细胞凋亡和细胞增殖在胃癌形成中的作用

目的：探讨细胞凋亡和细胞增殖在胃癌发生发展中的作用。方法：用原位末端标记法和免疫组织化学染色,检测30例胃癌和20例胃粘膜上皮异型增生中的细胞凋亡和调控基因（Bcl-2,Fas)及增殖细胞核抗原（PCNA）的表达情况。结果：随正常胃粘膜→胃粘膜异型增生→胃癌的梯度,细胞凋亡指数（AI）逐渐降低,差异有显著性（P＜0．05）,Bcl-2的阳性表达率逐渐升高,Fas的阳性表达率逐渐降低,差异均有显著性（P＜0．01）,且二者有相关性（P＜0．05）,PCNA阳性表达率（即增殖指数,PI）逐渐升高（P＜0．01）,结论：胃粘膜异型增生中已存在细胞凋亡和细胞增殖的异常,使增殖／调亡比值加大,是胃粘膜异型增生向胃癌发展的重要机制之一。     

胃癌细胞凋亡过程中胞内Ca2+和三磷酸肌醇浓度的改变

目的　探讨顺铂诱导胃癌细胞凋亡过程中细胞内游离Ｃａ２＋ 浓度（［Ｃａ２＋］ｉ） 和三磷酸肌醇（ＩＰ３） 浓度的变化特点和意义。方法　选择顺铂诱导胃癌细胞凋亡,采用光镜、电镜、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测凋亡。Ｆｕｒａ２ 荧光负荷技术测［Ｃａ２＋］ｉ,竞争性蛋白结合法测定ＩＰ３ 浓度。结果顺铂浓度为２ μｇ／ｍｌ 作用于ＢＧＣ８２３ 胃癌细胞２４ 小时出现典型的凋亡改变。胃癌细胞凋亡过程中,胞内［Ｃａ２＋］ｉ 明显升高,以凋亡早期更为明显。胃癌细胞凋亡早期（３０ 秒）,ＩＰ３ 浓度明显升高,到凋亡晚期（２ ～２４ 小时） ,ＩＰ３ 浓度明显降低。结论　在胃癌细胞凋亡过程中,［Ｃａ２＋］ｉ 表现为上调趋势。ＩＰ３ 浓度在凋亡早期,表现为上调趋势,在稍晚阶段,表现为下调趋势,这为治疗胃癌提供新靶点     

胃癌细胞凋亡与胃癌治疗新策略

从癌前病变,早期胃癌到进展期胃癌,细胞凋亡逐渐受抑。诱导胃癌细胞凋亡的研究报道日益增多。本文综述近年有关胃癌细胞凋亡的研究以及从凋亡机制出发寻求新的治疗策略。     

补骨脂素对HL60细胞凋亡及细胞内Ca2+浓度影响的探讨

目的:探讨补骨脂素对HL60细胞凋亡的影响,以及细胞内Ca2 浓度与凋亡之间关系。方法:采用MTT比色分析法测定补骨脂素对HL60的细胞毒性影响,流式细胞仪及激光共聚焦显微镜测定HL细胞内Ca2 浓度和凋亡比率。结果:补骨脂素对HL60细胞生长具有抑制作用,补骨脂素促进细胞凋亡比率,细胞凋亡与Ca2 浓度成正相关。结论:补骨脂素影响HL60细胞凋亡,Ca2 介导的细胞凋亡是补骨脂素抑制肿瘤细胞生长的可能机制之一。     

核黄素光化学反应诱导人胃癌细胞凋亡

背景与目的：核黄素在光照下具有抑癌活性。并且被认为与核黄素光化学反应产生的活性氧自由基有关。本研究探讨核黄素在光照处理下,体外诱导人胃癌MGC80-3细胞凋亡效应。方法：以台盼蓝拒染法计数细胞存活率,Giemas染色观察形态改变,DNA琼脂糖电泳分析DNA片段化,测定断裂及未断裂DNA含量定量凋亡效率。流式细胞术及Western blot分别检测细胞周期及凋亡相关基因表达变化。结果：细胞存活率依浓度及处理时间而下降;光照核黄素处理24h,细胞呈典型的凋亡形态;以10,10,30和40μmol/L的核黄素光照处理MGC80-3细胞,DNA电泳显示20μmol/L以上处理组均出现典型的凋亡DNA梯形带;且相应凋亡效率分别为35.4%,54.1%,70.6%和86.8%。与核黄素的浓度呈正相关;经10及20μmol/L核黄素光照处理后细胞周期主要阻滞于G2/M期,Western blot结果显示凋亡相关基因p53,c-myc及Bax表达上调,而Bcl-2表达下调。结论：核黄素光化学反应抑制胃癌MGC80-3细胞生长的作用是以诱导细胞凋亡为主要途径。并与诱导细胞阻滞于G2/M期有关。     

外源性胃泌素对胃癌细胞凋亡和凋亡调控基因bcl-2的影响

背景与目的:大量研究表明,外源性胃泌素对胃癌、结肠癌等胃肠道肿瘤细胞有促生长作用,但胃泌素是否参与了细胞的凋亡调控尚未见报道。本文旨在探讨胃泌素在胃癌细胞凋亡调控中的作用。方法:应用流式细胞仪观察胃泌素及其受体拮抗剂丙谷胺对MKN45胃癌细胞凋亡的影响;ABC免疫组化法测定细胞bcl-2基因的表达。结果:细胞培养48h后,胃泌素组细胞凋亡百分率为(1.39±0.54)%,明显低于对照组的(8.58±0.67)%(P<0.01);胃泌素组bcl-2基因阳性率为(22.3±5.3)%,明显高于对照组的(12.2±1.8)%(P<0.01),且随着时间延长表达率进一步增加。联合应用丙谷胺后上述作用消失。结论:胃泌素可能通过诱导细胞bcl-2基因的表达而抑制细胞的凋亡,丙谷胺可阻断胃泌素的凋亡调控作用。     

胞外环境Ca^2＋变化诱导人肿瘤细胞凋亡

目的：观察胞外环境Ca^2 变化对人肿瘤细胞的直接诱导凋亡作用。方法：通过EGTA螯合胞外Ca^2 或添加CaCl2改变胞外环境Ca^2 。用PI和Hoechst33342荧光双染观察细胞核形态，用流式细胞仪检测凋亡百分率。分别借助荧光探针Fluo-3和Rh123检测胞内Ca^2 和线粒体膜电位（△ψm)变化。用环孢菌素A（CsA)阻断PT孔，研究其在凋亡中的作用。结果：胞外环均Ca^2 升高或降低均诱导人胃癌MGC-803和喉癌Hep细胞凋亡，恢复胞外Ca^2 阻断凋亡。随胞外Ca^2 变化胞内Ca^2 相应升高或降低，但线粒体△ψm均表现为急剧下降。CsA对MGC-803细胞凋亡无明显抑制作用，轻微促进Hep细胞凋亡。结论：胞外环境Ca^2 变化引起胸内Ca^2 相应变化和线粒体△ψm下降并通过PT孔非依赖性途径诱导肿瘤细胞凋亡。     

胃癌组织中自发性细胞凋亡的临床意义

 目的:研究胃癌组织中自发性细胞凋亡的发生情况及其临床意义。方法:采用TUNEL技术对53例胃癌组织中的凋亡细胞进行原位观察和比较。结果:胃癌组织自发性细胞凋亡指数平均为57.6%。胃癌细胞凋亡指数与患者年龄、性别、肿瘤大小、浸润深度无明显关系,与胃癌细胞分化程度、淋巴结转移及临床分期有关,高、中分化腺癌凋亡指数显著高于低分化腺癌(P<0.01),无淋巴结转移和临床Ⅰ、Ⅱ期胃癌凋亡指数显著高于有淋巴结转移和临床Ⅲ、Ⅳ期胃癌(P<0.05)。结论:提示胃癌组织自发性细胞凋亡与胃癌的某些生物学特性有密切的关系,细胞凋亡异常在胃癌发生发展过程中可能起重要作用。     

放射诱导胃癌细胞凋亡的实验研究

目的：建立放射诱导胃癌细胞凋亡模型,为进一步研究细胞凋亡分子机理打下基础。方法：用直线加速器１２Ｇy(9MeV)照射培养的人胃癌细胞株ＳＧＣ－７９０１,诱导凋亡发生,检测ＤＮＡ条带变化,电镜观察凋亡小体的出现,流式细胞义检测凋亡率及细胞周期和细胞内Ｃa^2 、cAMP浓度。结果：照射后２小时,即有凋亡细胞出现,在７２小时达高峰,胃癌细胞ＤＮＡ结构断裂,电泳呈梯状带形。胃癌细胞形态学改变出现膜小泡和凋亡小体形成等凋亡细胞特征。ＦＣＭ检测出现典型的凋亡峰,以Ｇ２－Ｍ期凋亡率为最高,照射后２、２４、４８、７２小时凋亡率分别为１１.26%、38.39%、50.59%及59.47%,胞内Ｃa^2 和cAMP浓度变化也随调亡率增加而升高。结论：照射１２Ｇy(9MeV)诱导胃癌细胞株ＳＧＣ－７９０１发生凋亡,凋亡率在７２小时达高峰。胞内Ｃa^2 和cAMP浓度变化起了相当重要的作用。     

抗癌中药诱导胃癌细胞凋亡机制研究进展

细胞凋亡是细胞的程序性死亡,可分为起始与调节和凋亡执行两个大的阶段.细胞凋亡是否发生,取决于起始与调节阶段,一旦进入凋亡执行阶段,则不可回复.     

COX-2 iNOS及VEGF在胃不典型增生胃癌中的表达及其意义

目的:探讨COX-2、iNOS及VEGF在胃不典型增生及胃癌中的表达、相互关系及在胃癌中的作用.方法:采用免疫组化Power visionTM两步法对84例胃癌和54例胃不典型增生组织中COX-2、iNOS及VEGF的表达进行检测.结果:COX-2、iNOS及VECF在胃癌中表达的阳性率分别为66.67%、77.38%、61.90%,均高于胃不典型增生组织(P＜0.05).COX-2、iNOS及VEGF表达与肿瘤的大小、淋巴结转移呈正相关,COX-2、VEGF表达与肿瘤浸润深度呈正相关,VEGF与COX-2、iNOS的表达呈正相关(P＜0.05).结论:COX-2、iNOS及VEGF与胃癌的发生、浸润转移相关,COX-2、iNOS通过增强VEGF的表达而促进肿瘤血管生成及转移.     

胃癌患者血清和胃组织中锌,铜,铁,钙和镁含量分析

本文采用Perkin-Elmen 306型原子吸收分光光谱法和用Digi-Sense LED pH计直接测定法对31例胃癌患者血清和胃组织中锌、铜、铁、钙和镁的含量进行检测分析。并与20例胃、十二指肠溃疡病和84位健康成人对比。发现胃癌患者血清和癌灶中镁含量分别为非常显著降低(P<0.01)和显著降低(P<0.05)。其降低与癌细胞酵解不显示巴斯德效应而和胃液中pH有关。当镁降低到一定程度时,可反馈抑制糖的酵解。血清中钙和铜含量均显著升高 (P均<0.05)。钙/镁比值增大,此值增大与预后有关。血铜升高可能是应激反应之一。     

塞来昔布诱导SGC-7901人胃癌细胞凋亡及其影响端粒酶活性的实验研究

目的探讨选择性环氧化酶-2（COX-2）抑制剂塞来昔布对SGC-7901人胃癌细胞生长、端粒酶活性，细胞凋亡及相关基因的影响，研究其抗肿瘤的作用机制。方法终浓度为100、200及300μmol／L的塞来昔布作用于SGC-7901人胃癌细胞后，采用MTT比色法测定细胞的生长抑制率，采用半定量-TRAP银染法检测端粒酶活性，流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率及bcl-2表达水平变化。结果不同浓度的塞来昔布对SGC-7901人胃癌细胞均有抑制作用，抑制率与对照组相比，差异均有显著性（P〈0．05）；流式细胞学检测到凋亡峰，细胞阻滞于G0／G1期。同时它也显著抑制胃癌细胞的端粒酶活性，其抑制作用呈时间-剂量依赖性，且端粒酶活性的降低与bcl-2表达水平下降有关。结论塞来昔布能抑制胃癌细胞的增殖，诱导细胞凋亡，降低端粒酶活性，其作用机制与bcl-2表达水平下降有关，此可能是COX-2抑制剂抗肿瘤的机制之一。     

三氧化二砷对人胃癌耐药细胞系SGC7901/ADM耐药逆转及凋亡诱导作用的探讨

目的:探讨中药三氧化二砷(As2O3)对人胃癌多药耐药细胞系(SGC7901/ADM)的耐药逆转及凋亡诱导作用.方法:应用免疫细胞化学方法(PV法)测定不同剂量的As2O3用药前后细胞内mdr-1基因产物P-gp的表达变化;同时用流式细胞仪对以上各组细胞进行细胞周期解析和凋亡率的测定.结果:As2O3在0.10～0.75μmol/L浓度范围内能够逆转SGC7901/ADM细胞内P-gp的表达,并将细胞阻滞于G0～G1期、诱导细胞凋亡(P＜0.01),其作用随As2O3剂量增加而增大.结论:在胃癌耐药细胞系SGC7901/ADM中,As2O3具有耐药逆转和凋亡诱导双重作用,并呈剂量依赖性.     

白杨素对人胃癌SGC-7901细胞增殖与凋亡的影响

 目的 探讨白杨素（Chrysin,ChR）诱导人胃癌SGC-7901细胞株凋亡的作用及机制。方法 分别用10、20、40、80μM的ChR处理人胃癌细胞株SGC-790148h,采用MTT比色法检测ChR对SGC-7901细胞的增殖抑制效应;采用丫啶橙（AO）染色、流式细胞术检测ChR诱导SGC-7901细胞凋亡的发生;应用Western-blot法检测凋亡相关基因NF-κB、Bcl-2、Bax的蛋白表达,并用计算机图像分析软件进行半定量分析。结果 MTT比色法显示的10～80μM的ChR在体外对人胃癌SGC-7901细胞有增殖抑制率为：9.71%～53.64%,该作用呈浓度依赖性;AO染色荧光显微镜观察ChR在体外能诱导人胃癌SGC-7901细胞发生凋亡,出现早期凋亡细胞及凋亡小体;流式细胞术检测结果显示：ChR呈浓度依赖性地诱导SGC-7901细胞凋亡,凋亡率为2.35%-20.8%;Western-blot检测结果显示：凋亡相关基因Bcl-2、NF-κB蛋白表达下调,Bax蛋白表达上调。结论 ChR对体外培养人胃癌细胞具有增殖抑制和诱导凋亡作用,呈浓度依赖性。ChR对人胃癌细胞增殖抑制和诱导凋亡作用机制可能与其抑制NF-κB活化、下调Bcl-2蛋白表达和上调Bax蛋白表达相关。     

加热诱导人胃癌细胞株MKN28凋亡的动力学研究

目的观察加热诱导人胃癌细胞株MKN28凋亡的最佳强度、凋亡细胞的特点及细胞周期的变化,方法采用丫啶橙（AO）荧光染色、流式细胞术和电镜观察不同时间长度的加热诱导人胃癌细胞株MKN28的凋亡。结果经43℃的加热后,MKN28细胞的AO染色阳性率随着加热时间延长而上升,且凋亡的诱导在2h内即可启动。流式细胞术提示细胞周期亦发生变化,G1期细胞从60．1％下降至42．95;S期比28．5％上升至40．3％;G2／M期细胞从11．4％上升到16．8％;并见凋亡特有的AP峰。超微结构显示：细胞变圆,细胞核浓缩,染色质趋边缘分布。结论加热可诱导人胃癌细胞株MKN28凋亡,且凋亡的诱导在较短时间内即可完成。     

胃癌及癌前疾病血清细胞纤维连接蛋白的检测及其临床意义

目的:探讨胃癌及癌前疾病患者血清细胞纤维连接蛋白(cFN)含量在不同胃疾病中变化情况及临床意义,及与幽门螺杆菌(HP)感染的相关性。方法:利用酶联免疫吸附试验检测1177例正常人、癌前疾病及胃癌患者血清cFN含量、胃疾病患者血清HP抗体含量。结果:血清cFN含量胃癌组明显高于正常人及胃良性疾病组(P<0.05),分化不良组显著高于分化良好组(P<0.01),淋巴结转移阴、阳性组比较差异无显著性(P>0.05)。胃疾病患者血清HP抗体检测,血清cFN含量,HP阴、阳性组比较差异无显著性,但在胃良性病变组中HP抗体阳性组较阴性组高,而胃癌组HP抗体阳性组较阴性组低。结论:血清cFN含量测定可用于胃良恶性疾病的鉴别,对胃癌诊断具有潜在的临床应用价值;胃癌患者血清cFN含量与胃癌分化程度密切相关,与胃淋巴结转移无关。血清cFN含量HP抗体阴性、阳性组比较差异无显著性,但胃良性疾病组,HP抗体阳性组较HP阴性组略高,胃癌组,HP抗体阳性组较HP阴性组略低,提示HP感染在胃良性疾病阶段和胃癌阶段,对血清cFN含量可能具有不同影响。由于血清HP抗体与其HP感染不一定平行,HP感染对血清cFN含量的影响有待于进一步深入探讨。     

胃癌组织中促凋亡因子PDCD5的表达及意义

目的探讨PDCD5蛋白在胃癌及癌旁组织中表达的特点,并根据其与胃癌生物学行为之间的关系分析对胃癌诊断以及预后评估的意义。方法采用免疫组织化学SP法检测50例胃癌及癌旁组织中PDCD5蛋白,以人工阅片评分以及Image- Pro Plus 6.0图像分析软件半定量分析两种方法判断其表达。结果PDCD5蛋白在胃癌组织中的阳性表达率(22.0%)明显低于癌旁组织(76.0%),并且在胃癌组织中的阳性率与分化程度(P＜0.01)、浸润度(P＜0.05)、淋巴转移(P＜0.05)相关。图像软件半定量分析结果显示PDCD5在胃癌组织中表达IOD为(8033.83±7719.14),显著低于癌旁组织(50224.35±39934.31),并且不同类型胃癌组织中IOD水平与分化程度、浸润度、淋巴转移相关之间存在显著相关性(P＜0.01)。结论人工阅片评分及图像分析软件半定量分析两种方法结果一致,PDCD5蛋白低表达于胃癌组织,在不同分化程度、浸润度以及有无淋巴转移组间的表达都有显著差异。PDCD5蛋白低表达预示肿瘤有较强的侵袭性,可用于判断胃癌预后。     

胃癌组织三叶因子家族的表达与细胞增殖和凋亡的相关性

目的探讨三叶因子1（TFF1）、三叶因子2（TFF2）、三叶因子3（TFF3）在胃癌组织中的表达及其与细胞增殖、凋亡的相关性。方法检测40例胃癌组织、20例正常胃黏膜、30例肠上皮化生及24例不典型增生胃黏膜中TFF1、TFF2、TFF3和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达及其细胞凋亡情况。结果 TFF1、TFF2在正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜、肠上皮化生胃黏膜及胃癌组织中均有表达,两者表达强度依次均呈递减趋势（均P＜0.05）。TFF3在正常胃黏膜没有表达,而在肠上皮化生胃黏膜、不典型增生胃黏膜和胃癌组织中均有表达,表达强度依次呈递增趋势（P＜0.05）。胃癌组织中 TFF1、TFF2表达与细胞增殖指数呈负相关 （r=-0.55,r=-0.38,均P＜0.05）,与细胞凋亡指数呈正相关（r=0.58,r=0.48,均P＜0.05）;TFF3的表达与细胞增殖指数呈正相关（r=0.55,P＜0.05）,与细胞凋亡指数呈负相关（r=-0.48,P＜0.05）。结论TFF可能通过影响胃癌细胞的增殖和凋亡,在胃癌发生、发展中起不同的作用。