游离中性粒细胞胞外诱捕网DNA的研究进展

中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）是先天抗微生物免疫的重要部分。NETs由中性粒细胞DNA、组蛋白和细胞质蛋白质构成。它对微生物是一种有效的防御机制,当缺乏有效抗衡调节时,它又能损伤组织。越来越多的证据表明NETs的动态水平是随着炎性过程,而不是随着组织损伤而变化。一种快速定量游离中性粒细胞胞外诱捕网DNA（cf-DNA／NETs）的方法已经建立,cf-DNA／NETs可能是用于诊断与预测炎症性疾病的新标志物。     

原发性膝骨关节炎患者血浆cf-DNA/NETs 的检测水平及临床意义

目的　通过检测原发性膝骨关节炎（knee osteoarthritis,KOA）患者血浆中游离脱氧核糖核酸（circulating freeDNA,cf-DNA）/ 中性粒细胞胞外诱捕网（neutrophil extracellular traps,NETs）水平,分析其与病情严重程度及原发性KOA 发病的关系。方法　选取空军军医大学西京医院2020 年3 月～ 2021 年8 月收治的192 例原发性KOA 患者作为观察组,200 例体检健康人群作为对照组。检测两组受试者血浆cf-DNA/NETs 水平;采用凯尔格伦- 劳伦斯（Kellgren-Lawrence,K-L）分级标准将观察组分为四个亚组:原发性KOA Ⅰ组（n=39）、原发性KOA Ⅱ组（n=57）、原发性KOA Ⅲ组（n=63）和原发性KOA Ⅳ组（n=33）;采用西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数（Western Ontario andMcMaster University Osteoarthritis Index,WOMAC）量表评估原发性KOA 患者病情严重程度;Pearson 分析观察组血浆cf-DNA/NETs 水平与K-L 分级、WOMAC 评分的相关性;Logistic 回归分析影响原发性KOA 发病的相关因素。结果　观察组血浆cf-DNA/NETs 水平高于对照组（932.94±106.66 ng/ml vs 86.52±16.25 ng/ml）,差异有统计学意义（t=110.901,P =0.000）;原发性KOA Ⅰ组、原发性KOA Ⅱ组、原发性KOA Ⅲ组和原发性KOA Ⅳ组血浆cf-DNA/NETs 水平依次升高（836.54±93.18 ng/ml,905.29±94.46 ng/ml,950.33±117.85 ng/ml 和1 061.40±122.29 ng/ml）,差异有统计学意义（F=28.011,P=0.000）。观察组血浆cf-DNA/NETs 水平与K-L 分级、关节功能评分均呈正相关（r=0.552 ,0.627,均P=0.000）。年龄（OR=1.936, 95%CI:1.273~2.945）、吸烟史（OR=1.853, 95%CI:1.158~2.966）、家族遗传史（OR=1.997,95%CI:1.336~2.935）和血浆cf-DNA/NETs 水平（OR=2.104, 95%CI:1.441~3.071）均是原发性KOA 发病的危险因素（P=0.002,0.010,0.001,0.000）。结论　原发性KOA 患者血浆cf-DNA/NETs 呈高表达,血浆cf-DNA/NETs 与原发性KOA 的发生及病情发展密切相关。检测其水平可为原发性KOA 的预防及治疗提供参考依据。     

槲皮素对痛风模型大鼠血清NETs和淋巴细胞水平的影响

目的 分析槲皮素对痛风模型大鼠血清中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)和淋巴细胞水平的影响.方法 将30只大鼠采用随机数字表法分为对照组、模型组、槲皮素组,每组10只.对模型组和槲皮素组大鼠进行造模,造模成功后槲皮素组大鼠给予200 mg/kg槲皮素灌胃,对照组及模型组同期灌胃等体积的蒸馏水.给药前后依照炎症指数评定准则和...     

低密度粒细胞在自身免疫性疾病中的病理生理作用

疾病期增强活化异常的中性粒细胞可能导致组织损伤和异常免疫应答.最近报道了一种中性粒细胞亚群,即从系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者的外周血单核细胞部分分离出的低密度粒细胞(low-density granulocytes,LDGs).LDGs的表型和功能不同于循环中性粒细胞,其具有促炎性和致病性功能,包括内皮细胞毒性和合成干扰素-Ⅰ的能力.此外,LDGs容易形成中性粒细胞胞外诱捕网(low-density granulocytes,NETs),NETs促进自身抗原外显与器官损伤.阐明LDGs的的致病作用,有可能为SLE和其他自身免疫性疾病设计新的治疗策略.     

抗中性粒细胞胞外诱捕网的细菌毒力因子

中性粒细胞胞外诱捕网(Neutrophil extracellular traps,NETs)作为人体先天免疫系统的组成部分,具有捕杀病原体的作用.最近已经明确,几种细菌毒力因子有利于细菌逃避NETs的作用.本文讨论5种毒力因子,包括核酸酶、多糖荚膜、丙氨酰脂磷壁酸、唾液酸化聚糖分子模拟物、β-羟基丁酸.     

中性粒细胞胞外诱捕网与肝癌关系的研究进展

中性粒细胞胞外诱捕网（NET）是由解聚的染色质和颗粒蛋白组成的网状结构。NET的形成过程被称为中性粒细胞炎性凋亡（NETosis）,它被认为是从垂死的中性粒细胞中排出以捕获和杀死病原微生物。NET与肝癌、胃癌、肠癌、肺癌等多种恶性肿瘤密切相关。近年来,大量研究表明,在癌症患者和动物模型中都存在NET。NET促进了肿瘤的生长、侵袭、转移以及癌症相关血栓的形成。阻断或破坏NET的形成可抑制肿瘤进展和癌症相关血栓的形成。因此,靶向NET可能是一种新的抗肿瘤治疗方法。该文重点阐述了NET的形成机制及其在肝癌中的作用。深入了解NET在肝癌中的发病机制,为肝癌治疗提供新思路和新方法。     

儿童支气管哮喘患者血清NETs和IL-4水平表达与发作期中医证型的相关性分析

目的　探究支气管哮喘发作期患儿血清中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）、白介素-4（IL-4）表达水平及其与中医证型的相关性。方法　选取2017年1月~2020年1月湖南中医药高等专科学校附属第一医院收治的支气管哮喘急性发作期患儿98例作为观察组,其中热喘证37例（热喘证组）、寒喘证28例（寒喘证组）、虚喘证33例（虚喘证组）。另选取同期在该院体检的25例健康儿童作为健康对照组。使用PicoGreen荧光染料及单管型多功能检测仪检测血清游离DNA（cf-DNA）/NETs水平,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清IL-4表达水平,采用Pearson法分析支气管哮喘发作期患儿血清cf-DNA/NETs和IL-4水平与中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞及肺功能指标第1秒用力呼气量（FEV1）占预计值百分比（FEV1%）、FEV1/用力肺活量（FVC）水平相关性。结果　健康对照组、虚喘证组、寒喘证组、热喘证组患儿血清cf-DNA/NETs和IL-4水平及外周血中性粒细胞、单核细胞水平依次升高,差异均有统计学意义（F=895.500,69.590,63.250和50.590,均P＜0.05）,淋巴细胞水平及肺功能指标FEV1%,FEV1/FVC水平均依次降低,差异具有统计学意义（F=71.410,75.790,均P＜0.05）。支气管哮喘发作期患儿血清cf-DNA/NETs与IL-4水平呈正相关（r=0.431,P=0.000）;血清cf-DNA/NETs水平与中性粒细胞、单核细胞水平呈正相关（r=0.541,0.401,均P＜0.05）,与淋巴细胞、FEV1%和FEV1/FVC水平呈负相关（r=-0.456,-0.462和-0.503,均P＜0.05）;血清IL-4水平与中性粒细胞、单核细胞水平呈正相关（r=0.461,0.405,均P＜0.05）,与淋巴细胞、FEV1%和FEV1/FVC水平呈负相关（r=-0.438,-0.479和-0.534,均P＜0.05）。结论　 支气管哮喘发作期患儿血清cf-DNA/NETs,IL-4水平明显升高,且热喘证患儿血清中二者水平最高,其次为寒喘证和虚喘证,二者水平变化可能与不同中医证型存在一定相关性。     

Rac1和Cdc42在鼻咽癌组织中的表达及预后相关性研究

目的 观察鼻咽癌组织中Rac1和Cdc42的表达,探讨Rac1和Cdc42细胞信号分子可能参与鼻咽癌侵袭转移过程的机制.方法 采用免疫组织化学S-P法检测鼻咽癌标本肿瘤组织与鼻咽正常上皮组织中Rac1和Cdc42的表达,并探讨其表达与临床指标的关系,以及标志物之间的相互关系及其在鼻咽癌侵袭转移中的作用,分析Racl和Cdc42各分子表达情况与鼻咽癌患者预后的关系.结果 （1）鼻咽正常上皮组织Rac1和Cdc42表达显著低于鼻咽癌组,两者差异有统计学意义（P＜0.05）.（2）Rac1和Cdc42与患者的年龄、性别以及肿瘤原发部位和大小均无关（P＞0.05）,而在分化程度浸润深度和TNM分期等临床病理指标之间的差异比较则显示统计学意义显著（P＜0.05）.（3）通过相关分析,Rac1和Cdc42之间为正相关.（4）Rac1的低表达组5年总生存率和无瘤生存率明显高于高表达组,其差异具有统计学意义（P＜0.05）.Cdc42的低表达组和高表达组5年总生存率和无瘤生存率的差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 Racl和Cdc42在鼻咽癌的恶性表型及侵袭和转移中起促进作用,他们的表达同TNM分期呈正相关,Racl的表达水平可以作为鼻咽癌患者预后判断的生物学指标.     

光甘草定调控NETs抑制细胞焦亡缓解脓毒症肺损伤机制

目的探讨传统中药光甘草定对脓毒症肺损伤中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps, NETs)形成及细胞焦亡影响。方法将24只雄性Wistar大鼠, 按照随机数字表法分为3组:脓毒症组采用盲肠结扎穿孔术(cecalligation and puncture, CLP)建立脓毒症大鼠模型;光甘草定组(CLP+GLA)行CLP及光甘草定灌胃(30 mg/kg);假手术组(Sham)行盲肠探查术, 仅进行盲肠翻动后关腹。12 h后留取血浆、肺泡灌洗液及肺组织标本检测。测定肺泡灌洗液蛋白含量;测定肺组织湿重/干重(W/D)比值;用苏木精-伊红(HE)染色后观察肺组织病理学改变;用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血浆中NETs标志物MPO-DNA复合物水平、焦亡相关炎症因子IL-18、IL-1β的表达水平;Western blot技术检测大鼠肺组织Caspase-1及Cleaved-caspase-1焦亡蛋白的变化。结果脓毒症组肺泡灌洗液总蛋白浓度较假手术组明显升高(P<0. 01), 光甘草定组肺泡灌洗液总蛋白浓度较脓毒症组下降(P<0. ...     

外周血白细胞计数与缺血性脑卒中的关系及临床意义

目的探讨外周血白细胞计数及分类计数中,白细胞计数总数、中性粒细胞及单核细胞升高与缺血性脑卒中的关系及临床意义。方法用全自动血细胞分析仪,对阜阳市人民医院神经内科住院经CT、核磁检查确诊的365例缺血性脑卒中患者外周血进行白细胞计数和分类计数,了解白细胞计教总数、中性粒细胞及单核细胞升高情况,对其升高百分率进行分析。结果结果显示：365例缺血性脑卒中患者白细胞计数总数、分类计数中,中性粒细胞、单核细胞均有不同程度升高。白细胞升高范围：10．1—27．2×10^9／L,占26．6％;中性粒细胞升高范围：70．1％-93％,占67．8％;单核细胞升高范围：8．1％-46．5％;占49．8％。缺血性脑卒中患者,外周血白细胞计数总数、中性粗细胞及单核细胞升高,男女性别无统计学意义（P〉0．05）。结论外周血白细胞计数总数、中性粒细胞和单核细胞升高疑似与缺血性脑卒中发病及引起其发痛原因的重要因素动脉粥样硬化（AS）有一定关系。     

监测外周血中性粒细胞胞外诱捕网含量对食管癌远处转移的预测价值

目的 评价中性粒细胞胞外诱捕网（NET）生成对食管癌远处转移的预测价值。方法 前瞻性纳入食管癌患者（远处转移25例、非远处转移35例）和30名健康志愿者,检测其外周血NET含量并进行分析。结果 食管癌远处转移者外周血NET含量高于非远处转移者和健康志愿者。外周血NET含量升高是食管癌远处转移的独立危险因素（OR=1049.592, 95%CI:24.313～45310.558）。监测NET含量可预测食管癌的远处转移（AUC=0.37, 95%CI:0.737～0.937）,其预测价值高于中性粒细胞与淋巴细胞比值（NLR）;NET联合NLR可以提高NET预测食管癌远处转移的灵敏度和特异度。结论 NET生成是食管癌远处转移的高危因素,监测外周血NET的含量可预测食管癌远处转移,NET联合NLR能够提高NET的预测价值。     

急性胰腺炎患者血清cf-DNA/NETs、MAP1-LC3、DPB表达水平及临床意义

目的 探究血清游离DNA/中性粒细胞胞外诱捕网(cf-DNA/NETs)、微管相关蛋白1轻链3(MAP1-LC3)、维生素D结合蛋白(DPB)在急性胰腺炎患者中的表达水平及临床意义.方法 收集2015年9月至2020年9月本院收治的急性胰腺炎患者150例,随访30 d,根据预后分为生存组(138例)与死亡组(12例),...     

血小板和中性粒细胞在脓毒症中作用机制的研究进展

已知脓毒症是多种细胞和介质参与的复杂反应.越来越多的研究证明中性粒细胞和血小板参与了脓毒症的炎症反应并在其中起协同作用,包括血小板与免疫系统部分协同作用机制及循环中的细菌诱捕新路径.     

肿瘤相关中性粒细胞与肝癌发展的相关性研究进展

中国为原发性肝癌高发地区,大部分肝癌患者首诊时已为晚期,具有治疗效果欠佳、预后差、5年生存率低等特点.肝癌发病机制复杂,针对肝癌防治的新靶点亟待探索.中性粒细胞在机体固有免疫中发挥防御作用,而研究发现中性粒细胞在肝癌肿瘤微环境中也扮演了重要角色,参与了肝癌发生、发展和转移等多个环节.本研究对肿瘤相关中性粒细胞在肝癌肿瘤...     

NLR对缺血性脑卒中相关性感染的预测价值分析

目的:探究外周血液中中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)对缺血性脑卒中相关性感染的预测价值。方法:通过查阅电子病历回顾性分析2017年12月-2019年4月期间就诊于四川大学华西医院急诊科的287例缺血性脑卒中患者的临床资料,依据缺血性脑卒中发病7 d内是否感染进行分组(感染组和非感染组),采用Logistic回归分析缺血性脑卒中感染的独立影响因素。结果:本研究对象合计纳入287例缺血性脑卒中病例,其中发生感染病例78例,占比28%。感染组NLR值(5.90±3.81)明显高于非感染组(3.19±2.02)。NLR的ROC曲线下面积为0.734,明显高于其他传统炎性指标(白细胞计数、淋巴细胞绝对值、中性粒细胞绝对值及A^(2)DS^(2)),多因素Logistic回归分析显示,NLR是缺血性脑卒中感染的独立影响因素(OR=1.397,95%CI:1.254~1.557,P<0.01)。结论:NLR可用于预测缺血性脑卒中患者的感染,有助于缺血性脑卒中患者入院时早期感染的分层并指导临床精准干预。     

大鼠肺组织胞外囊泡对脓毒症肺内炎症及中性粒细胞胞外诱捕网形成的影响北大核心CSCD

目的探讨脓毒症大鼠肺组织来源的胞外囊泡对脓毒症肺内炎症反应及中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)形成的影响。方法采用盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)建立脓毒症大鼠模型,利用Collagenase D和DNase I充分酶解消化肺组织,多次离心去除杂质,最后通过差速超速离心法提取肺组织胞外囊泡(Ti-EVs)。将18只雄性SD大鼠随机分为3组:Ti-EVs组行CLP术并经气道滴入Ti-EVs混悬液(2.5 mg/kg);CLP组行CLP术并经气道滴入等体积PBS;Sham组行假手术。24 h后利用苏木精-伊红(HE)染色检测肺组织病理学变化,酶联免疫吸附实验检测肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fl uid,BALF)中IL-1β、TNF-α及IL-6的表达水平,免疫荧光法检测肺组织内NETs含量。结果分离提取的大鼠肺组织胞外囊泡经透射电镜观察为双层圆形的囊性小泡结构,粒子直径主要分布在150 nm,Western blot显示EVs标志物CD9、CD63、Tsg101呈阳性表达。肺组织HE染色可见脓毒症大鼠肺泡完整性破坏,炎症细胞浸润。与CLP组相比,Ti-EVs组肺组织损伤程度更重,且BALF中IL-1β、TNF-α、IL-6炎症因子表达水平均显著升高(P<0.01);激光共聚焦显微镜下见脓毒症组和Ti-EVs组肺内均有NETs形成,Ti-EVs组肺内NETs荧光强度较脓毒症组明显增加。结论通过酶解消化、差速超速离心等系列步骤能够成功分离提取得到纯度较高的大鼠肺组织胞外囊泡。在脓毒症肺损伤进程中,肺组织胞外囊泡可加重肺内炎症反应,促进NETs形成。     

中性粒细胞胞外诱捕网标志物游离DNA水平与脓毒症血小板活化的相关性

目的研究中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）标志物游离DNA（cfDNA）水平与血小板（PLT）活化之间的相关性。 方法根据纳入标准、排除标准将2018年9至12月中国医科大学附属第一医院ICU收治的51例患者分为脓毒症组（29例）和对照组（22例）。用酶联免疫吸附测定（ELISA）方法检测患者外周血浆的cfDNA、血小板因子4（PF4）、P-选择素浓度。采用SPSS 25.0进行统计学分析,比较2组患者入ICU 24 h内生化指标、急性生理学与慢性健康状况（APACHEⅡ）评分、序贯器官衰竭评估（SOFA）评分、国际血栓与止血委员会（ISTH）评分、日本危重病协会（JAAM）评分、cfDNA以及PLT标志物（PF4、P-选择素）的差异性。同时将脓毒症组cfDNA和PLT、PLT标志物（PF4、P-选择素）、炎症指标［中性粒细胞计数（NE）、C反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT）］、凝血指标［凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血酶时间（APTT）、D-二聚体（D-D）、抗凝血酶Ⅲ活性（AT-Ⅲ）］、疾病严重程度（APACHEⅡ评分、SOFA评分、ISTH评分、JAAM评分）等分别进行相关性分析。 结果脓毒症组患者cfDNA水平明显高于对照组,差异有统计学意义［（174.499±76.596）ng/ml vs （114.354±19.319）ng/ml,P＜0.05］,但2组P-选择素、PF4水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。脓毒症组中cfDNA水平与P-选择素/PLT、D-D、CRP、APACHEⅡ评分、JAAM评分之间具有相关性（r=0.3849、0.3872、0.6211、0.4542、0.4451,P＜0.05）;与NE、PLT计数、PLT标志物（PF4、P-选择素）、ISTH评分等无明显相关性（P＞0.05）。 结论脓毒症组患者cfDNA明显升高。脓毒症组中cfDNA与D-D之间具有明显正相关性,提示NETs可能与继发性纤溶过程关系更加密切。尽管脓毒症组中cfDNA与P-选择素/PLT之间有正相关性,但因为P-选择素并不是特异性的PLT活化标志物,所以NETs与脓毒症PLT活化的关系仍需进一步探究。     

异丙酚对脓毒症小鼠中性粒细胞胞外诱捕网生成和炎症因子表达的影响

目的 明确异丙酚对脓毒症小鼠模型中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)生成和炎症因子表达的影响.方法 雄性8～10周龄C57BL/6小鼠40只,按照随机数字表法分为对照组、脂多糖(LPS)组、异丙酚组和脱氧核糖核酸酶(DNase)组,每组各10只.腹腔注射LPS建立脓毒症模型;异丙酚组小鼠腹腔注射异丙酚全身麻醉1 h;DNa...