分随缺血时间延长呈逐渐下降趋...     

2-甲氧基肉桂醛对PDGF-BB诱导的血管平滑肌细胞表型转化的影响

目的：研究2-甲氧基肉桂醛（2-MCA）对大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖、迁移及表型转化的影响。方法：从大鼠主动脉中提取原代VSMCs体外培养，用10 ng/mL的血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)和不同浓度2-MCA处理细胞24 h，将其分为对照组、PDGF-BB组和PDGF-BB+2-MCA组。采用CCK8法检测药物毒性及细胞增殖情况，划痕实验及Transwell小室检测细胞迁移情况，Western blot法检测SMMHC、SMTN、OPN蛋白表达情况。结果：与对照组比较，PDGF-BB能够明显促进VSMCs增殖（P <0.000 1）和迁移（P <0.01），并且使OPN表达增多，SMMHC和SMTN表达减少（P <0.05）;2-MCA干预后，VSMCs增殖和迁移均减少（P <0.05）,SMMHC和SMTN表达增多，OPN表达减少（P <0.05）。结论：2-MCA能够抑制PDGF-BB诱导的VSMCs表型转化，进而抑制其增殖和迁移。     

温肾化痰方对动脉粥样硬化模型大鼠主动脉血管平滑肌细胞凋亡及细胞内胆固醇酯的影响

目的:探讨温肾化痰方对氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)诱导的动脉粥样硬化模型大鼠主动脉血管平滑肌细胞凋亡及细胞内胆固醇酯的影响.方法:将大鼠主动脉血管平滑肌细胞分为正常组(10％Gibco)、对照组(ox-LDL 70 mg/L+10％Gibco)及低剂...     

绞股蓝总苷逆转胆固醇诱导的血管平滑肌细胞表型转化

目的：研究绞股蓝总苷（Gypenosides,GP）对胆固醇所致人血管平滑肌细胞（Human Vascular Smooth Muscle Cells,HVSMCs）表型转化的影响。方法：体外培养人VSMCs株,分别用1.0、10.0、100.0μg?mL^-1的GP预处理1h后,再加入50.0mg?L^-1的胆固醇处理48h。透射电镜观察细胞超微结构改变;Western blot法检测VSMCs中α-平滑肌肌动蛋白（Smooth Muscle alpha-Actin,α-SMA）、平滑肌22α（Smooth Muscle 22 alpha,SM22α）及表皮调节素（Epiregulin）蛋白表达;实时定量PCR检测VSMCs中生长抑制同源基因（Growth arrest-specific homeobox,Gax）基因的表达。结果：与正常对照组比较,胆固醇组各指标差异均有统计学意义（P<0.01）;与胆固醇组比较,10.0、100.0μg?mL^-1GP可逆转胆固醇所致细胞超微结构的改变,增加细胞收缩表型标志蛋白α-SMA、SM22α的表达及减少合成表型标志蛋白Epiregulin的表达（P<0.05）,并能减少胆固醇所致的细胞增殖（P<0.05）。GP可逆转胆固醇所致的转录因子Gax的减少（P<0.05）。结论：GP可逆转胆固醇所致的VSMCs表型转化,并可能与增加转录因子Gax的表达有关。     

茶多酚对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的　探讨茶多酚对离体大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响。方法　体外培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞 ,应用不同剂量的茶多酚作用 2 4 h后 ,采用 MTS/ PES法确定血管平滑肌细胞的增殖状态。应用流式细胞术测定细胞周期。结果　与对照组相比 ,茶多酚对血管平滑肌细胞增殖具有明显的抑制作用 (P<0 .0 0 1)。流式细胞术检测结果表明 ,茶多酚可以使血管平滑肌细胞大部分处于 G0 / G1 期 ,与对照组相比有明显差异 (P<0 .0 5 ) ,并且可以诱导其凋亡。结论　茶多酚可明显抑制离体大鼠血管平滑肌细胞的增殖。     

麝香保心丸对血管平滑肌细胞表型转化和增殖的影响

目的:观察麝香保心丸(SXBXW)对血管平滑肌细胞表型转化和增殖的影响。方法:培养平滑肌细胞系RASMC P8细胞并将其分成对照组和SXBXW药物组。并观察SXBXW对细胞增殖、增殖周期、对血管平滑肌α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和肌球蛋白重链(SM-MHC)表达的影响。结果:麝香保心丸抑制RASMC P8细胞由收缩型向合成型转化,表现为收缩型细胞的标志物α-SMA和SM-MHC标记的阳性细胞增加,阴性细胞减少,同时抑制RASMC P8细胞周期从G1期向S期转化,从而抑制细胞的增殖。结论:SXBXW能有效的抑制血管平滑肌的细胞表型转化和细胞增殖。