HPLC测定不同生长年限及采收期何首乌中二苯乙烯苷和蒽醌类成分的含量

目的:建立HPLC同时测定何首乌中二苯乙烯苷和蒽醌类成分含量的方法,比较不同生长年限及采收期何首乌的成分动态变化。方法:采用HPLC同时测定一至四年生及7—12月采收的何首乌中的二苯乙烯苷和蒽醌类成分含量。色谱柱为C18,流动相为甲醇-0.1%磷酸水梯度洗脱,检测波长320,254 nm,流速1.0 mL.min-1。结果:在一定范围内二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚进样量与峰面积积分值线性关系良好,具有良好的精密度、重复性、稳定性和良好的加样回收率。结论:样品测定结果表明该方法灵敏,准确,重复性好。何首乌中的二苯乙烯苷和蒽醌类成分在一至二年生长期间迅速积累,至三年生时达到峰值;同年生何首乌中成分含量在11月时相对高于其他月份。     

慈菇消脂丸的质量标准研究和总黄酮含量测定

目的:建立慈菇消脂丸制剂成分鉴别及复方的总黄酮含量测定.方法:生山楂、决明子、何首乌等的薄层鉴别,决明子、何首乌中大黄素、大黄酚的HPLC含量测定,以及硝酸铝-亚硝酸钠法(UV)测定复方中总黄酮含量.结论:为慈菇消脂丸新药研发提供质量控制.     

基于指纹图谱结合化学计量法对何首乌不同炮制品多指标成分分析

目的 建立3个主产地何首乌、炆何首乌、制何首乌共30批样品的HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法,结合化学计量法对其进行质量评价。方法 采用HPLC建立何首乌及其炮制品的指纹图谱并进行6种成分的含量测定,通过层次聚类分析（clustering analysis,HCA）、主成分分析（principalcomponentanalysis,PCA）和正交偏最小二乘-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA）评价不同批次何首乌的质量差异,找寻不同炮制品间质量差异性的主要成分。结果 30批何首乌、炆何首乌、制何首乌的HPLC指纹图谱中有20个共有峰,指认了6个共有峰,峰面积占比均在75%以上。没食子酸（峰1）、二苯乙烯苷（峰8）、大黄素-8-O-葡萄糖苷（峰14）、大黄素甲醚-8-O-葡萄糖苷（峰16）、大黄素（峰19）、大黄素甲醚（峰20）质量分数分别在0.59～5.86、4.64～25.83、0.03～3.11、0.01～0.59、0.07～1.98、0.25～1.81 mg/g。方法学考察结果显...     

不同产地何首乌HPLC指纹图谱研究

目的建立不同产地何首乌Polygonum multiflorum的HPLC指纹图谱。方法采用HPLC法建立不同产地16批何首乌药材的指纹图谱,色谱条件为Extend C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0 m L/min,检测波长280 nm,通过Matlab软件对共有峰面积进行主成分分析,同时对16批何首乌中的二苯乙烯苷进行测定。结果 16批何首乌的相似度在0.936~0.998,说明不同产地何首乌样品质量稳定。同时确定了18个共有峰,并通过HPLC/Q-TOF/MS对何首乌共有峰进行定性分析。主成分分析结果与相似度分析结果一致,同时二苯乙烯苷量与主成分分析结果一致。结论该方法简便、可靠,可为何首乌药材的质量控制提供指导和依据。     

不同生长年限与采收季节对何首乌中14个成分含量的影响

目的:探究何首乌中成分含量随生长年限和采收季节的变化规律。方法:建立超高效液相色谱-三重四极杆质谱法(UPLC-QQQ-MS/MS),测定德庆地区何首乌药材中14个成分反式-2,3,5,4ʹ-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(trans-THSG)、顺式-THSG(cis-THSG)、2,3,5,4ʹ-四羟基二苯乙烯-2-O-(2ʺ-O-阿魏酰)-β-D-吡喃葡萄糖苷、虎杖苷、白藜芦醇、儿茶素、表儿茶素、金丝桃苷、芦丁、没食子酸、对羟基苯甲酸、对羟基苯甲醛、对香豆酸和决明酮-8-O-β-D-葡萄糖苷含量。结果:建立了准确可靠的UPLC-QQQ-MS/MS测定何首乌中14个成分含量的方法;随生长年限的增加,何首乌中二苯乙烯苷类、黄酮类、酚类化合物含量多降低;随采收季节的变化,二苯乙烯苷类、黄酮类、决明酮-8-O-β-D-葡萄糖苷成分多春季含量最高、秋季含量最低,酚类化合物多夏季含量最高、春秋含量低。结论:成分的含量与何首乌药材生长年限及采收季节密切相关,其中采收季节变化较为明显;以trans-THSG、决明酮-8-O-β-D-葡萄糖苷作为潜在肝毒性物质,cis-THSG作为有效成分,秋季为何首乌的适宜采收期,与《中华人民共和国药典》2020年版规定相符。     

不同施肥处理对何首乌单株鲜质量和成分积累的影响

目的:研究不同施肥处理对何首乌药材单株鲜质量及有效成分的影响,为何首乌合理施肥提供参考。方法:以2年生何首乌为实验材料,采用"3414"试验设计,测定不同施肥处理下何首乌单株鲜质量、二苯乙烯苷类、游离蒽醌类、结合蒽醌类成分含量。结果:施肥组何首乌的单株鲜质量明显高于不施肥组,对各成分含量的影响较小,且不同施肥处理的何首乌单株鲜质量及各成分含量间差异有统计学意义(P0.01),单株鲜质量、结合蒽醌类、游离蒽醌类含量主要受钾肥影响,二苯乙烯苷类含量主要受氮肥影响。结论:施肥处理在一定程度上可以提高何首乌单株鲜质量和有效成分的含量,当施肥量为氮肥13.8 g·m~(-2)、磷肥6.3 g·m~(-2)、钾肥13.5 g·m~(-2)时何首乌综合品质最佳,此时单株鲜质量为140.67 g。     

不同采收期对何首乌中二苯乙烯苷和蒽醌类成分含量的影响

目的:研究不同采收期对何首乌药材中二苯乙烯苷以及蒽醌类成分含量的影响,为何首乌适宜采收期的确定提供科学依据。方法:通过HPLC测定来自贵州施秉县不同采收期样品中二苯乙烯苷和蒽醌类成分的含量,同时采用主成分分析法对不同采收期何首乌样品质量进行综合评价。结果:不同采收期何首乌样品中二苯乙烯苷含量由高到低依次为:9月份10月份8月份11月份12月份1月份。结合型蒽醌含量在9月份达到峰值,随后随时间推移而降低。主成分分析结果显示:不同采收期何首乌样品综合评价指数9、10月份较高。结论:9、10月份为何首乌较为适宜的采收期。     

何首乌生品及不同炮制品中大黄素含量测定

目的:通过测定何首乌生品及不同炮制品大黄素含量以探讨其导致肝损伤的潜在风险。方法:按照2010版《中国药典》和《本草纲目》的方法炮制何首乌,采用HPLC测定何首乌生品及不同炮制品水提液和醇提液中大黄素含量。结果:采用C18色谱柱,甲醇-0.1%磷酸(85∶15)为流动相,254nm检测,测得何首乌生品及不同炮制品水提物、醇提物中均含有大黄素成分,以何首乌生品含大黄素含量最高,而九蒸九晒组最低。结论:何首乌生品导致肝损伤的风险最高,而九蒸九晒组最低。     

两种广西产何首乌炮制前后二苯乙烯苷和大黄素的含量考察

目的:研究广西产方茎何首乌与圆茎何首乌炮制后2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-3-D-葡萄糖苷与大黄素的含量变化,为科学评价广西产何首乌的质量提供参考依据.方法:采用HPLC法测定含量.结果:两种何首乌炮制样品中二苯乙烯苷及大黄素的含量差别极大,其中圆茎何首乌两种成分的含量较高.结论:两种广西产何首乌二苯乙烯苷...     

HPLC测定血脂灵片中2、3、5、4-羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷含量

本品由制何首乌、山楂、决明子等药昧制成，具有活血降浊、润肠通便作用，其中制何首乌为君药，由于制何首乌和决明子中均含蒽醌类成分，而且是本处方的有效成分，同时为了含量测定的专属性，故在测定本品大黄素含量的基础上又制订了2、3、5、4-四羟基二苯乙烯-2-0-β-D-葡萄糖苷HPLC含量测定方法，以便更好地控制制何首乌的质量。按中国药     

何首乌和首乌藤的脂肪酸成分研究

目的:研究何首乌与首乌藤的脂肪酸成分.方法:采用索氏提取法提取脂溶性成分,用GC-MS法鉴定其化学成分.结果:何首乌中鉴定了40个化合物,占色谱总馏分出峰面积的96.70%.首乌藤中鉴定了31个化合物,占色谱总馏分出峰面积的99.27%.结论:何首乌与首乌藤有14种共有成分,其中棕榈酸甲酯、9,12-十八二酸甲酯、(Z)-9-十八酸甲酯、γ-谷甾醇和十八酸甲酯是两者共有高含量成分;何首乌中脂肪酸含量明显高于首乌藤,但首乌藤中植物甾醇含量明显高于何首乌,其中1,19-二十碳二烯、17-三十五烷烯和谷甾4-烯-3-酮仅存在首乌藤中,并首次在首乌藤中发现.     

基于过程控制的何首乌产地加工与炮制一体化方法分析

目的:比较产地加工与炮制一体化方法和传统炮制方法对何首乌中二苯乙烯苷、游离蒽醌类成分和总多糖含量的影响,为建立何首乌产地加工与炮制一体化方法提供依据。方法:采用一体化方法和传统炮制方法对何首乌饮片清蒸和黑豆汁拌蒸,在不同时间点取样,分别测定二苯乙烯苷、游离蒽醌类(大黄素、大黄素甲醚)和总多糖的含量。采用HPLC测定二苯乙烯苷和游离蒽醌类成分的含量,二苯乙烯苷含量测定的流动相为乙腈-水(25∶75),检测波长320 nm;游离蒽醌类成分含量测定的流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液(85∶15),检测波长254 nm;利用苯酚-硫酸法显色,运用UV测定总多糖含量,检测波长489 nm。结果:在同一时间取样,一体化方法与传统炮制方法对二苯乙烯苷含量均无显著性影响,随着蒸制时间的延长,何首乌传统炮制方法样品和一体化方法样品中二苯乙烯苷的质量分数呈逐渐降低的趋势;一体化方法与传统炮制方法对游离蒽醌类成分的含量具有显著性影响,且一体化方法中游离蒽醌类成分的含量明显低于传统炮制方法;2种炮制方法对总多糖含量均无显著性影响。结论:何首乌产地加工与炮制一体化方法制备的制何首乌质量较好、省时省力、可操作性强,具有一定的可行性。     

何首乌中核苷类成分QTRAP UPLC-MS/MS分析

目的:建立同时测定何首乌中10种核苷类成分的QTRAP UPLC-MS/MS分析方法,分析比较生何首乌和制何首乌中核苷类成分的差异。方法:采用QTRAP UPLC-MS/MS技术,Waters Atlantis T3色谱柱(2.1 mm×150 mm,3μm),流动相甲醇-5 mmol·L-1乙酸铵(含0.1%冰乙酸),0.4 m L·min-1梯度洗脱,采用正离子多反应监测模式测定何首乌商品药材中10种核苷类成分的含量。结果:10种核苷类成分具有良好的线性关系,相关系数均0.99;何首乌商品药材中核苷类成分尿苷、腺嘌呤、鸟苷、胞苷含量均较高;生何首乌与制何首乌中核苷类成分含量差异明显。结论:该方法简便、灵敏、准确。该研究为何首乌药材内在质量的评价和控制提供可靠的检测方法。     

响应面法优化何首乌不同炮制品种中游离大黄素及大黄素甲醚提取工艺的研究

目的:研究不同炮制方式的何首乌中大黄素与大黄素甲醚的最佳提取工艺。方法:采用HPLC来测定何首乌生药、制何首乌、豆制何首乌中大黄素与大黄素甲醚的含量,以成分含量为指标,用响应面法建立甲醇浓度、料液比、提取时间3个因素的回归模型,优化提取工艺。结果:最佳提取工艺条件为纯甲醇,料液比1:30,提取时间1.5 h。在此条件下制何首乌中大黄素的含量为1.63 mg·g~(-1)生药,大黄素甲醚含量为0.95 mg·g~(-1)生药。结论:制何首乌中大黄素与大黄素甲醚含量较高。优化后的工艺适用于何首乌不同炮制品中游离大黄素和大黄素甲醚的提取测定。     

不同采集地何首乌中蒽醌类成分的含量测定

目的:建立何首乌中蒽醌类成分的含量测定方法。方法:HPLC法,色谱柱为C18,流动相为甲醇-0.1磷酸(85∶15),检测波长254nm。结果:大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚分别在0.16～1.6μg(r=0.9998)、0.168～1.68μg(r=0.9998)、0.172～1.72μg(r=0.9999)、0.16～1.6μg(r=0.9996)范围内线性良好,水解前平均回收率分别为98.9(RSD=1.8)、99.7(RSD=2.0)、99.3(RSD=1.1)、99.4(RSD=1.8),水解后平均回收率分别为99.6(RSD=1.9)、99.87(RSD=2.2)、99.03(RSD=1.1)、98.9(RSD=2.1)。结论:本法可用于何首乌中蒽醌类成分的含量测定。     

健脑安神片中10个成分的含量测定及其主成分分析和聚类分析

目的 建立HPLC法同时测定健脑安神片中的10个成分的含量,并结合主成分分析与聚类分析评价其质量.方法 采用HPLC法测定10种成分,对测定结果导入SPSS Statistics 26.0软件进行主成分分析和聚类分析.结果 5-羟甲基糠醛、远志(汕)酮Ⅲ、毛蕊花糖苷、3,6'-二芥子酰基蔗糖、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定...     

基于物质基础与颜色变化相关性分析的制何首乌古今炮制方法探讨

目的 比较古代经典炮制方法与《中国药典》2020年版收载炮制方法对制何首乌Polygoni Multiflori Radix Praeparata饮片主要化学成分及颜色的影响,探讨古今炮制方法的差异性。方法 采用HPLC法测定制何首乌不同饮片中没食子酸、5-羟甲基糠醛、二苯乙烯苷、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素、大黄素甲醚共7种成分含量;采用电子眼技术对制何首乌不同饮片颜色进行客观表征;利用偏最小二乘回归法（partial least squares regression method,PLS）对主要成分含量与颜色进行相关性分析。结果 古今方法炮制的制何首乌饮片在化学成分组成及含量方面具有显著差异,药典法制何首乌中没食子酸含量约为九蒸九晒何首乌的1.3倍,与九蒸九晒何首乌相比,二苯乙烯苷减少了约43%,蒽醌苷类成分减少了约74%,5-羟甲基糠醛仅在药典法制何首乌中检出。电子眼分析结果显示,何首乌经炮制后颜色变深变红变蓝,药典法较九蒸九晒制何首乌饮片颜色变化程度更深。7种主要成分含量和颜色的系统聚类分析（hierarchical clust...     

生/制何首乌HPLC指纹图谱结合模式识别与含量测定的质量控制研究

目的建立不同产地生/制何首乌的指纹图谱,结合模式识别与含量测定对其进行质量评价和鉴别。方法采用HPLC对20批生/制何首乌进行检测,建立何首乌HPLC指纹图谱,运用相似度分析、主成分分析和正交偏最小二乘-判别分析对其进行评价,寻找生/制何首乌分类的主要贡献峰,并对主要差异性化学成分进行含量测定。结果建立了生/制何首乌的HPLC指纹图谱,标定了10个共有峰,其中4个峰分别被指认为没食子酸、二苯乙烯苷、大黄素和大黄素甲醚,相似度在0.863～0.991之间;通过主成分分析和正交偏最小二乘-判别分析基本能区分生、制何首乌,并确定二苯乙烯苷和大黄素为生、制何首乌的主要差异性化学成分;生、制何首乌中二苯乙烯苷的含量分别为19.30～37.72 mg/g、7.50～18.26 mg/g,大黄素的含量分别为0.53～1.67 mg/g、0.11～0.50 mg/g。结论指纹图谱结合模式识别与含量测定不仅可以实现何首乌质量整体信息的控制,而且能有效区分生、制何首乌。     

HPLC同时测定何首乌中5种成分及指纹图谱的建立

目的建立HPLC同时测定不同产地何首乌中5种指标性成分含量的方法,并建立何首乌HPLC指纹图谱分析方法。方法采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,测定何首乌样品中五没食子酰葡萄糖、没食子酸、二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚含量,用SPSS19.0统计软件对数据进行聚类分析,建立何首乌HPLC指纹图谱并进行分析。结果何首乌中5种指标性成分的进样量在线性范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系,相关系数均大于0.999 4。安徽阜阳样品中五没食子酰葡萄糖、没食子酸、二苯乙烯苷、大黄素甲醚含量最高(分别为0.048 9%、0.036 1%、3.179 9%、0.551 2%),贵州安顺样品中大黄素含量最高(0.423 8%);安徽阜阳样品中指标成分平均总含量最高(3.966 6%),其次为安徽亳州(2.769 8%)、贵州(2.469 4%)及四川(2.306 3%)。云南何首乌样品与其他产地的指纹图谱差异较大,且二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚成分未检出。14批样品指纹图谱有18个共有峰,指认了2、4、7、17、18号峰分别为五没食子酰葡萄糖、没食子酸、二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚。结论本试验建立的方法稳定可靠,重现性好,能有效用于何首乌的质量控制。     

炮制时间对何首乌16个成分含量变化影响的研究

为研究48 h的炮制时间对何首乌中成分的含量及变化影响。采用HPLC测定22个不同炮制时间的何首乌对比市售制首乌中各成分的含量,并采用指纹图谱相似性分析和聚类分析对测定结果进行特征分析。结果显示,相似度均在0.9~1.0,各个样本之间有较好的相关性。聚类分析方法将22个制首乌和生首乌样品基本按成分变化特征聚为4类。该研究发现4~5 h为何首乌最佳炮制时间,为何首乌的质量控制以及深入研究提供参考依据。