抑癌基因p16、Rb在急性淋巴细胞白血病患者中的表达及其临床意义

 目的 观察抑癌基因p16、Rb在急性淋巴细胞白血病（ALL）患者中的蛋白表达水平，探索其在ALL发病中的临床意义。方法 应用Western Blot及SP免疫组织化学染色技术检测抑癌基因p16、Rb在ALL患者白血病细胞中的蛋白表达水平。结果 32.14 % ALL患者p16蛋白表达缺失，与对照组比较差异具有统计学意义（P＜0.05）；免疫组织化学染色白血病细胞阳性率降低为11.3 %，与对照组比较差异具有统计学意义（P＜0.05）；28.57 % ALL患者pRb蛋白表达缺失，与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；免疫组织化学染色白血病细胞阳性率降低为41.6 %，与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；ALL患者p16与pRb蛋白表达水平经等级相关分析呈负相关（rs =－0.9247，P＜0.001）。结论 p16、Rb基因的异常表达在ALL的发生及演变过程中有重要意义，两者之间可能存在着负反馈调节机制。     

人胰腺癌bcl-2基因的过度表达--免疫组织化学和原位杂交研究

目的 :应用地高辛标记bcl 2cDNA进行mRNA原位杂交和免疫组织化学分析胰腺癌中bcl 2基因的mRNA转录和蛋白翻译 ,研究bcl 2基因结构和功能表达的关系。方法 :以胰腺癌病人癌组织( 50例 )、胰腺癌转移灶组织 ( 15例 )为研究对象 ,采用免疫组织化学 (SP法 )和分子原位杂交法检测bcl 2在胰腺癌中的表达。对照组 10例为慢性胰腺炎组织。结果 :bcl 2蛋白在胰腺癌组明显高于胰腺癌转移灶组 ,Ⅰ、Ⅱ期、无转移、高分化的胰腺癌明显高于Ⅲ、Ⅳ期、有转移和低分化的胰腺癌。免疫组织化学与原位杂交技术检测胰腺癌组织中bcl 2基因表达结果一致。结论 :bcl 2蛋白可能作用于胰腺细胞的癌变阶段 ,并与胰腺导管上皮癌变有关 ;bcl 2基因在mRNA和蛋白水平是相对稳定的     

人乳腺癌p16,Rb基因表达及其相关性的研究

我们采用免疫组织化学染色方法研究了６６例乳腺癌中ｐ１６基因的表达及其与乳腺癌的组织学关系，同步检测了ｐＲｂ基因的表达情况，并与ｐ１６基因对比进行相关分析，以期较深入地了解ｐ１６、Ｒｂ基因在乳腺癌中的表达及其相关性。材料与方法６６例乳腺癌标本选自１９９...     

MAD2和p27在大肠癌组织中的表达及意义

目的探讨MAD2和p27表达与大肠癌发生、发展的关系。方法采用实时荧光定量PCR和免疫组织化学方法,检测大肠癌、腺瘤及正常大肠黏膜组织中MAD2表达,并对大肠癌组织中MAD2扩增产物进行测序。同时应用免疫组织化学方法检测大肠癌和正常组织中p27表达情况。结果大肠癌组织中MAD2阳性表达率明显高于腺瘤和正常大肠黏膜组织（66．7％VS39．6％VS22．9％）,三者间比较差异均有统计学意义（P〈0．01）。MAD2表达与大肠癌肿瘤分化和患者无瘤生存时间有关（P〈0．05）。大肠癌组织中未见MAD2基因突变。正常大肠黏膜组织中p27阳性表达率为81．3％,大肠癌中其阳性表达率为41．7％,两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论MAD2和p27基因表达与大肠癌的发生及发展有关。MAD2可能是大肠癌预后的1个重要指标。     

人胰腺癌bcl—2基因的过度表达：免疫组织化学和原位杂交研究

目的：应用地高辛标记ｂｃｌ－２ ｃＤＮＡ进行ｍＲＮＡ原位杂交和免疫组织化学分析胰腺癌中ｂｃｌ－２基因的ｍＲＮＡ转录和蛋白翻译，研究ｂｃｌ－２基因结构和功能表达的关系。方法：以胰腺癌病人癌组织（５０例）、胰腺癌转移灶组织（１５例）为研究对象，采用免疫组织化学（ＳＰ法）和分子原位杂交法检测ｂｃｌ－２在胰腺癌中的表达。对照组１０例为慢性胰腺炎组织。结果：ｂｃｌ－２蛋白在胰腺癌组明显高于胰腺癌转移灶组，Ｉ     

p16、Ki-67和PCNA的表达与胃肠道平滑肌肿瘤性质的关系

探讨Ｐ１６、ｋｉ－６７和ＰＣＮＡ的表达与胃肠道平滑肌肿瘤（ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｔｕｍｏｒｓ，ＧＬＳＭＴ）性质的关系。方法：采用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法检测８６例ＧＩＳＭＴ患者Ｐ１６的表达情况，采用微波修复抗原及免疫组织化学Ｓ－Ｐ法检测人抗增殖细胞核抗原Ｋｉ－６７及增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇ ｃｅｌｌ ｎｕｃｌｅａｒ ａｎｔｉｇｅｎ，ＰＣＮＡ）     

子宫内膜癌中细胞凋亡和bcl-2、bax基因的表达

目的 探讨细胞凋亡及其调控基因ｂｃｌ－２、ｂａｘ在子宫内膜癌变过程中的作用。方法应用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法和ＴＵＮＥＬ技术,对子宫内膜腺癌癌变过程各级病变组织中细胞凋亡、ｂｃｌ－２和ｂａｘ蛋白进行测定。结果 正常增生期子宫内膜有偶发凋亡,子宫内膜增生症和子宫内膜腺癌的细胞凋亡率分别为０．６％和２．８％。ｂｃｌ－２蛋白在正常增生期子宫内膜、子宫内膜增生症和子宫内膜腺癌的表达率分别为１００％、７４．４％     

大肠癌组织MAD2和p53表达及其临床意义的探讨

目的:了解大肠癌组织中MAD2和p53表达概况,探寻其表达差异及临床意义.方法:通过实时荧光定量PCR和免疫组织化学方法检测大肠癌、腺瘤及正常大肠黏膜组织中MAD2表达,并对大肠癌组织中MAD2扩增产物进行测序.同时利用免疫组织化学方法检测大肠癌和正常组织中p53的表达.结果:大肠癌组织中MAD2的阳性表达明显高于腺瘤和正常大肠黏膜组织,三者比较差异有统计学意义,P<0.001. MAD2表达与分化程度和生存时间有关,P<0.05.大肠癌组织中未见MAD2基因突变.正常大肠黏膜组织中p53表达均为阴性,大肠癌组织中p53阳性表达率为50%.结论:MAD2和p53表达异常是大肠癌产生的机制之一,与大肠癌的发生、发展有关.     

Rb磁物表达与胃癌预后的关系

Ｒｂ基因是细胞生长分化的重要调控因子，我们应用Ｓ－Ｐ免疫组织化学方法研究Ｒｂ基因产物表达与胃癌临床病理学特点和预后的关系。本组胃癌Ｒｂ基因产物阳性表达为６２／８５，与淋巴结呈极显著性相关，与胃癌术后生存期呈极显著性负相关。     

抑癌基因p16和Rb的失活与肺癌临床病理学的关系

目的 研究抑癌基因ｐ１６和Ｒｂ与肺癌生物学特征和临床进展的关系。方法 采用免疫组织化学和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交的方法对６８例肺癌进行了抑癌基因ｐ１６和Ｒｂ的检测。结果 肺癌ｐ１６蛋白总丢失率为４８．５％,且主要发生于非小细胞肺癌病例,与淋巴结转移、临床病理分期有关。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交发现ｐ１６基因缺失的频率为１７．６％,缺失多发生于ｐ１６蛋白阴性的病例。肺癌Ｒｂ蛋白丢失率为２９．４％,主要发生于小     

ras基因的表达与胃癌细胞生物学特性的相关研究

为研究ｒａｓ基因在胃癌中的表达，采用组织化学、免疫化学和自动图像分析方法，检测了５４例胃癌切除标本的ｒａｓ基因表达、癌细胞核形态参数和ＤＮＡ含量及倍体分布类型。发现胃癌细胞ｐ２１表达水平随着ＤＮＡ含量不断增多、倍体成倍增加而逐渐下降。表明ｒａｓ过度表达主要出现在细胞表型发生明显转化之前。此外，发现胃癌细胞ｐ２１的表达水平与癌细胞核形态参数、癌肿大小、有无淋巴结转移均无关。     

卵巢癌ras癌基因产物p21的定量分析

目的：探讨卵巢癌ｒａｓｐ２１表达与ＤＮＡ倍体水平及临床病理参数的关系。方法：采用流式免疫荧光技术。结果：３６例卵巢癌１４例ｒａｓｐ２１呈阳性表达，ｒａｓｐ２１阳性表达与组织分级无关：ｒａｓｐ２１阳性表达量在二倍体与异倍体之间有显著性差异；ｒａｓｐ２１阳性表达多见于粘液性卵巢癌。结论：ｒａｓｐ２１表达量与ＤＮＡ倍体相关     

ras p21在早期胃癌及癌旁组织中的表达

用ＡＢＣ免疫组组化法，对３６例早期胃癌及癌旁组织进行了ｒａｓｐ２１表达的检测，结果发现ｒａｓｐ２１阳性率分别对早期胃癌８８．９％（３２／３６）癌旁异型增生６８．７（２２／３２），其中不完全性结肠型化生阳性率为８４．６％，正常胃粘膜全部阴性，提示ｒａｓｐ２１的表达可能是胃癌形成过程中的关键步骤，ｒａｓｐ２１可以作为胃癌早期诊断的一种新的标志物。     

Similarity of expression of low molecular weight G proteins smg p21A and ras p21 in normal and malignant human tissues

We prepared monoclonal antibodies specific for smg p21A, one of the low molecular weight GTP-binding proteins and possibly a suppressor molecule for ras p21. Two monoclonal antibodies (T22 and T212) reacted with smg p21A but not with Ki-ras p21, both of which were produced by Escherichia coli. These two clones detected an Mr 21,000 band in one-dimensional immunoblotting of extracts of a human pancreatic cancer cell line which was indistinguishable from a band detected by RASK-3, a monoclonal antibody specific for ras p21. However, T22 and T212 detected a single spot in two-dimensional immunoblotting that was clearly different from the three spots detected in the same cellular extracts by RASK-3. A series of normal and malignant human tissues were examined for the expression of smg p21A and ras p21 by immunohistochemical methods utilizing T22 and RASK-3. In essentially all tissues examined, both normal and malignant, smg p21A and ras p21 were expressed with great similarity. Expression of both molecules in all malignant tissues examined was coincident with that in normal tissues except that gastric cancer showed increased expression of the two molecules in comparison with normal gastric tissue.     

Expression of ras oncogene p21 protein in early gastric carcinoma and adjacent gastric epithelia

The expression of the ras gene product p21 in normal gastric mucosa, early gastric carcinoma of diffuse (gastric) and intestinal types, and in adjacent mucosal abnormalities is reported. The analysis was performed on paraffin sections by an immunohistochemical assay using the mouse monoclonal antibody RAP-5 and the rat monoclonal antibody Y13-259. Expression of ras p21 was assessed by staining intensity and percentage of positively stained cells. In comparison to normal gastric mucosa of non-cancer patients, p21 was overexpressed in nearly all early carcinomas of both types and in the dysplastic and/or metaplastic mucosal alterations accompanying intestinal type of gastric cancer. Increased p21 expression was also observed in the normal-appearing mucosa adjacent to early carcinomas of diffuse type, but not in the morphologically normal gastric epithelium adjacent to the intestinal type. The results of this investigation suggest that ras p21 overexpression may be related to early events of human gastric carcinogenesis. The study supports the notion of different pathways in the development of diffuse (gastric) and intestinal types of gastric carcinomas.     

癌基因ras产物P^21蛋白在胃癌及癌前病变的表达

应用流式细胞术结合细胞免疫荧光技术对胃癌、非典型增生、肠化生、浅表性胃炎及正常胃粘膜组织进行了ras基因产物P~(21)蛋白的定量及定性研究.P~(21)含量及P~(12)阳性细胞百分率以胃癌最高,非典型增生及肠化生P~(12)表达也增高,均与浅表性胃炎及正常胃粘膜有显著差异(P<0.001).提示胃癌前病变时ras基因已经开始活化,其蛋白产物P~(12)过度表达.     

宫颈癌及慢性宫颈炎ras癌基因产物p21和DNA倍体的研究

应用细胞免疫荧光技术和流式细胞术对宫颈癌和慢性宫颈炎组织ras癌基因产物p21蛋白的表达量进行了定量研究，并分析了rasp21的表达量与DNA倍体和细胞增殖指数的关系。结果显示：宫颈癌rasp21的表达量（荧光指数FI）明显高于慢性宫颈炎组织，rasp21表达的荧光指数随组织学分级升高而增高。DNA倍体和rasp21的表达量有密切关系。     

ras p21及p53基因的表达与胃癌生物学行为关系的探讨

应用SP免疫组化法检测1980～1989年存档的33例胃癌及其癌旁组织石蜡包埋标本的ras p21和p53基因表达情况,并与临床、病理和随访资料进行对比分析。结果显示:胃癌标本的ras p21阳性表达7例(21.21％),p53蛋白的阳性表达11例(33.33％)。ras p21的阳性表达与病理类型、性别、年龄、民族以及肿瘤部位无关,但肿瘤浸润深度及有无淋巴结转移与ras p21阳性表达之间显著相关。生存不足1年组的ras p21表达阳性率(50％)明显高于1～5年组(22.22％)和5年以上组,表明P21蛋白的表达与胃癌的浸润、进展和预后有关,提示ras p21的检测有可能成为胃癌预后指标,并有指导临床治疗的意义。p53蛋白的表达与患者的临床病理状况无显著相关,提示p53基因的改变可能主要发生在癌变早期,对胃癌的发生起关键作用,但并不影响胃癌细胞的生物学行为。p~53蛋白的表达与ras p~21蛋白表达之间无明显关系。     

子宫内膜癌和子宫颈癌p21与DNA倍体的研究

目的研究ｒａｓｐ２１致癌基因和ＤＮＡ倍体与子宫颈癌及子宫内膜癌的关系。方法应用细胞免疫荧光技术和流式细胞术对４０例宫颈癌、２０例慢性宫颈炎、３２例子宫内膜癌和１３例癌前病变进行了ｒａｓｐ２１致癌基因的表达量及ＤＮＡ倍体的测定。结果子宫颈癌和子宫内膜癌ｒａｓｐ２１的表达量高于慢性宫颈炎和子宫内膜癌前病变,并与二者的组织学分级有关。ＤＮＡ倍体与ｒａｓｐ２１的表达量有关。结论ｒａｓｐ２１的表达与子宫颈癌和子宫内膜癌的发生有关。检测ｐ２１蛋白和ＤＮＡ倍体有助于判断这两种肿瘤的恶性程度和预后,并应积极治疗慢性宫颈炎     

P53 tumor-suppressor gene and cyclic adenosine-monophosphate in breast and esophageal cancer are regulated through high-concentration of epidermal growth-factor

To reveal the molecular mechanism of the growth-inhibitory effects of high concentrations of EGF, accumulations of p53 protein and p21ras expression in MX-1 and UM-1 breast cancer and ES-4 esophageal cancer transplanted into nude mice were investigated after local injections of 2 mug of EGF or 2 mug of TGF-beta. The accumulation of p53 protein and expression of p21ras were determined by using the methods of Western immunoblotting and p53 mutant selective quantitative ELISA assay. p53 mutation was investigated by using the PCR analysis and DNA sequencing. Contents of intra-cellular-cAMP of these tumors were also determined by radioimmunoassay. Results showed that the high concentration of EGF induced the accumulations not only of wild type p53 protein, but also of mutant p53 protein in these tumors growth-inhibited by EGF. In ES-4 esophageal cancer, 2 mug of EGF induced the up-regulation of p53 and the down-regulation of p21ras. On the contrary, 2 mug of TGF-beta induced the down-regulation of p53 and the up-regulation of p21ras in UM-1 human breast cancer. The point mutation of p53 gene was found at codon 181 contained C to T transversions (Amino acid switch: Arg --> Cys) in ES-4 esophageal cancer. The accumulations of p53 proteins were also associated with the down regulated intra-cellular-cAMP induced by high concentrations of EGF. These results indicate that p53 gene and ras gene are involved in the signal pathway of EGF and that the p53 gene may have some important role as a negative growth factor by suppressing ras oncogene in the mechanism of tumor growth inhibition through the high concentration of EGF.