时间分辨荧光免疫法检测HBsAg的临床评价

目的通过比较检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的两种方法,即时间分辨荧光免疫(TRFIA)法与微粒子酶免疫分析(MEIA),观察TRFIA法的临床应用价值。方法用上述两种方法同步检测210例乙型肝炎组、160例非乙型肝炎组及50例正常对照组血清样本,经χ2检验,对测定结果进行分析。结果TRFIA法与MEIA法比较,对各组HB-sAg正确检测率均为100%,特异性为100%,结果经配对资料χ2检验无显著性差异。结论采用TRFIA法临床检测HBsAg,其灵敏度和特异性与MEIA法一致,TRFIA法可作为一种准确、无放射污染、易于自动化,又经济的定量测定HB-sAg的方法。     

乙肝病毒血清学标志物 TRFIA与 RIA定量检测结果

目的以微粒子酶免疫分析(MEIA)为金标准,比较时间分辨荧光免疫(TRFIA)法、放射免疫分析(RIA)技术在定量检测乙肝表面抗原(HBsAg)、表面抗体(HBsAb)、e抗原(HBeAg)、e抗体(HBeAb)、核心抗体(HBcAb)5项乙肝病毒血清学标志物(HBV—M)的临床应用价值。方法对210例随机样本同时采用MEIA、TRFIA及RIA3种方法进行HBV-M5项指标测定,分别计算TRFIA、RIA法与标准MEIA检测结果的相对灵敏度、相对特异性和总符合率。结果TRFIA法检测HBV-M结果的相对灵敏度、相对特异性和总符合率均优于RIA法。结论TRFIA法与RIA法比较,在临床检测HBV-M5项指标具有相对灵敏度、相对特异性和总符合率较高的优势,且无放射污染,易于自动化。     

镧系元素时间分辨荧光分析技术及仪器的配套研究

放射免疫(RIA)分析方法以灵敏度高、特异性强著称,但由于它具有放射性,在分析和检测上很难实现全程自动化,从而限制了它的应用.为此,非放射性免疫分析技术应运而生,并迅速发展.主要有酶免疫分析(EIA)、发光免疫分析(CLA)、荧光免疫分析(FIA)等方法,其中被公认最有前途的是80年代初发展起来的时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA).     

时间分辨荧光免疫分析法的研究进展及在临床医学领域的应用

时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）是一种结合了酶标记免疫分析和放射免疫分析的新型超微量免疫标记分析方法,具有无放射性、无背景光干扰、灵敏度高、稳定性好、线性范围宽、操作简便、分析速度快等优点,已被广泛应用于临床医学检验、食品快速检测等领域。该研究就TRFIA的研究进展及在临床医学领域的应用作一综述。     

乙型肝炎表面抗原弱阳性结果探讨

目的探讨乙肝表面抗原(HBsAg)弱阳性的临床意义。方法用酶联免疫吸附法(ELISA)和时间分辨荧光免疫分析系统(TRFIA)分别对40例乙肝表面抗原(HBsAg)弱阳性标本进行检测。结果ELISA法测定40例弱阳性标本,经TRFIA法定量检测均为阳性。结论当检测HBsAg为弱阳性时,应进行复查确认。     

时间分辨荧光在免疫分析中的应用进展

时间分辨荧光免疫分析技术(time-resolved fluoroimmunoassay, TRFIA)是依赖于稀土元素独特的荧光性质而发展起来的一种免疫检测技术,它集合了放射免疫技术、酶联免疫技术以及普通荧光免疫技术的优点,具有灵敏度高、特异性强、稳定性好,且线性范围宽,荧光寿命长,操作简单和非放射性等特点,在免疫分析领域展现了良好的应用前景。围绕时间分辨荧光在免疫分析中的最新研究进展,介绍了几种常见的用于TRFIA的材料,阐述了TRFIA在免疫诊断、食品检测、环境监测等方面的应用,并对其发展方向和应用前景进行了展望。     

TRFIA法与ELISA法检测乙肝病毒血清学标志物的比较

目的探讨时间分辨荧光免疫测定法(TRFIA)定量检测乙肝病毒血清学标志物(HBV-M)与酶联免疫吸附试验(ELISA)一步法定性检测HBV-M的关系及其临床意义。方法采用TRFIA和ELISA分别检测436份血清标本的HBV-M。结果对于稍高于临界值的血清,TRFIA检出率明显高于ELISA。结论 TRFIA检测HBV-M比ELISA敏感,能为乙肝的临床诊断、疗效观察提供动态数据,是一种比较理想的定量检测方法。     

两种方法测定乙型肝炎血清学标志物的结果分析

目的 探讨酶联免疫吸附法(ELISA)和时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)检测乙型肝炎表面抗体HBsAb)的结果并进行对比分析.方法 218份样本每份均用ELISA和TRFIA两种方法进行HbsAb定量和定性检测,操作步骤均严格按照《全国临床检验操作规程》和试剂盒各自附带的说明书的要求进行;并对结果进行判断分析.结果 218份标本应用TRFIA法和ELISA法检测结果比较,HBsAg、HBeAg、抗-HBe结果符合率较高均＞ 90.00％,差异无统计学意义,而抗-HBs、抗-HBc结果符合率均为88.99％,差异有统计学意义P＜0.05).结论 采用TRFIA法检测乙型肝炎血清标志物优于传统ELISA法,有利于提高乙型肝炎的诊断率,同时可以根据血清标志物表达量的改变来评估患者的病情发展及传染性的强弱;较传统ELISA法更准确、可靠,值得临床推广.     

I型志贺毒素时间分辨荧光免疫分析方法的建立

目的构建基于时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)的高灵敏性、高特异性的I型志贺毒素(StxI)双抗体夹心免疫检测法,用于产志贺毒素大肠杆菌(STEC)感染的临床快速诊断。方法采用两株针对StxI不同表位的单克隆抗体2F6-F8和8E7-E6,构建双抗体夹心TRFIA,并评价该方法的灵敏度、特异性以及稳定性;以PCR检测stxI基因结果为金标准,以TRFIA、ELISA、Duopath~?Verotoxins免疫胶体金检测试剂盒,检测54例StxI毒素粗提物,比较灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值和与PCR法的一致性。结果建立的以StxI为靶向分子的TRFIA,可以在2h内完成对StxI检测,检测最大稀释倍数为1:1 000的StxI阳性菌株毒素粗提物样本,灵敏度比ELISA提高了约2个数量级。Stx I的TRFIA与StxII型无交叉反应,检测结果在1个月内仍保持较高稳定性。与PCR方法相比,TRFIA灵敏度(93.8%)高于ELISA(82.4%)和Duopath~?Verotoxins免疫胶体金(57.1%),差异有统计学意义(P<0.05);其特异性(100.0%)、阳性预测值(100.0%)、阴性预测值(97.4%)均大于等于ELISA(分别为97.2%、93.3%、92.1%)和Duopath~?Verotoxins免疫胶体金(分别为100.0%、100.0%、87.0%);TRFIA检测结果与PCR一致性(Kappa=0.955)高于ELISA(Kappa=0.809)法和Duopath~?Verotoxins免疫胶体金(Kappa=0.664)。结论成功构建StxI-TRFIA快速检测方法检测样品中StxI毒素,为TRFIA在毒素检测方面的推广应用提供了依据。     

时间分辨荧光免疫分析法检测产志贺毒素大肠杆菌

目的基于时间分辨荧光免疫分析技术,建立高灵敏性、高特异性的产志贺毒素II(StxⅡ)大肠杆菌(STEC)全自动超微量检测方法。方法以StxⅡ单克隆抗体S1D8包被96孔板,采用双功能螯合剂异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸络合Eu3+标记StxⅡ单克隆抗体S2C4,以β-二酮体为主的增强液为发光增强系统。建立StxⅡ双抗体夹心时间分辨荧光免疫分析法,并其对特异性、检出限、健全性进行评估。结果建立以StxⅡ为靶标的时间分辨荧光免疫法检测STEC法,检出限为0.023μg/L,与产StxI的STEC无交叉反应;平均回收率为98.95%,批内、批间CV分别为3.5%和4.7%。该方法灵敏性和特异性分别为100.0%和97.4%,阳性预测值和阴性预测值各是92.6%和100.0%,误诊率和漏诊率则分别是2.6%和0,假阳性率和假阴性率分别是2.6%和0。TRFIA检测StxⅡ毒素的诊断符合率为98.1%;约登系数为0.974,Kappa检验u系数为0.95。结论 StxⅡ时间分辨荧光免疫分析法灵敏度高、稳定性好,具有很好的临床应用前景。     

时间分辨荧光免疫测定在HBsAg检测中的应用

目的探讨时间分辨荧光免疫测定法(TRFIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)在乙型肝炎表面抗原(HBsAg)检测中的应用价值。方法标本用两种方法检测后,对低浓度标本和稀释后的高浓度标本双份复检。结果973例标本中,阳性检出例数为TRFIA法79例,ELISA法73例,高浓度标本复检两法均为6例,低浓度标本复检,TRFIA法11例,ELISA法7例。结论TRFIA法比ELISA法灵敏度更高,线性范围更宽,在高浓度和低浓度标本检测中更具优势。     

时间分辨法检测HCG中勾带效应分析

目的 探讨时间分辨荧光免疫分析法检测血清人绒毛膜促性腺激素(HCG)的临床优越性及应用前景.方法 对HCG血清样本,进行原液、10倍、50倍、100倍、200倍不同浓度样本的检测以及精密度检测和回收试验,以验证该方法在勾带效应中的作用.结果 HBG的最小测定值为0.10 ng/mL;3种质控样品的批内和批间的变异系数均在10%以下,可检测的精密度高;回收试验结果在96.8%-105.1%之间.结论 时间分辨法检测HCG不仅准确性高,还具有高特异性、高灵敏度、抗干扰等优点,是一个能够消除勾带效应影响的理想的临床诊断和治疗辅助手段.     

TRFIA与ELISA法检测乙肝病毒血清学标志物的分析与比较

目的比较分析时间分辨荧光免疫法（TRFIA）、酶联免疫吸附法（ELISA）对乙型肝炎病毒感染血清学标志物（HBV—M）的检测结果。方法采用TRFIA和ELISA法对182例肝病就诊患者同时进行HBV-M检测,两者结果不符合者双孔复查。结果TRFIA法测定乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝e抗原（HBeAg）、乙肝e抗体（HBeAb）灵敏度高于ELISA法,结果符合率分别为98．9％、96．7％、99．5％、90．7％、88。5％。经配对卡方检验．两种方法测定HBsAg,HBeAg,HBeAb的结果比较无显著性差异（P〉0．05）,而测定乙肝表面抗体（HBsAb）、乙肝核心抗体（HbcAb）的结果比较有显著性差异（P〈0．05）。乙肝病毒血清学标志物的医学模式比较中,HBsAb与HBsAb、HBcAb阳性模式有显著性差异（P〈0．05）,其它医学模式无显著性差异。结论TRFIA法测定HBV—M是一种灵敏度高,结果符合率高的定量检测技术,对提高临床检测水平、指导临床治疗、监测方面有实用价值。     

TRFIA法筛查新生儿先天性甲状腺功能减低症的质量评估

目的 评估时间分辨荧光免疫法(TRFIA)在新生儿先天性甲状腺功能减低症(CH)筛查中的质量.方法 采用TRFIA和酶联免疫吸附试验(ELISA)两法检测新生儿足跟血促甲状腺激素(TSH),筛查CH.结果 TRFIA法和ELISA法筛查CH,检出率分别为1 :1 526、1:3 861,经率的χ2检验,差异有统计学意义(P＜0.01);TRFIA的99%百分位值为8.89 μU/ml.ELISA为12.26 μU/ml,TRFIA的室内质控,内质控C1血片CV值:4.89%～10.60%、s 0.57～1.79.结论 TRFIA法检测质量稳定、敏感性高.     

TRFIA与RIA检测AFP的对比分析

目的应用TRFIA与RIA两种方法分别检测血清中AFP指标的含量,比较两种方法测定AFP的相关性.方法分别用TRFIA 与RIA两种方法检测正常对照组、肝硬化组、肝癌组三组AFP的含量,对相应结果进行统计分析.结果肝癌组AFP含量TRFIA法(352.18±308.32)ng/ml,RIA 法(318.68±286.12)ng/ml;肝硬化组AFP含量TRFIA法(38.28 4±14.25)ng/ml,RIA法(33.92±13.66)ng/ml;正常对照组AFP含量TRFIA法(6.88±4.65)ng/ml,RIA法(6.02±4.91)ng/ml,肝癌组分别与肝硬化组及正常对照组相比均有非常显著意义(P＜0.01),三组内两种方法测定结果相比均无显著意义(P＞0.05);两种方法相关性r=0.996(P＜0.001),相关性好;阳性符合率为96.6%,阴性符合率为95.1%,总符合率为95.6%.结论两种方法均能满足临床对AFP检测的需求,在方法学上TRFIA要优于RIA.     

时间分辨免疫荧光法测定乙肝病毒血清标志物的结果分析

[目的]探讨时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)在测定乙型肝炎血清标志物(HBV-M)中的应用价值。[方法]分别采用时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)两种方法进行乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)、乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)检测。对比研究了TRFIA和ELISA两种方法的灵敏度、特异性和结果符合率。[结果]TRFIA法测定HBsAg、HBsAb、HbeAg均有较高的灵敏度、特异性及符合率,对HbeAb测定的符合率为90.9%,灵敏度为97.40%,但易出现假阴性,特异性仅为86.7%,故测定特异性还有待提高。HBcAb测定结果符合率只有55.8%,特异性为27.0%。ELISA法检测HBV-M五项指标也有较高的灵敏度,其中以HBsAg最为理想,灵敏度为95.24%、特异性为96.55%、符合率为96.15%,HBcAb和HBeAg次之,HBeAb灵敏度最低。[结论采用TRFIA检测乙型肝炎血清标志物的灵敏度、特异性及符合率优于传统ELISA法,同时可以根据血清标志物表达量的多少评估患者的病情及传染性,较传统ELISA法更准确和更可靠,值得临床推广应用。     

盐酸克伦特罗的高灵敏时间分辨荧光免疫分析

目的采用时间分辨荧光技术建立高灵敏的盐酸克伦特罗(CBL)间接竞争免疫分析法(CBL-TRFIA)。方法以CBL-BSA为免疫原免疫新西兰大白兔制备抗CBL抗体;CBL与卵清蛋白的联结物(CBL-OVA)包被96孔板为固相抗原,与游离CBL共同竞争有限的抗CBL抗体;用稀土离子Eu3+标记的羊抗兔抗体进行示踪。结果该方法的灵敏度为0.01μg/L,测量范围为0.01~25μg/L,平均回收率为99.7%,RSD3.9%,与盐酸异丙肾上腺素的交叉反应率为0.01%,与沙丁胺醇、盐酸肾上腺素、重酒石酸去甲肾上腺素无交叉反应。8条不同时间进行的CBL-TRFIA的效应点值ED80、ED50、ED20分别为(0.07±0.01)μg/L(、1.47±0.11)μg/L和(23.6±0.56)μg/L。尿样经TRFIA和ELISA试剂盒同时检测CBL,两者的相关系数为0.932,结果相符。结论CBL-TRFIA分析方法稳定性好,可测范围宽,具有很好的应用前景。     

微囊藻毒素-LR的生物素-亲和素-时间分辨荧光免疫分析法

目的运用生物素-亲和素信号放大系统,建立高灵敏的微囊藻毒素-LR(MC-LR)时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)检测方法。方法采用5μg/ml二抗Ig G包被板,样品中的MC-LR与生物素-MC-LR半抗原(1∶300)竞争限量抗MC-LR抗体(1∶1 000),用铕标记的链霉亲和素示踪,采用TRFIA法检测水样中的MC-LR含量。结果在0.1~5 ng/ml的线性范围内,得到MC-LR-TRFIA的回归方程为y=-29 132x+38 057,r=0.991 5。方法的灵敏度为0.02 ng/ml,平均回收率为80.2%~102.0%,批内和批间的RSD分别为4.3%~8.1%和9.9%~15.2%。该方法检测MC-LR与MC-YR和MC-LF的交叉率均小于10%。结论基于生物素-亲和素信号放大系统的MC-LR-TRFIA方法灵敏度高、特异性好、操作简便,适于水中MC-LR浓度的检测。     

时间分辨荧光免疫分析法在乙肝病毒血清标志物检测中的应用价值

目的探讨时间分辨荧光免疫分析法检测乙肝病毒(HBV)血清标志物的临床应用价值。方法随机抽取门诊病人血清567份,分别应用时间分辨荧光免疫分析法、放射免疫法、酶联免疫法检测血清中HBV 3个标志物(HBsAg、HBsAb、HBcAb),并对结果的符合率进行比较。结果HBsAg的阳性率以时间分辨荧光免疫分析法捡出最高,为44.44%;放射免疫法次之,为43.91%;酶联免疫法最低,为40.74%;三者差异无统计学意义(χ2=1.855,P>0.05)。HBsAb的阳性率以时间分辨荧光免疫分析法检得最高,为45.67%;放射免疫法次之,为44.79%;酶联免疫法最低,为43.73%;三者差异无统计学意义(χ2=0.432,P>0.05)。HBcAb的阳性率以时间分辨荧光免疫分析法检出最高,为50.26%;放射免疫法次之,为49.55%;酶联免疫法最低,为47.44%;三者差异无统计学意义(χ2=0.979,P>0.05)。时间分辨荧光免疫分析法检测HBV3个血清标志物与放射免疫法、酶联免疫法的总符合率达96%以上,阳性符合率达91%以上,阴性符合率达93%以上。结论时间分辨荧光免疫分析法检测HBV血清标志物具有稳定性好、线性范围宽,不污染环境、操作简便等优点,其敏感性和特异性均达到放射免疫法和酶联免疫法水平,可作为临床HBV血清标志物的重要检测手段,对乙型肝炎的早期发现、预防和控制有重要的价值。     

一种甘胆酸快速测定试剂的性能评价

目的 对基于时间分辨荧光免疫层析法的甘胆酸快速检测试剂性能进行验证、评价,为临床实验室提供参考。 方法 根据美国临床和实验室标准协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)的相关EP(Extend Play,EP)文件以及我国发布的相关指南,从精密度、正确度、分析测量范围、临床可报告范围、回收率、空白限、交叉反应、抗干扰及可比性验证等方面对此甘胆酸检测试剂进行性能验证、评价。 结果 低、高值质控2种水平甘胆酸的批内变异系数(CV_R)分别为2.46%、4.43%,总变异系数(CV_L)分别为2.57%、6.13%,均小于厂家提供的产品性能指标(CV<15%);低、高值正确度验证物的偏倚分别为-0.96%、-1.73%,均小于厂家提供的产品性能指标(±10%);分析测量范围验证结果显示,在0.1～48.3 μg/ml范围内理论浓度与实测浓度有明显相关性(r＞0.999);正常人群样本甘胆酸均在参考区间(0～2.5 μg/ml)内,不同性别组的甘胆酸结果之间差异无统计学意义(P>0.05);回收率在102%~105%之间;空白限为0.08 μg/ml;交叉反应率均低于2%;4种干扰物在低、高值质控的试验浓度下偏差均＜5％;对均相酶免疫法和时间分辨荧光免疫层析法检测甘胆酸进行方法学比对,两种方法临床标本检测结果回归方程为Y=0.9964X+0.5539,R²=0.9823,两种方法具有极佳的相关性(P<0.01)。 结论 基于时间分辨荧光免疫层析法的甘胆酸快速测定试剂性能符合规定的质量要求,可满足临床快速检测的需求。