大鼠骨髓间充质干细胞磁标记及MR成像研究

目的应用菲立磁．多聚左旋赖氨酸复合物标记大鼠骨髓间充质干细胞，探讨MR成像显示磁标记干细胞的可行性。方法制备菲立磁-多聚左旋赖氨酸复合物。分离培养Wistar大鼠骨髓间充质干细胞，以菲立磁-多聚左旋赖氨酸复合物标记干细胞。分别于标记后24h及1、2、3周行普鲁士蓝染色观察细胞内铁，台盼蓝排除试验检测细胞活力。应用1．5TMR仪，以SE序列T1WI、T2WI和梯度回波（GRE）序列T2＊WI行磁标记干细胞成像。结果普鲁士蓝染色显示细胞质内大量铁颗粒存在，标记率100％；随细胞分裂增殖，细胞内铁颗粒逐渐减少。干细胞磁标记后24h及1、2、3周的台盼蓝拒染率分别为91．00％、93．00％、91．75％和92．50％，与未标记细胞相比较差异无统计学意义（P〉0．05）。10^3、10^4、10^5个磁标记干细胞T2WI信号降低分别为63．75％、82．31％、91．92％，T2＊WI信号降低分别为68．24％、83．01％、93．94％。10^5个干细胞磁标记后24h及1、2、3周T2＊WI信号降低分别为93．75％、75．92％、41．75％、8．83％。结论应用菲立磁-多聚左旋赖氨酸复合物标记大鼠间充质干细胞安全、有效；T2＊WI对磁标记干细胞的显示最敏感；MR信号改变与干细胞数目及分裂增殖状态相关。     

SHU555A标记大鼠骨髓间充质干细胞的磁敏感加权成像

目的 探讨超顺磁性氧化铁颗粒体外标记大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow stem cells,BMSC)后磁敏感加权成像序列显示移植细胞的可行性.方法 使用不同终浓度(7 μg/ml、14 μg/ml、28 μg/ml和56 μg/ml)的SHU555A标记大鼠骨髓间充质干细胞,标记后进行普鲁士蓝染色、细胞内铁颗粒的透射电镜观察及体外磁敏感加权序列成像,并将标记后的BMSC移植入正常大鼠脑内,移植后第1、3周和7周进行3.0T MRI磁敏感加权序列成像.结果 细胞普鲁士蓝染色及透射电镜显示铁颗粒散在分布于细胞胞质内.标记细胞的Ependoff管在SWI序列图像上呈明显低信号,且随SHU555A标记浓度的增高,标记细胞的Ependoff管信号强度在SWI序列幅值图及磁敏感加权图像上依次降低.标记后的BMSC移植入正常大鼠脑内1周后,SWI序列图像可见正常脑组织背景上团块状类圆形局限性极低信号影;移植7周后局部仍可显示低信号.结论 MRI磁敏感加权序列图像不仅可在体外明确显示SHU555A标记所致的低信号,且标记细胞移植入正常大鼠脑内最长达7周后仍可在磁敏感加权序列图像上显示.     

磁标记大鼠骨髓间充质干细胞活体内移植后向肝癌细胞趋向性迁移的研究

目的 探讨磁标记大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)活体内移植后对大鼠肝细胞癌的趋向性迁移及其机制.方法 培养大鼠BMSCs,超顺磁性氧化铁粒子标记.制备大鼠肝癌模型24只,数字表法随机分为3组:实验组(n=12)经脾植入磁标记的BMSCs;对照组A(n=6)移植未标记的BMSCs;对照组B(n=6)不作任何处理.分别于移植前及移植后1、3、7和14 d行MR扫描,选用T_2*WI序列进行移植细胞的示踪并测量肿瘤组织与正常肝组织的信号强度的比值(SI/SI*),结果行单因素方差分析;取肿瘤组织、瘤旁正常肝组织行普鲁士蓝染色,分析BMSCs在体内的分布并与MR对照.结果 BMSCs的磁标记率为90%以上.移植后实验组T_2*WI显示肿瘤信号强度值明显减低,移植前及移植后1、3、7和14 d的SI/SI*值分别为3.18±0.21、1.98±0.20、2.38±0.28、2.70±0.25及3.16±0.24,差异有统计学意义(F=56.65,P<0.05);与移植前相比,1、3、7 d肿瘤信号强度的减低有统计学意义(t值分别为1.20、0.79、0.48,P值均<0.05).对照组移植前后各SI/SI*值差异无统计学意义(P>0.05).免疫组织化学显示实验组肿瘤边缘及内部有大量监染的普鲁士蓝阳性细胞分布,标记细胞在肿瘤内的分布与MR信号改变基本一致.对照组肿瘤组织普鲁士蓝染色均为阴性结果.结论 BMSCs在活体内对肝癌细胞有明显的趋向迁移特性,有望成为基因治疗肝细胞癌的载体.     

磁标记大鼠骨髓间充质干细胞活体内移植后向肝癌细胞趋向性迁移的研究

Objective To label rat bone marrow mesenchymal stem cells with superparamagnetic iron oxide (SPIO) and to explore the tropism of BMSCs for hepatocellular carcinoma cells after transplantation in vivo. Methods BMSCs from bone marrow of Sprague-Dawly (SD) rats were cultured isolated and purified, Labeled BMSCs was achieved using Feridex. Twenty-four hepatocellular carcinoma models of SD rats were induced two weeks before tmnsplantation. The models were divided into three groups in random: the labeled BMSCs and unlabeled BMSCs were transplanted respectively into the rat's livers of experimental group (n = 12) and control group A(n =6) via spleens, and no transplant was done for control group B (n =6). MR imaging was performed to monitor the transplanted cells after 1,3,7,14 d using 1.5 T MR system. Signal intensity ratio (SI/SI*) between tumor and hepatic tissue on T2 * WI were measured and compared by one-factor analysis of variance. After MR imaging, Prussian blue staining was performed. MR imaging findings were compared with histological sections. Results Prussian blue staining confirmed the labeling efficiency of BMSCs was above 90%. SI/SI* of experimental group before and 1, 3, 7, 14 d after transplantation were 3.18±0.21,1.98±0.20,2.38±0.28,2.70±0.25 and 3.16±0.24 respectively. Following transplantation of BMSCs, signal intensity decrease was found in hepatocellular carcinoma of experimental group(F =56.65,P <0.05) and low signal change decreased gradually and disappeared at two weeks after transplantation, while no remarkable low signal change was seen in the control group by T2 * WI (P > 0.05). A large number of Prussian blue staining positive cells were found in hepatocellular carcinoma in experimental group. Histological section with Prussian blue staining had a good correlation with the signal intensity changes on MR images at different time. Conclusion BMSCs display significant tropism to hepatocellular carcinoma and may be an ideal gene therapy vehicle against hepatocellular carcinoma.     

肺部单发结节在~(18)氟脱氧葡萄糖-正电子发射体层显像检查后外科决策

目的探讨肺部单发结节(SPN)患者在18氟脱氧葡萄糖-正电子发射体层显像(FDG-PET)检查后的外科决策。方法 1998年10月—2006年4月对375例直径1.0～3.0 cm的SPN患者行FDG-PET检查,采用目测法结合半定量分析判读。结果 FDG-PET定性诊断的敏感度、特异度、准确率分别为73.7%(188/255)、71.7%(86/120)、73.1%(274/375);FDG-PET无法区别良性显影病变与腺癌;对于肺外病灶FDG-PET也存在假阳性。结论 PET检查阳性的SPN,除非抗感染或抗结核治疗有效,否则都应当通过手术切除等途径确诊;对PET检查阴性的SPN患者,或手术切除,或定期随访。     

电刺激对大鼠脊髓损伤后自体骨髓间充质干细胞移植的影响

目的 探讨脉冲电刺激对大鼠脊髓损伤后自体骨髓间充质干细胞( mesenchymal stem cells,MSCs)移植疗效的影响. 方法 选用60只雄性SD大鼠.数控脊髓损伤打击器制备脊髓损伤模型.脊髓损伤7d后,从大鼠自身股骨上采集并标记MSCs.以随机数字表法分为四组:MSCs移植组(A组)、电刺激组(B组)、电刺激联合MSCs移植组(C组)和PBS对照组(D组).应用BBB评分法和体感诱发电位(SEP)在脊髓损伤前后定期进行功能评定;磁共振弥散张量成像(DTI)技术检测脊髓的修复情况;免疫组化观察Brdu标记的移植MSCs的存活情况. 结果 术后4周,BBB评分C组与其他三组比较差异有统计学意义(P＜0.05),明显高于D组(P＜0.01),提示肢体功能恢复显著.移植后第8周,SEP检测C组潜伏期及波幅与其他各组比较差异有统计学意义(P＜0.05),提示C组神经功能恢复较快,DTI成像在移植后第8周也有明显修复.免疫组化显示术后8周C组脊髓损伤部位有大量Brdu标记的MSCs细胞,其阳性细胞数量和比率明显增加. 结论 电刺激疗法能够显著提高脊髓损伤后移植MSCs的存活能力及其联合治疗效果.     

~(18)F-氟脱氧葡萄糖摄取正电子发射体层成像作为肾透明细胞癌一种病理分级预测手段

<正>摘要目的探讨18F-氟脱氧葡萄糖正电子发射体层成像/CT(18F-FDG PET/CT)在预测肾透明细胞癌(c RCC)弗尔曼病理分级中的作用。方法回顾性分析经机构审查委员会的     

肾功能衰竭大鼠超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞肾脏移植MR活体示踪的研究

目的应用磁性氧化铁纳米粒子和多聚左旋赖氨酸（poly-L-lysine，PLL）的偶联物Fe2O3-PLL标记大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs），MR活体示踪经肾动脉移植入肾功能衰竭（简称肾衰）大鼠肾脏的标记细胞。方法制备Fe2O3-PLL，分离、纯化并培养大鼠骨髓MSCs，Fe2O3-PLL标记细胞，普鲁士蓝染色显示细胞内铁。肌内注射甘油所致肾衰的大鼠分为2组，分别经左肾动脉移植入标记细胞（6只）和未标记细胞（5只），移植后即刻及第1、3、5、8天应用MRI对移植细胞进行活体示踪，并与肾脏组织切片普鲁士蓝染色和HE染色对照。结果MSCs的Fe2O3-PLL标记率近100％，普鲁士蓝染色显示蓝色铁颗粒位于MSCs胞质内。标记细胞移植后肾衰大鼠肾脏皮质区信号强度明显下降，T2＊WI信号改变最明显，而肾髓质及肾盂信号较细胞移植前无明显变化，信号改变随着时间的延长逐渐减轻一直持续到移植后第8天。组织学分析见绝大多数标记细胞分布于肾皮质肾小球内，与MRI信号改变区域基本一致。未标记细胞移植后未见肾脏信号改变。结论Fe2O3-PLL可以有效标记大鼠骨髓MSCs，临床应用型1．5T磁共振仪可对经肾动脉移植入肾衰大鼠肾脏的标记细胞进行初步活体示踪。     

hBDNF基因修饰骨髓间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响

目的 探讨人脑源性神经营养因子(humar brain- derived neurotrophic factor,hBDNF)基因修饰骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植入大鼠体内后在脊髓损伤区的存活情况、hBDNF蛋白的表达情况及其对大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响. 方法 240只成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、损伤组、hBDNF-大鼠MSCs (rMSCs)组和空载体- rMSCs组,每组60只.用Mlen法建立大鼠脊髓损伤模型.造模后7d,于L4～5间隙蛛网膜下腔向hBDNF -rMSCs组、空载体- rMSCs组和损伤组分别注射等体积的hBDNF基因修饰rMSCs悬液、空载体基因修饰rMSCs悬液和PBS.移植后1,2,3,7和14 d分别取损伤脊髓组织,用荧光显微镜观察带有增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因的rMSCs在体内的存活分布情况,用Western blot法检测hBDNF蛋白的表达水平,以原位末端标记法(TUNEL)检测神经细胞的凋亡情况.结果 hBDNF - rMSCs组和空载体- rMSCs组均检测到EGFP基因表达的绿色荧光信号;hBDNF-rMSCs组表达hBDNF蛋白,其表达水平随时间而变化,移植后2d即可检测到hBDNF蛋白表达,移植后7 d hBDNF表达量最高,此后逐渐下降;移植后2,3,7和14 d,hBDNF - rMSC组TUNEL阳性细胞数量最少,空载体- rMSCs组次之,损伤组相对较多,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 脊髓损伤后hBDNF基因修饰rMSCs经蛛网膜下腔移植能聚集生长在脊髓损伤区域,并表达hBDNF蛋白;hBDNF基因修饰rMSCs能够抑制神经细胞的凋亡.     

原发灶不明的颈部转移病人的隐匿性原发肿瘤检测:~(18)FFDGPET/CT与增强CT或CT/MR成像的前瞻性对照研究

<正>目的评估18F FDG PET/CT对原发灶不明的颈部转移病人在检出隐匿性原发肿瘤诊断准确性并以此决定病人的最佳处理;与单独增强CT或联合增强CT和MRI(CT/