脑络通颗粒对动脉粥样硬化小鼠血管组织NF-κB、PPAR-γ的影响

目的探讨脑络通颗粒抗动脉粥样硬化(AS)的可能作用机制。方法 30只8周龄ApoE-/-小鼠高脂饲料饲养10个月建立AS模型,随机分为模型组、脑络通组、辛伐他汀组,每组10只;同时以同周龄C57BL/6J小鼠10只作为空白组。脑络通组小鼠给予脑络通颗粒溶液6.67 g/kg灌胃,辛伐他汀组给予辛伐他汀片溶液6.67mg/kg灌胃,空白组和模型组给予等量生理盐水,各组均每天灌胃1次,共2个月。比较各组小鼠血脂水平及血管组织斑块面积指数、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、核因子κB(NF-κB)、过氧化体增殖物激活型受体γ(PPAR-γ)蛋白及mRNA水平。结果与空白组比较,模型组小鼠血脂水平及血管组织TNF-α蛋白、NF-κB蛋白及mRNA升高,PPAR-γ蛋白及mRNA降低(P0.01);与模型组比较,脑络通组和辛伐他汀组小鼠血脂水平、血管组织斑块面积指数及血管组织TNF-α蛋白、NF-κB蛋白及mRNA降低,PPAR-γ蛋白及mRNA升高(P0.01)。结论脑络通颗粒能调控ApoE-/-小鼠AS模型NF-κB与PPAR-γ的平衡,可能是其抗AS的机制之一。     

四妙勇安汤对ApoE~(-/-)动脉粥样硬化小鼠IL-6和MCP-1的影响

目的:研究四妙勇安汤对高脂饲料喂养的ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化炎症反应的干预作用。方法:采用高脂饲料喂养ApoE~(-/-)小鼠14周制备动脉粥样硬化模型,成模后随机分为5组:模型组,阳性药组(阿托伐他汀,2.57 mg·kg~(-1)),四妙勇安汤高剂量组(34.9 g·kg~(-1))、四妙勇安汤中剂量组(23.14 g·kg~(-1))和四妙勇安汤低剂量组(11.61 g·kg~(-1)),分别灌胃给药12周,同时以C57BL/6小鼠为正常对照组,给予去离子水灌胃12周。采用生化仪检测三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量;HE染色观察主动脉血管形态,并测量主动脉内膜厚度(IT)、中膜厚度(MT)、血管管腔面积(LA)、粥样斑块面积(PA)、内中膜厚度比(IT/MT)、管腔狭窄率(PA/LA);采用流式高通量多因子检测技术检测血清中白介素-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)炎症细胞因子表达。结果:与对照组相比,模型组小鼠血清TC、TG、LDL-C明显提高,HDL-C明显降低,PA、IT及IT/MT明显升高(P0.01)。与模型组比较,四妙勇安汤能够明显降低ApoE~(-/-)小鼠主动脉PA、IT及IT/MT(P0.01),并明显降低IL-6及MCP-1表达(P0.01、P0.05),但对血脂水平无明显的影响。结论:四妙勇安汤可以通过抑制炎症反应防治动脉粥样硬化,而不依赖血脂水平的变化。     

通肾络1号对高糖状态下大鼠肾系膜细胞金属蛋白酶2及其抑制物2mRNA影响的研究

目的:探讨通肾络1号对在高糖刺激下大鼠肾系膜细胞MMP-2、TIMP-2mRNA转录水平及其对细胞培养上清产物FN、ColⅣ的影响。方法:大鼠肾小球系膜细胞在高糖、高糖 ET-1、高糖 ANGⅡ培养下,给予通肾络1号、缬沙坦刺激后,运用荧光定量PCR方法及ELISA方法检测MMP-2、TIMP-2mRNA转录水平及细胞培养上清产物FN、ColⅣ的含量。结果:通肾络1号能提高高糖刺激下大鼠肾小球系膜细胞MMP-2mRNA转录水平(P<0.05),降低TIMP-2mRNA水平(P<0.05),以及提高MMP2/TIMP2(P<0.05)比值,降低细胞上清FN(P<0.05)、ColⅣ含量(P<0.05)。结论:通肾络1号降低细胞上清FN、ColⅣ含量是通过提高高糖刺激下系膜细胞MMP-2mRNA转录水平,降低TIMP-2mRNA水平,达到提高MMP2/TIMP2比值实现的。     

脑络通颗粒对apoE-／-小鼠血管LOX-1ICAM-1TNFoL表达的影响

目的：研究脑络通对apoE-／-小鼠AS模型血管壁LOX-1、ICAM—1、TNFtx的影响。方法：2月龄健康雄性apoE-／-小鼠30只,随机分为模型组、脑络通组、辛伐他汀组,每组10只,高脂饲料饲养10月;同时设立同周龄c57BL／6J小鼠作为正常对照组,正常饲料饲养。10月后,全部小鼠饲料换为正常饲料,同时按照分组,给予相应药物。2月后小鼠取血清,生化法检测血脂;分光光度法检测MDA、SOD、GSH、ox—LDL。取主动脉,HE染色检911病变;westernblot检测LOX-1、ICAM-1、TNFct的表达;PCR检测LOX1mRNA的水平。结果：脑络通可以降低ApoE-／-小鼠AS模型血液中TC、TG、LDL-C的水平,调节血脂;升高SOD、GSH的浓度,降低MDA的浓度、降低OX—LDL的浓度,显示其抗氧化作用;降低血管组织ICAM—1与TNFa等炎症因子的表达,降低LOX-1与LOX-1mRNA的水平;抑制斑块面积。结论：脑络通抑制apoE-／-小鼠AS病变,可能与其降低血脂,抑制氧化应激与炎症因子的表达有关。     

复脉颗粒对心房颤动患者心房重构的临床疗效及其作用机理研究

目的:观察复脉颗粒治疗房颤的疗效及对房颤患者心房重构的影响。方法:将符合纳入标准的61例房颤患者随机分为2组,对照组30例予常规治疗,治疗组31例在对照组基础上予口服复脉颗粒治疗。分别在治疗前与治疗4周后,记录2组患者B型尿钠肽(BNP)、C-反应蛋白(CRP)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1);心房内径(LAD)、射血分数(EF);临床症状的变化,并初步探讨复脉颗粒的作用机理,同时观察2组患者治疗期间的不良反应。结果:治疗组治疗前后平均心室率、BNP、MMP-9、TIMP-1、CRP组内比较,差异均有显著性意义(P0.05)。上述指标2组治疗后比较,差异也有显著性意义(P0.05)。2组治疗前后心悸、胸闷、气短、乏力、头晕等中医症状体征积分组内比较,差异均有显著性意义(P0.05)。2组治疗后比较,差异也有显著性意义(P0.05)。证候疗效治疗组总有效率为90.32%,对照组为66.67%,2组比较,差异有显著性意义(P0.05)。在观察过程中,治疗组无不良反应的证据;对照组2例患者出现恶心、腹泻,未予处理,症状消失。结论:复脉颗粒治疗房颤疗效肯定,且无明显毒副反应。     

基于Wnt/β-catenin通路探讨通心络胶囊对ApoE-/-动脉粥样硬化小鼠炎症水平的影响

目的 探究通心络胶囊对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化形成的影响及其通过Wnt/β-catenin信号通路产生的作用机制。方法 将24只ApoE-/-小鼠随机分为正常饮食组（n=6）及高脂饮食组（n=18）。高脂饮食组喂养8周后，随机分为阿托伐他汀组（n=6）、通心络胶囊组（n=6）、模型组（n=6），并分别给予阿托伐他汀4.8 mg/kg、通心络胶囊超微粉1.5 g/kg以及同体积的生理盐水，每日1次，持续8周。末次给药后禁食12 h，收集各组小鼠主动脉组织进行苏木素-伊红（HE）及油红O染色，观察主动脉斑块情况；收集小鼠血清，采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的含量；并通过蛋白免疫印迹法（Western blotting）和实时荧光定量聚合物酶链式反应（Real-time PCR）检测主动脉组织中Wnt1、Wnt3a、β-catenin蛋白及基因表达量的变化。结果 与正常组相比较，模型组小鼠的斑块面积明显增加，血清中的炎症因子TNF-α和IL-6含量增加。与模型组相比较，通心络胶囊能够明显降低ApoE-/-小鼠粥样硬化斑块面...     

二氢杨梅素保护ApoE~(-/-)动脉粥样硬化小鼠的作用及其机制

目的探讨二氢杨梅素(dihydromyricetin,DHM)对高脂诱导的ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化的对抗作用及作用机制。方法取健康雄性ApoE~(-/-)小鼠30只,随机分为3组,即模型组、二氢杨梅素组[50 mg/(kg獉d)]和阿托伐他汀组[5 mg/(kg獉d)],每组10只;另取10只C57BL/6 J小鼠作为对照组。对照组与模型组小鼠予以0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃,药物组小鼠灌以0.5%羧甲基纤维素钠溶液配制的药物混悬液,灌胃容积均为0.2 mL/10 g。同时所有小鼠均给予高脂饲料(0.3%胆固醇,20%脂肪)饲养。10周后,眼眶取血,分离血清,生化仪检测血脂4项水平,试剂盒检测血清氧化酶活性。取心脏油红O染色观察主动脉根部脂质沉积;免疫荧光检测斑块处巨噬细胞的堆积以及Caspase-3的表达;TUNEL试验检测主动脉瓣膜处巨噬细胞凋亡情况。结果连续灌胃10周后,与模型组相比,DHM组小鼠血清TC、TG和LDL-C水平显著下降,主动脉瓣膜处粥样硬化斑块显著减少;DHM组血清MDA水平明显降低,CAT、GSH-Px和SOD活性明显提高;主动脉根部细胞Caspase-3表达明显降低;巨噬细胞在动脉粥样硬化斑块处的堆积减少,TUNEL实验结果显示DHM组斑块处巨噬细胞的凋亡明显降低。结论二氢杨梅素能够改善高脂饲料诱导的ApoE~(-/-)动脉粥样硬化小鼠脂质堆积,其机制可能与抑制巨噬细胞凋亡有关。     

辛通畅络法对膜性肾病小鼠肾功能指标和基质金属蛋白酶-9的影响

<正>膜性肾病(MN)是临床肾病综合征中常见病理类型,以肾小球基底膜的增厚为典型病理表现。基质金属蛋白酶(MMP)是具有降解细胞外基质作用的酶类,其中MMP-9主要降解Ⅳ型胶原蛋白,而肾小球基底膜中的主要成分是Ⅳ型胶原蛋白。本实验应用MMP-9基因敲除小鼠,建立阳离子化牛血清白蛋白诱导膜性肾病模型,观察辛通畅络中药复方肾络宁的疗效,并探讨其作用机理。1实验材料1.1实验动物:远交系健康雄性Balb/c小鼠(8周龄),     

津力达颗粒对高脂诱导的胰岛素抵抗ApoE~(-/-)小鼠骨骼肌SREBP-1c的影响

目的探究津力达颗粒(人参、黄精、苍术、苦参、麦冬、地黄、何首乌、山茱萸等)对高脂诱导的胰岛素抵抗Apo E-/-小鼠骨骼肌甘油三酯相关基因的影响。方法 8只雄性C57BL/6J小鼠设为正常组。40只雄性Apo E-/-小鼠喂养16周后分为模型组、罗格列酮组、津力达颗粒低,中和高剂量组,灌胃给药8周.采用组织游离脂肪酸试剂盒、BCA蛋白浓度法测定骨骼肌游离脂肪酸含量;葡萄糖耐量实验(OGTT)评价小鼠的胰岛素抵抗程度;实时荧光定量反转录PCR和蛋白质印迹法(Western-blot)测定小鼠骨骼肌胰岛素受体、胰岛素受体底物2、胆固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)mRNA和蛋白表达。结果津力达颗粒能够降低小鼠的空腹血糖、胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇,升高高密度脂蛋白,下调小鼠骨骼肌游离脂肪酸含量,提高胰岛素敏感指数。同时上调小鼠胰岛素受体和胰岛素受体底物2,下调SREBP-1c mRNA和蛋白表达。结论津力达颗粒能够明显改善小鼠糖耐量异常来改善高脂诱导的Apo E-/-小鼠的胰岛素抵抗。     

依折麦布对高脂饮食ApoE~(-/-)小鼠骨微结构的影响

目的观察依折麦布对高脂饲料喂养的ApoE基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠骨微结构的影响。方法选取8只野生型C57BL6小鼠为野生正常组,将24只ApoE~(-/-)小鼠随机分为ApoE~(-/-)正常组、ApoE~(-/-)高脂组、ApoE~(-/-)高脂加依折麦布组(依折麦布组)。其中依折麦布组小鼠给予依折麦布10 mg/(kg·d)灌胃,其他各组小鼠给予等量去离子水灌胃。6周后取各组小鼠的股骨,分别利用HE染色和番红O/固绿染色观察骨微结构,利用质构仪测定骨生物力学,用免疫组化法测定Cathepsin K蛋白表达情况。结果依折麦布组小鼠骨微结构均明显改善,股骨的第一循环硬度和峰值压力均明显高于ApoE~(-/-)高脂组(P均<0.05),股骨Cathepsin K蛋白表达量均明显低于ApoE~(-/-)正常组和ApoE~(-/-)高脂组(P均<0.05)。结论依折麦布能明显改善高脂饲料喂养的ApoE~(-/-)小鼠骨微结构,提高骨强度,其作用机制与降低Cathepsin K表达量有关。     

二氢杨梅素对高脂诱导ApoE~(-/-)小鼠肝脏损伤的保护作用及机制

目的本研究探讨二氢杨梅素对高脂诱导的非酒精性脂肪肝小鼠的保护作用及作用机制。方法取健康雄性ApoE~(-/-)小鼠40只,随机分为4组,即模型组,二氢杨梅素低、高剂量组,双环醇组,每组10只;另取10只C57小鼠作为对照组。对照组与模型组予以0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃0.2 m L/10 g,二氢杨梅素分别以50、100 mg/(kg·d)混悬液灌胃,双环醇组以140 mg/(kg·d)混悬液灌胃。高脂饲料(0.3%胆固醇,20%脂肪)持续饲养12周后,测量各组小鼠的体质量,眼眶取血,分离血清。生化仪检测血脂四项、AST、ALT水平。HE染色观察肝脏病理学改变,油红O染色观察肝细胞内脂质沉积状况;试剂盒检测氧化酶的表达;TUNEL实验检测肝脏细胞凋亡情况,应用免疫组化检测肝脏Bcl-2和Caspase-3的表达。Western评价肝脏腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)磷酸化水平。结果连续灌胃12周后,与对照组相比,模型组小鼠表现出肝脏脂肪变性并伴肝脏氧化损伤;同时TUNEL阳性细胞数增多,肝脏中Caspase-3表达升高且Bcl-2含有量减少;肝组织内AMPK磷酸化水平显著升高。与模型组比较,二氢杨梅素高、低剂量组和双环醇组可改善AST和ALT水平,减轻各治疗组小鼠肝脏脂肪变性,调控氧化酶的表达,降低TUNEL阳性细胞数,提高肝脏中Bcl-2和减少Caspase-3的表达,降低肝组织内AMPK磷酸化水平。结论二氢杨梅素能够降低肝脏脂质沉积,保护肝损伤从而改善高脂饲料诱导的ApoE~(-/-)小鼠非酒精性脂肪肝,其机制可能与其通过下调AMPK磷酸化水平进而抑制肝细胞凋亡有关。     

龙生蛭胶囊对ApoE~(-/-)小鼠心肌肥厚的抑制作用及其机制探讨

目的:探讨龙生蛭胶囊对高脂喂养的Apo E-/-小鼠心肌肥厚的抑制作用。方法:以C57BL/6雄性小鼠为正常对照组,给予普通饲料。Apo E-/-雄性小鼠随机分为模型对照组、龙生蛭胶囊0. 45 g/kg、1. 2 g/kg、1. 8 g/kg组、辛伐他汀0. 0025 g/kg组,采用高脂饲料喂养12 w造模,连续灌胃给药8 w后检测小鼠左室射血分数(EF)、左室短轴缩短率(FS)、左室舒张末期直径(LVIDd)、左室舒张末期后壁厚度(LVPWd)、心脏体重比(HW/BW); HE染色观察小鼠心肌形态学的变化并测量心肌细胞跨核最短直径及横截面积;取血检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)含量及抗氧化指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌组织中Bax、Caspase-3蛋白表达。结果:和正常对照组比较,模型对照组小鼠心脏EF、FS明显减弱,LVIDd、LVPWd、HW/BW值显著增加;心肌细胞肥厚,排列松散,心肌细胞跨核直径、横截面积显著增加;血清中TC、TG含量显著增加,MDA含量显著增加、SOD活性显著下降;心肌组织中Bax、Caspase-3蛋白表达显著上调(P <0. 05或P <0. 01);和模型对照组相比较,龙生蛭胶囊1. 2 g/kg、1. 8 g/kg组心脏EF、FS明显增强,LVIDd、LVPWd、HW/BW值明显降低,明显改善心肌细胞肥厚,心肌细胞跨核直径、横截面积显著降低,TC、TG含量明显降低、抗氧化SOD活性显著升高、MDA含量显著降低,同时能够明显下调心肌组织中Bax、Caspase-3蛋白表达(P <0. 05或P <0. 01)。结论:龙生蛭胶囊对Apo E-/-小鼠的心脏保护作用可能是通过抗氧化作用,抑制细胞凋亡发生。     

姜黄素对动脉粥样硬化家兔血管内皮功能的影响

目的: 观察姜黄素对实验性动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)家兔血浆一氧化氮(NO)水平,结构型一氧化氮合酶(constitutive NOS, cNOS)活性和非对称性二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine,ADMA)的影响,探讨姜黄素抗AS作用及与ADMA的相关性. 方法: 38只雄性日本大耳白兔随机分为4组,即对照组(8只,喂食普通饲料)、模型组(10只,喂食高脂饲料)、低剂量姜黄素组(10只,喂食高脂饲料+100 mg·kg^-1·d^-1姜黄素)和高剂量姜黄素组(10只,喂食高脂饲料+200 mg·kg^-1·d^-1姜黄素).于实验的第12周末测定血浆TC,LDL-C,NO,内皮素(endothelin,ET),ADMA水平,主动脉组织cNOS活力,同时留取主动脉组织行病理检查. 结果: 喂食高脂饲料的3组较对照组家兔血浆ADMA和ET水平浓度均有升高(P<0.01),血浆NO浓度、动脉组织cNOS活性降低(P<0.01).姜黄素组家兔血浆ADMA和ET水平较模型组低(P<0.05),血浆NO浓度、动脉组织cNOS活性则要高出于模型组(P<0.01),2个姜黄素组之间未见显著性差异. 结论: 姜黄素有可能通过降低血浆ADMA水平,在AS进程中发挥重要的内皮保护作用.     

调肝导浊汤调节ApoE~(-/-)小鼠ADMA的分泌量干预主动脉血流速度及峰压的实验研究

目的:观察调肝导浊方干预后Apo E-/-小鼠血清中e NOS、ADMA含量的变化,以及其对主动脉血流速度和峰压的影响,探讨调肝导浊方抗动脉粥样硬化的机制是否与上述因素有关。方法:将Apo E-/-小鼠随机分成模型组和调肝导浊组,每日给予高脂饮食,C57BL/6L小鼠作为对照组给予普通饮食,经不同方法干预12周后,HE观察各组小鼠主动脉病理变化;VEVO2100小动物超声检测各组小鼠主动脉血流速度及峰压的变化;ELISA法检测血清中e NOS及ADMA的含量变化。结果:HE结果显示对照组主动脉结构完整,未见斑块形成;模型组主动脉组织结构紊乱,内膜明显增厚,斑块形成;调肝导浊组主动脉结构相对完整,内膜轻度增厚。小动物超声结果显示,模型组与对照组相比,血流速度减慢,血管峰压降低,具有统计学差异(P0.05);相较于模型组,调肝导浊组血流速度增快,血管峰压升高,差异具有显著性(P0.05)。ELISA结果显示,与对照组相比,模型组e NOS和ADMA含量增高,具有显著性差异(P0.05);调肝导浊组相较于模型组,ADMA含量降低,差异具有统计学意义(P0.05),而e NOS含量未见明显变化(P0.05)。结论:调肝导浊汤抗动脉粥样硬化作用可能与其调节ADMA的含量变化,干预主动脉血流速度与峰压有关。     

天香丹对ApoE(-/-)基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

目的:观察天香丹对ApoE(-/-)基因敲除小鼠高脂血症及动脉粥样硬化的影响.方法:将30只8周龄的ApoE(-/-)基因敲除小鼠随机分为模型组、天香丹组和阿托法汀组,每组各10只,另以相同遗传背景的同龄正常C57BL/6J小鼠为正常对照组(n=10).天香丹组每只灌服天香丹7.2g·kg-1·d-1,阿托伐他汀组每只灌服阿托伐他汀10mg·kg-1·d-1,模型组和正常对照组每只灌服0.9％生理盐水0.2ml·10g-1·d-1.连续灌胃12周后眼眶采血测定各组血脂含量,取小鼠主动脉弓部进行形态学观察及图像分析.结果:模型组血清总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白水平明显高于正常对照组(P＜0.05),而天香丹组和阿托伐他汀组以上3项指标与模型组相比明显下降(P＜0.05).图像分析测量结果显示模型组与正常对照组比较其斑块总面积明显增加(P＜0.05);天香丹组动脉硬化病变程度较模型组减轻,其斑块总面积明显减小(P＜0.05).结论:天香丹有降低ApoE(-/-)基因敲除小鼠血清总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇水平及减缓动脉粥样硬化病变的作用.     

颅痛安颗粒改善大鼠血管内皮细胞功能紊乱的实验研究

目的:观察颅痛安颗粒(LTA)对大鼠血管内皮细胞功能的影响.方法:大鼠复制血管内皮细胞功能紊乱动物模型后治疗5天,取血测t-PA活性、PAI-1活性、NO和ET含量,求活性t-PA百分率.结果:模型组较正常对照组大鼠t-PA、活性型t-PA百分率、NO均显著降低,PAI-1、ET显著升高;与模型组比较,用药组t-PA、活性型t-PA百分率、NO均升高,PAI-1、ET降低.结论:LTA可能是通过改善血管内皮细胞功能紊乱而发挥治疗血管性头痛.     

小儿肺咳颗粒对未成年小鼠过敏性鼻炎模型的影响

目的:观察小儿肺咳颗粒对过敏性鼻炎(allergic rhinitis, AR)的作用效果并对其作用机制进行初步研究。方法:通过腹腔注射卵蛋白氢氧化铝溶液7次后连续卵蛋白溶液滴鼻激发10日造成未成年小鼠过敏性鼻炎模型,通过对小鼠行为学的观察,鼻粘膜病理学的研究以及变态反应相关指标免疫球蛋白E(IgE)、组胺(HIS)、白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)含量的测定对小儿肺咳颗粒治疗卵蛋白引起的过敏性鼻炎的作用效果及机制进行初步研究。结果:小儿肺咳颗粒能够减少AR小鼠的喷嚏和挠鼻次数,同时病理结果显示鼻腔分泌物一定程度地降低,提示其能够缓解AR发生时的症状,其机制可能通过降低血清中IgE和HIS含量,增加IFN-γ/IL-4比值有关。结论:小儿肺咳颗粒对卵蛋白引起未成年动物过敏性鼻炎具有一定的缓解作用,其机制可能与减少IgE及HIS的产生并调节Th1/Th2细胞活跃程度有关。