乙型肝炎

拉米夫定联合单磷酸阿糖腺苷治疗慢性乙型肝炎近期疗效分析，基因芯片技术检测HBV耐拉米夫定基因变异，慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞凋亡与血清HBVDNA定量关系的研究，慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞凋亡与HBV DNA及Th1／Th2类细胞因子的关系，HBsAg阴性的慢性乙型和丙型重叠感染肝炎患者临床研究，不同类型慢性乙型肝炎血清HBV DNA基因含量与临床的关系。     

可活化诱导的淋巴细胞凋亡在乙型肝炎慢性化机制中的作用

目的 探讨可活化诱导的淋巴细胞凋亡在慢性乙型肝炎（乙肝）发病机制中的作用。方法 应用流式细胞仪对乙肝外周血淋巴细胞的凋亡进行检测，乙型肝炎病毒（HBV）DNA定量检测采用斑点杂交法。结果 与正常对照组比较，可活化诱导的淋巴细胞凋亡在慢性乙肝患者明显升高，而在重型肝炎则降低，差异有显著性；急性肝炎则无。可活化诱导的淋巴细胞凋亡在丙氨酸转氨酶（ALT）下降期明显高于上升期，但与肝内炎症分级并无明显相关性。乙肝外周血淋巴细胞的凋亡比例与血清HBV DNA含量呈正相关。结论（1）可活化诱导的淋巴细胞凋亡可能参与乙肝的慢性化；（2）外周血淋巴细胞的凋亡与血清HBV DNA水平有关。     

荧光定量检测HBV cccDNA在慢性乙型肝炎患者中的应用

目的:研究慢性乙型肝炎患者HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)在外周血的分布、肝组织中含量及探讨抗病毒治疗对慢性乙型肝炎患者血清HBV cccDNA的影响。方法:随机选取HBV DNA阳性慢性乙型肝炎患者、肝硬化患者、重型肝炎患者共125例。使用实时荧光定量PCR法检测血清中cccDNA。选取36例慢性乙型肝炎患者肝组织和外周血样本,酶切后进行荧光定量PCR检测。60例慢性乙型肝炎患者,按1:1随机分配接受拉米夫定或干扰素治疗,所有患者均治疗24周以上;应用实时荧光定量聚合酶链反应技术检测慢性乙型肝炎患者0周、8周、12周、24周、HBV cccDNA及HBV DNA含量。结果:125例患者中cccDNA阳性率为71.2%,以肝硬化患者阳性率最低。肝硬化患者HBVcccDNA检出阳性率与慢性乙型肝炎患者及重型肝炎患者比较,差异有显著性意义(P0.05)。肝组织中HBV cccDNA与肝组织总HBV DNA及血清HBV DNA存在相关性(P0.05),HBeAg阳性组与阴性组患者比较差异有显著性意义(P0.05)。患者接受抗病毒治疗后血清HBV DNA及HBV cccDNA下降。结论:乙型肝炎肝硬化患者外周血HBV cccDNA阳性率低,慢性乙型肝炎患者中HBeAg(+)组病毒复制较HBeAg(-)组活跃。抗病毒治疗对血清HBV cccDNA有抑制作用;血清HBV cccDNA可作为抗病毒治疗的重要监测指标。     

Fas、FasL在慢性乙型肝炎患者肝细胞和外周血淋巴细胞上的表达

探讨慢性乙型肝炎患者肝细胞及外周血淋巴细胞上Fas、FasL的表达与乙型肝炎病毒（HBV）复制水平及肝组织炎症程度的关系。对30例慢性乙型肝炎患者进行肝穿刺肝组织病理检查及免疫组化SP法检测肝细胞中Fas、FasL表达强度。并采用单克隆抗体经流式细胞仪检测外周血淋巴细胞上Fas、FasL表达阳性百分率;同时,采用荧光实时标记法测定血清中病毒复制指标HBV DNA水平;采用Beckman全自动生化分析仪检测肝功能并研究其相关性。慢性乙型肝炎患者肝细胞中Fas、FasL表达强度随肝组织炎症活动度加重而增强（P均〈0．001）,与白蛋白及丙氨酸转移酶（ALT）呈负相关（P〈0．005,P〈0．001）,与球蛋白、总胆红质无明显相关性（P均〉0．05）。外周血淋巴细胞上Fas、FasL的表达阳性率与血清中肝炎病毒复制指标HBV DNA水平呈正相关;与慢性肝炎分度无明显的相关性。乙型肝炎病毒感染可诱导肝细胞及外周血淋巴细胞上Fas、FasL的表达。肝细胞Fas、FasL的表达随炎症活动度加重而表达增强,但其介导的凋亡并不引起肝细胞炎症损伤即ALT活性并不升高,相反减少;同时在某种程度上影响白蛋白的合成。提示Fas—FasL介导的肝细胞凋亡是以非细胞损伤方式参与慢性乙型肝炎的发病过程。同时,随血清HBV DNA水平增高,外周血淋巴细胞上Fas、FasL的表达亦增强,淋巴细胞的凋亡因而增多,是导致乙型肝炎慢性化的原因之一。由此可见,Fas、FasL介导的凋亡参与了慢性乙型肝炎的发病机制,且在慢性乙型肝炎的发生发展中起重要作用。     

慢性乙型肝炎患者外周血HBsAg与HBV DNA相关性分析

目的探讨HBeAg（＋）和HBeAg（-）慢性乙型肝炎患者外周血HBsAg与HBV DNA的关系。方法定量检测HBeAg（＋）55例和HBeAg（-）36例慢性乙型肝炎患者血清HbsAg和HBV DNA的水平。结果 HBeAg（＋）患者血清HBV DNA、ALT和AST水平较HBeAg（-）患者高（P〈0.05）;HBeAg（＋）患者血清HBsAg水平较HBeAg（-）患者低（P〈0.05）;高水平血清HbsAg患者血清HBV DNA水平低（F=10.096,P〈0.01）;HBeAg（＋）慢性乙型肝炎患者HBsAg与HBV DNA存在负相关（r=-0.796,P〈0.01）,而HBeAg（-）慢性乙型肝炎患者HBsAg与HBV DNA无相关性（r=0.289,P〉0.05）。结论定量检测慢性乙型肝炎患者血清HBsAg水平有一定的临床意义。     

荧光定量检测乙型肝炎患者外周血单个核细胞中HBV DNA的含量及其意义

探讨乙型肝炎患者外周血单个核细胞（PBMC）HBV DNA和血清HBV DNA的感染情况及其临床意义。采用荧光定量PCR技术对216例HBV感染者和20例健康人进行了PBMC中及血清中的HBV DNA检测。患者PBMC内HBV DNA的总检出率为51．3％（111／216）,有随着病情加重而逐渐增高的趋势,而血清中HBV DNA阳性率无此趋势;从定量结果上看各组血清和PBMC定量HBV DNA含量对数值间均呈正相关。所以PBMCHBV DNA较血清HBV DNA检测能更好反映肝细胞内HBV DNA的存在情况,从而对慢性乙型肝炎患者HBV的复制状态有更准确的评价。     

外周血单个核细胞TRAIL mRNA和血清sTRAIL水平与HBV感染肝损伤的相关性

目的:探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单个核细胞(PBMCs)肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)mRNA及血清可溶性TRAIL(sTRAIL)水平与HBV感染肝损伤的关系.方法:采用TaqMan实时荧光定量RT-PCR(FQ- RT-PCR)检测58例慢性肝炎患者外周血PBMCs中TRAIL mRNA水平,采用夹心酶联免疫吸附法分析其血清sTRAIL水平,同时与血清HBV DNA滴度和肝功能相关指标,进行相关性分析.结果:除轻度慢性乙肝外,其他各型慢性乙型肝炎患者血清sTRAIL水平均显著低于健康对照组(t=2.91,P<0.05),各型慢性乙肝之间无显著性差异,与白蛋白(ALB)呈显著正相关(r =0.426,P<0.05),与TBIL、ALT及HBV DNA滴度无相关性.各型慢性乙肝患者PBMCs中TRAIL mRNA水平显著高于健康对照组(t= 28.31.P<0.001),与肝功能指标及血清HBV DNA滴度无相关性.结论:血清sTRAIL水平降低与肝损伤相关,提示单个核细胞膜结合型TRAIL增高与肝损害及乙肝病程迁延不愈有关.     

荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎患者血清HBV DNA及临床价值

目的探讨荧光定量聚合酶链反应法定量检测乙型肝炎病毒(HBV)核酸的临床应用价值。方法应用荧光定量聚合酶链反应定量检测1962例乙型肝炎患者血清HBV DNA水平并与血清HBV标志物进行比较,并对35例乙型肝炎患者在拉米夫定治疗前后血清HBV DNA含量及相关指标作动态观察。结果乙型肝炎患者HBVDNA定量范围在6.79×102～1.95×109拷贝/毫升之间,在HBeAg阳性患者,其检出率和定量拷贝数较高。拉米夫定治疗后患者外周血HBV DNA载量下降明显。结论荧光定量PCR法是一种相对准确、灵敏度高、特异性强的定量检测HBV DNA的技术,对乙型肝炎诊断、指导、临床用药和疗效监测方面具有实用价值。     

荧光定量PCR检测血清和外周血单核细胞中HBV DNA含量及其意义

通过荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测慢性乙型肝炎及肝癌患者血清和外周血单核细胞(PBMC)中乙型肝炎病毒(HBV)DNA含量,分析两者的相关性,阐述:HBV感染PBMC在乙型肝炎慢性化和向肝癌恶性转化中的作用。     

定量PCR对乙型肝炎患者血清HBVDNA的测定与分析

目的:观察各类型乙型肝炎患者血清HBV DNA复制水平及其与临床病情、乙肝血清学诊断标志变化的关系。方法:应用美国Brotronics公司的一种新型定量PCR HBV DNA检测法测定85例乙肝患者血清HBV DNA。利用荧光素标记引物在扩增过程中能量转换的原理对模板DNA进行定量检测,由计算机自动控制和分析。结果:85例乙型肝炎患者HBV DNA检出率94.1％。63例CHB与LC患者中,HBeAg阳性与抗HBe阳性病例均表现较高的HBV DNA复制水平。7例AH与3例SH乙肝血清学诊断标志不典型,但也表现一定HBV DNA水平。血清ALT的异常变化与HBV DNA复制水平无显著相关性。结论:定量HBV DNA PCR法具有很高灵敏度和特异性,定量PCR测定HBV DNA优于斑点杂交法。     

乙型肝炎患者血清和肝组织中HBV DNA检测分析

探讨乙型肝炎患者血清和肝组织中HBVDNA的相关性。采用免疫荧光定量聚合酶链和原位分子杂交技术分别检测随机选择的 4 0例乙型肝炎患者血清和肝组织中HBVDNA。乙型肝炎患者血清和肝组织中HBVDNA水平呈正相关 ,但不呈直线相关 (re =0 2 4 ,t=1 0 9,P >0 0 5 )。乙型肝炎患者血清和肝组织中HBV -DNA水平有相关性。可以通过检测乙型肝炎患者血清HBV -DNA来判断其肝组织中HBV复制水平     

慢性乙型肝炎患者血清HBVDNA负荷与其肝组织炎症活动度的相关性研究

探讨慢性乙型肝炎患者血清ＨＢＶＤＮＡ水平与其肝组织炎症活动度的相关性。随机选择８２例慢性乙型肝炎患者，检测其血清ＨＢＶＤＮＡ和ＡＬＴ水平，肝穿刺活检，光镜多视野观察其肝组织炎症活动度。随着慢性乙型肝炎患者血清ＨＢＶＤＮＡ水平升高，其血清ＡＬＴ和肝组织炎症活动度明显升高（Ｐ＜０．０５）。慢性乙型肝炎患者ＨＢＶＤＮＡ负荷与其肝组织炎症活动度有相关性。     

慢性乙型肝炎患者肝功能与血清HBVDNA负荷及肝脏病理的关系

探讨慢性乙型肝炎患者肝功能与血清HBVDNA负荷及肝脏病理的相关性。随机选择207例慢性乙型肝炎患者,检测其血清ALT、HBVDNA含量,肝穿刺活检,光镜多视野观察其肝组织的病理情况。随着慢性乙型肝炎患者血清ALT的升高,HBVDNA复制程度的增高,其肝组织的炎症活动度、纤维化程度明显升高(P<0.01)。慢性乙型肝炎患者血清ALT、HBVDNA含量与肝组织的炎症活动度、纤维化程度有相关性。     

乙型肝炎患者血清HBV DNA负荷和肝组织超微结构损伤的相关性

探讨乙型肝炎患者血清HBV DNA负荷和肝组织超微结构损伤的相关性。采用免疫荧光定量聚合酶链和超微病理学技术,分别检测随机选择的40例乙型肝炎患者血清HBV DNA负荷和其肝组织超微结构损伤。血清 HBV DNA水平和肝组织某些超微结构损伤(线粒体肿胀、溶酶体增多、汇管区淋巴细胞浸润、Kupffer细胞增生、肝细胞淤胆和间质纤维组织增生)呈正相关,但不呈直线相关(re=0．21,t=1．12,P>0．05);血清HBV DNA水平和肝组织某些超微结构损伤(内质网增生扩张、高尔基体扩张、贮脂细胞增生、毛细胆管扩张淤胆、毛细血管增生)无相关性(P>0．05)。乙型肝炎患者血清HBV DNA负荷和其肝组织某些超做结构损伤有相关性。     

慢性乙型重型肝炎患者血清乙型肝炎病毒基因型分析

目的探讨慢性重型肝炎患者血清乙型肝炎病毒基因型特点及其与病毒复制水平的关系。方法选择慢性肝炎、肝硬化和重型肝炎各40例，用PE-R微板核酸-ELISA杂交技术进行HBVDNA基因分型，并同时进行HBVDNA定量检测。结果慢性重型肝炎组与肝硬化组D基因型和与D型相关的混合型所占百分率分别为50．0％和25．0％，两者有显著差异(X^2=4．3，P=0、0377)；56．5％的D基因型是慢性重型肝炎，而C基因型患者只有28．3％，差异显著(X^2=4．34，P=0、037)。结论乙型肝炎病毒基因型是否与慢性重型肝炎的发病有关，需进一步研究。     

Clinical Features and Outcome of Chronic Viral Hepatitis with Acute Exacerbation in Patients with Concurrent Infections of Hepatitis B and C Virus

Background/Aims: Studies have shown that concurrent infection of hepatitis B virus and hepatitis C virus may be associated with severe forms of chronic liver disease or with rapid progression. However, very little is known about the role and course of concurrent HBV and HCV infection in patients with acute viral hepatitis. Methods: This study retrospectively compared the clinical features of 83 patients diagnosed with HBV- or HCV-related chronic hepatitis with acute exacerbation (12 with concurrent HBV and HCV infection, 46 with HBV infection alone, and 25 with HCV infection alone) encountered at Chia-Yi Chang Gung Memorial Hospital, Taiwan, between January 2003 and December 2005. Results: The clinical course of chronic hepatitis with acute exacerbation in patients with concurrent HBV and HCV infection is similar to patients with single HBV infection, and more severe than patients with single HCV infection, evidenced by increased hepatic decompensation (P = 0.05), failure (P = 0.036), and mortality (P = 0.036). Elevated serum HCVRNA-negative percentage in HBVDNA-positive patients and low serum HBVDNA concentrations in HCVRNA-positive patients imply reciprocal interference of HBV and HCV in patients with concurrent HBV and HCV infections during acute-phase hepatitis. In patients with concurrent HBV and HCV infection, the mortality rate for detectable HBVDNA patients seemed higher than that for undetectable HBVDNA patients, although it did not reach statistical significance (P = 0.066). Conclusions: virus interference existed in chronic hepatitis with acute exacerbation patients with concurrent HBV and HCV infections. Clinical outcome for patients positive for serum HBVDNA was much worse than those negative for serum HBVDNA. When chronic hepatitis with acute exacerbation occurs in patients with concurrent HBV and HCV infection, aggressive management should be investigated and antiviral therapy targeting of HBV infection should be administered early.     

慢性乙肝患者血清病毒载量、肝组织病毒抗原表达及炎症分级的关系

为探讨慢性乙肝患者血清病毒载量、肝组织病毒抗原表达与肝组织炎症分级的关系,对113例慢性乙肝患者进行了血清HBVDNA定量检测、肝组织活检进行病理诊断及乙肝病毒表面抗原、核心抗原免疫组化染色,并分析其相关性。结果显示肝组织病毒抗原的表达与血清HBVDNA水平显著相关;血清HBVDNA水平与肝组织炎症分级无显著相关性;肝组织炎症分级与HBcAg表达显著相关,但与HBsAg表达无显著相关性。     

抗核抗体在乙肝患者中的表现及意义

目的观察不同病程的乙肝患者血清中ANA的表达及其与肝功能、HBVDNA的关系。方法对35例乙肝携带1患者、192例慢性乙肝患者,35例乙肝肝硬化患者检测血清中的ANA、肝功能、HBVDNA,并进行统计学分析。结果1.ANA在乙肝携带、慢性乙肝及乙肝肝硬化患者的血清中呈进行性升高趋势。2.192例患者中ANA阳性者共29例占15.10%,29例ANA阳性患者的ALT、TBil、ALB及HBVDNA较163例ANA阴性患者的均有升高,两者间差异有统计学意义（P〈0.05）。结论ANA与乙肝患者的病程相关,并与HBVDNA复制水平及肝功能损伤的程度相关。     

慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞凋亡的检测及临床意义

目的探讨乙型肝炎患者外周血淋巴细胞（ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ　ｂｌｏｏｄ　ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ,ＰＢＬ）凋亡在乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）持续感染中的作用。方法分离１５例慢性乙型肝炎患者ＰＢＬ,体外单独或与金黄色葡萄球菌肠毒素Ｂ（ＳＥＢ）域重组ＨＢｃＡｇ（ｒＨＢｃＡ）共培养,用荧光素ＹＯＰＲＯ－１和Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２对ＰＢＬ染色,观察ＰＢＬ中凋亡细胞比例。结果慢性乙型肝炎患者ＰＢＬ体外培养４８小时后,无论自发性还是由ＳＥＢ或＜ｒＨＢｃＡｇ诱导的ＰＢＬ凋亡率均明显高于正常对照组,Ｐ＜０．０１。其中ｒＨＢｃＡｇ诱导的ＰＢＬ凋亡率最高,达２４．６％。血清ＨＢｅＡｓ阳性组患者ＰＢＬ凋亡率明显高于ＨＢｅＡｇ阴性组患者。慢性轻度和中度肝炎ＰＢＬ凋亡率又高于慢性重度或慢性重型肝炎患者。结论　慢性乙型肝炎ＰＢＬ凋亡可能是ＨＢＶ持续感染的重要因素之一。