阿帕替尼联合阿霉素对外周T细胞淋巴瘤的抑制作用及机制研究

目的探讨抗血管生成药物阿帕替尼与常用化疗药物阿霉素联合应用对外周T细胞淋巴瘤Hut78细胞株的抑制作用以及相关分子作用机制,为开发外周T细胞淋巴瘤治疗新方法提供实验依据。方法将Hut78细胞分为不同浓度药物处理组:阿帕替尼单药(10、20、40、60μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2、4μmol·L^-1)、阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1、(60+1)μmol·L^-1、(60+2)μmol·L^-1],分别作用72 h,采用CCK-8法检测药物对细胞的增殖抑制作用。采用流式细胞术检测不同浓度药物处理组{阿帕替尼单药(40μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L^-1)、阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1]}作用24 h后对Hut78细胞凋亡的影响。采用流式细胞术检测不同浓度阿帕替尼(10、20、40μmol·L^-1)作用24 h后对Hut78细胞周期的影响。采用蛋白印迹法检测不同浓度药物处理组{阿帕替尼单药(40μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L^-1)、阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1]}作用24 h后,Hut78细胞中PI3K/Akt信号转导通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt及凋亡相关蛋白Bcl-2、Casepase-3、Bax的表达变化。结果不同浓度(10、20、40、60μmol·L^-1)的阿帕替尼作用72 h后,细胞抑制率分别为(13.42±2.19)%、(19.52±4.16)%、(31.49±3.16)%、(52.88±3.37)%,72 h的IC₅₀值为(59.34±0.31)μmol·L^-1,各药物处理组与对照组两两比较,差异具有统计学意义(χ²=10.116,P=0.018);不同浓度(1、2、4μmol·L^-1)的阿霉素分别作用72 h后,细胞抑制率分别为(15.82±3.23)%、(31.70±4.79)%、(42.34±5.23)%,72 h的IC₅₀值为(5.52±0.18)μmol·L^-1,各药物处理组与对照组两两比较,差异具有统计学意义(χ²=10.532,P=0.015);阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1、(60+1)μmol·L^-1、(60+2)μmol·L^-1]作用72 h的细胞抑制率分别为(51.70±2.09)%、(56.62±4.83)%、(61.35±1.79)%、(65.13±3.88)%。两药的联合指数(CI)<1,说明二者具有药物协同作用。阿帕替尼单药(40μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L^-1)作用24 h的细胞凋亡率分别为(15.65±0.75)%、(13.85±2.15)%、(23.60±1.30)%,阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1]作用24h的细胞凋亡率分别为(27.00±1.90)%、(33.20±2.30)%,各药物处理组与对照组[(6.10±0.90)%]比较,差异有统计学意义(χ²=16.251,P=0.006)。不同浓度(10、20、40μmol·L^-1)的阿帕替尼作用24 h后,G₀/G₁期细胞比例随浓度升高而升高[(49.27±0.45)%、(50.34±1.24)%、(59.16±1.23)%],S期细胞比例随浓度升高而降低[(42.81±2.22)%、(39.19±2.71)%、(34.08±1.01)%],各药物处理组与空白对照组[G₀/G₁期(39.26±0.65)%,S期(49.40±2.52)%]比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。阿帕替尼单药(40μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L^-1)以及阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1]作用24 h后,PI3K/Akt信号通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、p-Akt和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平呈下降趋势,促凋亡蛋白Casepase-3和Bax的表达水平呈上升趋势,Akt蛋白的表达水平无明显变化,各药物处理组p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、Bcl-2、Casepase-3及Bax蛋白表达水平与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论阿帕替尼可抑制外周T细胞淋巴瘤细胞的增殖并诱导其凋亡,同时具有细胞周期阻滞作用,其作用可能是通过抑制PI3K/Akt信号通路激活实现的。阿帕替尼联合阿霉素对外周T细胞淋巴瘤细胞具有协同抑制作用。     

反相高效液相色谱法测定血清中阿帕替尼的浓度

目的建立简单高效的阿帕替尼反相高效液相色谱测定法。方法血清中阿帕替尼用3mL乙醚-石油醚(10∶1)单步提取;色谱柱:Symmetry RP18(5μm,4.6mm×250mm,waters),流动相:乙腈-0.2%TFA水溶液(36∶64)。检测波长:阿帕替尼260nm,内标卡马西平286nm。结果阿帕替尼在0.2~8μg·mL^-1范围内呈良好的线性关系(r=0.9991)。结论此方法简便快速,可用于阿帕替尼血药浓度监测。     

吉非替尼致皮疹和肾病综合征

1例65岁男性患者肺腺癌Ⅳa期患者既往有镜下血尿10余年, 尿潜血波动在(+～++)。因肿瘤靶点基因检测示表皮生长因子受体L858R突变(+), 接受吉非替尼250 mg口服、1次/d治疗。治疗前实验室检查示血清白蛋白(ALB)37.2 g/L, 血清肌酐(Scr)73 μmol/L, 尿潜血(++)。治疗2 d后患者全身出现皮疹、大量泡沫尿、双下肢重度浮肿。2周后实验室检查示尿潜血(++++), 尿蛋白(++++), ALB 28.3 g/L, Scr 111 μmol/L。Scr峰值达135 μmol/L, ALB最低21.5 g/L。考虑为吉非替尼所致的药疹和肾病综合征, 停用吉非替尼, 给予对症治疗。3 d后皮疹和水肿逐渐消退, 抗肿瘤药物改用奥希替尼。肾脏病理学检查诊断为IgA肾病, 考虑吉非替尼在原发性IgA肾病的基础上导致肾病综合征。17 d后患者皮疹完全消退, 水肿明显好转。8个月后随访, ALB 37.9 g/L, Scr 130 μmol/L, 尿蛋白(++), 肾损伤仍未完全恢复。     

阿帕替尼调控上皮间质转化抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭

目的探讨阿帕替尼对人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭作用的影响。方法 MTT法检测不同浓度的阿帕替尼(1、 2、 4、 8、 16μmol·L~(-1))作用于乳腺癌MDA-MB-231细胞48 h的细胞毒性,并采用Bliss法计算半数抑制浓度(IC50); Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测阿帕替尼对MDA-MB-231细胞凋亡的影响;Transwell实验检测阿帕替尼对MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响;Western blot检测阿帕替尼对上皮间质转化(EMT)标志性蛋白上皮钙黏素、神经钙黏素及波形蛋白表达的影响。结果 1、 2、4、 8、 16μmol·L~(-1)阿帕替尼可显著抑制MDA-MB-231细胞的增殖,增殖抑制率分别为(38.38±3.33)%、(53.17±4.31)%、(62.09±6.21)%、(80.97±7.50)%和(98.54±9.75)%。阿帕替尼作用48 h对MDA-MB-231细胞的IC50为1.96μmol·L~(-1)。与空白对照组相比,阿帕替尼可显著诱导MDA-MB-231细胞凋亡,显著抑制MDA-MB-231细胞侵袭基底膜的能力(P<0.05);阿帕替尼还可显著上调MDA-MB-231细胞上皮钙黏素的表达,下调神经钙黏素及波形蛋白的表达(P <0.05)。结论阿帕替尼可能通过调控EMT进而发挥抗三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭作用。     

蛋白激酶C抑制药enzastaurin对吉非替尼耐药的人非小细胞肺癌细胞株生长的影响

目的：观察新型靶向制剂enzastaurin单独或联合吉非替尼对耐药人非小细胞肺癌细胞株的影响,设计合理的治疗药物组合。方法：CCK8法检测细胞增殖,Chou-Talalay联用指数法判定联合用药效果,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果：单药吉非替尼及enzastaurin作用NCI-H460耐药肺癌细胞72 h的半数抑制浓度（IC50）分别为6.99μmol·L-1（95%CI 3.55~13.79μmol·L-1）,7.25μmol·L-1（95%CI 4.77~1.02μmol·L-1）。两药联合应用对肺癌细胞的抑制作用增强（P 〈0.05）,同时给药组抑制效果更显著（P〈0.01）。同时给药组、序贯给药组（先用吉非替尼）和序贯给药组（先用enzastaurin）吉非替尼对H460细胞的IC50值分别为0.006μmol·L-1（95%CI 0.002~0.020μmol·L-1）,0.02μmol·L-1（95%CI 0.011~0.037μmol·L-1）,0.085μmol·L-1（95%CI 0.042~0.170μmol·L-1）。联合指数法显示在吉非替尼浓度0.05μmol·L-1以上时,同时给药组联合指数均〈1。细胞周期分布实验结果显示同时给药组可显著提高G0/G1期细胞比例（P〈0.05）,阻滞细胞于G1期。结论：蛋白激酶C抑制药enzastaurin与EGFR抑制药吉非替尼联用具有较好的协同作用,两药联合应用可能是出现吉非替尼耐药的非小细胞肺癌后续治疗的一个新选择。     

硫酸依替米星氯化钠注射液致肾损害

患者,男性,57岁,因腹膜后纤维化、双肾积水、泌尿系感染等症,给予硫酸依替米星氯化钠注射液0.3 g静脉滴注,每天1次,连续用药9d后,尿素氮由6.74 mmol·L-1上升至9.85 mmol·L-1,血清肌酐由103.0μmol·L-1升至373.9 μmol·L-1.停药6d后尿素氮降至5.11 mmol·L-1,血清肌酐降至122.1 μmol·L-1.随后的20多天里,仍按上述方案间断使用该药,用药过程中尿素氮及血清肌酐随用药或停药而上升或下降.在停药2周并针对原发病治疗后尿素氮恢复至2.94 mmol·L-1,肌酐恢复至76.0μmol·L-1.调整给药方案为硫酸依替米星氯化钠注射液,静脉滴注,0.15 g,每天2次,连续使用6d,尿素氮及血清肌酐未见明显升高.     

胃恶性肿瘤患者阿帕替尼的治疗药物监测研究

目的：探讨在胃恶性肿瘤患者中开展阿帕替尼治疗药物监测的情况,为临床安全合理用药提供参考。方法：采用LC-MS/MS测定2021年1月～2023年3月期间我院胃恶性肿瘤患者体内阿帕替尼的暴露水平,分析药物浓度与不良反应,疗效及不同联合用药种类之间的关系,考察性别、年龄、联合用药及肝肾功能等因素对稳态谷浓度的影响。结果：阿帕替尼回归直线方程为Y=0.065 12X+0.027 45,r²=0.998 7,血清样本在1.00～500μg·L^-1内具有良好的线性,定量下限为1.00μg·L^-1。50例患者中,血清药物谷浓度范围为10.39～364.74μg·L^-1,未发现疾病状况及不良反应与药物稳态谷浓度存在显著关联。与单抗类药物联用的阿帕替尼患者血药浓度显著高于紫杉醇组(P<0.05),其他各组之间差异无统计学意义(P>0.05)。肾小球滤过率(eGFR)是影响稳态谷浓度的重要因素。结论：在阿帕替尼治疗过程中,利用稳态谷浓度进行治疗药物监测的意义有限。阿帕替尼治疗期间需要密切关注肾功能的监测,...     

索凡替尼致急性肾损伤的病例分析

1例43岁女性患者因左上颌恶性肿瘤术后复发，口服索凡替尼300 mg·d-1，4周为一个周期。治疗第4周期出现蛋白尿、高血压、高血脂、水肿和低白蛋白血症，血肌酐升高。立即停用索凡替尼，给予降尿蛋白、降压及对症治疗。肾活检示血栓性微血管病变，判定为索凡替尼所致急性肾损伤。经治疗后患者尿蛋白逐渐减少，血压下降，血肌酐恢复正常。     

双氯芬酸钠致急性肾损伤1例

1病历资料
　　患者女（病案号01264999）,22岁,因间断腹痛4天、恶心2天,于2014年8月20日入院。患者8月15日因月经疼痛难忍,自行购买双氯芬酸钠肠溶胶囊（产地不详）服用（2片,一日两次）,3天后出现腹痛、恶心于门诊求治。查血常规：白细胞7.23×109/L,中性粒细胞百分比0.83。生化：尿素氮10.36 mmol· L-1,肌酐361μmol·L-1。自述近两日尿量减少,不足1500 mL。入院后查肾动态显像：GFR：58.72 mL· min-1,右肾27.32 mL·min-1,左肾31.40 mL·min-1。尿常规：尿蛋白2+。生化：尿素氮10.42 mmol·L-1,肌酐369μmol·L-1,钾3.39 mmol·L-1。诊断为急性肾损害。考虑为双氯芬酸钠导致的肾前性血容量不足引发的急性肾损伤。停用双氯芬酸钠后,补液治疗5天,肌酐下降至170μmol·L-1,尿量由入院时1400 mL· d-1升至2500 mL·d-1。经对症治疗,病情趋好,准予出院,嘱咐患者半个月后返院复查。     

贝那普利联合硫唑嘌呤对IgA肾病的疗效观察

目的探讨贝那普利联合硫唑嘌呤对IgA。肾病的治疗疗效及安全性。方法收集我科2003年1月一2007年12月36例IgA。肾病患者,病理分级均采用LEE氏分级法,均在Ⅲ～V级之间,24h尿蛋白定量在1一3g之间。随机分为治疗组和对照组。其中治疗组20例,对照组16例。治疗组在病理诊断后以贝那普利联合硫唑嘌呤治疗,贝那普利10mg／d,硫唑嘌呤2mg／kg·d。对照组仅以贝那普利10mg／d治疗。观察9个月后临床评估患者血清肌酐水平、肝功能、血脂及24小时尿蛋白定量。结果经过9个月的治疗,贝那普利对照组患者的24小时蛋白尿从（1．82±1．23）g／L减少至（1．32±0．27）g／L;血清肌酐水平从（97．34±11．25）μmol／L上升至（126．34±13．43）μmol／L。而贝那普利联合硫唑嘌呤24小时蛋白尿从（1．78±1．11）g／L减少至（0．65±0．45）g／L,与对照组比较,差异有显著性（P〈0．05）;而治疗后血清肌酐水平为（106．34±11．27）μmol／L,与对照组比较,差异有显著性（P〈0．05）。两组在血脂水平方面,治疗前后均无明显差异（P〉0．05）。结论对IgA肾病病理分级在3级以上,24小时尿蛋白定量在1～3g之间的患者,贝那普利联合硫唑嘌呤能明显降低患者的尿蛋白及保护患者的肾功能。     

葛根素治疗糖尿病肾病的临床观察

目的：观察葛根素对糖尿病肾病的临床效果。方法选择本院2010年1月～2012年12月收治的108例糖尿病肾病患者,随机分为治疗组54例,对照组54例,两组均予常规降糖、降压、降血脂治疗,治疗组加用以葛根素注射液400mg加入0.9％氯化钠注射液500mL中静脉滴注。每日1次,4周为1个疗程,观察两组治疗前后的尿微量蛋白、血肌酐、血尿素氮、血流变检测结果。结果对照组患者治疗前24h尿蛋白定量（0.35±0.17）g/24h,肌酐（135.8±27.6）μmol/L,尿素氮（13.4±3.5）mmol/L。治疗组患者治疗前24h尿蛋白定量（0.34±0.16）g/24h,肌酐（136.1±26.9）μmol/L,尿素氮（13.5±3.3）mmol/L等差异无统计学意义（P＞0.05）。两组患者治疗后对照组24h尿蛋白定量（0.23±0.10）g/24h,肌酐（109.9±18.9）μmol/L,尿素氮（11.6±2.9）mmol/L。治疗组24h尿蛋白定量（0.15±0.07）g/24h,肌酐（105.9±17.9）μmol/L,尿素氮（10.2±2.4）mmol/L。两组治疗后24h尿蛋白定量、肌酐、尿素氮均下降,但治疗组TP/24h与对照组比较下降有显著差异（P＜0.05）。两组治疗后血流变检测结果显示对照组血小板聚集率（76.7±15.1）%、全血黏度（10.27±1.16）mPa·s、血浆黏度（10.12±1.01）mPa· s。治疗组血小板聚集率（38.9±9.3）%、全血黏度（5.31±1.03）mPa·s、血浆黏度（5.16±1.18）mPa ·s。两组比较下降有显著差异（P＜0.05）。结论葛根素静脉滴注可降低糖尿病肾病蛋白尿,改善肾功能;可抑制血小板聚集、降低患者血液的高黏状态。     

伊立替康相关腹泻及粒细胞缺乏致死 亡简

1 例62 岁结肠癌男性患者,接受伊立替康80 mg 静脉滴注d1、d8 化疗.化疗后反复腹泻11 d,化疗第13 天腹泻加重伴发热,急诊入院.查血常规示WBC 0.34×109·L-1,NEUT 5.94%,L 85.34%,RBC 3.84×1012·L-1,Hb 114.0 g·L-1,PLT 33×109·L-1.BUN 13.71 mmol·L-1,Scr 291 μmol·L-1.给予头孢匹罗抗感染,重组人粒细胞集落刺激因子升白细胞,免疫调节,止泻、护肾、补液等对症治疗,入院第2 天出现感染性休克,给予抗休克等治疗.第3 天出现深度昏迷,血压难以维持.最终因循环、呼吸衰竭死亡.     

H型高血压患者血压晨峰现象与早期肾功能损害的关系

目的 探讨具有晨峰现象的H型高血压与早期肾功损害关系.方法 选择已确诊H型高血压[同型半胱氨酸(Hcy)≥10 μmol·L-1]者共210例,对这些患者行24 h动态血压监测(ABPM),根据监测结果将患者分为晨峰组(108例)和非晨峰组(102例),检测各组受试者血清胱抑素C水平以及尿β2-微球蛋白的含量,同时检测一般生化指标.结果 晨峰组24 h平均收缩压[(155.7±14.6) mmHg]、白昼平均收缩压[(160.4±15.5) mmHg]、夜间平均收缩压[(147.7 ±16.5) mmHg]、收缩压晨峰[(35.4±7.2) mmHg]、尿β2-微球蛋白[(1.11±0.31) mg·L-1]及血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C[(1.86±1.04) mg·L-1]均高于非晨峰组(P＜0.05).结论 H型高血压患者中具有血压晨峰者较非血压晨峰者更易出现早期肾功能损害.     

左氧氟沙星注射液致过敏性休克及肝功能损伤

1例61a女性患者,因泌尿系感染予以甲磺酸左氧氟沙星注射液0.2g,bid治疗。用药10min后出现寒战、头晕、视力模糊、四肢冰冷、BP80/60mmHg。血生化示：Cr158μmol·L-1,BUN3.33mmol·L-1,Glu9.64mmol·L-1,ALT195IU·L-1,AST141IU·L-1,予以扩容后生命体征恢复平稳。入院完善检查后,排除酒精性肝病,病毒性肝炎以及自身免疫性肝病。予以还原型谷胱甘肽、多烯磷脂酰胆碱护肝治疗12d,病情好转后出院。出院时,肾功能已经恢复;口服护肝药治疗1个月后肝功能恢复。     

拉西地平对高血压并发冠心病患者血浆同型半胱氨酸水平的影响

目的 研究拉西地平对高血压并发冠心病患者血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平的影响. 方法高血压并发冠心病患者184例,随机分为治疗组93例与对照组91例. 治疗组给予拉西地平4 mg,qd,po;对照组给予硝苯地平缓释片,每次10 mg,bid,po. 疗程均为3个月. 治疗前后监测血压及血浆Hcy水平. 结果 治疗组治疗前血浆Hcy水平(17.3±5.1) μmol.L^-1,对照组为(16.9±4.8) μmol.L^-1,治疗3个月后,治疗组平均血浆Hcy水平为(12.5±4.2) μmol.L^-1,对照组为(14.6±4.4) μmol.L^-1,两组Hcy水平均有显著降低,差异有统计学意义 (P<0.01),两组间治疗后比较,差异有统计学意义 (P<0.01). 结论 拉西地平可降低高血压并发冠心病患者血浆Hcy水平,此作用独立于其降压作用之外,可能为拉西地平抗动脉粥样硬化的独特作用机制之一.     

2种西酞普兰制剂的人体生物等效性研究

目的:比较西酞普兰胶囊与片剂在健康人体内的生物等效性。方法:20名健康志愿者采用双周期交叉试验,单剂量空腹口服西酞普兰胶囊(受试制剂)与西酞普兰片(参比制剂)各40mg,以高效液相色谱法测定其西酞普兰血药浓度,药-时数据经3p97软件处理,计算主要药动学参数,并进行2种制剂的生物等效性评价。结果:西酞普兰胶囊与片剂的主要药动学参数分别为tmax(36.9±9.1)、(39.3±6.8)h,cmax(68.7±5.6)、(71.8±6.9)μg·L-1,t1/2(4.3±1.1)、(4.6±1.0)h,AUC0～144h(2418±636)、(2483±342)μg·h·L-1,AUC0～∞(2576±561)、(2742±371)μg·h·L-1。西酞普兰胶囊的相对生物利用度为(98.8±11.4)%。结论:西酞普兰胶囊与片剂具有生物等效性。     

银杏注射液治疗儿童原发性肾病综合征的临床观察

目的观察银杏注射液对儿童原发性肾病综合征(PNS)的疗效。方法46例PNS患儿随机分成观察组26例,对照组20例,观察组在常规激素治疗的基础上加用银杏注射液治疗,对照组以常规激素治疗,其它治疗2组相同。分别测定2组治疗前后的血液流变学的变化、24h尿蛋白、血清白蛋白(ALB)、血2-微球蛋白(2-MG)、尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、平均动脉血压(MAP)及总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、免疫球蛋白IgA、IgG、IgM、补体C3等指标。结果观察组与对照组相比能使血黏度改善(P<0.05);24h尿蛋白、BUN、血2-MG、TC、MAP等明显降低(P<0.05);尿蛋白转阴时间明显缩短(P<0.05),IgA、IgG、C3水平明显升高(P<0.05)。结论银杏注射液具有降低血液黏滞度,改善微循环,降低血压,减少尿白蛋白,缩短尿蛋白转阴时间,保护肾功能等作用,对儿童PNS有治疗作用。