已酮可可碱抗白细胞与内皮细胞粘附的研究

本实验用流室系统定量地研究了已酮可可碱在体外对健康人白细胞与培育的人脐静脉内皮细胞粘附的作用。实验结果表明：已酮可可碱减少白细胞与内皮细胞的粘附，且已酮可可碱的这种抗粘附作用主要是通过作用于白细胞而实现的。     

己酮可可碱促进学习记忆作用的实验研究

目的 探讨己酮可可碱对三种学习记忆障碍模型的作用.方法 观察己酮可可碱对自然衰老痴呆模型大鼠(Morris水迷宫法)、东莨菪碱所致记忆获得障碍模型小鼠(跳台法)和乙醇所致记忆再现障碍模型小鼠(跳台法)的学习记忆的影响.结果 己酮可可碱大中小剂量组均能够不同程度缩短自然衰老痴呆模型大鼠定位航行实验的潜伏期(P＜0.01或P＜0.05),提高空间搜索实验的空间象限记忆频度(P＜0.05);缩短东莨菪碱所致记忆获得障碍模型小鼠的触电潜伏期(P＜0.01或P＜0.01),减少错误次数(P＜0.05);对乙醇所致记忆再现障碍模型小鼠的记忆障碍也有一定的改善作用,但无统计学意义.结论 己酮可可碱具有改善学习记忆能力的作用.     

己酮可可碱对肝纤维化大鼠抗纤维化作用的观察

目的探讨己酮可可碱在胆管阻塞性大鼠肝纤维化模型中的抗纤维化作用。方法雄性SD大鼠60只,分为假手术组、肝纤维化模型组、己酮可可碱组。比较各组肝组织羟脯氨酸含量和组织学评分。结果己酮可可碱组组织评分为2.38分,较模型组（3.5分）显著下降（P﹤0.05）。羟脯氨酸含量模型组[（108.33±14.54）μg/ml]较假手术组[（15.58±4.25）μg/ml]显著升高（P﹤0.05）,己酮可可碱组为[（67.50±12.48）μg/ml],与模型组比较下降38%。结论己酮可可碱在大鼠胆管阻塞性肝纤维化模型中具有一定的抗纤维化作用。     

己酮可可碱治疗急性脑梗死39例临床观察

目的观察己酮可可碱注射液治疗急性脑梗死的疗效。方法将78例急性脑梗死患者随机分为治疗组与对照组各39例,对照组用血塞通注射液,治疗组用己酮可可碱注射液。结果治疗组优于对照组,且有效病例起效时间更短。结论临床实践证明,己酮可可碱注射液静滴作用快,疗效肯定,是治疗急性脑梗死的理想药物。     

己酮可可碱对大鼠溃疡性结肠炎治疗作用及其机制

目的:观察己酮可可碱(PTX)对大鼠溃疡性结肠炎(UC)模型的治疗作用,探讨血栓及血栓前状态(PTS)在溃疡性结肠炎发病中的作用和己酮可可碱作用机制.方法:用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)造大鼠溃疡性结肠炎模型,将大鼠模型随机分为模型组,模型 生理盐水组,模型 己酮可可碱组,另设空白对照组,共4组.观察各组大鼠肠道大体形态和组织学改变;采用血小板黏附仪检测血小板黏附功能( PAdT),智能血液凝聚仪检测血小板的聚集功能(PAgT);ELISA法测定血清中的血栓烷B2( TXB2);单克隆酶联吸附法检测血管性假血友病因子相关抗原(vWF∶Ag);酶联免疫吸附法检测细胞内粘附因子1(ICAM-1).结果:与模型 生理盐水组比较,模型 己酮可可碱组损伤指数下降(6.02±0.74 vs 0.85±0.50,P＜0.01; 5.68±0.60 vs 1.08±0.45,P＜0.01);模型组血小板黏附率和聚集率与空白对照组无明显增加(P＞0.05); 模型组TXB2,vWF∶Ag,ICAM-1均较空白对照组的差异无统计学意义(P＜0.01),经己酮可可碱治疗后,均较模型 生理盐水组降低(P＜0.05).结论:TNBS所诱导大鼠溃疡性结肠炎模型与PTS有一定关系.PTX通过抗凝、抗炎症介质、抗细胞因子而发挥治疗UC作用.     

高糖及己酮可可碱对肾间质成纤维细胞作用的研究

目的：探讨糖尿病肾病肾间质病变的机理以及己酮可可碱对肾间质成纤维细胞的作用。方法：为研究高糖对肾间质成纤维细胞的作用,应用MTT比色法检测细胞的增殖,应用流式细胞仪检测细胞周期变化,并应用ELISA法检测细胞上清液中的纤维连接蛋白。同时,本研究也观察了己酮可可碱（Pentoxifylline),一种非选择性的磷酸二酯酶抑制剂对肾间质成纤维细胞的作用。结果：高糖和己酮可可碱均可抑制细胞增殖,影响细胞周期,但高糖可促进成纤维细胞分泌细胞外基质纤维连接蛋白,而己酮可可碱可减少其分泌,且可抑制高糖对成纤维细胞的作用。结论：高糖可能通过促进肾间质成纤维细胞分泌细胞外基质在糖尿病肾病的间质病变中起作用。而己酮可可碱抑制细胞增殖及细胞外基质的分泌将有利于肾间质病变的防治。     

己酮可可碱联合治疗急性脑梗死的临床疗效

目的探讨己酮可可碱治疗急性脑梗死的临床疗效。方法124例患者随机分成两组:己酮可可碱组66例和复方丹参组58例,用药14d,记录给药前后血液流变学指标及临床效果。结果己酮可可碱组治疗急性脑梗死的有效率为90.9%。结论己酮可可碱联合治疗急性脑梗死副作用少,疗效好。     

重症烧伤大鼠白细胞粘附特性的变化

用细胞液流室和显微录像技术观察重症烧伤大鼠白细胞在不同切应力下与鼠肺血管内皮细胞粘附特性的变化。发现重症烧伤后３小时，白细胞粘附于内皮细胞的数目明显增多，粘附曲线上移，而且，白细胞粘附率与动物存活时间明显相关。给予虎杖４号可明显降低白细胞粘附率，粘附特性曲线恢复正常，动物存活时间显著延长。本实验结果证明，重症烧伤后大鼠的白细胞粘附特性有明显增强，它是导致微循环紊乱和影响动物存活的重要因素之一     

活血化瘀注射液对大鼠肺微血管内皮细胞与白细胞粘附率的影响

观察活血化瘀注射液(HHI-I)对细胞因子诱发的体外培养大鼠肺微血管内皮细胞与白细胞粘附率的影响。结果表明肺微血管内皮细胞与含肿瘤坏死因子(TNF-α)、(IL-1β)培养基共同孵育后,可显著增加白细胞与内皮细胞的相互粘附作用,与正常对照组相比,有显著性差异(P＜0.01);在培养基中加入HHI-I或HHI-I含药血清后,则粘附率明显降低(P＜0.01)。提示抑制白细胞内皮细胞的过度粘附,是活血化瘀重要的作用机理之一。     

甘草酸二胺对腹膜透析模型大鼠腹膜功能的保护作用研究

目的研究甘草酸二胺对腹膜透析模型大鼠腹膜功能保护作用机制。方法将清洁级雄性大鼠40只随机分成4组,分别为空白对照组、模型组、己酮可可碱组、甘草酸二胺组,每组10只,连续实验4周,4周后观察大鼠腹膜功能(超滤量、Durea/Purea)和相关指标变化(尿素氮、肌酐及清除率、TNF-α、MCP-1)。结果模型组超滤量、D4/DO较己酮可可碱组、甘草酸二胺组降低,Durea/Purea升高(F=8.935、7.824、9.361,P<0.05),己酮可可碱组较甘草酸二胺组超滤量、Durea/Purea、D4/D0降低,但2组比较差异不显著(P>0.05)。与模型组比较,己酮可可碱组、甘草酸二胺组尿素氮、肌肝清除率升高(F=7.363、8.923,P<0.05),己酮可可碱组较甘草酸二胺组尿素氮、肌酐清除率升高,但2组比较差异不显著(P>0.05);与模型组比较己酮可可碱组、甘草酸二胺组TNF-α、MCP-1降低(F=7.824、7.911,P<0.05),甘草酸二胺组较己酮可可碱组TNF-α、MCP-1降低,2组比较差异不显著(P>0.05)。结论 4.25%葡萄糖腹膜透析液能使大鼠腹膜功能受损,甘草酸二胺能减轻腹膜损伤,降低腹膜功能恶化。     

Influence of traditional Chinese medicine Qingjieling () on LFA-1-dependent leukocyte adhesion to endothelial cells) on LFA-1-dependent leukocyte adhesion to endothelial cells

Objective: To investigate the influence of traditional Chinese medicine Qingjieling on leukocyte adhesion to vascular endothelial cells and the possible mechanisms.Methods: Firstly, We successfully established in vitro culture of human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) monolayer. Then we constructed a leukocyte-endothelial cell adhesion model and imitated the inflammation state by using endothelial cells stimulated with recombinant tumor necrosis factor a (TNFα) or interleukin-1 (IL-1) respectively. The drug-induced change of leukocyte adhesion function was observed after we directly administered traditional Chinese medicine Qingjieling on the leukocytes. Finally, we inquired into the molecular mechanism of the effect of Qingjieling by monoclonal antibody blocking assay.Results: HUVEC as a representative large vessel endothelial cell could perfectly construct an adhesion model with leukocytes. Under the stimulation of cytokines (TNFα or IL-1), endothelial cells demonstrated drastically improved adhesion with leukocytes, certain dose of Qingjieling (1mg/g body weight) might augment the leukocyte adhesion capacity with a 2-hour co-incubation. At least part of the reason of Qingjieling’s improving adhesion effect is due to the increased lymphocyte functional associated antigen-1 (LFA-1) expression of the white blood cells.Conclusion: Qingjieling could increase LFA-1-dependent leukocytes adhesion to endothelial cells.     

己酮可可碱对p38丝裂原激活蛋白激酶激活的影响

目的:观察己酮可可碱(PTX)对p38丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)激活的影响,探讨PTX保护内皮细胞单层通透性的机制.方法:建立内皮细胞单层损伤模型,随机分为脂多糖(LPS)-A组、LPS-B组、LPS PTX-A组及LPS PTX-B组,分别以不同终浓度LPS及PTX刺激不同时间,以Western印迹杂交技术检测内皮细胞p38MAPK活性.结果:LPS组,随着LPS刺激时间的延长及刺激浓度的增大,磷酸化的p38MAPK亮度逐渐增强;LPS PTX组,磷酸化的p38MAPK亮度随着PTX刺激时间的延长及刺激浓度的增大而逐渐减弱.结论:PTX可通过降低p38 MAPK的活性而起保护内皮细胞通透性的作用.     

脑梗死患者循环白细胞对内皮细胞金属蛋白酶9表达的影响

目的　观察脑梗死患者循环白细胞对培养内皮细胞金属蛋白酶 (MMP) 9表达的影响 ,探讨循环白细胞及内皮细胞在脑梗死病理机制中的作用。方法　采用细胞培养及免疫荧光技术 ,分别将 6例脑梗死患者及 6例正常人循环白细胞与内皮细胞联合培养 ,激光共聚焦成像定量测定内皮细胞MMP 9的表达水平。结果　与脑梗死患者循环白细胞联合培养的内皮细胞均荧光着色 ,显示MMP 9中度～强度表达 ,表达部位主要在胞浆 ,而与正常人白细胞联合培养的内皮细胞则基本无荧光着色 ;激光共聚焦成像显示脑梗死患者组荧光强度值为 131± 34,正常人组为 2 0± 8,两组比较P <0 0 0 1,差异有显著意义。结论　提示脑梗死患者循环白细胞处于炎性状态 ,可刺激内皮细胞表达MMP 9,并可能由此导致血浆MMP 9水平增高 ,抑制循环白细胞活性及血管内皮细胞MMP 9的表达 ,应成为脑梗死防治的重要有效途径之一。     

CD62L、CD11a单克隆抗体对严重烧伤早期大鼠白细胞-内皮细胞粘附的影响

目的:探讨CD62L、CD11a单克隆抗体(MAb)对严重烧伤大鼠白细胞与内皮细胞粘附的影响及作用机制.方法:复制大鼠烧伤模型,颈总动脉插管给予CD62LMAb(或CD11aMAb或生理盐水),观察动物存活时间;在液流室中观察CD62LMAb、 CD11aMAb则对分离的烧伤大鼠白细胞与培养的大鼠肺血管内皮细胞粘附的影响.结果:与生理盐水组相比, CD62LMAb可显著阻断烧伤大鼠白细胞与内皮细胞间的粘附,并延长烧伤大鼠的存活时间(P<0.05);CD11aMAb则无明显作用(P>0.05).结论:提示CD62LMAb具有一定的抗休克作用.     

肝素对HL-60细胞与人脐静脉内皮细胞粘附作用的影响

目的：研究肝素对HL-60细胞与脐静脉内皮细胞粘附作用的影响。方法：通过原代培养人脐静脉内皮细胞,在静止及动态条件下观察肝素对HL-60细胞与脐静脉内皮细胞的粘附作用的影响。结果：TNF-α处理脐静脉内皮细胞能明显增加HL-60细胞与脐静脉内皮细胞粘附;肝素处理脐静脉内皮细胞及HL-60细胞能明显抑制两者之间的粘附作用。讨论：肝素可抑制体外条件下HL-60细胞与人脐静脉内皮细胞粘附,该结果为进一步研究白细胞粘附机制及筛选抗炎药物提供了条件。     

炎症相关因子在脑缺血再灌注损伤中的研究进展

急性脑梗死患者在发病前常合并糖尿病或在发病急性期常可见血糖升高,许多临床及动物实验亦表明高血糖可加重脑缺血再灌注损伤。目前,较多的研究兴趣集中在缺血再灌注后的炎性过程,缺血细胞以及缺血激活的内皮细胞、白细胞,产生促炎性细胞因子,表达黏附分子,导致白细胞积聚和外流。该文主要综述炎症因子在高血糖脑缺血再灌注损伤中的研究进展。     

血液流动在血小板栓子形成中的作用

<正>Microparticles(MPs) are small anucleoid phospholipid vesicles shed from platelets,erythrocytes,leukocytes and endothelial cells.MPs contains a membrane skeletion and are defined by their size and expression on their surface of antigens specific of parental cells.The diameter of MPs are from 0.1 to 1 m.     

甘草酸二铵对腹膜透析大鼠腹膜纤维化及结缔组织生长因子的影响

目的:探讨甘草酸二铵对腹膜透析的腹膜纤维化大鼠腹膜结缔组织生长因子(CTGF)的影响.方法:将50只SD大鼠随机分成空白对照组、0.9%氯化钠注射液组、模型组、已酮可可碱治疗组、甘草酸二铵治疗组,各10只,建立大鼠腹膜透析模型,己酮可可碱治疗组同时给予己酮可可碱,甘草酸二铵治疗组同时给予甘草酸二铵进行干预,连续28 d,于第30天行4 h腹膜平衡实验测定腹膜功能,并留取壁层腹膜,观察病理形态,测量腹膜厚度,检测腹膜组织CTGF的表达.结果:光镜下,HE染色可见空白对照组和0.9%氯化钠注射液组腹膜表面覆盖着一层扁平间皮细胞,模型组、已酮可可碱治疗组和甘草酸二铵治疗组显示腹膜间皮细胞变形成为柱状、圆形,间皮细胞可见部分脱落,基质增厚,发现大量成纤维样细胞及巨噬、单核细胞浸润,且有纤维素样物质沉积.Masson染色显示有明显的胶原沉积,模型组比已酮可可碱治疗组和甘草酸二铵治疗组胶原沉积更明显.各组大鼠腹膜厚度为:模型组>已酮可可碱治疗组、甘草酸二铵治疗组>空白对照组、0.9%氯化钠注射液组(P<0.01);各组腹膜超滤量和D4/D0为:空白对照组、0.9%氯化钠注射液组>已酮可可碱治疗组、甘草酸二铵治疗组>模型组(P<0.01);各组腹膜Durea/Purea值和CTGF表达水平为:模型组>已酮可可碱治疗组、甘草酸二铵治疗组>空白对照组、0.9%氯化钠注射液组(P<0.01).结论:4.25%腹膜透析液会使大鼠腹膜纤维化,甘草酸二铵可以减轻腹膜纤维化及腹膜功能恶化.     

大鼠骨髓间充质干细胞内皮分化后诱导同种异体白细胞毒作用

目的探讨骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）内皮分化前后对同种异体白细胞的耐受能力。方法体外分离培养Wistar大鼠骨髓MSCs,传代扩增,使用含50 ng/ml VEGF和2%FBS的内皮分化诱导培养液诱导分化7 d,倒置相差显微镜观察细胞形态,并免疫组化染色方法鉴定内皮细胞特有标记物vWF和FLK-1。通过混合白细胞试验,将MSCs或内皮样分化后的d-MSCs与同种异体Lewis大鼠外周血白细胞（peripheral blood leukocytes,PBLs）共同培养3 d,检测实验组（＋PBLs）和对照组（未加PBLs）上清液中LDH释放量以评价免疫反应程度。结果诱导分化后的d-MSCs细胞形态学上与未分化的MSCs没有明显差异,经免疫组化染色显示d-MSCs表达vWF和FLK-1;MSCs实验组与对照组释放LDH量无统计学差异（P〉0.05）,d-MSCs实验组与对照组释放LDH量有显著性差异（P〈0.05）。结论向内皮细胞分化的d-MSCs诱导了同种异体白细胞毒作用。     

LFA-1粘附蛋白单抗对烧伤休克大鼠微循环的影响

目的 探讨运用白细胞粘附分子LFA-1单克隆抗体防治烧伤休克及改善微循环的作用机制。方法 复制大鼠烧伤休克模型,测量微静脉血液流速、口径和流量,镜下观察微静脉白细胞粘附数并记录动物存活时间。结果 单抗能减缓烧伤休克大鼠平均动脉压和微静脉血流速度的下降趋势,显著降低微静脉的白细胞附壁粘着数,明显延长动物的存活时间。结论 运用LFA-1单抗能阻断白细胞与内皮细胞的粘附、减少白细胞嵌塞微静脉以改善烧伤休克微循环和保护组织细胞。