CDK4、PTEN蛋白与子宫内膜癌浸润转移的关系

目的通过研究子宫内膜癌组织中细胞周期素依赖性蛋白激酶（CDK4）、10号染色体丢失的与张力蛋白同源的磷酸酶基因（PTEN）蛋白的表达,探讨二者与子宫内膜癌浸润转移的关系,为临床上寻找判断子宫内膜癌浸润转移情况的生物学标志物提供理论依据。方法采用免疫组化S-P法测定CDK4及PTEN蛋白在50例子宫内膜癌患者手术标本、10例正常子宫内膜、12例不典型增生子宫内膜组织中的表达。结果 1.CDK4在正常子宫内膜组织中表达的阳性率为30.0%,在不典型增生子宫内膜和子宫内膜癌中表达的阳性率分别为66.7%、72.0%。后两者与正常子宫内膜相比CDK4蛋白的表达有明显差异（P〈0.05）。2.CDK4蛋白表达阳性率随临床分期升高而有增高的趋势,Ⅱ期及Ⅲ期的阳性表达率与Ⅰ期相比有显著性差异（P〈0.05）。3.在不同组织学分级中,CDK4在G2及G3中的阳性表达率与G1比较,差异有显著性（P〈0.05）。4.CDK4蛋白在肌层浸润〉1/2或有淋巴结转移组中阳性表达率为88.0%。明显高于无肌层浸润或浸润〈1/2组（P〈0.05）。5.术后复发者CDK4蛋白阳性表达率（93.3%）明显高于未复发者（57.6%）,两者相比差异具有显著性（P〈0.05）。6.PTEN蛋白在子宫内膜癌中的表达阳性率为56.0%。明显低于正常子宫内膜组织中的表达（100.0%）以及不典型增生子宫内膜中的表达（91.0%）（P〈0.05）。PTEN蛋白在无肌层浸润或肌层浸润〈1/2组中阳性表达率为76.0%。肌层浸润〉1/2或有淋巴结转移者为36.0%,与子宫内膜癌及肌层浸润程度显著相关（P〈0.05）,但与临床分期、组织学分级、有无复发均无关（P〉0.05）。结论 PTEN蛋白在子宫内膜癌中表达下降或缺失及CDK4在子宫内膜癌组织中的过度表达与子宫内膜癌的浸润转移密切相关,检测子宫内膜癌组织中CDK4及PTEN的表达可作为判断子宫内膜癌浸润转移情况的有用标志物。     

子宫内膜癌中CDK4蛋白的表达及其临床意义

目的探讨CDK4蛋白表达与子宫内膜癌的发生、发展及复发的关系。方法采用免疫组织化学S-P法,测定10例正常子宫内膜、12例不典型增生子宫内膜及50例子宫内膜癌中的CDK4蛋白的表达情况。结果(1)细胞核内CDK4表达①CDK4在正常子宫内膜、不典型增生子宫内膜和子宫内膜癌中的阳性表达率分别为30.00%、66.67%和72.00%,后二者较正常组均有明显差异(P<0.05)。②Ⅱ~Ⅲ期CDK4蛋白的过度表达率与I期相比,有显著性差异(P<0.05)。③G2及G3的CDK4蛋白过度表达率与G1比较,差异有显著性(P<0.05)。④在肌层浸润>1/2或有淋巴结转移组中CDK4表达率均高于无肌层浸润或浸润≤1/2组(P<0.05)。⑤术后复发者CDK4蛋白阳性表达率(93.33%)明显高于未复发者(57.69%),差异也有显著性(P<0.05)。(2)细胞浆内CDK4蛋白表达CDK4蛋白在正常子宫内膜、不典型增生子宫内膜、子宫内膜癌中细胞浆内表达率均很高,但两两比较差异无显著性(P>0.05);CDK4蛋白胞浆内表达与组织学分级、临床分期、肌层浸润、复发均无关(P>0.05)。结论CDK4的过度表达可能在子宫内膜癌的发生、发展、浸润及复发中具有一定作用。     

抑癌基因PTEN、P27在子宫内膜癌〖JP〗及癌前病变中的表达及其临床意义

目的 探讨免疫组织化学法检测抑癌基因PTEN、P27在子宫内膜癌（EC）及癌前病变中的表达水平及其临床意义。方法 回顾性收集2015年6月～2020年1月成都医学院第一附属医院确诊为EC患者的存档癌组织蜡块35例,同时选取同期存档的39例内膜增生过长（不伴不典型）、26例子宫内膜不典型增生和35例正常子宫内膜组织蜡块。按组织类型不同分为正常子宫内膜组、子宫内膜增生过长组、子宫内膜不典型增生组和EC组。采用免疫组织化学法对各组组织中抑癌基因PTEN及P27的表达进行检测,并分析其与EC组织病理分级、临床分期、肌层浸润深度、淋巴结转移及组织学病理类型的关系。分析子宫内膜不典型增生及EC组织中PTEN及P27蛋白表达的相关性。结果 PTEN及P27在正常子宫内膜、内膜增生过长、内膜不典型增生及EC组织中阳性表达率呈逐渐下降（P＜0.05）;PTEN及P27的表达随着EC病理分级升高而显著降低（P＜0.05）;内膜样癌组织中PTEN及P27阳性率明显低于非内膜样癌组织（P＜0.05）;而PTEN及P27的表达与EC临床分期、肌层浸润深度及淋巴结转移无关（P＞0.05）;子宫内膜不典型增生及EC组织中PTEN及P27蛋白表达正相关（均P＜0.05）。结论 抑癌基因PTEN、P27表达缺失是子宫内膜癌发生的早期事件,采用免疫组织化学法检测PTEN及P27基因有助于鉴别EC及癌前病变,且对EC的癌变程度有一定的评估作用。     

子宫内膜腺癌中PTEN蛋白的表达及其意义

目的 研究PTEN在子宫内膜癌发生、发展中的作用。方法 应用免疫组化S－P法检测PTEN在10例正常增生期子宫内膜，10例子宫内膜不典型增生，58例子宫内膜腺癌中的表达，并分析PTEN与子宫内膜癌临床病理指标的关系。结果 PTEN蛋白在正常子宫内膜、子宫内膜不典型增生和子宫内膜癌中的阳性表达逐渐降低，有显著性差异（P＜0．05），在子宫内膜癌中的表达显著低于正常内膜（P＜0．05）。在子宫内膜腺癌中PTEN的表达与临床分期、组织分化、肌层浸润、淋巴结转移无关。结论 PTEN的失表达在子宫内膜癌的发生、发展中起着一定的作用，PTEN蛋白的检测有助于子宫内膜腺癌的早期诊断。     

TEN和诱导型一氧化氮合酶蛋白在子宫内膜癌中的表达

目的 研究子宫内膜癌组织中PTEN和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白的表达,并探讨其临床意义以及二者的相关性. 方法采用免疫组织化学EnVisionTM法,检测55例子宫内膜癌、24例子宫内膜不典型增生和20例正常子宫内膜石蜡切片中PTEN和iNOS的表达. 结果与正常子宫内膜(阳性表达率100%)比较,PTEN在子宫内膜不典型增生及子宫内膜癌组织中阳性表达率逐渐降低,分别为91.67%和60%(P<0.05);iNOS阳性表达率依次为5.00%、8.33%和76.36%,明显增高(P<0.05).PTEN的表达下降与病理分级、肌层浸润程度、淋巴结转移有关(P<0.05);iNOS的过表达与病理分级、肌层浸润程度有关.子宫内膜癌组织中PTEN和iNOS的表达呈负相关. 结论 PTEN的表达下降或缺失与iNOS的过表达在子宫内膜癌的发生发展中可能起着一定的作用.     

PTEN和诱导型一氧化氮合酶蛋白在子宫内膜癌中的表达

目的研究子宫内膜癌组织中PTEN和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）蛋白的表达,并探讨其临床意义以及二者的相关性。方法采用免疫组织化学EnVision^TM法,检测55例子宫内膜癌、24例子宫内膜不典型增生和20例正常子宫内膜石蜡切片中PTEN和iNOS的表达。结果与正常子宫内膜（阳性表达率100％）比较,PTEN在子宫内膜不典型增生及子宫内膜癌组织中阳性表述率逐渐降低,分别为91．67％和60％（P〈0．05）;iNOS阳性表达率依次为5．00％、8．33％和76．36％,明显增高（P〈0．05）。PTEN的表达下降与病理分级、肌层浸润程度、淋巴结转移有关（P〈0．05）;iNOS的过表达与病理分级、肌层浸润程度有关。子宫内膜癌组织中PTEN和iNOS的表达呈负相关。结论PTEN的表达下降或缺失与iNOS的过表达在子宫内膜癌的发生发展中可能起着一定的作用。     

子宫内膜样腺癌组织中PTEN、CDK6蛋白的表达及临床意义

目的探讨PTEN、CDK6蛋白在子宫内膜样腺癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法检测正常子宫内膜、内膜增生、非典型增生和子宫内膜样腺癌组织中PTEN和CDK6蛋白。结果非典型性增生和子宫内膜样腺癌组中PTEN和CDK6蛋白阳性表达率分别为56.7%、46.7%和40.0%、66.7%,两组中PTEN阳性表达均显著低于正常内膜和子宫内膜增生组（P〈0.001）,而CDK6则显著增高（P〈0.003）,二者在非典型性增生和子宫内膜样腺癌组中的表达均呈显著负相关（r=-0.3845,P〈0.04;r=-0.4725,P〈0.002）。癌组中PTEN阳性表达缺失与组织学分级（P〈0.04）、肌层浸润深度或伴有转移（P〈0.02）及临床分期有关（P〈0.03）。CDK6的阳性表达与肌层浸润（Ρ〈0.05）和临床分期有关（Ρ〈0.03）。肿瘤的复发与PTEN的低表达和CDK6的高表达有关（P〈0.05,P〈0.02）。结论PTEN表达缺失和CDK6的过表达可能涉及了子宫内膜样腺癌的发生、发展过程,二者的联合检测可作为临床预测肿瘤复发的生物学指标。     

Skp2蛋白和PTEN蛋白在子宫内膜疾病中的表达及相关性研究

目的 探讨Skp2和PTEN在子宫内膜组织中的表达及其在子宫内膜癌发生、发展过程中的作用及两者的关系.方法 采用免疫组织化SP法检测42例子宫内膜癌、35例子宫内膜不典型增生,23例复杂性增生及15例正常内膜中Skp2蛋白和PTEN蛋白的表达情况,并分析两者的相关性.结论 子宫内膜癌中Skp2蛋白表达水平显著高于正常子宫内膜、复杂增生及不典型增生的子官内膜,差异有显著性(P<0.05);PTEN蛋白的表达完全相反,且二者的表达呈负相关.结论Skp2蛋白和PTEN蛋白在子宫内膜癌的发生、发展中发挥重要作用,Skp2和PTEN的联合检测有助于判断子宫内膜癌的恶性程度和预后.     

PTEN、survivin在子宫内膜癌中的表达及临床意义

目的研究抑癌基因PTEN和凋亡抑制蛋白survivin在子宫内膜癌中的表达及其与临床病理指标的关系,探讨其在子宫内膜癌发生发展中的作用及其可能的临床意义。方法应用免疫组织化学SP法,检测PTEN、survivin在正常子宫、不典型增生、子宫内膜腺癌内膜及癌转移淋巴结中的表达。结果Survivin在子宫内膜癌及不典型增生中的阳性表达率均明显高于正常内膜(P<0.05),子宫内膜癌中survivin的表达强度与组织学分级及病理分期明显相关(P<0.05),但与肌层浸润无关;PTEN蛋白在子宫内膜中阳性表达率与肌层浸润程度显著相关(P<0.05)。结论PTEN和survivin在子宫内膜癌的发生中可能起一定的协同作用。     

抑癌基因PTEN在子宫内膜癌组织中的表达

目的:研究抑癌基因PTEN在子宫内膜癌的表达,探讨其在子宫内膜癌发生、发展中的作用.方法:用免疫组化方法检测PTEN在50例子宫内膜癌、20例子宫内膜不典型增生、20例正常子宫内膜组织中的表达.结果:PTEN在正常子宫内膜、子宫内膜不典型增生、子宫内膜癌中的表达率分别为100%、80%、46%,其中子宫内膜癌与正常子宫内膜差异有显著性(P<0.05).PTEN表达与子宫内膜癌的手术分期、肌层浸润有关(P<0.05).结论:PTEN在子宫内膜癌发生、发展中可能起一定作用,并可能成为早期诊断的一项有用指标.     

HEREDITARY PROTEIN S DEFICIENCY——SURVEY OF A CHINESE FAMILY

A 76-year-old woman was diagnosed as having left lilac deep vein thrombosis due to a hereditary deficiency of protein S, seventeen members of her family were studied with the measurements of total protein S (TPS), free protein S (FPS), protein C (PC) and anti-thrombin-Ⅲ(AT-Ⅲ). The results showed that the level of FPS of thepatient was only 7%, while that of TPS 137.1%. Her secondson had a low FPS level (13.4%) too, and his TPS level was 48.1%. PC and AT-Ⅲwere all normal It was thus the first case of hereditary PS dificiency reported in China.     

绿色荧光蛋白-小鼠纤维介素蛋白融合基因表达载体的构建和表达

目的：构建绿色荧光蛋白(GFP)和小鼠纤维介素蛋白(mfgl2)的融合蛋白表达载体，在仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达，为mfgl2的RNA干扰体外研究提供简便的判断手段。方法：用PCR从mfgl2cDNA文库中扩增出mfgl2cDNA片段，插入到GFP表达载体pEGFP—N2中GFP基因序列的上游，构建成GFP—mfgl2融合基因表达载体pEGFP—mfgl2，将该载体转染到CHO细胞后24—48h，通过荧光显微镜观察并摄片。结果：扩增出长约1．3kb的基因片段，经双酶切鉴定和测序鉴定无误；重组载体转染CHO细胞后，在荧光显微镜下可观察到GFP的表达。结论：成功构建了pEGFP．mfgl2融合基因表达载体；重组载体可在CHO细胞中表达出GFP—mfgl2融合蛋白，为下一步进行mfgl2RNA干扰研究提供了简便的判断手段。     

鼠尾胶原蛋白提取、分离、纯化方法的建立及鉴定

目的建立一种高效提取、分离、纯化鼠尾胶原蛋白的方法。方法通过对鼠尾进行剥离获得鼠尾腱,用Tris-HCl缓冲液、胃蛋白酶处理获得鼠尾胶原蛋白原液、反复使用氯化钠溶液进行分级盐析、醋酸溶液复溶进行鼠尾胶原蛋白的纯化。超纯水透析除去无机盐类获得纯化的鼠尾胶原蛋白。通过SDS-PAGE蛋白质电泳、氨基酸含量分析等技术手段鉴定。结果本研究建立的方法可以获得高纯度的鼠尾胶原蛋白,纯度达到电泳纯。与国外进口的商业化鼠尾胶原蛋白产品相比无差异。研究了提取、分离、纯化参数对得率、纯度的影响,建立了最优的鼠尾胶原蛋白提取条件,胃蛋白酶用量:1∶500,酶解时间:72 h,盐析浓度:2 mol/L,提取所用酸溶液:0.05mol/L醋酸溶液。结论为鼠尾胶原蛋白的扩大化生产提供了合适的工艺参数,为大量获得鼠尾胶原蛋白并进行更深层次的功效方面研究提供了理论支持和实践基础。     

Akt的PH结构域与其调节区的结合

目的 从人T细胞中克隆Akt的PH结构域及其调节区基因并进行6-his和GST融合表达，研究二者的体外结合情况，为进一步研究Akt的调节区在其分子激活中的作用打下基础。方法 以RT-PCR的方法从人T细胞中扩增目的基因片段，测序证明序列正确，再将正确的目的基因片段定向克隆到表达载体pRSET-A和pGEX-4T-1中，以IPTG诱导，获得Akt的PH结构域及其调节区与6-his和GST的融合表达。表达的PH结构域融合蛋白经谷胱甘肽耦联的琼脂糖珠纯化，以pull-down法检测该PH结构域与6-his调节区的结合。结果 Akt的PH结构域和调节区基因序列完全正确。得到与GST和6-his的融合表达，表达产物有较高可溶性。结论 SDS-PAGE检测到PH结构域可在体外与调节区特异地结合。     

Survivin、Her-2、P16和PTEN在膀胱癌中的表达及意义

目的研究Survivin、Her2、P16和PTEN蛋白在膀胱癌中的表达及其生物学意义。方法采用免疫组织化学SP法检测43例膀胱移行细胞癌和10例正常膀胱组织中以上4种蛋白的表达。结果4种蛋白在膀胱癌中的表达与在正常膀胱黏膜比较差异均有显著性意义(均为P<0.01)。不同临床分期间Her2和PTEN表达的差异具有显著性意义(P<0.05);不同病理分级间Survivin、Her2和PTEN表达的差异具有显著性意义(P<0.05或P<0.01)。Her2和Survivin蛋白表达间存在正相关(r=0.821,P<0.05)。结论Her2和Survivin的高表达是膀胱癌预后不良的指征;P16可作为早期诊断的标记物;PTEN则可作为膀胱癌预后不良的独立性指标。     

亲和层析纯化重组中性粒细胞激活蛋白

目的:直链淀粉树脂亲和层析法分离纯化重组麦芽糖结合蛋白-中性粒细胞激活蛋白(recombinantmaltose-binding protein-neutrophil-activating protein,rMBP-NAP)。用于支气管哮喘模型小鼠进行免疫调节实验。方法:IPTG诱导基因工程菌E.coli TB1(pMAL-c2X-nap)表达rMBP-NAP,离心收获细胞,过柱缓冲液重悬菌体并超声破碎,再次离心取上清和沉淀,SDS-PAGE分析rMBP-NAP可溶性;直链淀粉树脂亲和层析法分离纯化rMBP-NAP;SDS-PAGE凝胶扫描分析纯化后rMBP-NAP纯度;蛋白定量试剂盒测定rMBP-NAP浓度。结果:IPTG诱导工程菌表达的rMBP-NAP主要以可溶性形式存在于超声上清中,相对分子质量约为57 kD,与预期结果一致;亲和层析法纯化rMBP-NAP纯度可达96.5%,浓度可达0.625 g/L。结论:用直链淀粉树脂亲和层析法,可纯化得到高纯度、高浓度的融合蛋白rMBP-NAP。     

骨肉瘤p16与Rb蛋白的表达及其相关性的研究

目的 检测ｐ１６和Ｒｂ蛋白在骨肉瘤中的存在情况，以探讨骨肉瘤中ｐ１６和Ｒｂ蛋白的表达及其相关性。方法 采用免疫组化ＡＢＣ法对３２例骨肉瘤手术标本使用抗ｐ１６和Ｒｂ蛋白抗体进行检测。结果 ｐ１６和Ｒｂ蛋白阳性表达分别为３７．５％（１２／３２）和５６．３％（１８／３２）；在１２例Ｒｂ蛋白阳性或强阳性表达的骨肉瘤中，ｐ１６蛋白表达缺失或弱阳性表达８例（６７％）；相反，在１０例Ｒｂ蛋白阴性或弱阳性表达中，     

肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达及意义

目的　探讨肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达及其与临床病理因素的关系。方法　应用免疫组织化学S P法检测 6 2例肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达。结果　肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达阳性率分别为 5 3.2 %和6 4 .5 % ,PCNA蛋白表达阳性肺癌Fhit蛋白阳性率明显低于PCNA蛋白表达阴性肺癌 (P <0 .0 1)。Fhit蛋白和PCNA蛋白在肺癌中表达与肺癌的分化程度、淋巴结转移、3年生存期均密切相关 ,PCNA蛋白与肺癌病理类型亦有关。结论　Fhit蛋白和PC NA蛋白异常表达与肺癌发生、发展密切相关 ,二者相互抑制 ,呈明显负相关     

非小细胞肺癌患者肺耐药蛋白和多药耐药相关蛋白的表达及其临床意义

目的 检测肺耐药蛋白和多药耐药相关蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达情况.并探讨其临床意义.方法 采用免疫组化方法对术前未经化疗、术后病理诊断明确的92例肺癌组织标本并以20常肺组织作为对照进行了多药耐药相关蛋白（MRP）、肺耐药蛋白（LRP）表达的检测.并对病理类型、分化程度、临床分期、预后等进行统计学分析.结果 （1）92例肺癌组织中MRP、LRP及其两者共表达的阳性率分别为53%、52%和45%,均显著高于正常肺组织中的表达水平（P〈0.05）.（2）MRP、LRP蛋白表达在不同病理类型、不同分化程度之间具有统计学差异（P〈0.05）,而在不同年龄、性别、临床分期、淋巴结转移情况等均无明显差异.另外,MRP、LRP蛋白的表达与患者预后密切相关,且随着耐药蛋白表达种类的增加,生存曲线水平下降.结论 NSCLC中MRP、LRP的表达可能在肺癌的原发性多药耐药中起不同程度的作用,检测NSCLC中MRP、LRP在判断患者预后.指导肿瘤化疗方面具有重要的临床意义.     

树舌多糖对HepA小鼠瘤细胞蛋白质表达影响的研究

目的探讨树舌多糖抗肿瘤的作用机制,寻找特异蛋白。方法将各组小鼠的眼血清蛋白、匀浆蛋白、膜糖蛋白分别做PAGE电泳,分析其蛋白组分的变化。结果树舌多糖作用后血清蛋白、匀浆蛋白、膜糖蛋白的蛋白组分都有变化。