糖皮质激素诱导的骨质疏松发生机制

193 2年Cushing描述了由于垂体肿瘤产生ACTH引起的继发性肾上腺增生症所致的骨骼脱钙现象,这是对于糖皮质激素诱导的骨质疏松的最早文献记载。随着糖皮质激素在临床的广泛应用,其所致骨质疏松的发病率逐渐上升。据报道[1] ,服用糖皮质激素患者发生骨折的危险性随剂量的增加而增     

糖皮质激素诱导骨质疏松发病机制的研究进展

糖皮质激素是由肾上腺皮质束状带产生的甾体类物质,具有调节生长发育、代谢、免疫等功能。过量的糖皮质激素抑制骨形成、增强骨吸收,导致骨量减少、骨微结构破坏,增加骨折风险。既往研究证实,糖皮质激素通过作用于骨细胞的信号通路传导、氧化应激等影响骨重塑。近年来研究发现,糖皮质激素也通过影响细胞自噬、铁死亡、外泌体等诱导骨质疏松发生发展。笔者对近年来糖皮质激素诱导骨质疏松（glucocorticoid-induced osteoporosis,GIOP）的分子机制进行综述,旨在为GIOP的防治提供参考。     

染料木黄酮通过促进VEGF 表达改善去势大鼠骨质疏松的作用机制

目的观察染料木黄酮(Genistein Gen)通过促进VEGF表达改善去势大鼠骨质疏松的作用机制。方法建立绝经大鼠模型,6月龄雌性大鼠40只,随机分为对照组,假手术组、去势组、Gen干预6周组、Gen干预12周组。光镜下观察各组股骨头结构,分析大鼠股骨头空缺骨陷窝数的变化。ELISA检测血管内皮生长因子(VEGF),观察VEGFmRNA原位杂交表达强度并分析。结果与对照组相比,去势组骨密度值下降,Tb.Th明显下降(P0.05)。干预10周组骨密度值明显升高,Tb.Th明显升高,差异均有统计学意义(P0.05)。糖尿病大鼠股骨头随病程发展骨小梁变稀薄。Gen对去卵巢大鼠血清中VEGF的表达无影响。VEGF mRNA在骨髓腔血管内皮细胞表达上升(P0.05)。结论 Gen可促进血管内皮细胞增殖,促进血管形成,改善去势大鼠骨质疏松抗骨质疏松倾向。     

糖皮质激素性骨质疏松的研究新进展

近年来,随着糖皮质激素在临床广泛应用,糖皮质激素性骨质疏松发病率不断上升,在骨质疏松症中其发病率居于第三位,仅次于绝经后骨质疏松及老年性骨质疏松。糖皮质激素除了促进成骨细胞和骨细胞凋亡、降低成骨功能,抑制骨胶原及促进破骨细胞生成并延长其生存时间等直接抑制成骨,还通过调节内分泌及相关细胞因子、抑制骨局部血流量等间接影响骨形成。2008年FRAX工具的推出重新定义了糖皮质激素性骨质疏松风险度,为临床的诊治带来便利。针对其发生脆性骨折的风险,2010年ACR共识对其防治做出了新的调整和推荐,重点强调了双磷酸盐在防治糖皮质激素导致的脆性骨折方面的作用,同时甲状旁腺激素、充足的维生素、钙剂等在有效防治糖皮质性骨质疏松方面也起了重要作用。     

成骨细胞移植促进骨质疏松性骨折愈合的机制研究

目的 用Y染色体追踪移植细胞在骨折愈合不同时相的存活、转归，及血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子β1(TGF—p1)的动态表达。方法 将SD雄性乳鼠体外培养成骨细胞移植到96只SD雌性鼠骨质疏松性骨折部位(实验组48只；对照组48只)，用原位杂交、免疫组织化学检测骨折愈合不同时相标本的Y染色体；以及VEGF、TGF—β1和VEGFmRNA、TGF—β1RNA的动态表达。结果 实验组大鼠：成骨细胞移植后可在受体骨折部位局部生存、生长繁殖，促进骨质疏松性骨折愈合。移植84d后仍存活。实验组大鼠：VEGF、VEGF—mRNA在7d见阳性细胞，14d有分泌高峰。TGF-β1mRNA在3d见阳性细胞，7～10d有分泌高峰。对照组均未见明显分泌高峰。结论 移植的成骨细胞参与骨质疏松性骨折修复，至少存活84d。VEGF、TGF—β1的动态表达对促进骨折愈合起一定作用。     

分化型甲状腺癌中VEGF的表达及意义

目的探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）在分化型甲状腺癌中的表达及其与甲状腺癌临床病理特征之间的关系。方法采用免疫组化SP法检测57例分化型甲状腺癌、45例甲状腺良性病变和19例正常组织标本中的VEGF表达。结果VEGF在分化型甲状腺癌、甲状腺良性病变和正常甲状腺组织中的阳性表达率分别为86．9％、17．8％和10．5％,甲状腺癌中VEGF阳性表达与良性病变及正常组织相比差异均有统计学意义（P〈0．05）;VEGF强阳性表达在T3／T4、预后不良及复发组甲状腺癌中有更高的比例,差异有统计学意义（P〈0．05）。VEGF表达与预后指数呈正相关（r=0．320,P=0．015）。结论甲状腺组织中VEGF过表达可作为分化型甲状腺癌的一个辅助诊断和预后判断的指标,有助于预后不良的分化型甲状腺癌的筛选和鉴别。     

血管内皮生长因子防治骨质疏松的研究进展

血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)与骨质疏松的发生关系密切。其不仅能够促进血管生成,亦在骨形成与重建过程中发挥着重要的作用。现代研究表明,其能够促进内皮细胞增殖及新血管生成,加速骨形成及重建过程,直接促进骨髓间充质干细胞及增加成骨细胞的成骨活性,降低破骨细胞溶骨活性来促进骨形成及增加骨密度,在骨质疏松的发生发展中起到重要的作用。本文就VEGF对骨形成过程中相关细胞的作用及其机制做一分析总结,综述近年来研究进展及临床治疗效果,旨在为今后相关研究及骨质疏松临床治疗提供指导。     

糖皮质激素性骨质疏松的发病机制及治疗进展

糖皮质激素广泛应用于临床众多领域 ,但其通过对骨组织的直接作用和间接作用引起的骨质疏松引起了临床医师越来越多的重视 ,本文就糖皮质激素性骨质疏松的发病机制及治疗进展作一综述。     

糖皮质激素通过抑制内皮细胞形成骨血管导致骨质疏松的实验研究

目的探索糖皮质激素通过抑制内皮细胞(Endothelial progenitor cell,EPCs)形成骨血管导致骨质疏松的作用机制。方法建立应用泼尼松10 mg/m~2·day~(-1)从2周龄至6周龄每天腹腔注射的小鼠骨质疏松模型,使用micro-CT将对照组和泼尼松组小鼠股骨进行骨量和形态学的扫描分析,免疫荧光分析股骨干骺端H亚型血管的形成。在体外用泼尼松直接作用于内皮细胞,观察内皮细胞小管的形成,并对小管的长度进行定量分析。结果 micro-CT扫描显示,泼尼松组小鼠骨量较对照组明显减少;免疫荧光分析股骨干骺端H亚型血管的形成显示,泼尼松组小鼠股骨干骺端H型血管表达下降;体外细胞实验发现,糖皮质激素能够直接抑制内皮细胞形成血管。结论糖皮质激素导致的骨质疏松可能与糖皮质激素能直接抑制内皮细胞形成骨血管有关。     

VEGF特异2'-O-甲基化修饰siRNA抑制膀胱癌VEGF表达的实验研究

目的 研究VEGF特异性化学修饰RNA干扰对膀胱癌细胞增殖的影响.方法 针对VEGF构建siRNA表达载体PsilencerTM-VEGF-siRNA,为增加siRNA的稳定性,对VEGFsiRNA进行2'-O-甲基化化学修饰.通过Lipofectamine 2000将质粒转染到膀胱癌细胞,荧光显微镜观察siRNA转染效率,确定最佳时间点;分别采用Western Blot、RT-PCR检测VEGF蛋白含量及mRNA水平变化;MTT法检测细胞增殖率.结果 ①2'-O-甲基化化学修饰PsilencerTM-VEGF-siRNA表达载体构建成功;②脂质体与DNA最佳转染效率比例为:2μl∶1μg,48 h细胞存活状态最好;③48h转染效率在50％ ～ 60％,与对照组相比,转染PsilencerTM-VEGF-siRNA后蛋白及mRNA水平均下降;④MTT法检测显示:siRNA阳性对照组、VEGFsiRNA组与对照组相比,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 化学修饰的siRNA能够有效抑制膀胱癌中VEGF的表达,其稳定性增加,从而有效抑制膀胱癌细胞的生长.     

毛蕊花糖苷与^99Tc-MDP联合治疗糖皮质激素诱导大鼠骨质疏松的效果及其分子机制研究

目的探索毛蕊花糖苷(verbascoside,Ver)联合^99 Tc-亚甲基双膦酸盐(^99-Technetium-methylene diphosphonate,^99 Tc-MDP)对糖皮质激素诱导大鼠骨质疏松(glucocorticoid-induced osteoporosis,GIO)的治疗作用,及其分子机制。方法SD大鼠连续8周肌肉注射地塞米松(dexamethasone,Dex)磷酸钠(1 mg/kg,1周2次)建立GIO模型。Dex造模同时,Ver组、联合组、^99 Tc-MDP组、模型组大鼠分别给与Ver(30 mg/kg)、联合^99 Tc-MDP(5 mg/kg)、Ver联合^99 Tc-MDP(5 mg/kg)、生理盐水,对照组大鼠不予造模。给药8周后检测相关指标。结果与对照组比较,模型组的大鼠的体重、股骨干重明显降低,骨代谢相关血液指标明显异常;双能X线吸收法(dual-energy X-ray absorption,DXA)结果显示:模型组的大鼠全身、腰椎体及股骨骨密度均明显降低;股骨三点弯曲实验最大载荷、弹性载荷、弹性位移及弹性模量等参数也都明显降低;进一步RT-PCR结果显示,模型组骨组织中USP10及FLT3表达明显高于对照组。而毛蕊花糖苷及联合^99 Tc-MDP治疗均明显改善上述症状。进一步研究发现毛蕊花糖苷组和联合用药组的USP10/FLT3表达明显低于^99 Tc-MDP组及模型组,而^99 Tc-MDP组与模型组之间的表达差异无统计学意义。结论毛蕊花糖苷可以抑制大鼠骨组织USP10/FLT3通路的活性,进而改善GIO;毛蕊花糖苷和^99 Tc-MDP治疗GIO大鼠具有良好的药理协同作用,并且是通过作用不同的分子靶点而完成的。     

自噬在糖皮质激素性骨质疏松症中的作用机制

糖皮质激素性骨质疏松症（glucocorticoid-induced osteoporosis,GIOP）由长期或过量应用糖皮质激素（glucocorticoid,GC）所导致,其发病与骨质疏松症（osteoporosis,OP）相比有其自身特点。基于细胞自噬与OP的相关研究,探讨自噬与GC及GIOP三者之间的关联性。研究发现,在GC导致GIOP形成的过程中,针对不同GC浓度、不同细胞（BMSC、OB、骨细胞、OC）等,通过不同信号通路介导的细胞自噬发挥着复杂作用。要依据自噬对骨形成的积极作用开展GIOP的相关治疗,需要考虑多因素,将自噬水平精确调控在一个相对稳态范围内。     

辛伐他汀对糖皮质激素性椎体骨质疏松的预防作用

目的 研究辛伐他汀对糖皮质激素性椎体骨质疏松的预防作用。方法：取健康SD大鼠36只,体重（0.40±0.03）kg,随机分为实验组（A组）、模型组（B组）和对照组（C组）,每组12只。实验组灌胃法给予辛伐他汀10 mg.kg^-1.d^-1,每周2次肌肉注射地塞米松,每次2.5 mg/kg;模型组灌胃法给予生理盐水2 ml.kg^-1.d^-1,每周2次肌肉注射地塞米松,每次2.5 mg/kg;对照组灌胃法给予生理盐水2 ml.kg^-1.d^-1,每周2次肌肉注射生理盐水,每次0.5 ml/kg。8周后对各组大鼠的第1腰椎行骨密度测量和组织形态显微结构观察。结果：实验组第1腰椎骨密度值明显高于模型组（P〈0.01）,与对照组比较差异无显著性（P〉0.05）。实验组第1腰椎骨小梁形态结构与对照组相似,模型组呈骨质疏松特征。结论：辛伐他汀可有效预防糖皮质激素性椎体骨质疏松。     

防己诺林碱对糖皮质激素诱导雄性骨质疏松大鼠影响的研究

目的探讨防己诺林碱对骨质疏松症的保护作用并假设可能的作用机制。方法通过对大鼠皮下注射泼尼松龙(2. 5mg/kg) 4周诱导形成骨质疏松症。分别对大鼠腹腔注射防己诺林碱1、3、10 mg/kg,持续一个月时间。通过测量大鼠股骨干骺端组织的微结构参数和骨密度(bone mineral density,BMD)来评估防己诺林碱的保护作用,并检测泼尼松龙诱导的骨质疏松症大鼠血清中的生化指标。同时,测量大鼠股骨组织中Beclin-1、骨形态发生蛋白2(BMP2)、自噬相关5(ATG-5)、Runt相关转录因子2(RUNX-2)和核因子κB配体受体激活因子(RANKL)的基因表达[通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)蛋白]。结果与泼尼松龙组相比,防己诺林碱治疗组大鼠椎骨组织中BMD和微结构参数显著增加(P0. 01)。同时还发现用防己诺林碱治疗减弱了泼尼松龙诱导的骨质疏松症大鼠的BMP2、Beclin-1、ATG-5、RUNX-2和RANKL蛋白的表达。此外,防己诺林碱治疗和泼尼松龙诱导的骨质疏松症大鼠血清中生化参数水平减弱。结论防己诺林碱通过增加自噬来预防泼尼松龙诱导的骨质疏松症大鼠骨质流失。     

Molecular mechanisms of glucocorticoid-induced osteoporosis

Bone loss resulting from long-term glucocorticoid therapy is common and clinically relevant. A number of different glucocorticoid-mediated effects are responsible for the reduction in bone density: (i) glucocorticoid-induced direct impairment of osteoblast, osteocyte, and osteoclast function leads to reduced bone remodeling and diminished repair of microdamage in bone; (ii) the effects of parathyroid hormone (PTH) might be more pronounced in the presence of glucocorticoids, whereas vitamin D plays a lesser role in the pathogenesis of steroid-induced osteoporosis; (iii) glucocorticoids antagonize gonadal function and inhibit the osteoanabolic action of sex steroids; and (iv) increased renal elimination and reduced intestinal absorption of calcium lead to a negative calcium balance that has been suggested to promote secondary hyperparathyroidism. From a mechanistic point of view, all of the aforementioned effects have long been considered to be mediated at the molecular level exclusively by genomic actions. However, there is now increasing evidence for the existence of rapid glucocorticoid effects that are incompatible with this classical mode of action. These rapid effects, termed nongenomic effects, are mediated by glucocorticoid interactions with biological membranes, either through binding to membrane receptors or by physicochemical interactions. It is possible, but has yet to be shown, that these effects play a role in the pathogenesis of glucocorticoid-induced osteoporosis.     

糖皮质激素通过nr3c1受体依赖和非依赖途径介导骨质疏松症的机制

摘要：目的 糖皮质激素(glucocorticoids,GCs)在临床上被广泛应用于炎症相关疾病的治疗,然而GCs的长期应用会导致骨质疏松和骨质疏松相关性骨折,称之为糖皮质激素性骨质疏松症(glucocorticoid-induced osteoporosis,GIOP)。nr3c1是主要的糖皮质激素受体,其下游信号通路参与细胞内多种生理过程的调节,本研究探讨其在GIOP中的作用机制。方法 选取斑马鱼幼体,随机分为WT组、25μmol/L PN处理组、nr3c1-/-突变组和25μmol/L PN处理的nr3c1-/-突变组。受精后24 h用PN（25μmol/L）处理,对照组用等量二甲基亚砜（0.01%）处理同胞幼体。在受精后8 d（DPF）采集标本进行整体骨骼染色,在受精后5 d和8 d采集标本进行qRT-PCR分析,并评估nr3c1突变对软骨发育及骨矿化的影响、骨代谢相关基因的表达。结果 在nr3c1-突变体中,细胞外基质、成骨细胞和破骨细胞相关基因的表达均发生变化。进一步实验表明,GCs和Nr3c1在转录水平上可以调节基质金属蛋白酶9(MMP9)、碱性磷酸酶(ALP)和酸性磷酸酶5a(Acp5a)。结论 本研究揭示了GCs/NR3C1对骨代谢相关基因表达的影响,为研究GIOP和Nr3c1在骨代谢和骨发育中的作用提供了依据。此外,也为临床上糖皮质激素性骨质疏松症的治疗确定了新的效应靶点。     

云克治疗糖皮质激素性骨质疏松模型大鼠的实验研究

目的 探讨云克对地塞米松诱导的骨质疏松症大鼠的治疗作用.方法 12周龄的雌性Wistar大鼠30只,随机分为3组,对照组、模型组和治疗组,每组10只.模型组和治疗组给予5mg/kg地塞米松肌注,1次/周,连续注射12周,对照组肌注等剂量的生理盐水.DEXA骨密度仪检测大鼠股骨骨密度,各组均取2只处死,HE染色观察股骨结构的病理改变鉴定骨质疏松大鼠模型是否构建成功.骨质疏松模型构建成功后,治疗组大鼠尾静脉注射云克(0.05 μg/kg),对照组和模型组注射等剂量的生理盐水,1次/周,连续注射15周,治疗前后尾静脉采血,ELISA法检测血清骨碱性磷酸酶和酒石酸酸性磷酸酶水平的变化.检测各组大鼠治疗后的股骨骨密度,之后,处死各组大鼠,取股骨,免疫组化法检测大鼠股骨骨保护素的变化,HE染色观察骨结构的病理改变.结果 (1)模型组和治疗组大鼠经地塞米松处理12周后,股骨骨密度较对照组明显降低(P＜0.05);病理改变为骨小梁稀疏、数目明显减少甚至断裂,而对照组骨小梁结构较完整.(2)与模型组相比,治疗组大鼠血清骨特异碱性磷酸酶水平明显升高(P＜0.05),而抗酒石酸酸性磷酸酶水平有所下降,但无统计学差异(P＞0.05).(3)治疗组治疗后血清骨特异碱性磷酸酶水平明显升高(P＜0.05),而抗酒石酸酸性磷酸酶水平有所下降,但无统计学差异(P＞0.05).(4)与模型组和治疗前相比,治疗组大鼠股骨骨密度无明显改变(P＞0.05).(5)与模型组相比,治疗组大鼠股骨骨保护素表达明显增加.(6)云克治疗后,治疗组大鼠股骨有新生骨小梁的广泛形成,骨小梁结构破坏较模型组明显减轻.结论 云克对糖皮质激素性骨质疏松大鼠有治疗作用.     

Leptin and leptin receptor in human seminal plasma and in human spermatozoa

Leptin, a 167 amino acid peptide, is known to influence the gonads via direct and indirect effects. Recent studies provide contradictory proposition about the peripheral impact of leptin in the male gonads. Thus, we examined leptin and its receptors in human seminal plasma and in human ejaculated spermatozoa by Western blot technique and fluorescence microscopy. In seminal plasma we found a free leptin band (16 kDa) by an anti-leptin polyclonal antibody. Incubation of seminal plasma with recombinant leptin caused a statistically significant increase in the amount of free leptin (p < 0.01) and supports this finding. Furthermore, a soluble leptin receptor (145 kDa) was found in human seminal plasma in the same specimen. We also detected a 145-kDa leptin receptor isoform in ejaculated spermatozoa as a possible target of leptin action in the male genital tract, which was localized at the tail of spermatozoa by immunofluorescence microscopy only. This receptor was significantly associated with the intactness of sperm plasma membranes. Spermatozoa with deteriorated membranes contained 49.2 +/- 6.9% leptin receptor signal intensity compared with spermatozoa having intact membranes (p < 0.01). This finding is difficult to interpret and may be caused by a leakage of OB-R due to loss of membrane integrity. In conclusion, these data provide further hints for a peripheral role of leptin in the male genital tract, possibly, by an interaction between leptin and spermatozoa via sperm leptin receptors.     

淫羊藿治疗糖皮质激素性骨质疏松症分子机制的网络药理学分析

目的 利用网络药理学方法探索淫羊藿治疗糖皮质激素性骨质疏松症(glucocorticoid-induced osteoporosis,GIOP)的分子作用机制.方法 运用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)筛选淫羊藿的活性成分及相关靶点;运用GeneCards数据库、OMIM数据库获取GIOP的疾病靶点;通过R...