大鼠背根神经节持续受压后脊髓背角TRPV4蛋白表达及分布的变化

目的:探讨大鼠背根神经节持续受压(chronic compression of the dorsal root ganglion,CCD)后瞬时感受器电位离子通道香草素亚族受体4(transient receptor potential vanilloid 4,TRPV4)在脊髓背角中的蛋白表达及分布规律。方法:选取清洁级雄性Wistar大鼠30只,按随机数字表法分组:空白对照组5只,手术组25只(术后4天、7天、14天、28天各5只;免疫荧光组5只)。制备大鼠背根神经节持续受压模型,于术后4天,7天,14天及28天,测量机械刺激缩爪反应痛阈,观察机械痛阈的变化;利用western blot技术检测空白对照组及术后4天,7天,14天及28天,手术侧及对侧脊髓背角TRPV4蛋白表达的变化;利用免疫荧光技术检测术后4天,手术侧与对侧脊髓背角TRPV4阳性细胞分布。结果:大鼠背根神经节持续受压后4—14天,机械痛阈值明显下降(P0.001);术后4—7天,手术侧脊髓背角TRPV4表达升高(P0.01),对侧无明显变化;手术侧脊髓背角内TRPV4阳性细胞数目高于对侧(P=0.0008)。结论:大鼠背根神经节持续受压后,机械痛阈下降的同时,手术侧脊髓背角内TRPV4蛋白表达上调及阳性数目增多,TRPV4可能参与CCD后病理性神经痛的中枢敏化机制。     

低能量激光对大鼠背根神经节持续受压后痛觉敏感及TRPV4表达的影响

目的:观察低能量激光对大鼠背根神经节持续受压(chronic compression of the dorsal root ganglion,CCD)后痛觉敏感及脊髓背角内TRPV4表达及分布的影响.方法:选取健康雄性Wistar大鼠36只,分为空白组、CCD组、激光组各12只,各组均给予常规饲养.激光组在CCD后第4...     

蛋白激酶Cε对大鼠背根神经节持续受压后背角星型胶质细胞激活和机械痛敏的影响

摘要 目的：探讨大鼠背根神经节持续受压(chronic compression of the dorsal root ganglion,CCD)后,脊髓背角星型胶质细胞的激活情况,以及PKCε是否可以通过调节星型胶质细胞的活性而参与CCD后神经病理性疼痛。 方法：将大鼠随机分为 6组,每组大鼠8只：假手术组、CCD7天组、CCD14天组、CCD7天+BIM I组、CCD+DMSO组、CCD+PDBu组,分别通过鞘内注射不同药物,或对正常大鼠鞘注DMSO/PDBu后,测量大鼠机械刺激缩爪阈值（paw withdrawal mechanical threshold,PWMT）的变化,利用Western Blot技术检测脊髓背角PKCε和GFAP蛋白表达的变化,利用免疫荧光技术检测脊髓背角星型胶质细胞激活情况。 结果：CCD术后第4天,鞘内注射PKCε的激动剂PDBu 1—4h,明显降低CCD大鼠PWMT（P<0.05）,而给予BIM I 1—4h,可升高CCD大鼠PWMT（P<0.05）。从CCD术后第4天起,连续3天鞘注BIM I,可明显缓解大鼠的机械痛敏（4天,P<0.05）,但从停止注射后镇痛作用消失（P>0.05）。与假手术组比较,CCD后7天和14天,手术侧背角PKCε和GFAP表达升高,差异有显著性意义(P<0.05),星型胶质细胞激活增加,而注射BIM I可明显抑制PKCε和GFAP表达(P<0.05)和星型胶质细胞激活。PDBu可导致正常大鼠PWMT明显降低（P<0.05）,GFAP蛋白质表达量增加（P<0.05）,促进星型胶质细胞激活。 结论：大鼠背根神经节持续受压后,机械痛阈下降的同时,手术侧脊髓背角内PKCε和GFAP蛋白表达上调,星型胶质细胞激活增加。PKCε可能通过调节星型胶质细胞激活参与CCD后病理性神经痛的中枢敏化机制。     

ERK-TRPV4途径参与大鼠背根神经节持续受压后痛觉敏感的脊髓中枢敏化机制的研究

摘要 目的：探讨ERK-TRPV4途径参与大鼠背根神经节持续受压(CCD)后痛觉敏感的脊髓中枢敏化的机制。 方法：选取SPF级雄性Wistar大鼠共42只,随机分为空白对照组6只,CCD手术组36只（包括术后2d、4d、7d、10d和14d,每组6只,以及免疫荧光组6只）。利用免疫共沉淀检测正常大鼠脊髓背角中ERK与TRPV4的相互联系。利用免疫组织化学染色法,观察ERK与TRPV4的分布情况。制备CCD模型,利用western blot技术检测空白对照组及术后2d,4d,7d,10d及14d,手术侧及对侧脊髓背角ERK和TRPV4蛋白表达的变化。利用免疫荧光技术观察术后4d脊髓背角中ERK和TRPV4阳性细胞数目、神经元的形态及阳性神经元比率的变化。 结果：CCD术后第2天至第10天,手术侧脊髓背角中ERK及TRPV4表达明显升高（P<0.01）。同时,手术侧脊髓背角中ERK和TRPV4阳性细胞数目、共同阳性表达细胞数及阳性神经元细胞比率均高于非手术侧（P<0.01）。脊髓背角阳性神经元分布于灰质第Ⅰ至Ⅳ层,手术侧的神经元树突棘生成增加,胞体增大。 结论：ERK-TRPV4通路参与了CCD后痛觉敏感的脊髓中枢敏化机制。     

电针对多囊卵巢综合征小鼠机械痛阈及TRPV1和CGRP表达的影响

目的：观察电针关元及敏化点对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)小鼠关元穴、敏化点机械痛阈值及T₁₃-L₂节段脊髓、背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中瞬时受体电位香草酸亚型1 (transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)、降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)表达的影响，探讨PCOS小鼠模型体表敏化的部分机制。方法：32只雌性ICR小鼠，随机分为对照组、模型组、电针关元组、电针敏化点组，每组8只。采用双酚A灌胃的方式制备PCOS模型，对照组用玉米油灌胃；电针关元及敏化点，每日20 min，连续5天，共4周。电针结束后第3天，用von Frey测量小鼠体表敏化点及关元穴机械痛阈值；HE染色法观察卵巢组织病理形态；蛋白印迹法、免疫荧光法检测脊髓、DRG中TRPV1及CGRP表达水平。结果：与对照组比较，模型组卵巢组织囊性扩张、闭锁卵泡增加，关元穴、敏化点痛阈值下降，脊髓及...     

TRPV4在介导大鼠背根神经节持续受压后机械和热痛敏中的作用

目的:观察持续机械压迫(CCD)对瞬时感受器电位离子通道4(TRPV4)基因、蛋白表达及功能的影响,明确TRPV4是否参与CCD导致的机械和热痛敏。方法:建立CCD模型后,分别于手术前及手术后第7天、第14天及第28天取材前测量运动功能、机械刺激缩爪反应阈值和热辐射刺激缩爪反应潜伏期。为了测量TRPV4反义核苷酸干扰对机械和热痛阈值的影响,在蛛网膜下腔内注入TRPV4寡脱氧核苷酸(ODN)40μg/d,每天1次,第7天后测量大鼠行为学变化。使用实时定量RT-PCR检测TRPV4基因表达的变化,Western blot检测TRPV4蛋白质表达量的变化,激光共聚焦检测低渗溶液和佛波醇(4α-PDD)刺激背根神经节(DRG)神经元后细胞内钙离子浓度的变化。结果:所有动物在损伤前后步态均正常,持续压迫明显降低大鼠的机械和热痛阈,TRPV4干扰可部分逆转该痛敏。持续机械压迫可以明显增加TRPV4基因和蛋白的表达,手术后第7天,第14天和第28天,TRPV4mRNA的表达分别为假手术组大鼠的4.29倍、2.95倍和2.48倍,蛋白表达量分别为假手术组大鼠的4.34倍,3.88倍和2.47倍。持续机械压迫后,对低渗溶液和4α-PDD产生反应的DRG神经元的比例数增加,细胞内钙的峰值增高。这种反应被TRPV4反义ODN所抑制。结论:CCD可以上调TRPV4的基因、蛋白表达,敏化通道的功能;TRPV4参与介导CCD导致的机械和热痛敏。     

从小胶质细胞活化通路探讨化疗诱导大鼠神经病理性疼痛的发生机制

目的:研究脊髓小胶质细胞活化通路在化疗药物诱导的神经病理性疼痛中的作用。方法:大鼠鞘内置管并筛选出痛阈值合格的SD大鼠36只,采用随机配伍的方法分为3组:对照组、模型组、米诺环素组。用隔日腹腔注射长春新碱(125μg/kg)的方法建立化疗药物诱导的神经病理性疼痛动物模型,米诺环素组从建立化疗痛模型前1天起每日鞘内注射工具药米诺环素(100μg/rat,10μL),其他各组同步注射生理盐水。分别用Electronic von Frey测痛仪和热刺痛仪测定大鼠机械痛阈值及热痛阈值,免疫荧光法检测脊髓背角小胶质细胞特异性活化标志物Iba1的表达,Western Blot法检测脊髓CX3CR1蛋白、p-p38MAPK蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠机械痛阈值和热痛阈值显著降低(P<0.05或P<0.01),脊髓背角Iba1蛋白、脊髓CX3CR1蛋白、p-p38MAPK蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组相比,米诺环素组大鼠机械痛阈值和热痛阈值相对升高(P<0.05),脊髓背角Iba1蛋白、脊髓CX3CR1蛋白、p-p38MAPK蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:脊髓小胶质细胞活化通路可能参与了化疗药物诱导的神经病理性疼痛的发生和发展。     

神经病理性痛大鼠背根神经节细胞电生理学特征的改变

目的:研究神经病理性痛大鼠背根神经节(dorsal root ganglion, DRG)细胞电生理特征的改变.方法:以单侧L5和L6脊神经结扎制备大鼠神经病理性痛模型,运用全细胞电流钳技术进行电生理记录.结果:引起损伤侧DGR中、小直径神经元兴奋的基强度降低,动作电位爆发阈值下降,小直径神经元的动作电位时程变宽,自发放电的细胞比率明显升高.结论:神经损伤诱导初级感觉神经元的兴奋性增强,这可能是引起动物神经病理性痛敏的原因之一.     

大鼠背根神经节持续压迫后miRNA差异表达谱的分析及功能研究

摘要 目的：对大鼠背根神经节（dorsal root ganglion, DRG）持续压迫后所致神经病理性疼痛（neuropathic pain, NP）模型的DRG组织进行miRNA测序,应用生物信息学技术分析差异表达的miRNA及其靶基因在疾病中的定位与功能。 方法：采用随机分组法将大鼠分为2组,每组12只,分别为假手术组、CCD背根神经节持续压迫（chronic compression of the dorsal root ganglion, CCD）模型组,术后进行行为学检测。确定痛觉敏感的天数后重复造模,取材后进行miRNA转录组测序。利用生物信息学手段筛选具有显著性差异的miRNA,预测相关靶基因并对其GO功能及KEGG富集情况进行分析,使用在线数据库对miRNA与靶基因之间的属性关系建立miRNA-靶基因的调控网络。最后,通过qPCR验证差异最为显著的4条miRNA在CCD模型DRG组织中的表达情况。 结果：CCD造模7天后,大鼠痛觉最为敏感。重复造模,在第7天取材并进行miRNA转录组测序。将差异表达的miRNA以|log2（fold change）|>1且P<0.05为阈值,筛选符合要求的miRNA,与假手术组相比,有57种miRNA在CCD模型组表达上调,有17种miRNA在CCD模型组表达下调。差异表达的miRNA对应的靶基因主要富集在外泌体、细胞质、细胞膜、线粒体、内质网等结构,在细胞固有免疫、炎症信号传导、氧化应激等生物学过程中发挥重要作用,在PI3K-AKT、MAPK、JAK-STAT、钙信号等通路上均存在富集。经实验验证,miR-21-3p、miR-675-5p、miR-487b-5p、miR-3585-3p的表达与测序结果一致。 结论：在大鼠背根神经节慢性压迫所致NP模型的DRG组织中,异常表达的miRNA及其富集的相关信号通路可为NP诊断和治疗的新靶点提供新的思路。     

脊髓电刺激对神经病理性疼痛镇痛作用及相关机制研究

目的:探索脊髓电刺激(spinal cord stimulation, SCS)对小鼠神经病理性疼痛的镇痛作用并阐明相关机制。方法:30只健康成年雄性野生型CD1小鼠随机分为对照组(Sham)、坐骨神经结扎损伤组(chronic constriction injury, CCI)和治疗组(CCI+SCS),每组10只。通过行为学观察SCS对外周神经损伤引起的机械痛敏和热痛敏的缓解情况,以及对小鼠运动功能影响程度;采用电生理方法记录各组小鼠背根神经节(dorsal root ganglion, DRG)中小神经元的兴奋性;通过酶联免疫吸附试验测定DRG内炎性因子TNF-α的表达水平。结果:与对照组比较,CCI组小鼠机械痛阈值和热痛阈值明显降低(P <0.05)。治疗组与CCI造模组比较,SCS可提高小鼠的机械痛和热痛阈值。同时,各组转棒实验评分无差异。电生理及酶联免疫吸附试验结果提示外周神经损伤后,同侧小鼠背根神经节(dorsal root ganglion, DRG)神经元的兴奋性增强,同时DRG内TNF-α的释放增加,治疗组与CCI组比较,SCS可以明显抑制DRG神经元的兴奋性增强(P <0.05)和DRG内TNF-α的释放增加(P <0.05)。结论:SCS通过抑制外周神经损伤导致的DRG神经元的兴奋性增强,从而有效地减缓小鼠CCI导致的机械感觉过敏和热痛敏,并可减少CCI小鼠DRG中TNF-α的表达水平。     

指背神经及其伴行血管为蒂的岛状皮瓣的解剖与临床应用

目的　探讨指腹软组织缺损新手术方法的解剖学依据及其临床应用。方法　观察 2 0只手的指背神经、指背动脉和指背动脉网在指背的分布 ,并应用于 16例指腹缺损的修复。结果　临床应用于 16例16指 ,皮瓣面积 18mm× 12mm～ 30mm× 2 1mm ,皮瓣全部成活。结论　皮瓣面积大 ,手术简单 ,不影响手指血供 ,感觉好 ,有较高应用价值。     

Occipital neuralgia treated by intradural dorsal nerve root sectioning

The term occipital neuralgia was first used in 1821 to describe a characteristic pain in the region innervated by the greater occipital nerve. Since that time numerous authors have failed to reach a consensus concerning the presentation, cause, and treatment of this entity. Review of these previous works reveals that the term occipital neuralgia encompasses a collection of signs and symptoms which develop secondary to a variety of different disease processes. We have treated nine patients suffering from severe occipital pain with associated C₂ hypesthesia, unilateral retro-orbital pain, and occipital or C₂ tubercle trigger points by intradurally sectioning the C₁ -C₄ dorsal rootlets (C₄ if shoulder pain existed). All patients had been treated previously with various modalities without success. This paper discusses the results obtained in these patients.     

颈神经后支的应用解剖研究

目的：为临床诊治颈神经后支卡压提供解剖学基础。方法：对20例（40侧）成人尸体头颈标本颈神经后支分支的走行、分布及其与周围组织结构的解剖关系进行观测。结果：①C2颈神经后内侧深支支配头下斜肌和头半棘肌。②C3—8颈神经后支自脊神经分出，行向后内，分别经颈神经后支骨纤维孔和管．然后穿颈半棘肌与回旋肌间的腱性交叉纤维。分布于项部肌肉、颈椎关节突关节及枕项部皮肤。③颈神经后支骨纤维孔的壁：下壁为同序数颈椎横突后结节上缘；上壁为上位颈椎横突下缘及肋间软组织：内侧壁为同序数椎骨上关节突外缘；外侧壁为横突间肌和横突间韧带的内缘。④颈神经后支骨纤维管壁：内侧壁为同序数关节突腰部外面；外侧壁为颈半棘肌的腱纤维：上壁为同序数椎骨的上关节突；下壁为同序数椎骨下关节突基部。结论：颈神经后支穿行的骨纤维孔、骨纤维管及项部肌肉的腱性交叉纤维是造成颈神经后支卡压的解剖学基础。     

逆行指固有动脉背侧支皮瓣修复手指指端缺损

目的探讨应用指动脉远侧指间关节背侧支逆行岛状皮瓣修复手指指端缺损的方法和疗效。方法本院于2010年6月--2012年3月期间应用指动脉远侧指间关节背侧支逆行岛状皮瓣修复手指指端缺损并指骨外露患者16例,其中食指10例,中指4例,环指2例。皮瓣切取范围1．0cm×2．6cm--1．5cm×3．6cm。结果本组有5例患者皮瓣术后出现水疱,3例皮瓣淤血,2例皮瓣远端部分坏死,经换药后愈合,其余全部成活,且供区伤口皮瓣完全成活。平均随访6个月,静态2点辨别觉6--8mm,手指外观及功能均满意。结论该皮瓣操作简便,不损伤指固有动脉及神经,成功率高,是修复指端软组织缺损的一种有效治疗方法。     

低频电疗对周围神经损伤后白鼠的脊髓后角神经细胞活动电位的影响

目的:应用周围神经损伤的动物模型,探讨低频电疗对被机械性刺激和温度刺激所引发的脊髓后角神经细胞活动电位(膜电位)的影响。方法:用Sprague-Dawley雄性白鼠,制作出周围神经损伤疼痛模型作为实验组。用行动学和电生理学方法测定后腿的躲避反应和脊髓后角神经细胞的膜电位,并与对照组进行比较。结果:①实验组被机械性刺激和温度刺激所引发的躲避反应频率明显高于对照组(P<0.01)。②实验组被机械性刺激和温度刺激所引发的脊髓后角神经细胞膜电位明显高于对照组(P<0.01)。③实验组经低频电刺激10min后,其脊髓后角神经细胞的膜电位明显低于低频电刺激前脊髓后角神经细胞的膜电位(P<0.01)。④在实验组低频电刺激的同时静脉注射纳络酮10min后,其脊髓后角神经细胞的膜电位明显高于未注射纳络酮组(P<0.01)。结论:低频电缓解周围神经损伤所致疼痛的作用机理可能与其促进分泌内啡呔等中枢鸦片样物质,作用于脊髓后角神经细胞,降低其活性有关。     

Long-lasting enhancement in the intrinsic excitability of deep dorsal horn neurons

Intrinsic excitability (IE) can be defined as an output of action potentials from a given input signal. Changes to the IE of a neuron are an important aspect of the cellular plasticity that underlies learning and memory process. In this study, long-term plastic change in IE of deep dorsal horn neurons (DHNs) was investigated. Associative spike pairing stimulation (PS) induced a long-lasting increase in IE. Buffering intracellular calcium with BAPTA (10mM) prevented the induction of a long-lasting increase in IE. PS failed to induce a long-lasting increase in IE in the presence of either D-APV (50 microM) or cadmium chloride (100 microM). Apamin (100 nM) partially blocked the induction of a long-lasting increase in IE. This intrinsic plasticity requires a rise in postsynaptic Ca(2+) and NMDA receptor activation during the induction period, and this process might be mediated by the down-regulation of small-conductance calcium-dependent potassium (SK) channels. In deep DHNs, PS induced excitatory postsynaptic potential (EPSP)-spike (E-S) potentiation, which increases the firing probability and the number of spikes, by consistent dorsal rootlet stimulation. Under bath application of bicuculline (10 microM) and strychnine (1 microM), PS induced E-S potentiation and long-lasting increases in IE. These results suggest that an increase in IE might underlie E-S potentiation, while a reduction in inhibitory transmission does not contribute to E-S potentiation and long-lasting increases in IE. We conclude that PS enhances the IE of deep DHNs, which may play an important role in spinal processing of nociceptive information.     

A case of prenatally diagnosed limited dorsal myeloschisis with good prognosis

Diagnosis of fetal spinal dysraphism is a challenge. It is difficult to distinguish between a meningocele, myelomeningocele, and a recently described entity called limited dorsal myeloschisis (LDM). Although myelomeningocele is associated with a poor prognosis, LDM can have a good outcome. We present a case of prenatally diagnosed LDM. Because sonographic examination revealed a round, cystic, septated cervical mass without associated cerebral anomalies, the lesion was initially considered an isolated meningocele. Fetal MRI contributed to correct the diagnosis. A diagnostic error can lead to the wrong surgical support or even the termination of pregnancy. Therefore, we highlight the importance of fetal MRI in such cases, particularly when no cerebral abnormalities are observed on sonographic examination.     

Dilated superficial penile dorsal vein in a child: Clinical images

Dilated superficial penile dorsal vein in childhood has never been reported. We present this index case as clinical image which after investigation no obvious cause was found. This could just be a normal anatomical variant or an idiopathic dilatation of the superficial penile dorsal vein.